安捷伦GPC SEC 色谱柱(学习资料)
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GPC/SEC 的聚合物-溶剂参考表技术概述作者Adam Bivens安捷伦科技有限公司摘要本文为凝胶渗透色谱的溶剂提供了一份全面的参考,列出了全部测试溶剂、聚合物和色谱柱组合以及最佳实践说明。
每种固定相都经过了专门配制,大多数溶于相应溶剂的聚合物均不会与其发生相互作用。
聚合物填料不仅具备较大的孔径,并且表面化学性质单一,不像其他材料具有可发生相互作用的硅醇基或金属中心。
在 40 年的发展历程中,安捷伦建立了一个庞大的 GPC 应用数据库,如表 2所示。
实验部分为了让 GPC 能够生成有效的数据,切勿让分析物粘附在颗粒表面,否则会导致保留时间不仅会受到体积的影响,还会反映表面相互作用的影响。
为了克服这一困难,安捷伦提供了三种固定相,以尽可能减少各自溶剂中的表面相互作用:•PLgel ― 可兼容有机溶剂和多种极性有机溶剂的高度交联的聚苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB) 颗粒产品样本:5990-7994CHCN•PolarGel ― 专为溶于极性有机溶剂和水/有机混合溶剂的极性样品设计的专有颗粒固定相产品样本:5990-7995CHCN•PL aquagel-OH ― 可兼容水、高盐缓冲液和最高 50% 甲醇的亲水性颗粒固定相产品样本:5990-7995CHCN前言凝胶渗透色谱 (GPC) 也称为体积排阻色谱 (SEC) 或凝胶过滤色谱 (GFC)。
这项技术可让溶液中的体积较小的分析物扩散进入填料上的微孔,而体积过大以致无法进入微孔的分析物则随溶剂顺利通过色谱柱,从而根据分析物的体积实现分离。
该技术可通过调节孔径和分布来改变保留时间和体积之间的关系以及可分离体积的范围。
保留时间与体积之间的关系使用校准标样建立,但是随着时间的推移,准确性会降低,因此必须定期重建。
表 1. 化学品名称缩写THF 四氢呋喃DMAc 二甲基乙酰胺NMP N-甲基-2-吡咯烷酮HFIP 六氟异丙醇BHT 丁羟甲苯DMF 二甲基甲酰胺DMSO 二甲基亚砜TCB 1,2,4-三氯苯NaTFA 三氟乙酸钠TEA三乙胺表 2. 安捷伦 GPC 应用丙烯腈-丁二烯-苯乙烯 (ABS) 塑料DMF + 0.1% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 丙烯腈-丁二烯-苯乙烯 (ABS) 塑料THF PLgel405990-8495EN 丙烯腈苯乙烯丙烯酸酯 (ASA) 塑料THF PLgel255990-8601EN 聚己二酸酯THF PLgel255990-8602EN 烷类TCB PLgel1005990-8494EN 醇酸树脂THF PLgel255990-6845CHCN 烷基甘油酯THF PLgel355991-1895EN 烷基甘油酯THF PLgel255990-8322CHCN 烷基甘油酯THF PLgel255990-8326CHCN 烷基烯酮二聚体 (AKD)THF PLgel255990-8402EN ASA 塑料THF PLgel255990-8601EN 沥青邻二甲苯PLgel605990-8493EN 沥青THF PLgel505990-8494EN 双酚 A,定量THF PLgel255990-8408EN 沥青邻二甲苯PLgel605990-8493EN 沥青THF PLgel505990-8494EN 丁基橡胶己烷PLgel255990-6866CHCN 卡波姆 (PAA)水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255990-6920CHCN 羧甲基纤维素 (CMC)水 + 0.5 M Na2SO4PL aquagel-OH255991-5792EN 羧甲基纤维素 (CMC)水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 7PL aquagel-OH255991-5827EN 纤维素DMAc + 0.5% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 纤维素DMSO + 0.1% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 醋酸纤维素DMAc + 0.5% LiCl PLgel605991-5809EN 壳聚糖水 + 0.5 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 2PL aquagel-OH505991-5786EN 梳形聚合物,聚丙烯酸酯THF PLgel355991-2891EN 梳形聚合物,合成橡胶THF PLgel355991-2891EN 玉米淀粉DMSO + 0.1% LiBr PLgel505991-5772EN 葡聚糖水 + 0.2 M NaH2PO4 + 0.2 M NaCl,pH 7PL aquagel-OH255991-5791EN 葡聚糖水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4PL aquagel-OH405991-5841EN 双酚 A 二缩水甘油醚 (DGEBA)THF PLgel405991-5823EN 苯胺绿 NMP + 0.1% LiBr PLgel805991-5814EN 环氧树脂预浸料THF PLgel255990-8218CHCN 环氧树脂DMF + 0.1% LiBr PolarGel605991-5840EN 环氧树脂寡聚物THF PLgel255990-8609EN 环氧树脂寡聚物THF PLgel255990-8606EN 环氧树脂寡聚物THF PLgel255990-8604EN 商用环氧树脂THF PLgel505990-8398EN 高分子量环氧树脂THF PLgel255990-6845CHCN 乙烯-醋酸乙烯酯 (EVA)TCB + 0.015% BHT PLgel1605991-1690EN脂肪酸甲酯 (FAME)THF PLgel355991-1895EN 脂肪酸甲酯 (FAME)THF PLgel255990-8418EN 黄酮类 THF PLgel255991-0487EN 氟橡胶THF PLgel405991-6624EN 明胶水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 7PL aquagel-OH255991-5796EN 甘油酯THF PLgel355991-1895EN 甘油酯THF PLgel255990-8322CHCN 甘油酯THF PLgel255990-8326CHCN 阿拉伯胶水 + 0.01 M NaH2PO4 + 0.2 M NaNO3,pH 7PL aquagel-OH255991-5790EN 透明质酸水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 7PL aquagel-OH255991-5787EN 直链烃TCB PLgel1455990-6971CHCN 直链烃TCB PLgel1005990-8494EN 长链烃TCB PLgel1455990-6971CHCN 长链烃TCB PLgel1005990-8494EN 短链烃TCB PLgel1005990-8494EN 羟乙基纤维素DMF + 0.1% LiBr PLgel505991-4299EN 羟乙基纤维素水 + 0.05 M NaH2PO4 + 0.25 M NaCl,pH 7PL aquagel-OH505991-4299EN 改性羟乙基纤维素水 + 0.05 M NaH2PO4 + 0.25 M NaCl,pH 7PL aquagel-OH505991-5793EN 异氰酸酯预聚物二氯甲烷PLgel255990-7984EN 异氰酸酯预聚物THF PLgel255990-8219CHCN 异氰酸酯树脂THF PLgel255990-6845CHCN 木质素DMF + 0.1% LiBr PolarGel505991-5829EN 木质素DMSO + 0.1% LiBr PolarGel505991-5765EN 