骨碎补接骨丸的急性毒性实验研究
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一、实验目的1. 掌握骨碎补的炮制方法及注意事项。
2. 了解骨碎补炮制过程中的变化及其作用。
3. 分析不同炮制方法对骨碎补药效的影响。
二、实验材料1. 骨碎补药材:槲蕨或中华槲蕨的干燥根茎。
2. 砂子:河砂,洁净无杂质。
3. 酒、盐水等炮制辅料(根据需要)。
4. 炒制容器、筛子、刀具等实验工具。
三、实验方法1. 骨碎补的净制:取原药材,除去杂质和非药用部位,洗净。
2. 骨碎补的切制:将净制后的骨碎补润透,切厚片,干燥,筛去碎屑。
3. 砂炒骨碎补:先将砂置炒制容器中,用武火加热至灵活状态,投入骨碎补片,不断翻动,炒至鼓起,取出,筛去砂,放凉。
4. 酒制骨碎补:取去毛骨碎补片,加酒拌匀,用文火炒干为度。
5. 盐制骨碎补:取去毛骨碎补片,加盐水拌匀,用文火炒干为度。
6. 观察不同炮制方法对骨碎补性状、气味、药效的影响。
四、实验步骤1. 准备实验材料,包括骨碎补药材、砂子、炒制容器等。
2. 对骨碎补药材进行净制,去除杂质和非药用部位。
3. 将净制后的骨碎补润透,切厚片,干燥,筛去碎屑。
4. 分别进行砂炒、酒制、盐制等炮制方法,观察炮制过程中的变化。
5. 对炮制后的骨碎补进行性状、气味、药效等方面的观察和比较。
6. 记录实验数据,分析不同炮制方法对骨碎补药效的影响。
五、实验结果与分析1. 砂炒骨碎补:炮制后,骨碎补片呈扁圆状鼓起,质轻脆,表面棕褐色或焦黄色,断面淡棕色或浅棕色,无鳞叶,味微涩,气香。
炮制后的骨碎补易于去鳞片,便于调剂和制剂,利于粉碎煎煮出有效成分。
2. 酒制骨碎补:炮制后,骨碎补片呈深棕色,质脆易碎,味微苦,气香。
酒制骨碎补具有补肾强骨、续伤止痛的作用。
3. 盐制骨碎补:炮制后,骨碎补片呈浅棕色,质脆易碎,味咸,气香。
盐制骨碎补具有补肾壮骨、清热解毒的作用。
4. 比较分析:砂炒骨碎补在炮制过程中,鳞片易于去除,有效成分易于煎煮出,临床应用广泛;酒制骨碎补具有较好的补肾强骨、续伤止痛作用;盐制骨碎补具有清热解毒、补肾壮骨的作用。
接骨丸对 SD 骨折大鼠血清钙、ALP、CD3、CD44表达的影响金朗;王雪;王炳强【摘要】目的:探讨接骨丸对 SD 骨折大鼠血清钙、ALP、CD3、CD44表达的影响。
方法:SD 大鼠40只按照数字随机表法将其分为4个组(对照组、模型组、低剂量组、高剂量组),每组10只。
模型组、低剂量组和高剂量组给予造模。
对照组和模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃;低剂量组灌胃浓度为0.4 g/kg 浓度的接骨丸溶液、高剂量组灌胃浓度为1.6 g/kg 的接骨丸溶液。
结果:模型组、低剂量组、高剂量组治疗1周和2周血清钙、ALP、CD3、CD44水平低于对照组,模型组、低剂量组治疗3周血清钙、ALP、CD3、CD44水平低于对照组,而高剂量组治疗3周血清钙、ALP、CD3、CD44水平高于对照组(P <0.05);低剂量组和高剂量组治疗4周血清钙、ALP、CD3、CD44水平高于对照组和模型组,且高剂量组治疗4周血清钙、ALP、CD3、CD44水平高于低剂量组(P <0.05)。
结论:接骨丸可能通过增加血清钙、ALP、CD3、CD44表达水平,促进骨折愈合。
%Objective:To investigate the effect of Jiegu Pill on the expression of serum calcium,ALP,fracture CD3,CD44 in SD rats with fracture.Methods:Forty SD rats were randomly divided into four groups (control group,model group,low dose group, high dose group)with 10 rats in each group.Model group,low dose group and high dose group were given.Rats in the control group and the model group were given equal volume of ordinary saline and the low dose group was intragastricly