犬猫寄生虫病粪便检查法
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通过实验室手段检查粪便或血液,可以确定宿主是否感染了体内寄生虫,及其感染种类和感染强度。
其中,粪便检查在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定上均具有重要意义。
1小动物的体内寄生虫的检查小动物的体内寄生虫检查是通过检查粪便中的寄生虫卵进行。
应采用新鲜粪便样品进行检查,最好用粪环从直肠中采集粪便样品。
采集的粪样应置于密闭容器中,加注适当标识后送交诊断实验室。
寄送的粪样应固定在10%甲醛溶液中,也可在冷冻条件下寄送。
其他防腐剂(如乙酸钠甲醛、聚乙烯醇)能更好地保护原虫,也有助于特殊染色(如三色染色法、铁苏木精染色法)。
可采用粪便直接涂片法和粪便漂浮法进行粪常规检查。
通过在混合粪便样品中(用木制棉签的一头蘸取粪便)加1滴生理盐水(用于可游动的生物)直接制备涂片,然后加入卢戈氏液染色,以观察内部结构,如贾第鞭毛虫属寄生虫,并在载玻片上盖上盖玻片。
粪便漂浮法主要用于诊断,需要大约2g粪便,制备较为干净的样品。
常用的漂浮液是糖和硝酸钠。
采用硫酸锌漂浮法时,需要连续检查3d,这是检查贾第鞭毛虫包囊的首选方法,这种包囊随粪便排泄时呈间歇式排泄,故需多次检查。
采用贝尔曼沉淀法可对能游动的线虫幼虫进行收集和浓缩;一种可用于小动物的简便方法是在一滤茶器放置几层纱布,在其锥形漏嘴的广口端装上橡胶管和开关,将约2g粪便置于纱布内,通过漏嘴加注温热的自来水或生理盐水,1h后取沉渣物进行检查。
幼虫由于重力作用而下沉,可从漏斗底部收集,并进行镜检。
检查寄生虫的幼虫时,由于幼虫不易漂浮,也可采用特殊程序,如福尔马林乙酸乙酯沉淀法。
采用饱和糖溶液漂浮法,聚焦到盖玻片下,即可检查到隐孢子虫卵囊(4~6μm)或弓形虫卵囊(12μm)。
在进行镜检前10min内,载玻片上的卵囊即可浮动到盖玻片的底面。
采集1滴血液直接制备血涂片,可用于检查能运动的犬恶丝虫的微丝蚴,但这不是唯一的检查方法。
更精确的血液检查方法是改良的诺茨检查法:在15mL试管中加入2%福尔马林溶液9mL,再加入1mL血液,以1500r·min-1离心。
寄生虫卵粪便检查法许多寄生虫的虫卵、卵囊或幼虫可随宿主的粪便排出体外。
通过检查粪便,可以确定是否感染寄生虫及其种类和感染强度。
粪便检查在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定上均具有重要意义。
一、目的及要求1、掌握直接涂片法、漂浮法、沉淀法检查寄生虫卵。
23、观察常见吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等寄生虫虫卵,掌握其一般特征。
二、实验内容(一)粪样采集及保存方法1.被检粪样应该是新鲜且未被污染,最好从直肠采取。
2.大动物按直肠检查的方法采集;小动物可将食指套上塑料指套,伸入直肠直接钩取粪便。
自然排出的粪便,要采取粪堆上部未被污染的部分。
3.采取的粪便应装入清洁的容器内。
采集用品最好一次性使用,如多次使用则每次都要清洗,相互不能污染。
4.采取的粪便应尽快检查,否则,应放在冷暗处或冰箱冷藏箱中保存。
当地不能检查需送出或保存时间较长时,可将粪样浸入加温至50~60℃、5%~10%福尔马林中,使其中的虫卵失去活力,但仍保持固有形态,还可以防止微生物的繁殖。
(二)直接涂片法(Examination of Direct Smears)在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴甘油与水的等量混合液(加甘油的好处是能使标本清晰,并防止过快蒸发变干),其上加少量粪便,用火柴棍儿仔细混匀。
再用镊子去掉大的注意涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时,纸上的字迹隐约可见为宜。
直接涂片法的优点是简便易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查;缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。
因此在实际工作中,需多检几片,以提高检出率。
检查虫卵时,先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分,发现疑似虫卵物时,再用高倍镜仔细观察。
因一般虫卵(特别是线虫卵)图1-1-1 直接涂片法示意另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。
取2~3g 粪样加清水2~3倍,充分混匀成悬液。
后用玻璃棒搅拌0.5—1min ,使之成回旋运动,在搅拌过程中迅速提起玻璃棒,将棒端附着的液体放于载片上涂开,加上盖片在镜下检查。