淀粉中的麦芽糊精水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255991-2029CHCN 三聚氰胺树脂DMAC + 1% LiBr PolarGel505991-5830EN 三聚氰胺树脂DMSO + 0.1% LiBr PolarGel505990-6845CHCN 三聚氰胺-甲醛樹脂DMF PLgel805990-8419CHCN 甲基纤维素水 + 0.05 M NaH2PO4 + 0.25 M NaCl,pH 7PL aquagel-OH505991-2519CHCN 硫化天然橡胶甲苯PLgel255990-8407EN 酚醛树脂DMF PLgel505990-8486EN 酚醛树脂THF PLgel255990-7981EN 酚醛树脂DMF + 0.1% LiBr PolarGel505991-5767EN 酚醛树脂DMSO + 0.1% LiBr PolarGel505991-5766EN 尼龙HFIP + 20 mM NaTFA HFIPgel405991-0485CHCN 尼龙间甲酚PLgel1005991-0485CHCN 低分子量尼龙 6THF PLgel255990-8423EN 着嗅剂,精油,酸酯THF PLgel255990-7982EN 油,润滑剂,标准分子量 3100THF PLgel305991-4312EN 油,润滑剂,凡士林THF PLgel255991-5820EN Oligopin THF PLgel255991-0487EN寡糖NMP PLgel805990-8489EN 寡糖,木糖水PL aquagel-OH255990-8399EN 颜料,树脂,商用THF PLgel255990-6845CHCN 果胶水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH505991-4086EN 果胶水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 7PL aquagel-OH255991-5794EN 凡士林THF PLgel255991-5820EN 苯酚馏分残留物丙酮PLgel255990-8421EN 酚醛树脂DMF + 0.1% LiBr PolarGel505991-5767EN 酚醛树脂THF PLgel255990-7983EN 邻苯二甲酸二烷基酯,增塑剂THF PLgel255990-8324CHCN 聚丙烯酸酯,梳形THF PLgel355991-2891EN 泊洛沙姆DMF + 0.1% LiBr PLgel705990-8296EN 聚(2-乙烯基吡啶) 水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 7PL aquagel-OH255991-5780EN 聚(2-乙烯基吡啶) 水 + 0.8 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 3PL aquagel-OH255991-5881EN 聚(4-溴苯乙烯)THF PLgel255991-5839EN 聚(丙烯酸酯)DMAc + 0.5% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 聚(丙烯酸酯)DMF + 0.1% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 聚丙烯腈 (PAN)DMF + 0.1% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 聚(氨基苯乙烯-乙烯吡咯烷酮)水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255991-5781EN 聚(酯-酰亚胺)THF PLgel255990-6845CHCN 高分子量聚(环氧乙烷)DMF + 0.1% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 聚(乙烯-醋酸乙烯酯) (PEVA)TCB + 0.015% BHT PLgel1605991-1690EN 聚(甲基丙烯酸异冰片酯) (IBMA)THF PLgel255991-5819EN 聚(乳酸-乙醇酸) (PLGA)氯仿PLgel255990-8401EN 聚(乳酸-乙醇酸) (PLGA)THF PLgel405991-5776EN 聚(甲基乙烯基醚-马来酸)水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,根据需要调节至 pH 7 或 pH 9PL aquagel-OH25SI-01965聚(甲基乙烯基醚-马来酸)烷基酯水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,根据需要调节至 pH 7 或 pH 9PL aquagel-OH255991-5799EN 聚(正-异丙基丙烯酰胺) (PNIPAM)THF + 5% TEA PLgel405991-5834EN 聚(苯乙烯-异戊二烯)嵌段共聚物THF PLgel255990-8228CHCN 聚(苯乙烯丁二烯)共聚物 (SBR)THF PLgel405991-5771EN 聚(氯乙烯) (PVC)THF PLgel255991-5813EN 聚(偏二氟乙烯) (PVDF)DMSO PLgel955990-8328CHCN 聚丙烯酰胺 (PAM)水 + 0.05 M Na2SO4,pH 3PL aquagel-OH255991-5789EN 聚丙烯酰胺 (PAM)水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 7PL aquagel-OH405991-5773EN 聚丙烯酸 (PAA)水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255991-5783EN α-聚烯烃 (PAO)TCB + 0.015% BHT PLgel1605990-6971CHCN 聚酰胺HFIP + 20 mM NaTFA HFIPgel405990-7978EN 聚苯胺NMP + 0.1% LiBr PLgel805991-5814EN 聚阴离子,丙烯酸,钠盐水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255991-5783EN聚阴离子,聚丙烯酰胺水 + 0.05 M Na 2SO 4,pH 3PL aquagel-OH 255991-5789EN聚阴离子,聚苯乙烯磺酸酯80% [水 + 0.3 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4,pH 9] + 20% 甲醇PL aquagel-OH255991-5778EN 聚溴化苯乙烯THF PLgel 255991-5839EN 聚丁二烯THF PLgel 405991-5833EN 聚对苯二甲酸丁二醇酯 (PBT)HFIP + 20 mM NaTFA HFIPgel 405990-8220CHCN 聚丁酸酯树脂THFPLgel 255990-8602EN 聚己内酰胺HFIP + 20 mM NaTFA HFIPgel405991-0485CHCN 聚己内酰胺间甲酚PLgel 1005991-0485CHCN 低分子量聚己内酰胺THF PLgel 255990-8423EN 聚碳酸酯二氯甲烷PLgel 255990-7894CHCN聚碳酸酯THFPLgel 405991-5822EN 聚阳离子,聚(2-乙烯基吡啶)水 + 0.2 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4,pH 7PL aquagel-OH 255991-5780EN 聚阳离子,聚(2-乙烯基吡啶) 水 + 0.8 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4,pH 3PL aquagel-OH 255991-5881EN 聚阳离子,聚(氨基苯乙烯-乙烯基吡咯 烷酮)水 + 0.2 