欧洲药典盐酸二甲双胍杂质F二甲胺检测方法

２０２０，Ｖｏｌ．３７，Ｎｏ ５评价技术与方法［作者简介］　梅芊，硕士，主管药师，研究方向：药物分析。

Ｅ ｍａｉｌ：ｍｍｑｑｇｇｌｌ＠１６３ ｃｏｍ［通讯作者］　刘英，硕士，主任药师，研究方向：药物分析。

Ｅ ｍａｉｌ：ｙｉｎｇ＿ｌｅａｆ＠２６３ ｎｅｔＵＨＰＬＣ Ｑ ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ法测定盐酸二甲双胍及其片剂中遗传毒性杂质的含量梅芊，李倚天，杨博涵，刘英（河南省食品药品检验所，河南郑州４５００１８）［摘要］　目的：采用超高效液相色谱 四级杆／静电场轨道阱高分辨质谱法（ＵＨＰＬＣ Ｑ ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ）建立一种快速测定盐酸二甲双胍及其片剂中遗传毒性杂质（杂质Ｃ）的定量分析方法。

方法：使用ＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣ ＢＥＨＳｈｉｅｌｄＲＰ１８（２ １ｍｍ×１００ｍｍ，１ ７μｍ）色谱柱，以１０ｍＭ甲酸铵溶液 乙腈（９０∶１０）为流动相，流速为０ ２ｍＬ·ｍｉｎ－１，正离子（ＥＳＩ＋）模式下平行反应监测（ＰＲＭ）方式检测。

结果：所建方法的专属性、重复性、稳定性均良好。

杂质Ｃ的浓度在０ ６２５６～３ ９１０２ｎｇ·ｍＬ－１范围内线性关系良好（ｒ＝０ ９９９７），原料的平均回收率为８７ ６％，片剂的平均回收率为８６ ４％。

６批次样品中的杂质Ｃ含量为３ ５～１１ ０μｇ·ｇ－１。

结论：该方法简便快捷，准确可靠，适合盐酸二甲双胍及片剂中杂质Ｃ的快速检测，也为研究其他药物中类似杂质的检测提供参考。

［关键词］　超高效液相色谱 四级杆／静电场轨道阱高分辨质谱法（ＵＨＰＬＣ Ｑ ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ）；遗传毒性杂质；盐酸二甲双胍；杂质Ｃ［中图分类号］　Ｒ９１７ ［文献标志码］　Ｂ ［文章编号］　２０９５－３５９３（２０２０）０５－０３５３－０５ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＧｅｎｏｔｏｘｉｃＩｍｐｕｒｉｔｙｉｎＭｅｔｆｏｒｍｉｎＨｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄＩｔｓＴａｂｌｅｔｓｂｙＵＨＰＬＣ Ｑ ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳＭＥＩＱｉａｎ，ＬＩＹｉ ｔｉａｎ，ＹＡＮＧＢｏ ｈａｎ，ＬＩＵＹｉｎｇ（ＨｅｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，ＨｅｎａｎＺｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００１８，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｒａｐｉｄｕｌｔｒａｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ／ｏｒｂｉｔｒａｐｈｉｇｈｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＵＨＰＬＣ Ｑ ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ）ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｏｔｏｘｉｃｉｍｐｕｒｉｔｙｉｎｍｅｔｆｏｒｍｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄｉｔｓｔａｂｌｅｔｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅａｎａｌｙｔｅｗａｓｓｅｐａｒａｔｅｄｏｎＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣ ＢＥＨＳｈｉｅｌｄＲＰ１８（２ １ｍｍ×１００ｍｍ，１ ７μｍ）ｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈ１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ａｍｍｏｎｉｕｍｆｏｒｍａｔｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（９０∶１０）ａｓｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓｓｅｔａｔ０ ２ｍＬ·ｍｉｎ－１Ｔｈｅｔａｒｇｅｔｃｏｍｐｏｕｎｄｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｉｏｎｐａｒａｌｌｅｌｒｅａｃｔｉｏｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ （ＰＲＭ）ｍｏｄｅ Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｈａｄｇｏｏｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｓｔａｂｉｌｉｔｙ ＴｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆｉｍｐｕｒｉｔｙＣｗａｓ０ ６２５６－３ ９１０２ｎｇ·ｍＬ－１（ｒ＝０ ９９９７），ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆｄｒｕｇｓｕｂｓｔａｎｃｅａｎｄｔａｂｌｅｔｓｗｅｒｅ８７ ６％ａｎｄ８６ ４％ ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｒａｎｇｅｏｆｉｍｐｕｒｉｔｙＣｉｎｓａｍｐｌｅｓｗａｓ３ ５－１１ ０μｇ·ｇ－１ Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｎｄｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｒａｐｉｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｉｍｐｕｒｉｔｙＣｉｎｍｅｔｆｏｒｍｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄｉｔｓｔａｂｌｅｔｓ Ａｎｄｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗｉｌｌｌａｙａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓｉｍｉｌａｒｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓｉｎｏｔｈｅｒｄｒｕｇｓ．［ＫｅｙＷｏｒｄｓ］　ＵＨＰＬＣ Ｑ ＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ；Ｇｅｎｏｔｏｘｉｃｉｍｐｕｒｉｔｙ；Ｍｅｔｆｏｒｍｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ；ＩｍｐｕｒｉｔｙＣ 早在１８００年，研究者发现豆科植物山羊豆中富含胍类物质，１９１８年，有研究发现胍类物质具有降低动物血糖的活性。

