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太湖梅梁湾不同深度沉积物中细菌群落结构组成_赵大勇

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第41卷第4期2013年7月河海大学学报（自然科学版）Journal of Hohai University （Natural Sciences ）Vol．41No．4Jul．2013DOI ：10．3876/j．issn．1000－1980．2013．04．001收稿日期：2012－11－29基金项目：国家自然科学基金（41001044，41101052）；江苏省自然科学基金（BK2011876）作者简介：赵大勇（1982—）男，河北丰南人，副教授，博士，主要从事湖泊富营养化形成机理及控制技术研究。

E-mail ：dyzhao@hhu．edu．cn 太湖梅梁湾不同深度沉积物中细菌群落结构组成赵大勇1，孙一萌1，方超1，刘鹏1，曾巾2，王猛1，黄睿1（1．河海大学水文水资源学院，江苏南京210098；2．中国科学院南京地理与湖泊研究所湖泊与环境国家重点实验室，江苏南京210008）摘要：为研究湖泊沉积物不同深度处的细菌群落结构组成和多样性，选取太湖梅梁湾作为采样点，应用末端限制性片段长度多态性（T-RFLP ）技术比较湖泊不同深度沉积物样品中细菌群落的结构组成及其多样性。

结果表明：太湖沉积物中细菌具有丰富的多样性，细菌种类和相对丰度与当前已有的可培养细菌研究结果一致。

细菌群落结构随着沉积物深度的增加呈现一定的变化规律，相邻近的沉积物分层中细菌群落结构的相似度较高；随着沉积物深度的增加，沉积物中优势菌属发生了一定的变化；表层沉积物与底层沉积物的细菌群落结构相差较大。

鉴于氧含量随着沉积物深度的增加而逐渐减少，可以推断氧含量的变化是造成湖泊沉积物中细菌群落结构与多样性差异的主要原因。

另外，表层沉积物中的生物扰动也是可能的原因。

关键词：湖泊沉积物；沉积物深度；细菌群落结构；T-RFLP 技术；太湖梅梁湾中图分类号：X17；X524文献标志码：A 文章编号：1000－1980（2013）04－0283－05Vertical distribution of bacterial community composition insediments of Meiliang Bay in Taihu LakeZHAO Dayong 1，SUN Yimeng 1，FANG Chao 1，LIU Peng 1，ZENG Jin 2，WANG Meng 1，HUANG Rui 1（1．College of Hydrology and Water Resources ，Hohai University ，Nanjing 210098，China ；2．State Key Laboratory of Lake Science and Environment ，Nanjing Institute of Geography andLimnology ，Chinese Academy of Sciences ，Nanjing 210008，China ）Abstract ：To investigate the vertical distribution and diversity of bacterial community composition in the sediments of Taihu Lake ，sediment samples were collected from Meiliang Bay in Taihu Lake．Terminal restriction fragment length polymorphism （T-RFLP ）technology was used to analyze the bacterial community composition and diversity in sediment samples of different depths．High bacterial diversities were observed in the sediments of Taihu Lake ，and the bacterial species and relative abundance were found to be consistent with those in previous reports based onthe culture-dependent method．Additionally ，different T-RFLP patterns were observed for samples collected at different depths．Bacterial community compositions derived from those nearby samples showed greater similarities．The dominant bacterial groups varied at different depths．Moreover ，the bacterial community compositions of the top and the bottom sediments showed great differences．Dissolved oxygen decreased with the increase of the depth of sediments ，which shows that the variation of dissolved oxygen was the main cause of the differences in bacterial community compositions and diversity．Bioturbation induced by the submerged macrophytes and zoobenthos may be another cause．Key words ：lake sediment ；sediment depth ；bacterial community structure ；T-RFLP technology ；Meiliang Bay in Taihu Lake浅水湖泊水域较广阔，水深较浅，风浪扰动大，湖泊沉积物与水体物质交换频繁［1］。

以往的研究表明，河海大学学报（自然科学版）第41卷浅水湖泊沉积物是湖泊营养物质来源的一个主要方面［2-4］。

微生物作为沉积物中物质循环和转化的核心参与者，可以通过同化、异化等作用来影响沉积物中的营养盐及金属元素的分布和转化［5］，对湖泊中的物质循环和水体自净具有不可替代的作用［5-6］。