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4,调节至 pH 7PL aquagel-OH 255991-5781EN聚阳离子,聚丙烯酰胺水 + 0.05 M Na 2SO 4,pH 3PL aquagel-OH 255991-5789EN 聚二甲基硅氧烷 (PDMS)甲苯PLgel 255990-7893CHCN聚酯THF PLgel 505991-5775EN聚酯,己二酸酯树脂THF PLgel 255990-8602EN 聚酯,多元醇树脂THF PLgel255990-8325CHCN 聚醚乙酮 (PEEK)80% 氯仿 + 20% 二氯乙酸PLgel 255990-8422EN聚醚砜DMF + 0.1% LiBrPLgel 605991-5811EN聚醚酰亚胺 (PEI)DMF + 0.1% LiBrPLgel 605990-8222CHCN 聚乙烯TCB + 0.0 15% BHTPLgel 1605991-5826EN 聚乙烯TCB + 0.0 15% BHTPLgel1605990-6971CHCN 聚乙二醇 (PEG)DMF + 0.1% LiBr PLgel 505991-5825EN 聚乙二醇 (PEG)水PL aquagel-OH 255990-6920CHCN 支化聚乙二醇 (PEG)DMF + 0.1% LiBr PLgel 505991-5825EN 星形聚乙二醇70% [水 + 0.2 M NaNO 3 +0.01 M NaH 2PO 4] + 30% 甲醇PL aquagel-OH 255991-5798EN 聚对苯二甲酸乙二醇酯 (PET)4-氯酚PLgel 1005991-5806EN 聚对苯二甲酸乙二醇酯 (PET)2-氯酚PLgel 1005991-4707EN 支化聚乙烯 TCB + 0.015% BHT PLgel 1605991-2517CHCN聚乙烯,LDPETCB + 0.015% BHT PLgel 1605991-2781EN 直链聚乙烯TCB + 0.015% BHT PLgel 1605990-8494EN 直链茂金属聚乙烯 (mPE)TCB + 0.015% BHT PLgel 1605991-2781EN 聚羟基脂肪酸酯 (PHA)氯仿PLgel 255991-0486EN 聚羟基丁酸酯 (PHB)氯仿PLgel 505991-5641EN 聚羟基丁酸酯 (PHB)氯仿PLgel 255991-0486EN 聚异氰酸酯二氯甲烷PLgel255990-7984EN聚异戊二烯THF PLgel 405990-6866CHCN 聚异戊二烯甲苯PLgel 505990-6866CHCN 聚异戊二烯,天然乳胶甲苯PLgel 505990-6920CHCN 聚乳酸 (PLLA)THF PLgel 405991-5776EN 直链聚甲基丙烯酸酯THF PLgel 355991-2891EN 多元醇THF PLgel 255990-7986EN 多元醇,预聚物树脂THF PLgel 405991-5770EN 多酚THF PLgel 255991-0487EN 聚苯硫醚 (PPS)1-氯萘PLgel 2105991-5570EN 聚丙烯TCB + 0.015% BHT PLgel 1605990-8494EN 商用聚丙烯TCB + 0.015% BHT PLgel1605990-6971CHCN多糖水 + 0.2 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4PL aquagel-OH 405991-5841EN 多糖,玉米粉DMSO + 0.1% LiBr PLgel 505991-5772EN 多糖,木糖寡聚物水PL aquagel-OH255990-8399EN 多糖NMP PLgel 805990-8489EN 商用聚硅氧烷THF PLgel 405990-7897CHCN 商用聚硅氧烷甲苯PLgel 405990-7897CHCN 聚酯树脂THF PLgel 255990-6845CHCN 聚苯乙烯THF PLgel255991-5803EN 聚苯乙烯磺酸酯80% [水 + 0.3 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4,pH 9] + 20% 甲醇PL aquagel-OH 255991-5778EN 聚苯乙烯寡聚物THF PLgel 255990-8323CHCN 聚苯乙烯寡聚物THF PLgel 255990-8607EN 星形支化聚苯乙烯THFPLgel 405991-5837EN 聚砜DMF + 0.1% LiBr PLgel 605991-5811EN 聚噻吩 (PT)TCB + 0.015% BHT PLgel 1205991-5828EN 聚氨酯THFPLgel 255990-8229CHCN 聚氨酯共聚物 DMAc + 0.02% LiBr PLgel 605990-8495EN 聚氨酯树脂二氯甲烷PLgel 255990-8600EN 聚氨酯树脂THFPLgel 255990-7892CHCN 高分子量聚氨酯DMAc + 0.5% LiBr PolarGel505991-2517CHCN 高分子量聚氨酯DMF + 0.1% LiBr PLgel 605991-5812EN 聚乙酸乙烯酯 (PVAc)THFPLgel 255991-5805EN聚乙烯醇 (PVA) (PVOH)水 + 0.2 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4,pH 7PL aquagel-OH255991-5780EN 聚乙烯醇 (PVA) (PVOH)水 + 0.25 M NaNO 3 + 0.01 M NaH 2PO 4,pH 7PL aquagel-OH255991-5788EN 乙酰化聚乙烯醇 (PVA) (PVOH)THF PLgel 255991-5805EN 疏水改性的聚乙烯醇 (PVA) (PVOH), 表面活性剂DMSO + 0.1% LiBrPLgel 605991-5838EN 聚乙烯醇缩丁醛 (PVB)THFPLgel 255991-5835EN 聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)DMAc + 0.5% LiCl PLgel 605991-5808EN 聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)DMF + 0.1% LiBrPLgel605991-5807EN聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 3PL aquagel-OH255991-5784EN 原花青素THF PLgel255991-0487EN 普鲁兰多糖水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4PL aquagel-OH405991-5841EN PVC 塑料THF PLgel255990-8392EN 热固性酚醛树脂DMF PLgel505990-8486EN 热固性酚醛树脂THF PLgel255990-7983EN 硅橡胶甲苯PLgel255990-8490EN 商用硅胶THF PLgel405990-7897CHCN 商用硅胶甲苯PLgel405990-7897CHCN 聚丙烯酸钠水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255991-5783EN 淀粉DMSO:DMAc (4:1) + 0.1% LiBr PLgel605991-5831EN 淀粉NMP PLgel805990-8489EN 淀粉,玉米水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255991-5768EN 淀粉,土豆水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,调节至 pH 7PL aquagel-OH255991-5768EN 丁苯橡胶 (SBR)THF PLgel405990-8405EN 强化采油用表面活性剂,聚丙烯酰胺水 + 0.05 M Na2SO4,pH 3PL