administrated with Jiegu Pill solution of 0.4 g/kg concentration,while ratsin the high dose group was intragastricly administrated with Jiegu Pill of 1.6 g/kg solution.Results:The serum calcium,ALP,CD3,CD44 levels of the model group,low dose group,high dose group a week and 2 weeks later after the treatment were lower than those in the control group.serum calcium,ALP,CD3,CD44 levels of the model group and the low dose group 3 weeks after the treatment were lower than those in the control group and the high dose group,but the levels of serum were higher in the high dose group compared to those of the control group 3 weeks after the treatment (P <0.05).The levels of serum calcium,ALP,CD3 and CD44 were higher in the high-dose group and low-dose group than those in the control group and the model group after 4 weeks treatment and the high-dose group was superior to the low-dose group (P <0.05).Conclusion:Jiegu Pill may increase the expression of serum calcium,ALP,CD3,CD44 and promote fracture healing.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2016(011)012【总页数】4页(P2747-2750)【关键词】接骨丸;SD 骨折大鼠;血清钙;ALP;CD3;CD44【作者】金朗;王雪;王炳强【作者单位】河北省沧州市人民医院药学部,沧州,061001;河北省沧州医学高等专科学校基础医学部,沧州,061001;河北省沧州市妇幼保健院药剂科,沧州,061001【正文语种】中文【中图分类】R285.5骨折是常见的一种临床骨科疾病。
骨碎补药用活性研究进展发表时间:2015-10-12T15:55:35.910Z 来源:《河南中医》2015年5月供稿作者:荆长友孙玲韩晰光尚剑(通讯作者)[导读] 哈尔滨医科大学附属第一医院骨碎补药用历史悠久,始载于《本草拾遗》,味苦、性温、归肾、肝经,具有疗伤止痛、补肾强骨之效。
荆长友孙玲韩晰光尚剑(通讯作者)(哈尔滨医科大学附属第一医院黑龙江哈尔滨 150000)【摘要】骨碎补为常用中药,具有促进骨愈合、抗骨质疏松、抗炎等活性,药理作用显著,具有重要的应用价值。
动物体内实验和体外细胞实验表明,骨碎补能增强成骨和破骨细胞活性,提高 ALP 活性,增加钙盐沉积,调控相关因子的表达促进成骨细胞矿化,促进骨愈合。
此外,骨碎补在调节骨类代谢疾病中也具有重要作用。
近年来国内外学者对骨碎补药理作用的深入研究,为骨碎补药用活性及开发提供了更多依据。
【关键词】骨碎补;药用活性;骨愈合【中图分类号】R 285 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028(2015)5-0148-01骨碎补是水龙骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei(Kunze)J.Sm.的干燥根茎,生于树石上,皮色如生姜,又名猴姜。
骨碎补药用历史悠久,始载于《本草拾遗》,味苦、性温、归肾、肝经,具有疗伤止痛、补肾强骨之效,主治跌扑闪挫、筋骨折伤、肾虚腰痛、筋骨痿软、牙齿松动、耳聋耳鸣[1]。