2002年，Haglund 等［7］研究发现湖泊沉积物中细菌的代谢能力远高于水体中浮游细菌的代谢能力。

因此，研究湖泊沉积物中的微生物群落结构组成对于阐明营养元素在湖泊生态系统中的循环过程具有重要意义。

太湖是我国东部一个大型的浅水湖泊，梅梁湾是其各湖区中水污染较严重的区域。

目前，大部分研究着重于沉积物中氮［8］、磷［9］、硫［10］等元素及其化合物的形态变化分析或微生物与环境因子的相互关系［5，11-12］，极少关注沉积物中微生物的多样性。

少数研究如周丽华等［13］、戴欣等［14］利用基于培养的方法研究太湖沉积物中可培养细菌的多样性［15］。

然而，在环境样品中能用现有技术培养的微生物仅占微生物总数的0.01% 10.0%［16］，难以客观揭示环境样品中的微生物多样性。

1997年，Liu 等［17］首先应用末端限制性片段长度多态性（T-RFLP ）技术研究微生物的多样性。

与其他指纹图谱技术相比，T-RFLP 技术具有更高的灵敏度和重复性［18］。

目前，关于采用T-RFLP 技术分析土壤［19］或活性污泥［20］中微生物多样性的研究均有报道，但对湖泊不同深度沉积物中微生物多样性的研究在国内还很少。

笔者以太湖梅梁湾湖区沉积物为研究对象，应用T-RFLP 技术研究不同深度沉积物中细菌的多样性，旨在更好地认识不同深度沉积物中细菌的群落结构组成，为进一步研究细菌在太湖营养物质循环中的作用奠定基础。

1材料与方法1.1样品采集与准备采样时间为2011年8月，采样点位于太湖梅梁湾（图1）。

梅梁湾是太湖北部的一个湖湾，位于无锡市中心西南10km 处，湖湾南北长12 17km 、宽7 10km 、面积129.3km 2。

目前，太湖梅梁湾水域营养化程度长期处于超富营养化水平。

图1太湖采样点位置示意图Fig．1Sketch map sampling locations in Taihu Lake采样点S 位于太湖梅梁湾湖区中心（31ʎ28'16ᵡN ，120ʎ10'20ᵡE ）。

使用柱状采泥器（德国HYDRO-BIOS ），采集长30cm 、直径11cm 的沉积物样品。

分离时用活塞自下而上将泥柱推出，并将泥样每1cm 分1层，共13个样本，泥样编号分别记为：0-1（表示该样品为0 1cm 深度的沉积物，以下类似），1-2，…，12-13。

同时采集2个平行沉积物柱状样，将同一深度层的平行样品混合。

混合后的样品置于冰上冷藏，运回实验室。

同时，用采水器采集水面下0.5m 处的水样2L ，置于冰上冷藏，运回实验室用于理化指标分析。

1.2水体理化指标分析水体pH 应用便携式pH 计（PHB-4，上海雷磁）在采样现场测定，水样经0.22μm 滤膜过滤后，用流动注射仪（San ++，SKALAR ，Netherlands ）测定水样总氮（TN ）、总磷（TP ）、氨氮（NH +4）、硝氮（NO －3）和亚硝态氮（NO －2）。

1.3样品总DNA 的提取与PCR 扩增取0.3g 真空冷冻干燥（ALPHA1-2，德国CHRIST ）后的沉积物样品，采用Zeng 等［21］应用于沉积物的DNA 提取方法进行DNA 提取。

PCR 扩增反应采用细菌通用引物对27f （5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'）和926r （5'-CCGTCAATTCCTTTGAGT TT-3'），前者5'端采用Cy5-N-羟基琥珀酰亚胺酯荧光标记。

PCR 反应体系和循环条件参照Zeng 等［21］的方法进行。

PCR 扩增产物采用2%琼脂糖凝胶电泳检测。

1.4T-RFLP 分析用绿豆酶30ʎC 消化PCR 产物30min 。

用PCR 产物纯化试剂盒（爱思进生物技术（杭州）有限公司）纯化消化后的产物。

然后，用限制性核酸内切酶Hha Ⅰ（Takara ，Otsu ，Japan ）37ʎC 消化3h ，之后使用CEQ8000（Beckman Coulter ，Fullerton ，CA ，USA ）核酸片段分析仪对酶切产物进行T-RFLP 分析。