aquagel-OH255991-5789EN 表面活性剂,改性聚乙烯醇DMSO + 0.1% LiBr PLgel605991-5838EN 表面活性剂,泊洛沙姆,聚(PEG-PPG-PEG)DMF + 0.1% LiBr PLgel705990-8296EN 单宁THF PLgel255991-0487EN 焦油,石油邻二甲苯PLgel605990-8493EN 焦油,石油THF PLgel255991-0518EN 焦油,石油THF PLgel505990-8494EN 焦油,苯酚馏分残留物丙酮PLgel255990-8421EN TINUVIN,光稳定剂,添加剂THF PLgel405991-4284EN 三醋酸酯,三醋酸纤维素DMAc + 0.5% LiCl PLgel605991-5809EN Ultem (PEI)DMF + 0.1% LiBr PLgel605990-8222CHCN 清漆,豆油,干燥THF PLgel255990-8491EN 乙烯基 PVC 塑料THF PLgel255990-8392EN Vitaflavan THF PLgel255991-0487EN 蜡,蜂蜡THF PLgel255990-8488EN 蜡,微晶,烃THF PLgel255990-8488EN 蜡,石蜡TCB PLgel1605990-6971CHCN 蜡,石蜡TCB PLgel1005990-8494EN 黄原胶水 + 0.2 M NaNO3 + 0.01 M NaH2PO4,pH 7PL aquagel-OH255991-5785EN 低聚木糖水PL aquagel-OH255990-8399EN参考文献1. Turk, E. Phosgene from chloroform. Chemical & Engineering News 2 Mar 1998, Vol. 76, No. 9, pp. 6. /cen/safety/19980302.html• 氯仿和二氯甲烷等氯代溶剂会在紫外光照射下分解,并且会与大气中的水分和氧气缓慢反应。
Agilent GPC软件 现场培训教材安捷伦科技有限公司 化学分析仪器部一. 仪器配置:• 单元泵 (G1310A)• 在线脱气机 (G1379A )• 自动进样器 (G1313A )• 柱温箱 (G1316A)• 视差折光检测器 (G1362A)• 化学工作站 (G2170AA, G2182AA)• GPC-SEC 有机相起始套包(PN: 5064-8251)• GPC-SEC 水相起始套包(PN: 5064-8252)注:如果使用二元泵或四元泵,千万不要使用泵的比例阀进行混合。
在使用二元泵情况下,严格使用100%通道A和0%通道B。
四元泵的连接应使梯度比例阀旁路,这需要一个转换接头(P/N 0100-1847)以便使溶剂直接到达主动阀而不是比例阀。
本培训操作以GPC-SEC 有机相起始套包为例:• 色谱柱:• 安捷伦PLgel Mixed-C, 300 x 7.5 mm, 5 µm (79911GP-MXC) 此 PLgel Mixed-C 色谱柱填料为5 µm 不同孔径的颗粒,因而可以使分子量范围很宽的高聚物得到分离 (约200-3,000,000),这样宽的分子量范围一般需要几根(通常2到3根)传统意义上单一孔径的色谱柱串联完成。
另一方面,一根30 cm长混合gel 色谱柱不可能与一套串联色谱柱具有相同的柱效。
因此该混合柱通常用于方法的快速开发,其优化需要使用几根混合柱或单一柱串联来完成。
二.样品制备:• 为节约时间,样品制备和仪器参数的设置最好在前一天的下午来完成,这样可以使日RI检测器和色谱柱有足够的时间平衡过夜。
1. 分别加入1.0 mL THF 到三个含有窄标聚苯乙烯标样混合物的小瓶中(红, 蓝 和绿)以及一个宽标样品瓶(黄色)中,让其溶解60分钟,每10分钟摇动一次。
在样品加入溶剂后其使用不应超过2天。
2. 通电打开GPC系统各模块。
3. 确认系统在使用 THF时没有盐析出且没有溶剂不互溶的现象,否则用水或过渡溶剂异丙醇充分冲洗系统。
GPC/SEC 色谱柱成功进行GPC/SEC 分离的关键是正确选择色谱柱。
安捷伦色谱柱设计的全线PLgel 产品已覆盖了聚合物分析应用的几乎全部领域,可以快速而可靠地选择正确的色谱柱、溶剂和校正标准品。
安捷伦的PLgel GPC 系列色谱柱适用于使用有机溶剂的聚合物应用。
PLgel 是一款高度交联的、多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯基质的填料,这是一种GPC 色谱柱领域的领先技术。
PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度更高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
安捷伦的PL aquagel-OH 系列为水相SEC 的可靠分离提供了化学和物理稳定的固定相。
该色谱柱装填了带强亲水性的多羟基官能团的大孔径共聚物柱床。
“中性”表面及其广泛的溶剂操作条件,能为中性、离子和疏水组分提供高效分析,无论它们是单独存在的还是混在一起的。
PL aquagel-OH可用于分析和制备应用。
GPC/SEC 的原理•聚合物分子溶解在溶液中,由于分子量不同形成大小不同的球形线团状结构•聚合物线团随洗脱液流经色谱柱•色谱柱内填充具有特定孔结构的不溶性多孔小球•多孔小球的孔径与聚合物线团的体积接近•聚合物线团在孔内外扩散•洗脱基于分子大小——大分子先洗脱,小分子后洗脱•通过使用聚合物标准品建立的校正曲线将体积分离转换为分子量分离如何选择GPC/SEC的色谱柱(以黑体字显示的色谱柱为首选)有机GPCPlgel GPC 柱•最极端条件下稳定性极佳•在高达220 °C 的温度下保持稳定•良好的溶剂兼容性可允许在各种极性的溶剂之间轻松、快速转换PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度最高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
成功进行GPC 分离的关键是正确选择色谱柱。
Agilent 7890/5975-GC/MSD (For 1701E02系列工作站)现场培训教材1安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部2培训目的● 初步了解Agilent 7890气相色谱仪和5975质谱仪的操作。
● 正确地执行仪器的开机、关机;初步掌握软件中有关仪器参数设定、分析方法的编辑、谱库检索及报告的打印。
注意事项:1.老化柱子分段老化。
按温度从低到高分段,程序升温老化。
这是最好的老化方法。
如HP-5柱,5-6℃/min至250℃,反复数次;再升至280℃,反复数次;接到MS上看基线情况。
270℃以后基线提高为正常。
再老化到300℃半小时。
无论何种方式,载气必须充足。
2.进样口用红色或灰色隔垫,可减少隔垫流失。
3.GC/MS接口处使用的垫圈是85%vesper材质 (5062-3508)。
注意安装方向(大的一端朝向质谱)。
4.新柱子安装时无方向性,但一旦使用过,不要再改变方向。
保存柱子时注意将两端密封好,避免水和空气破坏柱子内涂层仪器配置:341. 在操作系统桌面双击Config/配置图标进入仪器配置界面2. 如下图所示点击所要配置的仪器。
配置MSD 及GC :以下采用中文工作站界面,英文工作站请参考相应位置及图标在出现的画面中输入仪器名称、序列号等信息后,在质谱仪一栏中选择MSD 的型号,并输入MSD 的IP 地址,选择DC 极性(标注于MSD 侧板的中部金属上部);同样配置GC 后点击确定退出。
5配置完成后桌面上应出现“GCMS ”和“GCMS Data Analysis ”的图标(名称由配置时输入的仪器名称决定)。
如下图所示:开机1. 打开载气钢瓶(He)控制阀,设置分压阀压力至0.5Mpa2. 打开计算机,登录进入Windows XP系统。
3. 打开7890GC、5975MSD电源(若MSD真空腔内已无负压则应在打开MSD电源的同时用手向右侧推真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢),等待仪器自检完毕。
GPC/SEC 色谱柱成功进行GPC/SEC 分离的关键是正确选择色谱柱。
