㊀文章编号:１６７４Ｇ１４８X (２０２０)０２Ｇ０１２３Ｇ０６酶解法制备大豆肽工艺的优化及苦味测定刘公博,张凯跃,丁新宇,王繁业(青岛科技大学化工学院,山东青岛２６６０００)摘㊀要:大豆肽作为大豆蛋白水解后的产物,有着许多大豆蛋白所不具备的优异理化性质与生理功能.本文通过复合蛋白酶㊁风味酶㊁植物蛋白水解酶酶解大豆蛋白制备大豆肽,采用正交试验优化水解工艺条件考察水解度与苦味.结果表明最适酶解工艺条件为:复合蛋白酶与底物的质量比值为０ ０５,水解时间４h ,水解温度５０ħ;风味酶与底物的质量比值为０ ０５,水解时间５h ,水解温度４０ħ.研究结果可为大豆肽的工业生产提供理论支撑.关键词:大豆肽;正交;苦味;水解度中图分类号:T S ２１４．２文献标识码:AD O I :１０．３９６９/J ．I S S N．１６７４Ｇ１４８X．２０２０．０２．００９收稿日期:２０２０Ｇ０３Ｇ１１作者简介:刘公博(１９９９ ),男,山东诸城人,在读本科,研究方向为药物合成与生物催化,E Ｇm a i l :L C _１９０７２９＠１６３．c o m 通信作者:王繁业(１９６４ ),男,山东青岛人,研究员,研究方向为药物合成与生物催化,E Ｇm a i l :f y w a n g８２０９＠１６３．c o m O p t i m u mE n z y m a t i cH y d r o l y s i s o f S o y b e a nP e pt i d e a n dD e t e r m i n a t i o no fB i t t e rT a s t eL I U G o n g b o ,Z H A N G K a i y u e ,D I N G X i n y u ,WA N GF a n ye (C h e m i c a l E n g i n e e r i n g I n s t i t u t e ,Q i n g d a oU n i v e r s i t y of S c i e n c e a n dT e c h n o l og y ,Q i n gd a o ２６６０００,C h i n a )A b s t r a c t :S o ype p t i d e ,a s a p r o d u c t of s o yp r o t e i nh y d r o l y s i s ,h a sm a n y e x c e l l e n t p h y s i c o c h e m i c a l p r o pe r Ｇt i e s a n d p h y s i o l o g i c a lf u n c t i o n s t h a t s o yp r o t e i nd o e s n o t h a v e ．I n t h i s p a p e r ,s o yp e p t i d ew a s p r e p a r e db y e n z y m a t i ch y d r o l y s i s o f s o y p r o t e i nw i t h c o m p l e x p r o t e a s e ,f l a v o u r z y m e a n d p l a n t p r o t e o l y t i c e n z y m e ,a n d o r t h og o n a l t e s tw a s u s e d t o o p t i m i z e th e h y d r o l y si s p r o c e s s c o n d i t i o n s t o i n v e s t i g a t e d t h e d e g r e e o f h yd r o l Ｇy s i s a n db i t te r n e s s ．R e s u l t s s h o w e d t h a t t h e o p t i m u mh y d r o l ys i s c o n d i t i o n sw e r e a s f o l l o w s :t h em a s s r a t i o o f c o m p o u n d p r o t e a s e t os u b s t r a t ew a s０ ０５,h y d r o l y s i s t i m e４h ,t e m pe r a t u r e５０ħ;t h em a s s r a t i oof f l a v o u r z y m e t o s u b s t r a t ew a s ０ ０５,h y d r o l y s i s t i m e ５h ,t e m p e r a t u r e ４０ħ．