HPLC 法测定盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍的含量摘要：目的：通过HPLC方法测定二甲双胍在盐酸二甲双胍片剂中的含量。

方法:在色谱条件：选择Hypersil CN (200 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,流动相：乙腈：0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调至pH=3.5）（30:70）,检测波长：232nm, 进样量10μl，1.0 mL/min 为流速,柱温为30℃条件下进行检测。

结果：二甲双胍在1.14ug·mL-1～57.00ug·mL-1范围内线性关系良好，线性方程为：Y =46657X-341531（r=0.9993）, 平均回收率为100.12%，RSD 为 1.4%。

结论:采用高效液相色谱方法，可有效评估盐酸二甲双胍片剂中二甲双胍的含量,本法简单、灵敏度高、结果准确。

关键词：HPLC法;盐酸二甲双胍;含量二甲双胍是治疗2型糖尿病的首选药物，该药可通过多种作用机制控制空腹及餐后血糖，且能改善患者血脂代谢[1]，目前主要用于饮食和运动控制血糖不满意的2型糖尿病患者，尤其是胰高血糖素和肥胖患者[2]。

此类药物的质量控制对于临床用药安全至关重要，本文由此出发，考察高效液相法在盐酸二甲双胍片剂含量测定中的应用，结果报道如下：1 材料1.1 仪器与试药岛津LC-2010CHT 型高效液相色谱仪；超声波清洗器；乙腈由霍尼韦尔贸易（上海）有限公司提供，为色谱醇；磷酸、磷酸二氢钾均为色谱纯；盐酸二甲双胍对照品（中国药品生物制品检定所，批号：151113-160117）；盐酸二甲双胍片（华润双鹤药业股份有限公司，国药准字H11020541，规格：0.25g，批号为：151223、160316、160721）。

2 方法与结果2.1 方法学验证2.1.1 色谱条件波长选择：以流动相做空白对照，于200-400nm波长下对盐酸二甲双胍对照品溶液进行全波长扫描，结果显示在232nm处盐酸二甲双胍有最大吸收；以空气为对照，对流动相进行全波段扫描显示，其在232nm内基线平行，无干扰，故确定检测波长232nm。