安捷伦色谱柱设计的全线PLgel 产品已覆盖了聚合物分析应用的几乎全部领域,可以快速而可靠地选择正确的色谱柱、溶剂和校正标准品。
安捷伦的PLgel GPC 系列色谱柱适用于使用有机溶剂的聚合物应用。
PLgel 是一款高度交联的、多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯基质的填料,这是一种GPC 色谱柱领域的领先技术。
PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度更高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
安捷伦的PL aquagel-OH 系列为水相SEC 的可靠分离提供了化学和物理稳定的固定相。
该色谱柱装填了带强亲水性的多羟基官能团的大孔径共聚物柱床。
“中性”表面及其广泛的溶剂操作条件,能为中性、离子和疏水组分提供高效分析,无论它们是单独存在的还是混在一起的。
PL aquagel-OH可用于分析和制备应用。
GPC/SEC 的原理•聚合物分子溶解在溶液中,由于分子量不同形成大小不同的球形线团状结构•聚合物线团随洗脱液流经色谱柱•色谱柱内填充具有特定孔结构的不溶性多孔小球•多孔小球的孔径与聚合物线团的体积接近•聚合物线团在孔内外扩散•洗脱基于分子大小——大分子先洗脱,小分子后洗脱•通过使用聚合物标准品建立的校正曲线将体积分离转换为分子量分离如何选择GPC/SEC的色谱柱(以黑体字显示的色谱柱为首选)有机GPCPlgel GPC 柱•最极端条件下稳定性极佳•在高达220 °C 的温度下保持稳定•良好的溶剂兼容性可允许在各种极性的溶剂之间轻松、快速转换PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度最高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
成功进行GPC 分离的关键是正确选择色谱柱。
Agilent GPC软件 现场培训教材安捷伦科技有限公司 化学分析仪器部一. 仪器配置:• 单元泵 (G1310A)• 在线脱气机 (G1379A )• 自动进样器 (G1313A )• 柱温箱 (G1316A)• 视差折光检测器 (G1362A)• 化学工作站 (G2170AA, G2182AA)• GPC-SEC 有机相起始套包(PN: 5064-8251)• GPC-SEC 水相起始套包(PN: 5064-8252)注:如果使用二元泵或四元泵,千万不要使用泵的比例阀进行混合。
在使用二元泵情况下,严格使用100%通道A和0%通道B。
四元泵的连接应使梯度比例阀旁路,这需要一个转换接头(P/N 0100-1847)以便使溶剂直接到达主动阀而不是比例阀。
本培训操作以GPC-SEC 有机相起始套包为例:• 色谱柱:• 安捷伦PLgel Mixed-C, 300 x 7.5 mm, 5 µm (79911GP-MXC) 此 PLgel Mixed-C 色谱柱填料为5 µm 不同孔径的颗粒,因而可以使分子量范围很宽的高聚物得到分离 (约200-3,000,000),这样宽的分子量范围一般需要几根(通常2到3根)传统意义上单一孔径的色谱柱串联完成。
另一方面,一根30 cm长混合gel 色谱柱不可能与一套串联色谱柱具有相同的柱效。
因此该混合柱通常用于方法的快速开发,其优化需要使用几根混合柱或单一柱串联来完成。
二.样品制备:• 为节约时间,样品制备和仪器参数的设置最好在前一天的下午来完成,这样可以使日RI检测器和色谱柱有足够的时间平衡过夜。
1. 分别加入1.0 mL THF 到三个含有窄标聚苯乙烯标样混合物的小瓶中(红, 蓝 和绿)以及一个宽标样品瓶(黄色)中,让其溶解60分钟,每10分钟摇动一次。
在样品加入溶剂后其使用不应超过2天。
2. 通电打开GPC系统各模块。
3. 确认系统在使用 THF时没有盐析出且没有溶剂不互溶的现象,否则用水或过渡溶剂异丙醇充分冲洗系统。
色谱柱基础知识简介一、色谱柱工作原理当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。
二、色谱柱的分类2.1 色谱柱主要分为填充柱和毛细管柱注:此外,还有一些综合了填充柱和毛细管柱特点的特殊色谱柱,例如Alltech公司采用专利技术生产的集束管毛细管柱。
2.2 填充柱与毛细管柱的比较表1 填充柱与毛细管柱的比较色谱柱内径/mm 长度/m柱材料柱容量载气流速填充柱2-5玻璃或金属材质mg20-30mL/min毛细管柱10-10熔融石英或不锈钢、聚酰亚胺涂层ng1-10mL/min注:毛细管柱外层为聚酰亚胺,可修补柱子缺陷(即增强柔韧性)并且增加强度。
三、填充柱填充柱的柱管填充柱可以使用任何类型的柱管,只要它对样品是清洁,、惰性的, 以及能够承受GC的柱箱温度,像:不锈钢管、玻璃管、铜管、聚四氟乙烯管、聚合物管等。
固体载体(颗粒)和固定相近距离观察一个填充颗粒,会发现它是由一个固体载体(颗粒)和在它上面均匀涂渍的涂敷物(叫做固定相)所组成。
固体载体即液态固定相附着的载体,其细小、均匀、多孔,增加与样品接触的表面积。
常用的固体载体为硅土。
固体载体也有不同大小的颗粒度,颗粒度是指“目数大小”。
一般是根据柱径来选择固体载体的粒度,保持载体的直径为柱内径的1/20为宜。
常用60-80目及80-100目。
表2 直径大小与目号的关系四、毛细管柱4.1 毛细管柱的构成毛细管色谱柱由两个主要部分组成:管身和固定相。
管身毛细管柱的管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质。
熔融二氧化硅即高纯度合成石英(以下通称熔融石英),通常在其表面涂上一层聚酰亚胺做为保护层。
当实验要求更高的使用温度时,我们可以来用不锈钢毛细柱来代替熔融石英毛细柱。
Agilent LC colmns 1提高分离速度,节约分析成本安捷伦液相色谱柱介绍与选择OUTLINE安捷伦液相色谱柱介绍及选择建议如何提高液相色谱分离效率安捷伦新一代常规分析柱Agilent LC colmns2Agilent LC colmns 3常规分析柱Zorbax Eclipse Plus 柱Zorbax Eclipse XDB Zorbax Stable Bond 柱Zorbax Extend C18柱Zorbax Bonus-RP 柱Zorbax SB-Aq 柱Zorbax RX HPLC 柱原先的Zorbax ODS 柱Zorbax 正相柱其他Zorbax 柱生化分析柱Zorbax 300 SB 柱Zorbax 300Extend 柱Zorbax Poroshell 柱Zorbax Eclipse AAA 柱Zorbax GF-250/450 凝胶柱Zorbax Oligo HPLC 柱Zorbax SAX 和SCX 柱MARSmRP column高通量和LC/MS 柱Zorbax 高通量柱,LC/MS 色谱柱Zorbax 快速分离柱Zorbax 快速分离高通量柱Zorbax 溶剂节省色谱柱Zorbax 微径色谱柱Zorbax 毛细管柱和纳流柱制备柱Zorbax PrepHT 制备柱Zorbax ®液相色谱柱常规分析柱Agilent TC /HCAgilent TC/HC (2)Agilent ®液相色谱柱制备柱Agilent prep 制备柱Agilent LC colmns4安捷伦Zorbax ®HPLC 色谱柱严格的质量控制产品研究与开发硅胶生产键合柱装填•具可追溯性•可定购生产批号不同的色谱柱•特殊规格定制StableBondEclipseBonus RP ExtendAgilent LC colmns 5二氧化硅Na K Mg Al Ca Ti Fe Zr Cu Cr ZnZorbax Rx-SIL 10< 34 1.52nd 3nd nd nd 1Zorbax SIL 17nd nd 579322188< 1nd 88Nucleosil 56N/A N/A nd 1305776nd N/A N/A ndHypersil 2900N/A 403003865230N/A N/A N/A N/And = 未检出金属浓度(ppm)A 类硅胶Original ZORBAX SIL (1970s)由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高(硅羟基的pKa 低), 