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太湖浮游细菌与春末浮游藻类群落结构演替的相关分析

太湖浮游细菌与春末浮游藻类群落结构演替的相关分析

第27卷第5期2007年5月生态学报ACT A ECOLOGI CA SI N I CA Vol .27,No .5May,2007基金项目:国家重点基础研究发展计划资助项目(2002CB412300);国家自然科学基金资助项目(40471045);中国科学院百人计划资助项目;中国科学院南京地理与湖泊研究所所长基金资助项目收稿日期:2006203203;修订日期:2007202212作者简介:邢鹏(1979～),女,河北石家庄人,博士生,主要从事生态学研究.E 2mail:pxing@niglas .ac .cn3通讯作者Corres ponding author .E 2mail:fxkong@niglas .ac .cn致谢:感谢中国科学院南京地理与湖泊研究所的吴庆龙、高光老师对实验的指导,感谢中国科学院太湖湖泊生态系统研究站对采样工作的大力协助Founda ti on ite m :The p r oject was financially supported by State Key Basic Research and Devel opment Plan (No .2002CB412305);The Nati onal Natural Science Foundati on of China (No .40471045);The One 2Hundred 2Scientist Pr ogra m of CASRece i ved da te:2006203203;Accepted da te:2007202212B i ography:X I N G Peng,Ph . D.candidate,mainly engaged in ecol ogy .E 2mail:pxing@niglas .ac .cn太湖浮游细菌与春末浮游藻类群落结构演替的相关分析邢　鹏1,2,孔繁翔1,3,曹焕生1,2,张　民1,2(1.中国科学院南京地理与湖泊研究所,南京　210008; 2.中国科学院研究生院,北京　100039)摘要:为研究浮游细菌与浮游藻类群落演替的相关性,2005年4月至6月在太湖5个观测点采集浮游细菌及浮游藻类样本。

DGGE指纹图谱分析太湖富营养化水体中细菌群落结构的变化

DGGE指纹图谱分析太湖富营养化水体中细菌群落结构的变化

12富营养化的成因与危害随着城市化和工农业生产的发展大量富含氮磷等营养物质的城市污水工农业废水流入自然水域使水体中营养物质迅速富集导致某些藻类特别是蓝绿藻过度增殖水体透明度下降溶解氧含量降低水质恶化严重时发生水华水变腥变臭大量水生生物死亡这就是水域富营养化现象其经常发生在湖泊海湾等相对封闭水流缓慢的水体
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上海交通大学硕士学位论文
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本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行 检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。
KEY WORDS ： bacterial community structure ， denaturing gradient gel
electrophoresis，16S rRNA，Lake Taihu，statistical analysis
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上海交通大学硕士学位论文
上海交通大学 学位论文原创性声明
关键词：
计学分析
细菌群落结构，变性梯度凝胶电泳，16S rRNA，太湖，统
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上海交通大学硕士学位论文
CHANGES IN BACTERIAL COMMUNITY STRUCTURE OF A HYPERTROPHIC FRESHWATER LAKE TAIHU, DETERMINED BY DENATURING GRADIENT GEL ELECTROPHORESIS FINGERPRINT
本文采集太湖不同地点(梅梁湖、东太湖和南部沿岸区)、不同月份(06 年 4 至 9 月)的表层水样，提取细菌总 DNA，采用引物 357F-GC-clamp 和 518R 进行 PCR 扩增。实验结果表明，PCR 扩增产物的特异性会对 DGGE 实验产生至关重要的影响，包括选择适合的引物及其浓度、适当 的模板浓度，确定初始退火温度和总循环数。变性剂梯度被确定为 40%～ 55%。DGGE 图谱的初步分析结果表明，太湖水样中的菌种丰富度非常高， 并且不同取样时间和不同取样地点的 DGGE 带谱在条带的数量、位置及 条带的亮度上均存在较大的差异。Quantity One 软件包定量分析表明，太
太湖不同湖区水生真菌多样性