利用气相色谱测定盐酸二甲双胍及制剂中的痕量N-亚硝基二甲胺发布时间：2021-09-24T14:05:21.244Z 来源：《探索科学》2021年8月下16期作者：张宇驰[导读] 本文分别从试验仪器、试药、溶液配制、试验考察等方面进行具体的勘察试验，旨在探求方法的可行性和稳定性，更好地进行盐酸二甲双胍及其制剂中基因毒性杂质 NDMA含量检测。

浙江美诺华药物化学有限公司 ?张宇驰浙江绍兴 312300摘要：本文分别从试验仪器、试药、溶液配制、试验考察等方面进行具体的勘察试验，旨在探求方法的可行性和稳定性，更好地进行盐酸二甲双胍及其制剂中基因毒性杂质 NDMA含量检测。

关键词：气相色谱；盐酸二甲双胍；N-亚硝基二甲胺引言：基于致癌物质清单，N- 亚硝基二甲胺（NDMA）本身属于 2A 类致癌物质。

本研究则应用气相色谱 - 质谱联用法对盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride，1)进行制备和检测，旨在合理把控1中NDMA含量。

1.仪器与试药本次试验将会应用到TSQ 9000 型气相色谱 - 质谱联用仪、MX-S 型涡旋混合仪、THZ-82 型水浴恒温振荡器、二氯甲烷、NDMA 对照品，还需要相应准备好一定含量的 1 原料药、 1 格列本脲胶囊、 1 格列本脲片、 1 缓释片。

2.溶液配制2.1对照品线性系列溶液预先预先准备好NDMA 对照品，应用二氯甲烷进行定量稀释，一共分为八份对照品线性系列溶液，容量设置为1 ml，NDMA含量分别为0.25、0.5、1、2.5、5、10、20、50 ng。

2.2NDMA贮备液NDMA贮备液对照品，则需要预先应用精密瓶，准备对照品两份，容量分别是30μl、 50 μl，便将其放置到200ml量瓶当中，加入适量二氯甲烷进行溶解稀释，最终制备形成质量浓度保持为两份贮备液， NDMA贮备液1质量浓度为 150 ng/ml，NDMA贮备液2质量浓度为 250 ng/ml[1]。

血清中盐酸二甲双胍含量测定方法的建立和考核前言盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride)是属于双胍类降血糖药物，该药在临床上使用多年，有很好的安全性和有效性。

临床上主要用于II型糖尿病患者的治疗。

本药可以单独使用或与磺脲类药物联合使用。

本文参考文献报道的方法，并对测定方法进行了改进，改进后的方法样品处理更简单，在保持精密度和准确度的情况下，所建立的方法在灵敏度方面也能够满足药代动力学研究的要求。

材料和方法1．药品和仪器1．1药品和试剂标准品：盐酸二甲双胍，北京德众万全药物技术开发有限公司提供，含量99.7％。

试剂：乙腈为美国Fisher产色谱纯乙腈，所用的其它试剂均为分析纯，试验中各种溶液的配制均使用双蒸馏水。

试验中使用的空白血清为购自北京红十字会血站。

1.2仪器和色谱条件Agilent 1100液相色谱仪系统，由单元泵、自动进样器、紫外检测器、色谱工作站组成，以上各部分均由美国Agilent公司生产。

色谱条件为：Alltima sillica色谱柱(150mm×4.6mm 5μm)；流动相为乙腈：pH7.0 0.05mol/L磷酸盐缓冲液=40：60；流速为1ml/L；检测波长为233nm；柱温为室温；进样量为40μl。

1.3贮备液的制备盐酸二甲双胍贮备液：称取适量的盐酸二甲双胍细粉于容量瓶中，用水溶解并稀释成50μg/ml的溶液作为贮备液，于冰箱中保存。

1.4血样处理方法精密量取0.25ml含有药物的血清，精密加入0.5ml乙腈(1:2)，振摇30秒后，4000r/min离心10min后，取出上清液，于自动进样器小瓶中直接进样分析。