导致碱性化合物发生拖尾B 类硅胶(高纯)ZORBAX Rx-Sil (1987)由于金属含量低, 硅羟基pKa 高,碱性化合物不发生拖尾Zorbax Rx-SIL: 11种金属< 35 ppm (未检出其他杂质, <1ppm); 99.995% 纯度的二氧化硅ZORBAX ®硅胶类型Agilent LC colmns6选择适用于pH7.5流动相的色谱柱流动相:乙腈: 50 mMK 2HPO 4: 55: 45, pH 7.5UV: 224 nm 23°C进样量: 20 µL (0.5 µg / µL)Zorbax Eclipse XDB-C18 (B 类硅胶)ZORBAX SB-C18(B 类硅胶)ODS (A 类硅胶)封端ODS (A 类硅胶)不封端普通硅胶(A 类)由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高(硅羟基的pKa 低), 导致碱性化合物发生拖尾高纯硅胶(B 类)由于金属含量低, 硅羟基pKa 高,碱性化合物不发生拖尾Agilent LC colmns7硅胶填料-液相色谱柱的基础……Zorbax 液相色谱柱硅胶特点Zorbax 硅胶的制备方法由液相色谱柱著名创始人J.J. Kirkland 发明,属于安捷伦公司的专利技术。
气相色谱柱基础知识及安捷伦气相色谱柱介绍主要内容1.气相色谱柱(GC基础知识2.安捷伦GC柱产品及选择指南3.GC柱辅助产品气相毛细管色谱柱的柱材料•石英•不锈钢玻璃最常用、弹性好、惰性好耐高温、不易折断、惰性差、不易截取易碎、惰性差石英毛细管色谱柱其他一些重要概念柱容量色谱柱对一种溶质可容纳的最大量,超过此值,该溶质的峰形会发生畸变(WCOT柱表现为前沿,PLOT柱表现为拖尾)与柱容量相关因素:固定相与溶质极性匹配性(相似相溶原理)膜厚柱内径溶质的保留色谱柱温度极限如60 C至240/260 C温度下限恒温温度上限程序升温温度上限低于该温度使用柱效会降低,但不会损伤色谱可在此温度长时间使用不可超过此温度,且在此温度使用不得超过10分钟主要内容1.气相色谱柱(GC基础知识2.安捷伦GC柱产品及选择指南3.GC柱辅助产品安捷伦GC柱产品及选择指南安捷伦气相色谱柱发展简介Agilent WCOT气相色谱柱介绍Agilent PLOT气相色谱柱介绍安捷伦GC柱产品及选择指南安捷伦气相色谱柱发展简介Agilent WCOT气相色谱柱介绍Agilent PLOT气相色谱柱介绍其他一些重要概念交联和键合固定相交联是将聚合物链通过共价键进行联接键合是将其通过共价键与管壁表面相连交联键合固定相的热稳定性和溶剂稳定性大大提高固定相流失固定相(聚硅氧烷类及聚乙二醇类趋于热力学稳定的降解反应或热分解反应柱流失过程ill /Z =207 m/Z =281in/Z =331柱流失的规律叨流失与温度成正比妬极性固定相比非极性固定相易流失妬对于一定的固定相•流失水平与色谱柱中固定相的绝对量成正比: 流失曲线a长柱b大口径c厚膜的色谱柱产生的流失更大低流失色谱柱的优势吻提高灵敏度增强信号-高效、惰性的色谱柱有利于活性化合物产生尖锐色谱峰降低噪音-低流失色谱柱的基线低、噪音小,从而降低了基线的干扰。
叨温度上限高由于增加了聚合物的稳定性,用户可以提高色谱柱的操作温度,从而能够缩短分析时间、延长色谱柱使用寿命。
GPC/SEC 色谱柱成功进行GPC/SEC 分离的关键是正确选择色谱柱。
安捷伦色谱柱设计的全线PLgel 产品已覆盖了聚合物分析应用的几乎全部领域,可以快速而可靠地选择正确的色谱柱、溶剂和校正标准品。
安捷伦的PLgel GPC 系列色谱柱适用于使用有机溶剂的聚合物应用。
PLgel 是一款高度交联的、多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯基质的填料,这是一种GPC 色谱柱领域的领先技术。
PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度更高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
安捷伦的PL aquagel-OH 系列为水相SEC 的可靠分离提供了化学和物理稳定的固定相。
该色谱柱装填了带强亲水性的多羟基官能团的大孔径共聚物柱床。
“中性”表面及其广泛的溶剂操作条件,能为中性、离子和疏水组分提供高效分析,无论它们是单独存在的还是混在一起的。
PL aquagel-OH可用于分析和制备应用。
GPC/SEC 的原理•聚合物分子溶解在溶液中,由于分子量不同形成大小不同的球形线团状结构•聚合物线团随洗脱液流经色谱柱•色谱柱内填充具有特定孔结构的不溶性多孔小球•多孔小球的孔径与聚合物线团的体积接近•聚合物线团在孔内外扩散•洗脱基于分子大小——大分子先洗脱,小分子后洗脱•通过使用聚合物标准品建立的校正曲线将体积分离转换为分子量分离如何选择GPC/SEC的色谱柱(以黑体字显示的色谱柱为首选)有机GPCPlgel GPC 柱•最极端条件下稳定性极佳•在高达220 °C 的温度下保持稳定•良好的溶剂兼容性可允许在各种极性的溶剂之间轻松、快速转换PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度最高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
成功进行GPC 分离的关键是正确选择色谱柱。
Agilent GPC软件 现场培训教材 安捷伦科技有限公司 化学分析仪器部 一. 仪器配置: ? 单元泵 (G1310A)? 在线脱气机 (G1379A )? 自动进样器 (G1313A )? 柱温箱 (G1316A)? 视差折光检测器 (G1362A)? 化学工作站 (G2170AA, G2182AA)? GPC-SEC 有机相起始套包(PN: 5064-8251) ? GPC-SEC 水相起始套包(PN: 5064-8252)注:如果使用二元泵或四元泵,千万不要使用泵的比例阀进行混合。
在使用二元泵情况下,严格使用100%通道A和0%通道B。
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另一方面,一根30 cm长混合gel 色谱柱不可能与一套串联色谱柱具有相同的柱效。
因此该混合柱通常用于方法的快速开发,其优化需要使用几根混合柱或单一柱串联来完成。
二.样品制备: ? 为节约时间,样品制备和仪器参数的设置最好在前一天的下午来完成,这样可以使日RI检测器和色谱柱有足够的时间平衡过夜。
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安捷伦液相色谱柱1. 简介安捷伦液相色谱柱是一种高性能液相色谱柱,以其优越的分离能力和稳定性在分析化学领域得到广泛应用。
安捷伦液相色谱柱可用于分离和分析各种复杂样品,如药物、生物分子、食品、环境污染物等。
2. 原理安捷伦液相色谱柱基于液相色谱技术,利用样品在固定填充物上的吸附和解吸作用进行分离。
柱内填充物由高表面积的载体和分离剂组成,样品在流动相中与填充物发生相互作用,不同组分在填充物上滞留时间不同而实现分离。
3. 特点•高分离效能:安捷伦液相色谱柱具有高分离效能,能够有效地将复杂样品中的目标物质分离出来。
其高表面积的填充物和优化的分离剂能够提供良好的分离效果。
•良好的重现性:安捷伦液相色谱柱具有良好的重现性,重复使用时能够保持较为稳定的分离性能,不易受环境和操作条件的影响。
•高稳定性:安捷伦液相色谱柱在流动相中具有良好的化学和物理稳定性,能够耐受高压、高温和酸碱等极端条件,保持稳定的性能。
•多种可选规格:安捷伦液相色谱柱提供多种规格和尺寸可选,适用于不同实验需求和分析要求。
4. 应用安捷伦液相色谱柱适用于各种分析应用,包括但不限于以下领域:•药物分析:安捷伦液相色谱柱可用于药物的分离、鉴定和定量分析。
在药物研发、药物质量控制和药代动力学等领域具有重要应用价值。
•生物分析:安捷伦液相色谱柱可用于蛋白质、肽段和核酸等生物分析。
在生物医学研究、基因组学和蛋白质组学等领域具有广泛应用。
•食品分析:安捷伦液相色谱柱可用于食品中有毒有害物质的分析和检测。
在食品安全监测和食品质量控制等方面具有重要作用。
•环境分析:安捷伦液相色谱柱可用于环境污染物的分离和定量分析。
在环境监测和环境保护等方面具有重要意义。