现代药理和临床研究表明,骨碎补具有良好的促进骨愈合、抗骨质疏松、抗炎等作用。
其化学成分主要为黄酮、三萜、酚酸及其苷类化合物,药理作用显著,具有重要的应用价值,文章就近年来骨碎补的药用活性研究进行综述。
1 化学成分目前通过液相色谱和质谱连用的方法对骨碎补的全部化学成分进行分析,共得到 369 种化合物[2] 从骨碎补中分离提取的化学成分主要为黄酮、三萜、酚酸及其苷等,骨碎补的主要活性成分为柚皮苷和酚酸类化合物。
其中黄酮类包括黄酮、二氢黄酮、黄烷醇及其苷以及少量的橙酮和查耳酮[3-4] 黄酮及其苷类化合物主要以山奈酚、木犀草素Ⅱ为苷元的黄酮苷类。
中华中医药学刊单味中药骨碎补对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡作用的实验研究金连峰(辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳110032)摘要:目的:利用细胞、分子生物学技术,采用反转录聚合酶链反应(RT -PCR )、蛋白印迹(Western -blot )检测方法,观察其对实验性兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响并进行理论分析。
方法:将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为6组,空白组6只,模型组6只,治疗组(骨碎补组)6只,对照组(维固力组)6只。
兔左后肢伸直位管型石膏固定6周得到兔膝OA 的模型。
用药4周后,以耳缘静脉空气栓塞法处死各组动物取下每只家兔左后肢股骨髁,取下的关节软骨分成两部分,股骨髁的一部分用于RT -PCR 检测;另一部分用于Western blot 检测。
采用SPSS 13.0软件包对RT -PCR 和Western Blot 结果进行方差分析和Pearson 相关分析,P <0.05有统计学意义。
结果:(1)RT -PCR 检测结果:模型组较空白组的TNF -αmRNA 、Caspase -3mRNA 表达水平差异有显著性(P <0.05));对照组较模型组的TNF -αmRNA 、Caspase -3mRNA 表达水平差异有显著性(P <0.05);治疗组较模型组的TNF -αmRNA 、Caspase -3mRNA 表达水平差异有显著性(P <0.05);治疗组较对照组的TNF -αmRNA 、Caspase -3mRNA 表达差异无显著性。
(2)Western blot 检测结果:模型组较空白组的TNF -α、Caspase -3表达水平差异有显著性(P <0.05);对照组较模型组TNF -α、Caspase -3蛋白表达水平差异有显著性(P <0.05);治疗组较模型组的TNF -α、Caspase -3蛋白表达水平差异有显著性(P <0.05);治疗组较对照组的TNF-α、Caspase -3蛋白表达差异无显著性。
骨碎补抗骨质疏松活性部位的化学成分研究的开题报告一、研究背景骨质疏松是一种常见的疾病,主要表现为骨量减少和骨密度降低,最终导致骨折。
在中老年人群中尤为常见,影响人们的生活质量。
骨碎补是一种常用的中药材,据传统认为具有补骨健脾的作用。
而且骨碎补萃取液中含有多种化合物,这些化合物可能对骨代谢具有调节作用。
因此,研究骨碎补中活性部位的化学成分,有助于深入了解其补骨作用的分子机制。
二、研究内容本研究将采用一系列现代化学和生物学方法,对骨碎补中具有抗骨质疏松活性的化合物进行分离纯化和结构鉴定。
同时,通过体内和体外实验,评估这些化合物对骨细胞增殖和成熟、骨吸收和骨形成等关键环节的影响,探究其在骨代谢中的作用机制。
三、研究意义通过对骨碎补中活性部位的化学成分研究,可以深入了解骨代谢的分子机制,为探索中药材治疗骨质疏松的机制提供科学依据。
同时,本研究结果可能为新型骨质疏松药物的研发提供重要的理论支持和实验基础。
四、研究方法1.骨碎补提取液制备:采用水煎法、甲醇浸提法等方法,制备骨碎补提取液。
2.化合物分离纯化:采用高效液相色谱技术、逆相高效液相色谱技术等方法,对骨碎补提取液中的化合物进行分离纯化。
3.化合物结构鉴定:结合质谱、核磁共振等技术,对分离纯化得到的化合物进行结构鉴定。
4.细胞实验:采用体外细胞培养技术,评估化合物对骨细胞增殖、成熟、骨吸收和骨形成等关键环节的影响。