1.5标准曲线和质控样的制备用贮备液和空白血清以三倍稀释的方式制备2.54, 0.847, 0.282, 0.094, 0.031, 0.011μg/ml的盐酸二甲双胍标准曲线溶液。

按照血样的处理方法进行试验，以盐酸二甲双胍的浓度对其峰面积进行线性回归。

HPLC测定盐酸二甲双胍片的有关物质【摘要】目的：缩短检测盐酸二甲双胍片和盐酸二甲双胍缓释片中有关物质双氰胺的出峰时间。

方法：采用高效液相色谱法。

色谱柱JADE-PAK SCX-II，流动相4.0%磷酸二氢铵溶液(磷酸调pH至2.8)，检测波长：218 nm，流速：1.0ml/min。

结果：双氰胺与二甲双胍主峰可以达到良好的分离，试验结果精密度良好。

结论：本法专属性强、分离较好，操作简便、结果准确。

【关键词】HPLC法；盐酸二甲双胍片；有关物质；双氰胺[Abstract]Objective: to shorten the peak time for the determination of dicyandiamide and other related substances in metformin hydrochloride tablets. Methods: HPLC conditions were as follows: JADE-PAK SCX-II column (250X 4.6 mm,5μm),mobile phase,4.0% ammonium dihydrogen phosphate solution (pH adjusted by phosphoric acid to 2.8), detection wavelength 218nm,Flow rate,1.0 ml/min. Results: dicyandiamide could be separated from the main peak of metformin with good reproducibility. Conclusions: The method is specific, simple, rapid, accurate and reliable.[Keywords] HPLC method;metformin hydrochloride; related substance; dicyandiamide盐酸二甲双胍为降血糖药，主要用于治疗非胰岛素依赖型糖尿病。

HPLC-MS法测定盐酸二甲双胍片中毒性杂质 N-亚硝基二甲胺（ NDMA）的含量重庆国舒制药有限公司重庆 401338重庆国泰康宁制药有限责任公司重庆 401520摘要：目的建立HPLC-MS法检测盐酸二甲双胍片中毒性杂质N-亚硝基二甲胺的含测定方法。

方法以ACE EXCEL3 C18-AR 4.6mm×100mm，3.0μm为色谱柱，流动相为流动相A：0.1%甲酸溶液流动相B：0.1%甲酸甲醇溶液，柱温40℃，检测波长258nm，流速为0.55ml/min，采用APCI+:MRM扫描模式，定量离子对75.0→43.0 m/z。

结果：该方专属性强，NDMA在0.985ng/ml～98.5ng/ml范围内浓度与峰面积呈良好线性，线性方程为y =8×104 x–1.88×104，相关系数r为0.9999，该方法的回收率在98.58%～101.45%之间，9份溶液平均回收率为99.9%，RSD为0.9%，准确度良好。

结论：该HPLC-MS法能准确检出盐酸二甲双胍片中毒性杂质N-亚硝基二甲胺的含量。

关键词：HPLC-MS法；盐酸二甲双胍片；N-亚硝基二甲胺；含量盐酸二甲双胍片在临床上主要用于单纯饮食控制不满意的II型糖尿病病人，尤其是肥胖和伴高胰岛素血症者，用本药不但有降血糖作用，还可能有减轻体重和高胰岛素血症的效果[1]。

国外报道盐酸二甲双胍片中检出NDMA杂质。

目前所知，NDMA杂质可能通过亚硝化机理生成。

即在一定条件下，胺类化合物尤其是仲胺，）或其他亚硝化试剂反应产生亚硝胺类杂质。

盐酸二甲双胍片与亚硝酸钠（NaNO2中NDMA来源分析：（1）原料引入：盐酸二甲双胍合成起始物料分别是二甲胺和双氰胺，原料药二甲胺本身均含有仲胺结果，但整个合成工艺中均未使用或添加）或其他亚硝化试剂（亚硝酰卤化物、亚硝酸酯、三氧化二氮和亚硝酸钠（NaNO2四氧化二氮），也未使用或添加酰胺类溶剂（如N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮等），所以引入亚硝胺类杂质的风险很低。