太湖不同湖区水生真菌多样性

J. Lake Sci . ( 湖泊科学 ), 2011, 23 ( 3): 469 478 http: //www. jlakes . org . E m a i: l jlakes @ nig las . ac . cn 2011 by Journal of Lake Sciences
太湖不同湖区水生真菌多样性
多样性及环境因子对其的影响 . 结果表明 , 2009年 5 月份太湖水生真菌群落 具有较为 丰富的多 样性组成 . 东半湖水 生真 菌多样性指数较西半湖高 , 湖心区最低 . 不同湖区水生真 菌群落的 遗传结构 和主要类 群组成存 在空间差 异 , 东半湖 真菌 类群较多 , 湖心区最少 . 系统发育分析显示太湖水生真菌优 势类群主要归 属于真菌界的 子囊菌门 ( A scom ycota) 和担 子菌 门 ( B as id iom ycota) , 包含 8个目 , 分别占所有序列的 57. 7 % 和 26 . 9 % , 它们在不同湖区均有分布 . 经检测 发现卵菌纲 ( O o mycetes)水霉目 ( S apro legn iales) 一种 , 仅存在于东太湖水体中 ; 沉积物中的 特有真菌类群主 要归属于壶菌 门 ( Chytrid iomy cota)和接合菌门 ( Zygom ycota) . 这些具有空间分布差异的类 群约占所 有序列的 15 . 4% . 聚类及 典型相关 分析表明 , 太湖 不同湖区水生真菌多样性存在差异 , 这与湖区间不同的营养水平、 风浪扰动状况等因素有关 . 关键词 : 水生真菌 ; 多样性 ; PCR DG GE; 太湖
D ive rsity o f aqua ti c fung i in d iffe ren t a reas o f Lake Ta ihu
太湖梅梁湾水体及沉积物中微囊藻毒素含量垂向分布特征