5.动物实验:采用小鼠骨质疏松模型,评估化合物对骨质疏松的治疗作用及其机制。
五、预期成果通过本研究,预计能够获得骨碎补中活性部位的化学成分,深入探究其对骨细胞增殖、成熟、骨吸收和骨形成等环节的影响,并阐明其在骨代谢中的作用机制。
这将为中药材治疗骨质疏松、新型骨质疏松药物的研发提供重要的理论指导和实验基础。
中药骨碎补真伪鉴别与质量控制研究骨碎补是一种我国的传统中药,主要用于续伤止痛、补肾强骨。
本文以骨碎补药材为对象,通过建立指纹图谱轮廓对药材的快速鉴别与质量控制进行研究。
论文的主要研究内容如下:第一部分重点介绍了传统中药骨碎补的主要化学成分信息及其现代药理研究,同时对中药炮制的目的、炮制前后化学成分的变化进行了概述。
同时还对敞开式质谱在化学合成药物和中草药质量控制中的应用进行了介绍。
第二部分采用高效液相色谱法建立骨碎补液相指纹图谱,并通过液质联用对骨碎补中的主要化学成分信息进行确证,指认出了 11个化学成分,并对骨碎补中主要化学成分柚皮苷、新北美圣草苷柚皮苷与新北美圣草苷二级质谱碎片进行归属,两个化合物具有相似的结构在黄酮苷元处发生RDA裂解,都会产生[M-H-120]-的特征碎片离子。
本文对骨碎补超声提取过程中提取时间、提取溶剂进行优化,以达到最优的提取效果及节约实验时间。
通过建立骨碎补指纹图谱轮廓结合统计学分析软件,对比真品与伪品中的化学成分信息差异,多批次药材相似度分析中正品骨碎补的相似度均大于0.75,伪品低于0.4,在主成分分析中PC1、PC2得分达到88.6%,药材被分成了明显的两组,能准确的对多批次药材进行真伪鉴别。
第三部分采用了纸喷雾敞开式质谱建立骨碎补指纹图谱轮廓结合统计学分析软件,对骨碎补快速真伪鉴别及质量控制进行研究。
本章以药材中的三种含量最高的活性成分柚皮苷、新北美苷和4-O-β-D-葡萄糖基反式咖啡酸的响应为指标对喷雾电压、锥孔电压以及正负离子响应进行优化以达到最好的实验效果。
对药材质谱响应稳定性进行考察,日内精密度RSD不超过5.28%,日间精密度RSD小于7.27%。
在负离子模式下,骨碎补正品药材中m/z 191、341、377、579、595、615、631响应较好,伪品中m/z 191、341、371、533、609等有较好的响应,4-O-β-D-葡萄糖基反式咖啡酸的峰(m/z341)在伪品中也有显示,指标性成分柚皮苷的峰以及活性成分新北美圣草苷均未检出,在主成分分析中m/z 579、595、615、631四组峰贡献最大,真伪品分成了两组。
・论 著・骨碎补对骨折愈合中T GF2Β1表达的影响王华松1 许申明2(指导)(1.华中科技大学同济医学院附属同济医院 湖北 武汉 430030;2.湖北中医附院骨科)摘要 目的:骨碎补是骨伤科常用的一味中药,为了进一步探讨其促进骨折愈合的机理,设计了该实验以期为临床运用骨碎补提供理论依据。
方法:将36只SD大鼠随机分成三组:生理盐水组(A)、骨碎补组(B)、伤科接骨片组(C)。
按标准骨折模型方法造模,不作任何外固定,分笼饲养。
从手术后第二天开始灌胃给药,骨碎补组每天以骨碎补水煎液分早晚2次灌胃,伤科接骨片组每天给药2次,对照组同时给予等量生理盐水。
于术后第7天、14天、21天每组分别处死动物4只,取出骨标本。
骨标本制成切片测量骨痂厚度及T GF2Β1免疫组化染色。
结果:骨碎补组骨痂组织形成丰富,厚度明显优于对照组(P<0.01);骨碎补组骨痂组织中T GF2Β1表达量及阳性定位与伤科接骨片组相同,均明显强于对照组。
结论:实验结果表明骨碎补能增加骨痂厚度,提高骨折愈合质量。
增加T GF2Β1在骨痂组织中的表达,可能是骨碎补促进骨折愈合的机制之一。
关键词 骨碎补 骨折 T GF2Β1中图分类号:R683;Q291 文献标识码:A 文章编号:1005-0205(2001)04-0010-04 Gusu ibu’s Effect on Expression of TGF-Β1i n Ca llus D ur i ng Fracture Hea l i ngW ang H uasong,Xu Shenm ingT ongj i M ed ica l Colleg e of H uaz hong S cience and T echnology U n iversity,W uhan430030ABSTRACT Objective:T h is experi m en t has been designed to study the m echan is m of Gu su