T h e r e s e a r c h p r o v i d e d t h e o Ｇr e t i c a l s u p p o r t f o r t h e i n d u s t r i a l p r o d u c t i o no f s o y b e a n p e pt i d e s ．K e y w o r d s :s o y b e a n p e p t i d e ;o r t h o g o n a l ;b i t t e r t a s t e ;d e g r e e o f h y d r o l y s i s ㊀㊀随着肽吸收学说的出现,小肽分子对人体各项机能的调节已经成为了新的研究热点.大豆肽因其有着优秀的抗癌[１,２],调节免疫[３,４],降 三高 [５],护肝解酒[６]等作用而饱受关注.但由于国内相关研究开展较晚,生产技术不成熟,导致大豆肽产品的价格昂贵,普及率低.使用蛋白酶水解大豆蛋白是获取大豆肽的主要途径之一,不同种类的酶㊁水解工艺都会影响水解度,且有可能在生产过程中产生苦味[７].本文比较了复合蛋白酶㊁风味酶㊁植物蛋白水解酶对大豆蛋白水解度与苦味的影响,并采用了正交试验优化了水解工艺,为工业生产提供理论参考.１㊀材料与方法１．１㊀材料与试剂大豆分离蛋白,食品级,河南丽轩生物科技有限公司购买;复合蛋白酶㊁风味酶㊁植物蛋白水解酶购于天津诺奥酶生产力促进有限公司;氢氧化钠,分析纯,购于烟台市双双化工有限公司;浓盐酸,优级纯,购于西陇科学股份有限公司;甲醛溶液,分析纯,于国药集团化学试剂有限公司购买;酚酞指示剂,购于天津市标准科技有限公司.青岛农业大学学报(自然科学版)㊀３７(２):１２３~１２８,２０２０J o u r n a l o f Q i n g d a oA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y (N a t u r a lS c i e n c e )１．２㊀仪器与设备电子分析天平:舜宇恒平科学仪器有限公司;恒温加热磁力搅拌器:郑州科泰实验设备有限公司;蒸馏水机:湖南力辰仪器科技有限公司;其他器材:烧杯㊁碱式滴定管㊁容量瓶㊁移液管㊁锥形瓶㊁量筒㊁玻璃棒均来自四川蜀玻(集团)有限责任公司.１．３㊀试验条件１．３．１㊀单因素试验设计由于酶法水解大豆蛋白制备大豆肽影响因素较多,因此本研究采用单因素试验来确定各个因素的最佳条件,研究了水解温度㊁水解时间㊁酶与底物的质量比３个因素对水解度的影响,试验设计按表１ 表３进行.在单因素试验基础上设计正交试验,优化试验过程,得到最佳水解条件.表１㊀复合蛋白酶单因素试验T a b l e１㊀S i n g l e f a c t o r e x p e r i m e n t o f c o m p l e x p r o t e a s e因素F a c t o r s梯度G r a d i e n t不变量I n v a r i a n t水解温度/ħH y d r o l y s i s t e m p e r a t u r e４０４５５０５５６０底物:２g水:１００m L水解时间:４h 酶与底物的质量比值:０．０５水解时间/hH y d r o l y s i s t i m e３４５６７底物:２g水:１００m L水解温度:５５ħ酶与底物的质量比值:０．０５酶与底物的质量比值M a s s r a t i oo f e n z y m e t o s u b s t r a t e０．０３０．０４０．０５０．０６０．０７０．０８底物:２g水:１００m L水解温度:５５ħ时间:４h表２㊀风味酶单因素试验T a b l e２㊀S i n g l e f a c t o r e x p e r i m e n t o f f l a v o u r z y m e因素F a c t o r s梯度G r a d i e n t不变量I n v a r i a n t水解温度/ħH y d r o l y s i s t e m p e r a t u r e４０４５５０５５６０底物:２g水:１００m L水解时间:４h 酶与底物的质量比值:０．０３水解时间/hH y d r o l y s i s t i m e３４５６７底物:２g水:１００m L水解温度:５０ħ酶与底物的质量比值:０．