吸光光度法分析条件的选择

吸光光度分析中选择测定波长的原则
在分光光度分析中选择测定波长，是分光光度法成功实施的关键。

测试波长的选择取决于待测物质和测试干扰物质之间的特异性和敏感性，以及待测物质吸收率随波长的变化情况。

一般来说，选择测定波长时应考虑以下原则：
第一，检测波长的敏感性高是最好的，应尽量选择植物的特征吸
收特性最强的波长。

第二，波长的选取应对物质的吸收普遍性更强，选择的范围更宽，尽可能多选择植物的多种分子与同一波长的特殊表面吸收关系。

第三，波长应尽量避开干扰物质在该波长上的吸收特征，尽可能
选择该波长不受物质吸收影响最小的波长。

第四，综合考虑植物有效成分吸收特性，在待测物质与干扰物质
之间找到足够能分辨的波长，估算试验所需要的波长，同时，选择的测
定波长应能充分体现物质的吸收特性。

总之，选择测定波长的原则主要有：选择植物吸收特性最强的波长，选择物质普遍性强的波长，避开物质吸收影响的波长，以及能够综
合考虑植物有效成分吸收特性的选择波长，等等。

只有结合上述所有原则，才能选出最合适的测定波长，才有利于成功操作。

简述吸光光度法测量条件光度分析中，为使测得的吸光度有较高的灵敏度和准确度，还必须选择合适的测量条件。

1. 入射光波长的选择一般以λmax作为入射光波长。

如有干扰，则根据干扰最小而吸光度尽可能大的原则选择入射光波长。

2. 参比溶液的选择参比溶液主要是用来消除由于吸收皿壁及试剂或溶剂等对入射光的反射和吸收带来的误差。

应视具体情况，分别选用纯溶剂空白、试剂空白、试液空白作参比溶液。

3. 吸光度读数范围的选择吸光光度分析所用的仪器为分光光度计，测量误差不仅与仪器质量有关，还与被测溶液的吸光度大小有关。

由下式可计算在不同吸光度或透光度读数范围引起的浓度的相对误差。

若分光光度计的读数误差DT 为5%, 当T = 65-20%，（或 A =0.19-0.70），则测量误差。

通常应控制溶液吸光度A在0.2-0.7之间，此范围是最适读数范围。

通过调节溶液的浓度或比色皿的厚度可以将吸光度调节到最适范围内。

当T%=36.8或A=0.434时，由于读数误差引起的浓度测量相对误差最小。

在吸光度法中，影响显色反应的主要因素有哪些？⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。

因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。

为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。

通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。

对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。

⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。

【关键字】分析第八章吸光光度法基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法称为吸光光度法。

包括比色法、看来及紫外分光光度法等。

本章主要讨论看来光区的吸光光度法。

利用看来光进行分光光度法分析时，通常将被测组分通过化学反应转变成有色化合物，然后进行吸光度的测量。

例如：测量钢样中Mn的含量，在酸性溶液中将Mn 氧化为MnO4-，然后进行吸光度的测量。

与化学分析法比较它具有如下特点：（一）灵敏度高分光光度法常用于测定试样中1－0.001%的微量组分。

对固体试样一般可测至10-4%。

（二）分析微量组分的准确度高例如：含铁量为0.001%的试样，如果用滴定法测定，称量试样，仅含铁0.01mg，无法用滴定分析法测定。

如果用显色剂1，10-邻二氮杂菲与铁生成橙红色的1，10-邻二氮杂菲亚铁配合物就可用吸光光度法来测定。

Fe2+ + 3(1,10-phen) → [ Fe(1,10-phen)3] 2+（三）操作简便，测定快速（四）应用广泛几乎所有的无机离子和许多有机化合物都可直接或间接地用分光光度法测定。

可用来研究化学反应的机理、溶液中配合物的组成、测定一些酸碱的离解常数等。

§8-1 吸光光度法基本原理一、物质对光的选择吸收当光束照射到物质上时，光与物质发生相互作用，产生了反射、散射、吸收或透射（p241, 图9-1）。

若被照射的是均匀的溶液，则光在溶液中的散射损失可以忽略。

当一束由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光复合而成的白光通过某一有色溶液时，一些波长的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过。

当透射光波长在400-700nm范围时，人眼可觉察到颜色的存在，这部分光被称为看来光。

透射光和吸收光呈互补色，即物质呈现的颜色是与其吸收光呈互补色的透射光的颜色。

例如：CuSO4溶液由于吸收了580-600 nm的黄色光，呈现的是与黄色呈互补色的蓝色。

不同波长的光具有不同的颜色，见P294,表9-1。

物质吸收了光子的能量由基态跃迁到较高能态（激发态），这个过程叫做物质对光的吸收。

第四章原子吸收光谱法测定条件的选择1.空心阴极灯测量条件的选择1.1 吸收线选择为获得较高的灵敏度、稳定性、宽的线性范围和无干扰测定 , 须选择合适的吸收线。

选择谱线的一般原则:a)灵敏度一般选择最灵敏的共振吸收线, 测定高含量元素时 , 可选用次灵敏线。

例如在测定高浓度钠时，不选择最灵敏线（589.0nm），而选择次灵敏线（330.2 nm）。

具体可参考Z-5000分析软件中提供各元素的谱线信息。

b)干扰谱线干扰当分析线附近有其他非吸收线存在时 , 将使灵敏度降低和工作曲线弯曲 , 应当尽量避免干扰。

例如 ,Ni230.Om 附近有 Ni231.98nm 、 Ni232.14 nm 、 Ni231.6nm 非吸收线干扰，因此，可选择灵敏度稍低的吸收线（341.48 nm）作为分析线。