ibu’s p romo ting the healing of fractu re and p rovide the better theo retical basis fo r mo re ex ten sive clin ical app licati on.M eth2 ods:T h irty-six SD rats w ere divided in to th ree group s at random and equally:Group A(con tro l),Group B (Gu su ibu),Group c(shangke jiegup ian).Standard fractu res w ere m ade at m iddle s m en ts of righ t tib ias in th irty-six rats.A t the first,second,th ird w eek s after fractu re,bone speci m en w as co llected from every rat.T hen m easu ring th ickness of calu s and i m m unoh istochem ical studies w ere perfo rm ed on every slice.Re2 sults:D u ring fractu re healing,the th ickness of callu s and exp ressi on s of T GF2Β1in callu s in Group B w ere m uch better than in con tro l.Conclusion:A cco rding to the resu lts,w e m ain tain the m echan is m of Gu su ibu on p romo ting fractu re healing:enhance the exp ressi on of T GF2Β1in callu s.KEY WOR D S Gu su ibu F ractu re T ran sfo rm ing grow th T GF2Β1 骨碎补是一味骨伤科常用的中药,历代治疗骨折愈合的诸多方剂中多有应用。
散瘀止痛接骨丸药效学及急性毒性实验
王新春;朱喜玲;周新明;郭庆功;李钦
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2003(025)005
【摘要】目的:研究散瘀止痛接骨丸药效学及其毒性.方法:采用热板法、扭体法、二甲苯致炎法、棉球法、家兔骨折愈合、血液流变学等试验方法.结果:散瘀止痛接骨丸能明显减少小鼠扭体次数及延长热刺激致痛的潜伏期,能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度和减轻大鼠棉球肉芽肿的重量,促进实验性骨折的愈合,降低全血粘度,改善血液流变性,小鼠最大给药量为10g·kg-1,7d内动物全部存活.结论:散瘀止痛接骨丸具有镇痛、抗炎、促进骨折愈合、活血化瘀作用,制剂毒性小.
【总页数】4页(P393-396)
【作者】王新春;朱喜玲;周新明;郭庆功;李钦
【作者单位】河南大学第一附属医院,河南,开封,475001;河南大学第一附属医院,河南,开封,475001;河南大学第一附属医院,河南,开封,475001;河南大学第一附属医院,河南,开封,475001;河南大学药学院,河南,开封,475001
【正文语种】中文
【中图分类】R285.6
【相关文献】
1.黎族通瘀去炎汤的药效学初步和急性毒性实验研究 [J], 张一云;唐菲;高雨;侯世封;杨丽娜
2.散瘀止痛接骨丸治疗骨折的临床疗效观察 [J], 段西峰;刘振华;刘志刚;王胜利
3.活血止痛接骨膏联合三七接骨丸促进骨折愈合的临床研究 [J], 杨洸
4.散瘀止痛巴布膏对大鼠试验性炎症和疼痛药效学研究 [J], 李驰荣;张尊祥;蔡晓红;朱羞阳
5.消肿止痛接骨散的药效学研究 [J], 刘振亚;权仁子
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骨碎补化学成分和药理作用研究进展钱茜【摘要】骨碎补为骨科常用中药,化学成分主要为黄酮、三萜、酚酸及其苷类等,具有良好的促进骨折愈合、抗骨质疏松、抗炎等活性。