０３酶与底物的质量比值M a s s r a t i oo f e n z y m e t o s u b s t r a t e０．０３０．０４０．０５０．０６０．０７底物:２g水:１００m L水解温度:４５ħ时间:４h表３㊀植物蛋白水解酶单因素试验T a b l e３㊀S i n g l e f a c t o r e x p e r i m e n t o f p l a n t p r o t e o l y t i c e n z y m e因素F a c t o r s梯度G r a d i e n t不变量I n v a r i a n t水解温度/ħH y d r o l y s i s t e m p e r a t u r e４０４５５０５５６０底物:２g水:１００m L水解时间:４h 酶与底物的质量比值:０．０５水解时间/hH y d r o l y s i s t i m e３４５６７底物:２g水:１００m L水解温度:５０ħ酶与底物的质量比值:０．０３酶与底物的质量比值M a s s r a t i oo f e n z y m e t o s u b s t r a t e０．０３０．０４０．０５０．０６０．０７底物:２g水:１００m L水解温度:５５ħ时间:４h１．３．２㊀正交试验设计根据之前单因素试验得出的结果,采用L９(３３)正交表,以水解度为考察指标,选择温度(A)㊁时间(B)㊁酶与底物质量比值(C)进行三因素三水平的正４２１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀青岛农业大学学报(自然科学版)㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀３７卷㊀交试验.正交水平与试验条件见表４㊁表５.表４㊀复合蛋白酶正交试验T a b l e４㊀O r t h o g o n a l t e s t o f c o m p l e x p r o t e a s e水平L e v e l A温度/ħT e m p e r a t u r eB时间/hT i m eC酶与底物质量比值M a s s r a t i oo fe n z y m e t o s u b s t r a t e１４５３０．０４２５０４０．０５３５５５０．０６表５㊀风味酶正交试验T a b l e５㊀O r t h o g o n a l t e s t o f f l a v o u r z y m e水平L e v e l A温度/ħT e m p e r a t u r eB时间/hT i m eC酶与底物质量比值M a s s r a t i oo fe n z y m e t o s u b s t r a t e１４０３０．０３２４５４０．０４３５０５０．０５１．３．３㊀检测方法本次试验采用甲醛滴定法测定水解度(D H)＝[(h－h０)/h t o t]ˑ１００％其中h:采用甲醛滴定法测定的酶解液中的－N H２或－C O O H基团的含量(mm o l/g);h０:采用甲醛滴定法测定的水解前原料中的－N H２或－C O O H基团的含量(mm o l/g);h t o t:每克原料蛋白的肽键物质的量(mm o l/g),对于大豆分离蛋白h t o t＝７ ５[８].１．３．４㊀苦味测定每次试验结束剩余的溶液进行感官分析法测定苦味,并记录.苦味程度以０~５区分,０为最弱,５为最苦.２㊀结果与分析２．１㊀水解温度对水解效果的影响分析由图１可以看出,复合酶蛋白酶(图中简称复合酶)温度在５５ħ以下时水解度随温度升高而增大,高于５５ħ水解度下降.曲线变化平缓,确定温度的范围为４５ħ~５５ħ;风味酶温度在４５ħ以下时水解度随温度升高而增大,高于４５ħ水解度下降.曲线变化平缓,确定温度的范围为４０ħ~５０ħ;植物蛋白水解酶(图中简称植物蛋白酶)水解度几乎不受温度影响,且一直很低.对于复合蛋白酶与风味酶,温度过低时,酶活性不高,反应效率低,水解度随温度升高而升高,直至到达酶最适反应温度;当温度过高时,酶失活导致水解度下降.对于植物蛋白水解酶,应该是它对大豆蛋白无水解能力,所以基本不受条件变化影响.图１㊀温度对水解的影响F i g．１㊀E f f e c t o f t e m p e r a t u r e o nd e g r e e o f h y d r o l y s i s ２．２㊀水解时间对水解效果的影响分析由图２可以看出,复合蛋白酶与风味酶水解度随时间增加而升高,４h后增长速度逐渐放缓,原因是随水解进行,单一酶所能切割的位点逐渐减少,考虑到水解效果与经济成本,复合蛋白酶与风味酶水解时间为４h时较适宜,确定水解时间的范围为３~５h;植物蛋白水解酶水解度很低且随水解时间增加做无规则变化,结合图１我们认为植物蛋白水解酶对大豆蛋白无水解能力,故不再做进一步研究.