5. 使用方法使用安捷伦液相色谱柱时,需要注意以下几点:•柱前处理:样品中的杂质和干扰物质可能会损害液相色谱柱的性能,因此需要进行柱前处理,如样品预处理、固相萃取等。
•流动相选择:根据目标物的特性和分析目的,选择合适的流动相组成。
凝胶排阻色谱(gpc或sec)今天咱们来聊一个特别有趣的东西,叫凝胶排阻色谱。
你看,就像我们玩游戏的时候,不同大小的小珠子要通过一个有很多小孔的迷宫一样。
凝胶排阻色谱里有个像迷宫一样的东西,叫凝胶。
这个凝胶里面有好多小小的孔,就像一个个小房间。
有一些分子呀,就像一群小伙伴。
有些小伙伴特别大,就像大胖子,他们进不了凝胶的小房间,只能从凝胶外面的大路走。
而有些小分子呢,就像小瘦子,他们可以钻进凝胶的小房间里,在里面绕来绕去。
比如说,我们把不同大小的弹珠当成不同大小的分子。
大弹珠在一个有小孔的盒子里滚动的时候,只能在外面滚,滚得可快了,一下子就到终点了。
可是那些小弹珠呢,它们钻进了盒子里的小孔里,在里面转来转去,花的时间就长多了。
那这个凝胶排阻色谱有啥用呢?它就像一个超级分拣员。
假如我们有一堆混合在一起的东西,有大的分子,也有小的分子,就像我们把大苹果和小樱桃混在一起了。
这个凝胶排阻色谱就能把大的分子和小的分子分开来。
我给你讲个小故事吧。
有一个科学家叔叔,他在研究一种神奇的药水。
这个药水里有很多不同大小的东西混在一起。
他想知道药水里到底有哪些是对治病有用的大东西,哪些是可能会捣乱的小东西。
于是呀,他就用凝胶排阻色谱这个厉害的工具。
他把药水放进凝胶排阻色谱里,就像把一群小动物放进一个特别的迷宫。
结果呢,那些大的对治病有用的分子很快就从一边出来了,那些小的可能捣乱的分子在凝胶里绕了好久才出来。
这样科学家叔叔就能很清楚地知道药水里的成分啦。
还有哦,在做果汁的时候,有时候会有一些果肉的大颗粒和果汁里的小分子混在一起。
要是我们想知道果汁里有多少小分子的营养成分,就可以用凝胶排阻色谱。
大的果肉颗粒就像那些不能钻进凝胶小房间的大分子,一下子就被分出去了,而果汁里的小分子营养成分就会按照自己的速度通过凝胶,这样我们就能知道有多少营养啦。
凝胶排阻色谱就像一个超级魔法工具,能把混在一起的东西按照大小分开来。
它在很多地方都能帮上大忙呢,是不是很有趣呀?。
安捷伦凝胶渗透色谱安捷伦凝胶渗透色谱(GPC)是一种用于分离和表征高分子化合物的方法,如聚合物、蛋白质、多糖等。
以下是关于安捷伦凝胶渗透色谱的详细说明:1. 仪器组成:安捷伦凝胶渗透色谱系统由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据采集系统和计算机等组成。
2. 工作原理:凝胶渗透色谱的原理是基于分子大小不同,通过多孔凝胶固定相的孔径大小,按分子大小依次分离样品中的各个组分。
在分离过程中,大分子物质先被洗脱,小分子物质后被洗脱。
3. 实验操作流程:凝胶渗透色谱实验的一般流程包括以下步骤:样品准备:将待分析的样品进行适当处理,以便于后续的色谱分离。
流动相准备:选择合适的流动相,一般使用THF、DMF、水相、氯仿、三氯苯等作为流动相。
样品进样:将样品通过进样器注入色谱柱。
洗脱分离:使用高压输液泵将流动相通过色谱柱,按分子大小顺序分离样品中的各个组分。
检测和记录:使用检测器检测各个组分的信号,并通过数据采集系统记录数据。
结果处理:通过计算机处理数据,得到各个组分的分子量分布和浓度等信息。
4. 应用范围:安捷伦凝胶渗透色谱广泛应用于高分子化合物的分析,如聚合物、蛋白质、多糖等。
其应用范围包括高分子聚合物分子量的测定、线性高分子化合物多分散指数的测定、聚合物稳定性的评价及降解过程分析、高分子材料产品质量控制等方面。
5. 注意事项:在进行凝胶渗透色谱实验时,需要注意以下几点:样品准备要适当,以利于后续的色谱分离。
流动相的选择要合适,根据不同的样品选择不同的流动相。
实验过程中要保持严格的温度和流速控制,以保证实验结果的准确性。
对于某些样品,可能需要使用不同的色谱柱或流动相来达到最佳的分离效果。
安捷伦凝胶渗透色谱是一种非常有效的分析高分子化合物的方法,可以提供关于样品分子量分布、分子大小等信息,帮助研究人员深入了解样品的性质和组成。
Agilent GPC软件 现场培训教材安捷伦科技有限公司化学分析仪器部1、仪器设备:Agilent 1100LC●G1310A :(单元泵);G1312A(二元泵);G1311A(四元泵)。
● G1367A(在线脱气机)。
● G1313A(自动进样器)。
● G1316A(柱温箱)。
● G1362A(示差检测器)。
● GPC-SEC 起始套包(有机相:5064-8251;水相:5064-8252)。
● G2170AA (1100 软件 A.09.01以上)。
● G2182AA (GPC软件 A.02.02以上)。
若为二元泵,需使用100% A或100% B;若为四元泵,需要一个转接头(P/N 0100-1847)直接连接溶剂瓶到主动阀(跳过梯度比例阀)。
若用户订购了GPC-SEC 起始套包(有机相:5064-8251;水相:5064-8252)。
可按照相关条件进行分析获取相关标样和实际样品的色谱图,若用户未订购此套件,使用软件所带的demo文件进行练习。
2. 如何做窄标校正1. 切换到或开启化学工作站并进入数据分析画面"Data Analysis" 。
2. 从 DATA\GPC_DEMO 子目录调入数据文件002-0201 ,此数据含有使用RI检测器检测的聚苯乙烯标样混合物。
3. 通过GPC | GPC-Settings...检查并修改 GPC设置参照图1:图1:用于产生校正曲线的GPC设置4. 从 GPC 菜单选择“Calculate GPC-Results“GPC-Addon 软件将打开并已经设置好基线,缺省的 default.cal 校正曲线用于产生分子量数据。
但是,这些分子量肯定不对,因为缺省的数据还没有与我们的数据相关联。
现在我们可以根据峰保留时间和已知的摩尔质量产生校正表:1. 单击Window |Calibration并在GPC-Addon软件屏幕菜单栏使用File| New 产生新的校正文件。
GPC/SEC 色谱柱成功进行GPC/SEC 分离的关键是正确选择色谱柱。
安捷伦色谱柱设计的全线PLgel 产品已覆盖了聚合物分析应用的几乎全部领域,可以快速而可靠地选择正确的色谱柱、溶剂和校正标准品。
安捷伦的PLgel GPC 系列色谱柱适用于使用有机溶剂的聚合物应用。
PLgel 是一款高度交联的、多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯基质的填料,这是一种GPC 色谱柱领域的领先技术。
PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度更高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
安捷伦的PL aquagel-OH 系列为水相SEC 的可靠分离提供了化学和物理稳定的固定相。
该色谱柱装填了带强亲水性的多羟基官能团的大孔径共聚物柱床。
“中性”表面及其广泛的溶剂操作条件,能为中性、离子和疏水组分提供高效分析,无论它们是单独存在的还是混在一起的。
PL aquagel-OH可用于分析和制备应用。
GPC/SEC 的原理•聚合物分子溶解在溶液中,由于分子量不同形成大小不同的球形线团状结构•聚合物线团随洗脱液流经色谱柱•色谱柱内填充具有特定孔结构的不溶性多孔小球•多孔小球的孔径与聚合物线团的体积接近•聚合物线团在孔内外扩散•洗脱基于分子大小——大分子先洗脱,小分子后洗脱•通过使用聚合物标准品建立的校正曲线将体积分离转换为分子量分离如何选择GPC/SEC的色谱柱(以黑体字显示的色谱柱为首选)有机GPCPlgel GPC 柱•最极端条件下稳定性极佳•在高达220 °C 的温度下保持稳定•良好的溶剂兼容性可允许在各种极性的溶剂之间轻松、快速转换PLgel 填料具有高孔容和高柱效,使分离度最高。
它们无与伦比的溶剂兼容性使极性溶剂和非极性流动相之间的转换快速简单,并且具有出色的机械强度,色谱柱寿命更长,使停机时间降至最低。
成功进行GPC 分离的关键是正确选择色谱柱。
我们设计的种类齐全的PLgel 产品已覆盖了基于有机溶剂的聚合物分析应用的全部领域,可以快速而可靠地选择正确的色谱柱、溶剂和校正标准品。