本文综述了国内外学者近年来对骨碎补化学成分和药理作用的研究,为进一步深入系统的研究骨碎补活性与开发奠定基础。
%Rhizoma Drynariaed is commonly used for orthopedics, and the chemical composition mainly were flavonoids, triterpenoids, and phenolic glycosides, etc.It has good bioactivity of healing, anti-osteoporosis, anti-inflammatory activity.This paper reviewed the research on chemical constituents and pharmacological activities of Rhizoma Drynariae at home and abroad in recent years, lay the foundation for the further research and development activity of Rhizoma Drynariae.【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】3页(P186-188)【关键词】骨碎补;化学成分;药理作用;研究进展【作者】钱茜【作者单位】河南中医学院第一附属医院药学部,河南郑州 450000【正文语种】中文【中图分类】R446骨碎补为常用中药, 是水龙骨科(polypodiaceae)多年生蕨类植物。
又名:破故纸,婆固脂,胡韭子。
属蔷薇目,豆科一年生直立草本,高60~150 cm。
骨碎补对链霉素耳毒性解毒作用的实验研究戴小牛;童素琴;贾淑萍;陶艳梅【期刊名称】《东南大学学报(医学版)》【年(卷),期】2000(019)004【摘要】Objective The purpose of the present study was to analyze the effect of Gusuibu on the ototoxicity by streptomycin. Methods A deafness model was established in 30 guinea pigs by streptomycin (300 rmg· kg-1,i.m.),in which 17were used as experimental group(32 ears) and 13 as controls( 18 ears). The experimental animals were administrated with 100% Gusuibu solution(5 ml· kg-1 )orally. Cochlear pathology was assessed by surface preparation technique. Detail counts of hair cells were recorded under light microscope and analyzed statistically. Result C usuibu decreased the loss of outer hair cells in the lirst and second coils. Conclusion Gusuibu may attenuate the ototoxicity by streptomycin.%目的:探讨骨碎补对链霉素耳毒性的解毒作用。
方法:肌肉注射链霉素(300mg·kg-1)15 d制成豚鼠耳聋模型,其中部分动物同时用100%骨碎补液灌胃(5ml·kg-1)。
骨碎补总黄酮急性毒性实验赵晋宁;谢雁鸣;张文军;王智;刘玉琦【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2005(024)001【摘要】目的评价骨碎补总黄酮的安全性,给临床实验提供依据,从而保证临床用药安全.方法①小鼠灌胃最大耐受量测定:20只NIH小鼠给予0.40 g·mL-1骨碎补总黄酮溶液30 mL·kg-1,分2次(8:30,16:30)灌胃给药,观察其饮食、活动、精神状态、皮毛肤色、大小便及体重变化.②大鼠灌胃最大耐受量测定:20只Wistar大鼠灌胃给予0.40 g·mL-1骨碎补总黄酮溶液30 mL·kg-1,分2次(8:30,16:30)给药,观察其饮食、活动、精神状态、皮毛肤色、体重、摄食量变化及大小便.