图２㊀时间对水解度的影响F i g．２㊀E f f e c t o f t i m e o nd e g r e e o f h y d r o l y s i s ２．３㊀酶与底物的质量比对水解效果的影响分析由图３可以看出,复合蛋白酶与底物质量比值５２１㊀２期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀刘公博,等:酶解法制备大豆肽工艺的优化及苦味测定㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀小于０ ０６时,水解度随酶量增加而升高,比值为０ ０６时水解度最高,超过０ ０６出现了抑制现象,水解度降低.确定酶与底物质量比值的范围为０ ０４图３㊀酶与底物的质量比对水解度的影响F i g ．３㊀E f f e c t o fm a s s r a t i o o f e n z y m e t o s u b s t r a t e o nh y d r o l ys i s ~０ ０６;风味酶与底物质量比值小于０ ０５时,水解度随酶量增加而升高,酶与底物质量比值为０ ０５时水解度最高,超过０ ０５出现了抑制现象,水解度降低.确定酶与底物质量比值的范围为０ ０３~０ ０５.酶浓度较低时,水解度随酶浓度升高而升高,反应效率增加,而酶浓度过高又会抑制其自身的反应活性,且增加经济成本.２．４㊀正交试验结果优化２．４．１㊀复合蛋白酶正交优化由表６㊁表７分析可知,三个因素对酶解影响的大小关系为A＞C ＞B ,即温度＞酶与底物质量比＞时间,温度对工艺的影响有显著性差异(P ＜０ ０５),说明温度是复合蛋白酶水解大豆蛋白制备大豆肽的主要影响因素.同时,结合单因素试验结果与实际生产成本,得出复合蛋白酶在温度５０ħ㊁时间４h ㊁酶与底物质量比值０ ０５的情况下酶解效果最好.表６㊀复合蛋白酶正交试验结果与分析T a b l e ６㊀R e s u l t s a n d a n a l y s i s o f o r t h o g o n a l e x p e r i m e n t o f c o m pl e x p r o t e a s e 试验号T e s tN o A 温度/ħT e m p e r a t u r e B 时间/h T i m eC 酶与底物质量比值M a s s r a t i oo f e n z ym e t o s u b s t r a t e 水解度％D e g r e e o f h y d r o l ys i s １４５(１)３(１)０．０４(１)７．４２ʃ０．０３２５０(２)３(１)０．０６(３)１０．２３ʃ０．０５３５５(３)３(１)０．０５(２)９．５２ʃ０．０４４４５(１)４(２)０．０６(３)８．１６ʃ０．０４５５０(２)４(２)０．０５(２)１１．７１ʃ０．０４６５５(３)４(２)０．０４(１)９．８４ʃ０．０３７４５(１)５(３)０．０５(２)８．９０ʃ０．０４８５０(２)５(３)０．０４(１)１０．２９ʃ０．０２９５５(３)５(３)０．０６(３)８．３５ʃ０．０３Ⅰ８．１６９．０６９．１８Ⅱ１０．７４９．９０１０．０４Ⅲ９．２４９．１８８．９１极差０．８６０．２８０．３８主次A＞C ＞B 表７㊀方差分析表T a b l e ７㊀R e s u l t o f a n a l ys i s o f v a r i a n c e 方差来源S o u r c e o f v a r i a n c e离差平方和S u m s o f s qu a r e dd e v i a t i o n s 自由度V a r i a n c e均方M e a n s q u a r e F P A １０．０７６２５．０３８２６．１２８０．０３７B １．２５９２０．６３０３．２６６０．２３４C２．０９３２１．０４７５．４３９０．１５６误差E r r o r０．３８６２０．１９３６２１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀青岛农业大学学报(自然科学版)㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀３７卷㊀２．４．２㊀风味酶正交优化由表８㊁表９分析可知,风味酶三个因素对酶解影响的大小关系为A＞C ＞B ,即温度＞酶与底物质量比＞时间,三个因素对于工艺影响都有显著性差异(P ＜０ ０５).