PLgel 是一款高度交联的、多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯基质的填料,这是一种GPC 色谱柱领域的领先技术。
PLgel 按照ISO 9001 : 2000 标准生产,完备的QC/QA 带来总体重现性高,批次间以及色谱柱间的重现性高的优点。
Plgel miXED 柱PLgel MIXED 大大简化了色谱柱选择,更容易作出决定。
使用这类混合型色谱柱,您可以避免错误匹配色谱柱并出现假峰,以获得更可靠的结果。
每种色谱柱都含有混合的不同孔径填料,精确混合,覆盖特定的分子量范围,在此范围内呈线性,避免色谱柱错配。
如需得到Plgel miXED-lS 柱•数据质量立即得到改善•无需预处理,节省了时间和溶剂成本•最大限度地发挥了光散射检测器的潜力PLgel MIXED-LS 系列采用PS/DVB 填料和创新专利的悬浮聚合技术,避免了纳米级颗粒渗漏。
在使用PLgel MIXED-LS 柱后,光散射数据质量比使用常规GPC 柱立即有了明显的改善。
这里展示的光散射图谱是用THF 以1 毫升/分钟速度冲洗柱一小时后获得的。
聚苯乙烯标准样品(Mp 21 万)以 1 毫克/毫升的浓度进样,其目的是为演示在使用PLgel MIXED-LS 柱后显著提高了信噪比。
PLgel MIXED-LS 色谱柱性能在校正曲线、柱效、宽溶剂兼容性和操作温度等方面与PLgel 20 μm。
MIXED-A 和PLgel 10 μm MIXED-B 色谱柱相当。
MIXED-LS 色谱柱也是在线粘度检测的理想选择,最大限度地降低了毛细管阻塞的风险,可以与填充了刚性小孔径凝胶的常规PLgel 保护柱一起使用,没有填料流失•数据质量立即得到改善Plgel minimiX 柱•节省溶剂70%,并节约了经费•储存溶剂较少,并且提高了操作者的安全性•堪比安捷伦常规内径柱的高柱效如需降低溶剂成本和消耗,那么请您使用行业标准PLgel MiniMIX 250 x 4.6 mm 窄径混合凝胶柱。
这种窄径柱具备极高性能、优异的溶剂兼容性和机械稳定性。
PLgel MiniMIX 柱可用于常规GPC仪器。
为了保持流经色谱柱的线性流速相同,随着色谱柱截面积的减小,将体积流速减少至0.3 mL/min,从而显著降低了溶剂消耗。
载样量也应随柱体积的减少而缩小,同时由于系统死Plgel 单一孔径色谱柱•极高的柱效提高了效率•针对性能和应用的最佳匹配选择最适合的色谱柱•用较少色谱柱进行快速分析,节省时间和经费单一孔径GPC 柱为特定分子量范围的聚合物提供高分离度。
校正曲线的线性部分,即斜率最低处,就是获得最佳分离度的分子量区域。
Plgel 制备柱•卓越的柱效提供优化的分离度•高载样量允许进行mg 级样品的分离,用于后续研究•可进行10 倍以上的比例放大,可进行有效的大量制备制备型GPC 一般用于分流聚合物、分离聚合物中的组分或复杂基质中相应的小分子混合物。
材料混合物基于分子大小可以很容易地得到分离,最好使用低沸点有机溶剂。
然后将一系列分开的流分分别进行收集,通过简单的溶剂蒸发进行分离。
PLgel 制备柱填充与分析柱相同的高效刚性填料。
10 μm 填料能够提供高柱效(> 25000 p/m),用于优化分离和上样参数。
PLgel 25 mm 内径制备柱提供了比7.5 mm 分析柱高10 倍的比例放大制备量。
增加的内径和柱体积可以提高载样量。
对于低分子量物质,样品浓度还特殊GPC/SEC 应用的色谱柱1)EnviroPrep•高载样量确保高效的痕量分析•简单的净化步骤节约样品制备成本•优化的填料尺寸分布提供了高分离度EnviroPrep 柱允许将简单、一步净化作为方法的一部分,以测定许多有机基体中的杀虫剂。
较高分子量的流分,如脂质、聚合物、天然树脂和分散的高分子量组分,都很容易从GPC 中去除。
EPA 方法3640A 描述了用300 x 25 mm 和150 x 25 mm 制备柱对土壤提取物进行GPC 净化,得到更高的载样量和流分收率,尤为适用于低含量污染物。
小孔径EnviroPrep 柱是该方法的理想选择。
该色谱柱装填10 μm 粒度100 ? 孔径填料,具有高分离度,分子量排阻上限为4000 g/mol。
制备柱通过填料粒径分布的优化提供了良好的分离度和高载样量。
2)Plgel olexis•聚烯烃分析的优化设计•耐高温•不发生样品断裂损伤的高分离度、干净的分离PLgel Olexis 是为分析超大分子量聚合物,特别是聚烯烃而设计的。
该色谱柱能分离的分子量最高可达100000000 g/mol(聚苯乙烯的四氢呋喃溶液),填充13 μm 填料以进行柱效和分离度的优化,在分析过程中不会发生样品断裂降解。
PLgel Olexis 的填料与其它PLgel 柱一样,具有良好的机械稳定性和耐用性,因而可以在高达220 °C 的条件下进行高晶材料•在优化的分离范围内具有无缺陷的高性能•高度耐用的填料延长了柱寿命•低操作压力减少了系统损伤和不必要的停机PL HFIPgel,一种具有单分散性填料尺寸、高孔容和高分离度的PS/DVB 填料。
使用PL HFIPgel 避免了与常规装填和HFIP 相关的常见问题,如校正曲线曲率过度、多色散样品峰错位/肩峰以及低分子量区域分离度差等。
柱效保证> 30000 p/m,该色谱柱非常耐用,最大工作压力为145 bar(2030 psi)。
其装填和测试时使用甲醇,运输时使用HFIP 方便您即开即用。
7.5 mm 内径PL HFIPgel 色谱柱通常在1 mL/min 流速下运行。
而4.6 mm 内径柱在0.3 mL/min 流速下运行,溶剂消耗减少70%,从而节省了购买和处理溶剂的费用。
4)Pl Rapide•在10 分钟之内完成分析,节约时间•样品通量显著增加,提高柱效•减少了溶剂消耗和废液处理成本,节省资金•提供L、M 和H 型柱,适于低、中和高分子量聚合物分离;提供的F 型用于流动注射分析快PL Rapide 色谱柱适用于快速分离应用,例如高通量筛选、过程监测、跟踪分子量分布,这些应用中时间是整个分析的关键因素。
这些色谱柱填充高质量的凝胶,涵盖完整的分子量范围,同时适合于分析水溶性聚合物,也适合分析溶于有机相的聚合物样品。
主要特点包括填料具有高孔容和高分离度、对系统无特殊要求、可选择分子量分离范围、较广的溶剂兼容性,5)PolarGel•中等极性表面和高机械稳定性•可使用广泛的溶剂组合•有两个分离区域可供选择,PolarGel-L 和PolarGel-MPolarGel 系列适用于使用极性溶剂的分析,如二甲基甲酰胺(DMF)和二甲亚砜(DMSO),并且适用于混合溶剂,如四氢呋喃溶剂与水的组合。
这些流动相在GPC/SEC 分离极性物质时非常有用,这些物质如极性树脂、改性多糖或复杂的极性聚合物等,在使用传统SEC 溶剂时(如单独使用四氢呋喃)是难以进行分析的。
PolarGel-L 适用于低分子量极性聚合物,PolarGel-M 适用于高分子量极性聚合物。
当使用极性溶剂和传统非极性聚苯乙烯/二乙烯基苯柱时,极性聚合物的强极性基团将产生非特异性相互作用和次级分离机理。
通常需要添加剂和/或柱再生,以减少这类相互作用的发生。
PolarGel则没有这些干扰,也不会有这类相互作用和次级效应带来的色谱图失真。
PlusPore系列色谱柱PlusPore 系列产品有递增的孔容,为特定应用提供高分离度分离。
填料具有高稳定性,可使用范围广泛的有机溶剂,确保准确度和精密度,使分子量分布不失真。
PlusPore 系列色谱柱为高分离度GPC 而特别设计,蕴含了最新的GPC 柱技术。
这种新型填料基于行业标准,是高度交联的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB),具有最广泛的应用性和溶剂兼容性。
用新的聚合工艺制成,填料颗粒具有特殊的可控微孔结构,提供最佳GPC 性能。
典型的应用包括树脂、缩聚物、预聚物和低聚物。
对于高分离度聚合物分析,PlusPore 产品系列的PolyPore、ResiPore、MesoPore 和OligoPore 柱提供了广泛的孔径分布,近线性校正曲线覆盖的分子量范围更宽。
这些所谓的“多孔”结构与一般PS/DVB填料相比增加了孔容。
从而得到适用于特殊应用领域的极高分离度GPC 柱。
这种高度交联的多孔填料提供了良好的化学和物理稳定性,允许在广泛的有机溶剂之间轻松转换,柱效和校正曲线形状基本不变。
这种多孔柱技术不需要单一孔径填料的组合,因而能得到高准确度和高精密度的分子量分布图并且无任何缺陷。