北京中惠药业有限公司文件分类：体系程序性文件-质量标准文件名称：盐酸二甲双胍质量标准文件编码：SOP-QS001-00页码：第1页共5页制定人审核人批准人签名日期姓名康敬苏曼利窦豆职务质检员质检主管质量管理部经理执行日期：2013年06月01日分发范围：质量管理部、质监室、质检室、物流部文件变更记载文件编码文件名称变更历史及原因执行日期JS·ZL002-04盐酸二甲双胍质量标准根据《药品生产质量管理规范》2010版和《质量标准类文件的编制和标准》（GL·WJ009-02）进行变更。

2012年10月01日SOP-QS001-00盐酸二甲双胍质量标准增加“红外图谱的附图”：文件格式发生变化。

2013年06月01日1 目的：制定盐酸二甲双胍的质量标准，使盐酸二甲双胍的采购、验收、检验、贮存、使用有据可依，保证产品的质量。

2 范围：适用于盐酸二甲双胍的采购、验收、检验、贮存、使用各岗位。

3 职责3.1 物流部：按本标准进行采购、验收和贮存。

3.2 质监室：监督检查以下项目并对该物料行使放行审核权。

3.2.1 物流部是否按本标准进行采购、验收和贮存；3.2.2 取样员是否按抽样程序对待检物料进行取样；3.2.3 质检室是否按本标准进行检验。

3.3 质检室：按本标准进行检验，并及时出具检验报告。

4 内容4.1 物料基本信息4.1.1 物料名称: 盐酸二甲双胍；物料编码：Y010；4.1.2 质量标准的依据: 《中国药典》2010版二部；4.1.3 经批准的合格供应商：天津太平洋化学制药有限公司 ,淮南佳盟药业有限公司4.2 取样方法：取样执行《取样管理规程》（SMP-QA011-00）。

4.3检验项目、方法及可接受标准4.3.1 性状4.3.1.1本品应为白色结晶或结晶性粉末；无臭。

4.3.1.2本品在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中微溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。

4.3.1.3 熔点：照《熔点测定法标准操作规程》（SOP-TP012-00）操作，应为220～225℃。

高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片含量的优化方法摘要：本文主要针对高校液相色谱法，对盐酸二甲双胍片当中的盐酸二甲双胍含量的测试方法进行探讨，并且建立相应的探讨机制。

在过程当中，使用的色谱柱是kronaxil C18，流动性是甲醇以及离子对试液在进行含量检测的过程当中，工作人员可以将测试的波长调整为235纳米，流动的速度是每分钟一毫升，这种方法可以对盐酸二甲双胍的含量进行准确的检测，并且提高整体的平均回收率，回收率达到99.96%。

为此，分析优化方法与标准的方法相比并没有非常显著的差别。

在对盐酸二甲双胍片进行含量检测的过程当中，选择高效液相色谱法具有较高的使用价值，这种方案不仅简单准确，而且还具有比较高的灵敏度。

关键词：盐酸二甲双胍片；高效液相色谱法；盐酸二甲双胍在为糖尿病患者进行临床治疗操作的过程当中，医疗工作者可以选择盐酸二甲双胍片开展治疗操作，它可以通过配合饮食控制健康锻炼的方法，提高整体的治疗效果，特别是对存在肥胖症状的糖尿病患者来说，这种药物的使用价值更高。

糖尿病是一种由遗传以及环境相互作用之下引发的常见疾病，主要以高血糖作为诊断的标准，很多患者在治疗期间会存在比较明显的身体多系统受到损害的情况此时再提供盐酸二甲双胍片进行治疗操作时能够获得比较明显的治疗效果，可以通过配合使用磺脲类口服降糖药的方法提高患者的治疗有效性。