结合单因素试验结果与实际生产成本,得出风味酶在温度４０ħ㊁时间５h ㊁酶与底物质量比值为０ ０５的情况下酶解效果最好.表８㊀风味酶正交试验结果与分析T a b l e ８㊀R e s u l t s a n d a n a l y s i s o f o r t h o g o n a l e x p e r i m e n t o f f l a v o u r z ym e 试验号T e s tN o A 温度/ħT e m p e r a t u r e B 时间/h T i m eC 酶与底物质量比值M a s s r a t i oo f e n z ym e t o s u b s t r a t e 水解度％D e g r e e o f h y d r o l ys i s １４０(１)３(１)０．０３(１)９．３２ʃ０．０４２４０(１)５(３)０．０４(２)１０．４８ʃ０．０３３４０(１)４(２)０．０５(３)１１,９０ʃ０．０３４４５(２)５(３)０．０３(１)８．００ʃ０．０４５４５(２)４(２)０．０４(２)５．８４ʃ０．０３６４５(２)３(１)０．０５(３)７．１９ʃ０．０６７５０(３)４(２)０．０３(１)９．０１ʃ０．０４８５０(３)３(１)０．０４(２)５．３２ʃ０．０３９５０(３)５(３)０．０５(３)１１．４０ʃ０．０２Ⅰ１０．５７７．２５８．７８Ⅱ７．０１８．９２７．２１Ⅲ８．５８９．９６１０．１６极差１．１８０．９００．９９主次A＞C ＞B 表９㊀方差分析表T a b l e ９㊀R e s u l t o f a n a l ys i s o f v a r i a n c e 方差来源S o u r c e o f v a r i a n c e离差平方和S u m s o f s qu a r e dd e v i a t i o n s 自由度V a r i a n c e均方M e a n s q u a r e F P A １９．１６７２９．５８４４１．９５７０．０２３B １０．９０４２５．４５２２３．８６９０．０４０C１３．０６６２６．５３３２８．６０２００３４误差E r r o r０．４５７２０．２２８２．５㊀苦味测定植物蛋白水解酶对大豆蛋白几乎无水解作用,味道与大豆蛋白溶液接近.由图４分析可知,使用复合蛋白酶酶解大豆蛋白,水解度为７％时开始出现明显苦味,８％时达到顶峰,之后苦味逐渐减弱;使用风味酶酶解大豆蛋白,水解度为６％时开始出现明显苦味,７％时达到顶峰,之后苦味逐渐减弱.大豆蛋白在水解过程中,一些疏水性基团由于肽链断开暴露出来,产生苦味.随着水解继续进行,肽链被进一步细切,苦味逐渐减小.复合蛋白酶与风味酶切割位点不同,这使得二者水解产物在苦味出现㊁峰值和减小时的水解度有所不同.图４㊀水解度与苦味关系F i g ．４㊀T h e r e l a t i o nb e t w e e n d e g r e e o f h y d r o l ys i s a n db i t t e r t a s t e ７２１㊀２期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀刘公博,等:酶解法制备大豆肽工艺的优化及苦味测定㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀３㊀结论由以上试验可以得出,复合蛋白酶水解最适条件:酶与底物质量比值０ ０５,水解时间４h,水解温度５０ħ;风味酶水解最适条件:酶与底物质量比值０ ０５,水解时间５h,水解温度４０ħ:植物蛋白水解酶对大豆蛋白水解效果甚微,在最适水解条件下复合蛋白酶与风味酶水解液无明显苦味,可为相关实验与工业生产提供参考.参考文献:[１]R A Y A P R O L US J,H E T T I A R A C H C H Y NS,H O R A XR,e t a l．S o y b e a n p e p t i d ef r a c t i o n s i n h i b i th u m a nb l o o d,b r e a s ta n d p r o s t a t e c a n c e r c e l l p r o l i f e r a t i o n[J]．J o u r n a l o f f o o ds c i e n c e a n d t e c h n o l o g y,２０１７,５４(１):３８Ｇ４４[２]王琳．