③小鼠腹腔注射给药急性毒性实验(LD50):设置7个浓度的药液进行腹腔注射,一次给药后观察7 d.结果小鼠、大鼠灌胃给药后,其饮食、活动、精神状态等体征均无异常变化,体重变化在正常范围内(P>0.05).小鼠急性毒性实验,尸检可见动物腹腔内有少量残留药液,重要脏器未见明显病理变化,总黄酮LD50=5.99g·kg-1.结论骨碎补总黄酮急性毒性实验未显示毒性作用,预期临床应用安全性良好.【总页数】3页(P12-14)【作者】赵晋宁;谢雁鸣;张文军;王智;刘玉琦【作者单位】中国中医研究院西苑医院实验动物中心,北京,100091;中国中医研究院西苑医院实验动物中心,北京,100091;中国中医研究院西苑医院实验动物中心,北京,100091;中国中医研究院西苑医院实验动物中心,北京,100091;中国中医研究院西苑医院实验动物中心,北京,100091【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R965.3【相关文献】1.骨碎补总黄酮对卵巢去势大鼠骨质疏松的干预作用 [J], 陈学生;张洪钦;陈秋琴;林立;王永胜2.骨碎补总黄酮干预Notch信号通路影响骨重建过程中成血管-成骨耦联 [J], 黄敏玲;卢赵琦;申震;林海雄;冯骏杰;黄枫;姜自伟;蔡群斌3.骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞倍增反应和分化的作用机制实验 [J], 王军松;李佳;刘桂奇4.骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞倍增反应和分化的作用机制实验 [J], 王军松;李佳;刘桂奇5.骨碎补总黄酮对骨代谢的影响及作用机制 [J], 张朝栋;曹芹芹;徐婷婷;林露茜;岳珂;郑晶晶;黄淑成因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
接骨丸对SD大鼠肝肾毒性的实验研究王雪;金朗;王炳强【期刊名称】《中医学报》【年(卷),期】2014(29)5【摘要】目的:观察接骨丸对SD大鼠肝脏和肾脏的毒性,完善接骨丸质量标准,确保该制剂使用安全。
方法:选择40只健康SD大鼠,雌雄各半,按照数字随机表法分为空白对照组、接骨丸低剂量组、接骨丸高剂量组及接骨丸生马钱子组,每组10只。
实验开始前取每只大鼠的血液测定肝肾功能相关的生化指标,包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(T-BIL)、血糖(GLU)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及三酰甘油(TG)。
对每组SD大鼠按照实验设定的给药剂量连续12周灌胃,每日1次,每周测定大鼠体质量,并根据体质量实时调整给药量。
给药期间每日观察两次大鼠的活动及行为,记录变化情况。
12周灌胃结束后,取每只大鼠的血样测量实验前测量的生化指标并比较。
停药2周后再次进行上述指标检测并比较,处死小鼠取小鼠肝脏、肾脏测量肝、肾脏器系数,取肝组织和肾组织制片观察大鼠的病理改变。
结果:40只小鼠在实验期间的活动及行为表现均无明显异常;实验前4组小鼠的血生化指标无明显差异;灌胃12周后、停药2周后,空白组、低剂量组小鼠的血生化指标和实验前比较无明显变化,灌胃12周后,高剂量组和生马钱子组小鼠的ALT、AST、ALP、TBIL、GLU、BUN、Cr及TG均较实验前有明显上升,前后比较差异具有统计学意义(P<0.05),生马钱子组小鼠上述指标的上升幅度明显高于高剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05)。
停药2周后,高剂量组和生马钱子组小鼠的上述生化指标均得到明显下降,但与实验前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
停药2周后空白组、低剂量组小鼠的肝、肾脏器系数处于正常范围,而高剂量组和生马钱子组小鼠的肝肾脏器系数明显超出正常范围,差异有统计学意义(P<0.05)。
骨碎补接骨丸的急性毒性实验研究
发表时间:2012-03-27T10:51:52.867Z 来源:《心理医生》2011年4月总第190期供稿作者:尹松鹤1赵玉梅2张晓梅1 [导读] 给药前后体重变化情况:空白给与药物给小鼠体重增长比较无统计学意义(P>0.05),动物均增重。