盐酸二甲双胍片当中的盐酸二甲双胍含量对后期的治疗效果会产生比较大的影响，本次课题主要分析高效液相色谱法，在盐酸二甲双胍片的含量测定工作中产生的效果进行探讨，研究结果表明这种测试的方法简单方便，而且具有很强的专属性，结果准确。

1.仪器和试剂在开展课题研究的过程当中，研究人员使用了kromasilc18色谱柱进行一系列的检测工作。

流动性是甲醇以及离子对试液在进行含量检测的过程当中，工作人员可以将测试的波长调整为235纳米，流动的速度是每分钟一毫升，这种方法可以对盐酸二甲双胍的含量进行准确的检测，并且提高整体的平均回收率，回收率达到99.96%。

1.前言盐酸二甲双胍是一种降血糖药，具有提高Ⅱ型糖尿病患者的血糖耐受性，降低基础和餐后血糖的作用。

美国糖尿病协会和欧洲糖尿病协会于2006年共同提出建议，Ⅱ型糖尿病患者一经确诊应尽早开始使用盐酸二甲双胍；世界上绝大多数的糖尿病治疗指南都将其列为首选用药，也是中国成年Ⅱ型糖尿病人用得最多的口服处方降糖药。

盐酸二甲双胍的作用机理不同于其它类型的口服抗血糖药，它可减少肝糖的产生，降低肠对糖的吸收，并且可通过增加外周糖的摄取和利用而提高胰岛素的敏感性，与磺酰脲类药物不同的是，盐酸二甲双胍不会使Ⅱ型糖尿病患者或正常血糖的患者产生低血糖症。

盐酸二甲双胍治疗后，胰岛素的分泌保持不变，而降低了空腹胰岛素水平及每日血浆胰岛素水平。

盐酸二甲双胍为药典品种，其中收载了有关物质双氰胺的测定方法，限度为0.02%[1]，但该法有一定的局限性，如色谱分离时双氰胺的保留时间较短，难于和溶剂峰基线分离，给定量的工作带来不便，色谱条件重现性欠佳等；近年来，关于盐酸二甲双胍中双氰胺含量测试也有文献报道[2-5]，但在实际应用上由于色谱条件要求高，成本高等亦存在部分局限性；本文主要参照药典方法，并作了一些条件的改动以适应实际测定的需要。

2.仪器与试药仪器：色谱仪:Agilent1200series高效液相色谱仪；紫外检测器：Agilent G1314A VWD；电子天平:CPA225D(赛多利斯)；pH计：PB-10(赛多利斯)。

试剂：盐酸二甲双胍原料药(A、B制药企业分别提供3批)；盐酸二甲双胍对照品(批号：100664-200401中国药品生物制品检定所)、双氰胺对照品(批号：100206-200302中国药品生物制品检定所)；水为超纯水；磷酸二氢铵(分析纯)，磷酸(分析纯)。

3.方法与结果3.1色谱条件的选择流动相：3.4%(W/V)磷酸二氢铵缓冲液(用磷酸调pH值至2.5)；色谱柱：Agilent SCX(250 mm×4.6mm，5μm)；检测波长：218nm；流速：1.0 ml/min；柱温30℃，进样量：10μl。

欧洲药典中盐酸二甲双胍杂质F（二甲胺检测方法）翻译
衍生试剂：现配现用，1ml2,4-二氟硝基苯至100ml容量瓶中，用乙腈（HLPC级）溶解。

空白溶液：取100ul三乙胺和1ml衍生试剂加入到5ml乙腈中，摇匀，60℃加热30min，冷却后，用乙腈定容至10ml。

供试品溶液：现配现用，10mg盐酸二甲双胍原料药，用5ml乙腈溶解，超声5min，加入100ul三乙胺和1ml衍生试剂，摇匀，60℃加热30min，冷却后，用乙腈定容至10ml。

用前过滤或者在（离心力）800g的转速下离心5min。

对照溶液：取1ml二甲胺至100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，然后移取此溶液2.5ml此溶液至100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容。