大豆寡肽(Q R P R㊁H C Q R P R)对H e p G２细胞凋亡的作用及机制的研究[D]．长春:吉林大学,２０１９:３６Ｇ４６[３]朱振平,韩晓英,程东．大豆肽免疫调节作用实验研究[J]．预防医学论坛,２０１７,２３(９):７１０Ｇ７１１,６３６[４]D I L S HA T Y,P A R I D A H,N N R MUH AMMA T A,e t a l．E f f e c t s o f s o y b e a n p e p t i d e o n i mm u n e f u n c t i o n,b r a i n f u n c t i o n, a n dn e u r o c h e m i s t r y i nh e a l t h y v o l u n t e e r s[J]．N u t r i t i o n,２０１２,２８(２):１５４Ｇ１５９[５]D A V I SJ,H I G G I N B O T HAM A,O＇C O N N O R T,e ta l．S o y p r o t e i na n di s o f l a v o n e s i n f l u e n c ea d i p o s i t y a n dd e v e l o p m e n to f m e t a b o l i c s y n d r o m e i nt h eo b e s em a l eZ D Fr a t[J]．A n n N u t r M e t a b,２００７,５１:４２Ｇ５２[６]S P E L L MA ND,O C U I N NG,F I T Z G E R A L DRJ．B i t t e r n e s s i nB a c i l l u s p r o t e i n a s e h y d r o l y s a t e so f w h e y p r o t e i n s[J]．F o o dC h e m i s t r y,２００８,１１４(２):４４０Ｇ４４６[７]雷海容,张枫燃．高纯度大豆低聚肽制备及其醒酒机理的研究[J]．长春大学学报,２０１７,２７(１０):２２Ｇ２７[８]姚玉静,崔春,邱礼平,等．p HＧs t a t法和甲醛滴定法测定大豆蛋白水解度准确性比较[J]．食品工业科技,２００８(９):２６８Ｇ２７０(上接１２２页)３㊀结论本研究通过正交试验优化得出,R f l p对鲜榨猕猴桃汁中氯吡脲具有较好的降解效果,R f l p条件为电压１７０V㊁极距２c m㊁处理４m i n时,降解率为８７ ５％,处理前后鲜榨猕猴桃汁的色泽㊁总酸㊁维生素C㊁总酚含量没有显著性变化,可溶性固形物含量增加了７％,基本保持了其原有的色香味及营养成分.R f l p加工技术不仅能杀灭果蔬汁的食源性致病菌,而且还能降解其有害化学残留,是一种绿色㊁高效的非热力加工技术.参考文献:[１]李钊君．四川主要果蔬植物生长调节剂应用情况及其残留分析研究[D]．雅安:四川农业大学,２０１５[２]Q I C O N G HU,WJ AM E SN E L S O N,E L I A STS P I L I O T I S．F o rＧc h l o r f e n u r o na l t e r s m a mm a l i a ns e p t i na s s e m b l y,o r g a n i z a t i o n, a n dd y n a m i c s[J]．J o u r n a lo fB i o l o g i c a lC h e m i s t r y,２００８,２８３(４３):２９５６３Ｇ２９５７１[３]马强,孙厚良,赵丽芳,等．S e p t i n基因家族的功能及其与人类疾病关系的研究进展[J]．重庆医学,２０１６,４５(２５):３５７０Ｇ３５７３[４]L U HA N,S O N A LP A T I L,D A N I E L A B O E HM,e t a l．M e c h aＧn i s m so f i n a c t i v a t i o nb y h i g hＧv o l t a g ea t m o s p h e r i cc o l d p l a s m a d i f f e r f o r E s c h e r i c h i a c o l i a n d S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s[J]．