而测定铷时，为了消除钾、钠的电离干扰，可用798.4nm代替780.0nm。

c)仪器条件大多数原子吸收分光光度计的波长范围是190 900 nm,并且一般采用光电倍增管作为检测器,它在紫外区和可见区具有较高的灵敏度.因此,对于那些共振线在这些区域附近或以外的元素,常选用次灵敏线作为分析波长。

例如测定铅时，为了克服短波区域的背景吸收和吸收和噪声，一般不使用217.0nm灵敏线而用283.3nm谱线。

1.2 电流的选择选择合适的空心阴极灯灯电流 , 可得到较高的灵敏度与稳定性，图4-1为Cd 灵敏对水灯电流变化的曲线。

从灵敏度考虑 , 灯电流宜用小 , 因为谱线变宽及自吸效应小 , 发射线窄 , 灵敏度增高。

但灯电流太小 , 灯放电不稳定，光输出稳定性差，为保证必要的信号输出，势必增加狭缝宽度或提高检测器的负高压，这样就会引起噪声增加，使谱线的信噪比降低，导致精密度降低。

从稳定性考虑 , 灯电流要大 , 谱线强度高 , 负高压低 , 读数稳定 , 特别对于常量与高含量元素分析 ,灯电流宜大些。

灯电流的选择原则是：保证稳定放电和合适的光强输出的前提下，尽可能选用较低的工作电流。

原子吸收分光光度法习题一、填空题1.原子吸收光谱分析是利用基态的待测原于蒸气对光源辐射的吸收进行分析的。

答：特征谱线2.原子吸收光谱分析主要分为类，一类由将试样分解成自由原子，称为分析，另一类依靠将试样气化及分解，称为分析。

答：两，火焰，火焰原子吸收，电加热的石墨管，石墨炉无火焰原子吸收。

3.一般原子吸收光谱仪分为、、、四个主要部分。

答：光源、原子化器，分光系统，检测系统。

4.空心阴极灯是原子吸收光谱仪的，其最主要部分是，它是由制成的。

整个灯熔封后充以或成为一个特殊形式的。

答：光源，空心阴极灯，待测元素本身或其合金，低压氖，氢气，辉光放电管。

5.原子吸收光谱仪中的火焰原子化器是由、及三部分组成。

答：雾化器，雾化室，燃烧器。

6.原子吸收光谱仪中的分光系统也称，其作用是将光源发射的与分开。

答：单色器，待测元素共振线，其它发射线。

7.早期的原子吸收光谱仪使用棱镜为单色器，现在都使用单色器。

前者的色散原理是，后者为。

答：光栅，光的折射，光的衍射。

8.在原子吸收光谱仪中广泛使用做检测器，它的功能是将微弱的信号转换成信号，并有不同程度的。

答：光电倍增管，光，电，放大。

9.原子吸收光谱分析时工作条件的选择主要有的选择、的选择、的选择、的选择及的选择。

答：灯电流，燃烧器高度，助燃气和燃气流量比，吸收波长，单色器狭缝宽度。

10.原子吸收法测定固体或液体试样前，应对样品进行适当处理。

处理方法可用、、、等方法。

答：溶解，灰化，分离，富集。

11.原子吸收光谱分析时产生的干扰主要有干扰，干扰，干扰三种。

答：光谱干扰，物理干扰，化学干扰。

二、判断题1.原子吸收光谱分析定量测定的理论基础是朗伯一比尔定律。

（√）2.在原子吸收分析中，对光源要求辐射线的半宽度比吸收线的半宽度要宽的多。

（×）3.原子吸收光谱仪和752型分光光度计一样，都是以氢弧灯做为光源的。

（×）4.原子吸收法测定时，试样中有一定基体干扰时，要选用工作曲线法进行测定。

火焰原子吸收法最佳实验条件的选择【实验目的】：1.进一步熟练原子吸收分光光度计及其工作软件的使用。

2.学习最佳实验条件的优选试验方法。

【实验原理】：在火焰原子吸收法中分析方法的灵敏度、准确度、干扰情况和分析过程是否简便快速等，除与所用仪器有关外，有很大程度取决于实验条件。

因此最佳实验条件的选择是个重要的问题。

本实验以镁的实验条件优选为例，分别对灯电流、光谱通带、燃烧高度等因素进行优先选择。

在条件优选时，可以进行单个因素的选择，即先将其他因素固定在一个水平上，逐一步变所研究因素的条件，然后测定某一标准溶液的吸光度，选取吸光度大且稳定性好的条件为该因素的最佳工作条件。

【仪器与试剂】：1，仪器：TAS990型原子吸收分光光度计镁空心阴极灯空气压缩机乙炔钢瓶100ml烧杯一个100ml容量瓶3个5ml移液管1支10ml移液管1支10ml吸量管1支。

2，试剂：镁储备液：准确称取于800摄氏度灼烧至衡量的氧化镁1.6583g，滴加1mol/L的HCL至完全溶解，移入1000ml容量瓶中，稀释至标线，摇匀。

此溶液镁的质量浓度为1.000mg/mL【实验内容和操作步骤】：1,配置镁的标准溶液：1.配置质量浓度为0.1000mg/mL镁标准溶液移取10ml质量浓度为1.000mg/mL储备液于100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。

2.配置质量浓度为0.0050mg/mL镁标准溶液移取5ml质量浓度为0.1000mg/mL储备液于100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。

3. .配置质量浓度为0.300vg/mL镁标准溶液移取6ml质量浓度为0.0050mg/mL储备液于100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。

2，安装空心阴极灯：将镁空心阴极灯小心从盒中取出，打开灯源室门，取出一号元素灯引脚，将元素灯引脚对准灯源插座适配插入。

并且灯的健体对准电源插座的键槽，轻轻插入。

如果感觉插入困难，说明操作有误，拔出重新安装。