太湖梅梁湾水体及沉积物中微囊藻毒素含量垂向分布特征

!Lake'((湖泊科学)，2019,31(4)：976-987DOI10,18307/2019.0426©2019by Journal of Lake Sciences太湖梅梁湾水体及沉积物中微囊藻毒素含量垂向分布特征”舒秀波1,2，谢丽强2,万翔2,3，姚磊2,3,薛庆举2,李金娟®(1：贵州大学资源与环境工程学院，贵阳550025)(2：中国科学院南京地理与湖泊研究所湖泊与环境国家重点实验室，南京210008)(3：中国科学院大学，北京100049)摘要：为探究太湖梅梁湾水体及沉积物中微囊藻毒素！MC-LR、MC-RR、MC-YR)含量的垂向分布特征，于2018年5月采集梅梁湾6个点位表层水、上覆水、混合水、间隙水以及柱状沉积物样品，并采用超高效液相色谱一串联质谱法分析样品中微囊藻毒素的含量•分析结果表明:水体中(表层水、上覆水、混合水以及间隙水)MCYR、MC-RR、MCYR的浓度范围分别为11.80〜1297.14、2.50〜818.40、1.80〜176.00g EF表层水、上覆水以及混合水中MCYR的浓度高于MCYR和MC-YR,MC-RR和MCYR之间差别较小，而间隙水中MC b三种异构体浓度大小顺序为：MCYR>MC-RR>MCYR；垂向分布上，间隙水中MC b异构体(MCYR、MC-RR、MCYR)浓度均远高于表层水、上覆水以及混合水，表层水MC b异构体浓度略高于上覆水#混合水MC b异构体浓度介于表层水和上覆水之间.对沉积物的研究发现,1-10cm表层沉积物中MCYR、MCYR、MC-YR含量范围分别为040〜26.95、0〜0.90、0〜840nEg,且1〜10cm层中MC b三种异构体平均含量大小顺序为:MCYR>MCYR>MCYR,其中MCYR、MCYR、MCYR的检出率分别为100%、70%、92%*垂向分布上,MCYR含量较低且变化不大，而MCYR和MCYR含量均随沉积物深度的增加先升高后降低•相关性分析结果表明，表层水和混合水中MC b与总磷浓度呈显著正相关，而与总氮浓度无显著相关性*上覆水、间隙水以及沉积物中MC b与总氮、总磷浓度均呈显著正相关.关键词：太湖*梅梁湾*微囊藻毒素*水体*沉积物*垂向分布Vertical distribution characteristics of microcystin concentration#water and sediment of Meiliang Bay,Lake TaibuSHU Xiubo1'2,XIE Liqiang2,WANG Xiang2'3,YAO Lei2,3,XUE Qi'gju2&LI Jinjuan1!!(1:College of Resources and Environmental Engineering,Guizhou University,Guiyang550025,P.R.China)(2：Statt Key Laborctoc of Lake Science and Environment,Nanjing Instituty of Ge s graphy and Limnology,Chinese Acedemy of Sciences,Nanjng210000,P.R.Rhina)(3:Unmesim of Chinee Academy of Sciences,Beijing100049,P.R.Rhina)Abstract:In order to explore the vertical distribution characteristics of microcystin(MC-YR,MC-RR,MC-YR)concentration in the wateo body and sediment of Meibang Bay,suiace wateo,overlying wateo,mixed wateo,interstitiaO wateo and columnao sedi­ment samples at six points were collected ia May2018,and the microcystin concentrations were analyzed by ultra-high peOormance liquid chomatography-tandem mass spectrometo(UPLC-MS/MS).The results indicated that the MC-YR,MC-RR,MC-RR con-cenirations in wateo(surfacc water,overlying water,mixed wateo and inters tiXal water)ranged from11.80-1297.14, 2.50-81840,140-176.00ngL,respectively.The MC-YR concentraion in suaface water,overlying water and mixed water were higher than MC-RR and MC-RR concentrations,but there were no sionificant dimerence between MC-RR and MC-RR concentration.The order of MC concentrations isomer in intrs11X31water was:MC-YR k MC-RR k MC-YR.The MC concentrations isomer(MC-YR, MC-RR,MC-YR)in inters titial water were all far higher than those in surfacc water,overlying water and mixed water in verticay**!国家自然科学基金项目(41877486)、国家水体污染控制与治理科技重大专项(2018ZX07208-008,2017ZX07203Y 004-04)和中国科学院科技服务网络计划(KFJ-STS-ZDTP-038-3)联合资助.2018-10-26收稿*2018-12-18收修改稿.舒秀波(1994〜)，男，硕士研究生*E-my：2635309579@.**通信作者；E-mab：summy_lee@.