A p p l i e d a n d e n v i r o n m e n t a lm i c r o b i o l o g y,２０１６,８２(２):４５０Ｇ４５８[５]S E AC M I N,S IH Y E O NR O H,B R E N D A N A N I E M I R A,e t a l．D i e l e c t r i cb a r r i e r d i s c h a r g e a t m o s p h e r i c c o l d p l a s m ai n h i b i t sE s c h e r i c h i ac o l i O１５７:H７,S a l m o n e l l a,L i s t e r i a m o n o c y t oＧg e n e s,a n d T u l a n ev i r u s i n R o m a i n el e t t u c e[J]．I n t e r n a t i o n a l j o u r n a l o f f o o dm i c r o b i o l o g y,２０１６,２３７(１１):１１４Ｇ１２０[６]T H OMA SＧP O P OE,M E N D O NÇA A,M I S R A N,e t a l．I n a c t iＧv a t i o no f S h i g aＧt o x i nＧp r o d u c i n g E s c h e r i c h i a c o l i,S a l m o n e l l a e nＧt e r i c a a n dn a t u r a lm i c r o f l o r ao nt e m p e r e d w h e a t g r a i n sb y a tＧm o s p h e r i c c o l d p l a s m a[J]．F o o dC o n t r o l,２０１９,１０４:２３１Ｇ２３９[７]张志伟．常压低温等离子体对鲜切胡萝卜表面金黄色葡萄球菌的杀菌效果及品质影响[J]．粮油食品科技,２０１８,２６(３):５０Ｇ５５[８]孙艳,张志伟,王世清．常压低温等离子体对黄瓜表面大肠杆菌杀菌效果及品质的影响[J]．粮油食品科技,２０１８,２６(１):６１Ｇ６７[９]刘真,王世清,肖军霞,等．花生中的物质成分对低温射频等离子体降解黄曲霉毒素B１的影响[J]．食品科学,２０１６,３７(２１):２１９Ｇ２２３[１０]陈扬达,王旎,陈建东,等．不同孔径H Z S MＧ５协同低温等离子体催化降解甲苯性能研究[J]．环境科学学报,２０１７,３７(２):５０３Ｇ５１１[１１]杨丽霞,岳田利,袁亚宏,等．响应面试验优化失活酵母吸附猕猴桃汁中氯吡脲条件[J]．食品科学,２０１６,３７(４):１６Ｇ２１[１２]L IM i n g h e,G U OX i a o d a n,C H E N Y a j i n g,e t a l．T h e d e g r a d aＧt i o no f f o r c h l o r f e n u r o n i n t h em o d e l k i w i f r u i t j u i c e b y u l t r a s o nＧi c t r e a t m e n t[J]．J o u r n a l o fF o o dP r o c e s s i n g a n dP r e s e r v a t i o n．２０２０,３;d o i:１０．１１１１/j f p p．１４４２４[１３]王楠,胡坪,国欣,等．Q u E C h E R S H P L C法快速检测猕猴桃中氯吡脲残留[J]．食品工业,２０１４,３５(５):２３４Ｇ２３７[１４]郭彩华,卢珍华,伍菱,等．紫薯花青素的提取及其在V c含量测定中的应用[J]．食品科学,２０１６,３７(９):１３４Ｇ１３８[１５]赵晓丹,刘夏衍,陈芳,等．超高压和高温短时杀菌对绿色复合果蔬汁的杀菌效果与品质影响[J]．食品工业科技,２０１９,(５):１１４Ｇ１２３８２１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀青岛农业大学学报(自然科学版)㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀３７卷㊀。
![一种利用固定化酶脱除水酶法大豆多肽苦味的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s1/m/0c57bb4a0029bd64793e2c68.png)