取上述溶液1ml，加入5ml乙腈，在加入100ui三乙胺，摇匀，60℃加热30min，冷却后，用乙腈定容至10ml。

色谱柱：以封尾的碳十八烷基键合硅胶为固定相，规格：125mm×3mm×5um 柱温：30℃，流速：0.7ml/min，检测波长：380nm，进样量：5ul。

流动相A：0.1%磷酸（体积比）
流动相B：乙腈
洗脱梯度：
鉴别峰：对比空白图谱和对照谱图，确定杂质F衍生峰。

杂质F分离度保留时间约为4min。

系统适用性要求：与杂质F衍生峰最近的峰的分离度不得小于3.0。

限度：供试品中杂质F衍生峰的峰面积不得大于对照品溶液中杂质F衍生峰的峰面积的0.05%。

盐酸二甲双胍简介目录•1拼音•2英文参考•3盐酸二甲双胍药典标准o 3.1品名▪ 3.1.1中文名▪ 3.1.2汉语拼音▪ 3.1.3英文名o 3.2结构式o 3.3分子式与分子量o 3.4来源（名称）、含量（效价）o 3.5性状▪ 3.5.1熔点▪ 3.5.2吸收系数o 3.6鉴别o 3.7检查▪ 3.7.1有关物质▪ 3.7.2干燥失重▪ 3.7.3炽灼残渣▪ 3.7.4重金属o 3.8含量测定o 3.9类别o 3.10贮藏o 3.11制剂o 3.12版本•附：o*盐酸二甲双胍药品说明书1拼音yán suān èr jiǎ shuāng guā2英文参考Metformin Hydrochloride[湘雅医学专业词典]3盐酸二甲双胍药典标准3.1品名3.1.1中文名盐酸二甲双胍3.1.2汉语拼音Yansuan Erjiashuanggua3.1.3英文名Metformin Hydrochloride3.2结构式3.3分子式与分子量C4H11N5·HCl 165.633.4来源（名称）、含量（效价）本品为1,1二甲基双胍盐酸盐。

按干燥品计算，含C4H11N5·HCl 不得少于98.5%。

3.5性状本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭。

本品在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中微溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。

3.5.1熔点本品的熔点（2010年版药典二部附录Ⅵ C）为220～225℃。

3.5.2吸收系数取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含5μg 的溶液，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ A），在233nm的波长处测定吸光度，吸收系数（）为778～818。

3.6鉴别（1）取本品约10mg，加水10ml溶解后，加10%亚硝基铁氰化钠溶液－铁氰化钾试液－10%氢氧化钠溶液（等体积混合，放置20分钟使用）10ml，3分钟内溶液呈红色。

（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（《药品红外光谱集》631图）一致。

盐酸⼆甲双胍质检⽅法盐酸⼆甲双胍质检⽅法⼀：质量指标⼆：质量检验⽅法1、外观性状⽬测颜⾊、颗粒形状，本品应为⽩⾊结晶或结晶性粉末，⽤⿐测其⽓味，⼏乎⽆臭。

2、溶解性（澄清度）盐酸⼆甲双胍分别能溶于⽔合甲醇中，且⽔中的溶解度要远⽐甲醇中⼤。

精确称量1.000g盐酸⼆甲双胍，加10mL⽔于⽐⾊管中，待完全溶解后，⽐⾊管从上往下看，如果纯清则表⽰其在⽔中的澄清度合格；同样精确称量1.000g盐酸⼆甲双胍，加30mL甲醇于⽐⾊管中，边晃动边使其慢慢溶解，待完全溶解后，⽐⾊管从上往下看，如果纯清则表⽰其在甲醇中的澄清度合格。