舒秀波等：太湖梅梁湾水体及沉积物中微囊藻毒素含量垂向分布特征977profiles of water#the MC isomer concentrations in surface water were slightly higher than those in overlying water.The MC isomer concentrations in mixed wateo were between surface wateo and overlying wateo.The MC-LR,MC-RR and MC-YR contents in sedi­ment with a depth of10cm ranged from0.60-26.95,0-0.90and0-8.10ng/g,respectively,and the ordeo oi the average contene oi three MC isomero in the1-10cm layeo was MC-LR k MC-YR k MC-RR.The detection rates of MC-LR,MC-YR and MC-YR were100!,70%and92%,respectively.In the vertical distribution of sediment,the MC-RR concentration was low and showed littie change,the overall trend of MC-YR and MC-LR contents increased first and then decreased with the increasing of the sedi­ment depth.The results of correlation analysis indicated that MC isomer concentrayons in surfacc wateo and mixed wateo were posi­tively correlated with total phosphorus(TP)concentration,respectively,but did not show cooelation with totay nitrooen(TN) concentration.The MC concentrations in overlying water,11^10X81water and sediment were posiively correlated with TN and TP concentrations,respectively.Keywords:Lake Taihu；Meiliang Bay；microcystin；water；sediment；distribution近十年来，太湖水体长时间处于中度富营养化状态，蓝藻水华发生日趋频繁，这引起了国内外学者的普遍关注.水华暴发期间，微囊藻(Microcystis)、鱼腥藻(Anabaena)、颤藻(Oscillator,)等浮游藻类大量繁殖，同时藻细胞死亡破裂后会向水体释放多种蓝藻毒素，危害水生态系统的安全［1］，其中微囊藻毒素(microcystins，简称MCs)是一种分布广泛且毒性最强的蓝藻毒素.MCs是由7个氨基酸组成的单环七肽，由于多肽组成中氨基酸种类和位置的变化,导致了MCs结构上的多样性，目前已经发现了200多种不同类型的MCs异构体巴其中MC-LR、MC-RR、MC-YR(L、R、Y分别代表亮氨酸、精氨酸和酪氨酸)为最主要的3种类型，且MC-LR和MC-RR是在我国天然水体中检出频率最多和浓度最高的MC s异构体.MCs有着环状和间隔双键的结构特性，性质稳定,耐高温，易溶于水［3］，且自然水体中MCs的归趋主要分为以下5个途径⑷：(1)大量自然湖泊水体的稀释作用，(2)沉降物或悬浮物对水体中MCs的吸附作用，(3)在特定的水温及pH 条件下的热分解作用，(4)光降解作用，(5)生物降解作用.此外，研究证明，MC s还可以在鱼体、螺类及其他水生生物体内积累+5L,，—旦人类食用被MC s污染的水产品，MC s很有可能在人体内富集，从而对人体造成很大的伤害［8］.目前,国内外学者对太湖梅梁湾水体及沉积物中MCs浓度已开展了部分研究，并取得了一系列的研究结果.Xu等［9］用酶联免疫法(ELISA)分析了梅梁湾水体中MCs总浓度的变化，发现一年之中的7-10月为 水体中MC s总浓度较高的时间段.Song等［10］用酶联免疫法分析了梅梁湾表层水和上覆水MCs总浓度的变化，结果表明表层水中MC s总浓度略高于上覆水.高振美等［11］用高效液相色谱法分析了梅梁湾水体中MC-LR、MC-RR、MC-YR的浓度变化，结果发现水体中MC-LR和MC-RR这2种异构体浓度较高.Chen等⑷用酶联免疫法分析了梅梁湾沉积物中MCs总含量的变化，研究表明蓝藻暴发期间，沉积物中MCs总含量较高.但前人的研究工作大多注重于水体，少有对间隙水以及沉积物中MCs的含量报道,没有对MCs的垂向分布进行充分阐释，且研究方法以酶联免疫法居多，但ELISA是一项把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化作用原理有机结合起来的一种检测技术，其存在的问题是抗体往往只是针对某一种毒素建立起来的，对其他类型毒素的交叉反应性不高［12］，不能够较全面地反映MC s不同异构体在水体及沉积物中的含量分布情况.因此本研究选取太湖蓝藻水华较严重的梅梁湾为研究区，在蓝藻水华强度较大的5月问，采集梅梁湾表层水、上覆水、混合水、间隙水以及柱状沉积物样品，并采用超高效液相色谱一串联质谱法(UPLC-MS/MS)准确分析样品中MCs三种主要异构体(MC-LR、MC-RR、MC-YR)含量，进而从垂向空间变化来详细分析蓝藻水华期间MCs在梅梁湾水体以及底泥中具体分布情况，以便后期更深入地探讨MCs在水体以及沉积物中的环境归趋.1材料与方法1.1研究区概况梅梁湾位于太湖的北部,属于典型的藻型湖湾，其水域面积约为100km2［14］.据《2017年太湖健康状况报告》数据显示［13］,梅梁湾蓝藻数量与其他湖区相比,处于较高水平，营养状况为中度富营养化水平，蓝藻水华强度较大的两个时段分别出现在4一6月和8—11月.978J Lake Sei.(湖泊科学),2019,31(4)1.2样品采集依据梅梁湾湖面地形、湖底淤泥深度等现状以及参考中国科学院太湖湖泊生态系统研究站布设的采样 点位，于2018年5月在梅梁湾共布设6个采样点#这6个点位均匀地覆盖整个梅梁湾#具有较好的代表性 （图1）.用2.5 L 有机玻璃采水器采集表层0〜04 m 处水样，取1 L 过GF/C 玻璃纤维滤膜（1.2What ­man , Brentord # UK ），收集滤液用于测定表层水MC 的浓度，另取500 ml 用于测定表层水体理化指标.用 24 L 有机玻璃采水器采集表层（水下0〜04 m ）、中层（水深一半处）、底层（水底泥上0〜04 m ）的水样，混 合后取1 L 过滤后用于测定混合水MC 浓度，另取500 k 1用于测定混合水体理化指标.用自重力柱状采泥 器在6个点位采集沉积物柱状样#每个点位采集4根柱子，参考Song 等+ 1°］对上覆水的采样方法，在现场用 50 ml 针筒注射器吸取4根柱状泥样表层以上0〜10cm 处上覆水，混匀后取1 L 过滤后用于测定上覆水MC 浓度，另取500 ml 用于测定上覆水体理化指标.在每个点位选取1根柱子利用1 cm 切环将柱状沉积物自上 而下分割成10层，混匀后装袋带回实验室，在-80^条件下冷冻保存#用于沉积物中MCs 含量的测定.剩余 6个点位的3根柱子利用10 cm 切环直接切取表层10 cm 厚的沉积物，混匀后装袋带回实验室，在离心机 （ThermoFisher , Heraeus , Multifuge , X1R ）4弋条件下以 1200 转/min 离心 25 min 得到间隙水，经 GF/C 滤膜 过滤后，测定间隙水MC 浓度，另取200 ml 用于测定间隙水体理化指标4O J I C O O I E120°0‘120°15, 120°30' 120。