尹松鹤1赵玉梅2张晓梅1 (1牡丹江市食品药品检验检测中心黑龙江牡丹江157000; 2牡丹江医学院红旗医院黑龙江牡丹江157011)【中图分类号】R285.6【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2011)04-0019-02 骨碎补接骨丸是由当归、土鳖虫、醋乳香、醋没药、苏木、煅自然铜、烫骨碎补等组成,具有活血散瘀,消肿止痛之功效。
临床应用于跌打损伤,筋断骨折,瘀血肿痛等。
为了对本品的安全性做出客观、科学的评价,进一步指导临床用药,故进行骨碎补接骨丸对小鼠的急性毒性实验研究。
1实验材料 1.1动物:昆明种小鼠, SPF级,雌雄各半,体重(20 ±2) g,由黑龙江肿瘤防治研究所提供,饲养温度: ( 24 ±2) ℃,相对湿度: 45% ~60% ,以颗粒饲料喂养,自由饮水。
1.2药物:骨碎补接骨丸,黑棕色的大蜜丸,味辛,微甜。
用前以蒸馏水研磨成混悬液进行口服灌胃。
2 试验方法 2.1半数致死量(LD50)预试验:在进行正式试验之前,首先做预试验。
以便为正试实验提供依据,将12只小鼠随机分为两组,雌雄各半,灌胃前禁食不禁水16h。
给药组:以可供灌胃的最大浓度(60%),小鼠灌胃可承受的最大体积(每10g体重0.4ml)一次灌胃骨碎补接骨丸沉溶液。
给药后常规饲养,观察3d,空白组灌胃等量蒸馏水,方法同给药组,结果小鼠全部存活。
处死后尸检观察各鼠主要脏器(肝、心、脾、肺、肾)未发现任何异常改变。
因此,无法测出本品的半数致死量(LD50 ) ,提示该中药复方制剂药是安全的,故进行小鼠最大耐受量试验。
2.2最大耐受量实验
预试验时,无法测出LD50 ,故做最大耐受量试验,以进一步评价其安全性。
将40只小鼠随机分为空白组20只,骨碎补接骨丸组20只,每组雌雄各半。
试验前禁食16h,正常饮水。
药物组每只小鼠按0.4g/10g的剂量灌胃60%浓度的骨碎补接骨丸溶液(已达最高浓度,最大给药浓度),一日内连续灌服3次,间隔时间为4小时,空白组灌胃等体积的蒸馏水,给药后连续观察7日,每天称取其体重并观察动物反应。
给药后常规饲养,室温(20~24℃),湿度50%。
试验第8天称取体重后,处死小鼠,解剖观察其心、肝、脾、肺、肾等主要器官的组织变化。
2.3观察项目(1)给药前和给药后的第1-8 天,测量小鼠体重。
(2)观察给药后小鼠的外在表现,反射活动,饮水量,大、小便,存活情况等。
2.4实验结果及统计学处理:实验计量资料以均数±标准差(X ±s)表示,用统计软件SPSS1410处理,结果见表1、2。
表1骨碎补接骨丸急性毒性试验小鼠体重变化( g, X ±s, )
2.5毒性反应情况:小鼠每天最大给药量相当于72g/kg,,为成人临床推存用量的280倍,小鼠灌胃给药后,即刻出现闭眼、卧伏等现象,自主活动明显减少,食欲有所下降,粪便呈黑褐色,以上体征均在给药后2h~4h内基本恢复正常。
此外,药物组小鼠无叫声异常、震颤、惊厥、运动失调、流涏、流泪、流鼻涕、呼吸困难、心跳过强或过弱、腹泻、便秘、腹胀气等现象发生;小鼠皮毛光泽;给药8d内小鼠未出现死亡情况。
2.6给药前后体重变化情况:空白给与药物给小鼠体重增长比较无统计学意义(P>0.05),动物均增重。
提示骨碎补接骨丸对小鼠的急性毒性反应不明显。
2.7内脏结构观察:试验第8天称重后逐只处死并解剖,肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、精囊、前列腺、睾丸、胃、肠及胸腔、腹腔,各器官均无异常。
3讨论实验表明: (1)从表1可以得出:给药前、给药后的8天内两组小鼠体同时期内比较无显著性差异( P> 0.05) ,说明该中药复方制剂对小鼠消化吸收功能影响不大; (2)从表2可以看出:空白组观察指标均为正常,而给药组小鼠出现了24 h内自发活动减少、反应迟钝及48 h内有少数几只大便不成形的现象,说明满负荷灌胃给药对小鼠自主神经系统有一定的刺激作用,且对消化吸收功能有轻微的不良影响; (3)一般认为,按体重计算,小鼠1日内最大给药量相当于成人临床日用量的100 倍以上是较为安全的[1]。
通过灌胃给药无法测出骨碎补接骨丸的LD50 ,其1日最大给药量相当于72g/kg,折合成人临床日用量的280倍。
据此可以得出结论,骨碎补接骨丸急性毒性很小,在常规剂量下服用是安全可靠的。