3、⼲燥失重精确称重1.000克样品于⼀称量⽫中，放于105℃⼲燥炉中4⼩时⾄恒重，取出后放于⼀⼲燥⽫中⾄室温，称重计算，减重不超过0.5%为样品合格。

计算⽅法如下：⼲燥失重=（m样—m⼲）÷m样4、炽灼残渣600度坩埚，先在⾼温箱中600℃加热1⼩时，⽽后取出放⼊⼲燥⽫中冷却，精确称重。

准确称重1.000g样品放于坩埚中，直接放电炉加热⾄没有青烟（约半⼩时左右）凉⾄室温加0.5mL 硫酸，继续放电炉加热⾄⽆烟(低温加热⾄硫酸蒸汽，全部除尽)，⽽后放于600度⾼温炉中2⼩时，取出放于⼲燥⽫中完成冷却，精密称量后，再在600-800℃炽灼⾄恒重，称重计算，⼩于0.1%为合格。

计算：A最后残渣质量÷m样品质量5、有关杂质（双氰胺对照试验）取⼆甲样品0.5g，加⽆⽔甲醇5mL（沿壁加⼊）于试管1中，⽔浴加热⾄完全溶解（加热取出多次，防⽌沸出试管），⽽后⾃然降温⾄35度，再加5mL⼄醚搅拌冷却⾄20度，静⽌30分钟，⽤滤纸过滤，再⽤2.5mL⼄醚洗试管，同样过滤合并滤液。

滤液。

滤液置⽔浴上蒸发⾄⼲，（可先⽤电炉蒸⼲⼀部分⽔），残渣加⽔0.5mL溶解，作为备⽤样品。

双氰胺对照试样，取双氰胺对照品0.004g，溶于10mL⽔中，作为备⽤对照（即没1mL中含0.4mg）展开剂配⽐：正戊醇、吡啶、⽔（1:2:1.8），分别取样品5mL、10mL、9mL混合于瓶中备⽤。

盐酸二甲双胍药物中杂质测定方法研究进展
徐艳梅;卞广利;高辉;王俊峰;王振刚;高燕霞
【期刊名称】《化学分析计量》
【年(卷),期】2022(31)3
【摘要】对近年来盐酸二甲双胍类药物中杂质的测定方法进行综述。

盐酸二甲双胍类药物中的杂质主要有双氰胺、二甲胺以及由二甲胺形成的亚硝胺类基因毒性杂质等。

测定方法主要有高效液相色谱(HPLC)法、离子色谱(IC)法、高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法和气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法,其中高效液相色谱法主要用于测定双氰胺,衍生化-高效液相色谱法和离子色谱法主要用于测定二甲胺,HPLC-MS/MS法和GC-MS/MS法主要用于测定亚硝胺类基因毒性杂质。

该综述旨在为盐酸二甲双胍类药物中杂质的测定提供参考。

【总页数】5页(P95-99)
【关键词】盐酸二甲双胍;双氰胺;二甲胺;基因毒性杂质;综述
【作者】徐艳梅;卞广利;高辉;王俊峰;王振刚;高燕霞
【作者单位】河北省药品医疗器械检验研究院;河北医科大学第二医院药学部;石家庄市华新药业有限责任公司;河北天成药业股份有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】O657
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荷移光度法测定盐酸二甲双胍的含量
黄薇
【期刊名称】《德州学院学报》
【年(卷),期】2004(020)004
【摘要】研究了7,7,8,8-四氰基对二次甲基苯醌(TCNQ)与盐酸二甲双胍的荷移反应,确定了反应条件.TCNQ与二甲双胍形成络合物的反应在842 nm处有较强光吸收,表观摩尔吸光系数是2.46×103 L·mol-1·cm-1.在丙酮介质中,二甲双胍的浓度在5-40 mg/l范围内呈线性关系.该方法重现性好,灵敏度较高,操作简单,用于测定二甲双胍的含量,精密度好,相对标准偏差为1.4%(n=6),回收率为97%以上,
【总页数】3页(P40-41,62)
【作者】黄薇
【作者单位】枣庄师范高等专科学校化学系,山东枣庄,277100
【正文语种】中文
【中图分类】O654
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