基因工程原理习题参考答案

第一章绪论名词解释：1.基因操作：将在细胞外产生的核酸（物质）分子插入到病毒，质粒或其它载体系统中，再整合到特定的宿主中，从而形成一种新的可连续繁殖的有机体。

2.间断基因：序列中间插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区，使一个基因分隔成不连续的若干区段。

我们称这种编码序列不连续的基因为间断基因。

3.启动子：DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。

4.亚克隆：当初始克隆中的外源DNA片段较长，含有许多目的基因以外的DNA片段时，在诸如表达、序列分析和突变等操作中不便进行，将目的基因所对应的一小段DNA找出来，这个过程叫“亚克隆”。

填空题：1.基因操作的核心部分是基因克隆，基因克隆的基本要点有（克隆基因的类型），（受体的选择）和（载体的选择）。

2.（基因）是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。

它可以是连续的，也可以是（不连续的）；可以是（DNA），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（存在于染色体之外如质粒、噬菌体）。

3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（表达）、（调控）、（检测）和（改造）等与基因研究相关的内容。

4.启动子是指（基因转录过程中控制起始的部位）。

通常一个基因是否表达，（转录起始）是关键的一步，是起决定作用的。

在转录过程中，启动子还是（RNA聚合酶）的结合位点。

5.原核生物的RNA聚合酶主要由两部分组成：（核心酶）和（σ因子），其中σ-因子并不参与RNA的合成，它的作用主要是（识别要转录的起始位点）。

6.从（启动区）到（终止区）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其中可包括一个或者多个基因。

7.转录终止子主要有两种，一种是（依赖ρ因子），另一种是（不依赖ρ因子）。

8.基因的书写方式，通常是写出的DNA序列总是与（mRNA）相同的那条链，方向是从（5'）到（3'）。

对于碱基的位置，一般自转录起始点向两个方向编号，其中转录起始点定为（+1），（在起始点上游第一个碱基）定为-1。

基因工程习题及参考答案02工具酶部分——限制性内切核酸酶一、填空题1．严格地说限制性内切核酸酶(restriction endonuclease)是指已被证明是的酶。

基因工程中把那些具有识别的内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。

2．年Luria 和Human 在T 偶数噬菌体对大肠杆菌感染实验中首次发现了细菌的现象。

3．1970 年，Smith 和Wilcox 从流感嗜血杆菌中分离到一种限制酶，能够特异性的切割DNA，这个酶后来被命名为，这是第一个分离到的Ⅱ类限制性内切核酸酶。

4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的。

5．Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小．一般在20~40kDa，通常由亚基所组成。

它们的作用底物为双链DNA，极少数Ⅱ类酶也可作用于单链DNA，或DNA／RNA 杂合双链。

这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，Ⅱ类酶既具有专一性，也具有专一性，一般在识别序列内切割。

切割的方式有，产生末端的DNA 片段或的DNA片段。

作用时需要作辅助因子，但不需要和。

6．完全的回文序列具有两个基本的特点，就是：(1)(2) 。

7．Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸酶。

根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别序列具有倾向，即它们在识别序列中含量较高。

8．EcoK 是I 类限制性内切核酸酶，分子组成是α2 β2 γ，分子量300kDa。

在这些亚基中，α亚基具有作用；β亚基具有的活性；γ亚基的作用则是。

9．个体之间DNA 限制性片段长度的差异叫。

10．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自，第二、第三两个字母取自，第四个字母则用表示。

11．限制性内切核酸酶Acy I 识别的序列是5’—GRCGYG-3’，其中R ，Y 。

基因工程原理练习题及其答案一、填空题1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。

2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。

3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。

4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。

5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。

6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。

7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。

8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。

9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。

10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。

11．EGTA是____________离子螯合剂。

12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。

13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。

14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。

基因工程的原理及技术练习题1．下列关于限制酶的说法正确的是（）A.限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键【答案】B【解析】限制酶主要从原核生物中分化出来，A错误；一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，B正确；不同的限制酶切割DNA后会形成黏性末端、平末端，C错误；限制酶的作用部位是磷酸二酯键，D错误，故选B。

2．下列叙述不正确的是（）A.质粒在宿主细胞内可整合到染色体DNA上B.质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器C.基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的D.烟草花叶病毒可作为基因工程中的运载体【答案】B【解析】质粒是细胞中的小型环状DNA，进入细胞后可以整合到宿主细胞的染色体DNA上，A正确。

质粒是DNA，不是细胞器，B错误。

质粒一般不能直接用于基因工程，所以需要人工的改造，C正确。

在基因工程中可以做运载体的有：质粒、动植物病毒、λ噬菌体衍生物，烟草花叶病毒是植物病毒，可以做运载体，D正确。

3．下列有关基因工程的相关叙述，不正确的是（）A.目的基因主要指编码蛋白质的结构基因B.基因表达载体的构建是基因工程的核心C.限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸D.DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键【答案】D【解析】目的基因要表达目的性状，故A正确。

目的基因依赖基因表达载体导入受体细胞，故B正确。

目前发现的限制酶都是切割DNA的酶，不能切割烟草花叶病毒的RNA，故C正确。

DNA连接酶可催化脱氧核糖和磷酸之间形成磷酸二酯键，故D错误。

4．下列技术中，不是依据DNA分子杂交原理的是（）A.检测目的基因是否导入了受体细胞B.检测目的基因是否转录出了mRNAC.检测目的基因是否翻译合成蛋白质D.快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量【答案】C【解析】用目的基因制成基因探针，依据碱基互补配对原则，检测目的基因是否导入了受体细胞、是否转录出了mRNA、快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量，而目的基因是否翻译合成蛋白质的检测是用抗原-抗体的杂交实验，虽然也属于分子水平的检测，但不是依据DNA分子杂交的原理。

第一章1.1972年，P. Berg领导的研究小组在世界上第一次成功地实现了DNA体外重组。

( )答案:对2.基因工程诞生的意义毫不逊色于有史以来的任何一次技术革命。

( )答案:对3.基因工程受体只能是单个细胞，而不能是组织、器官、更不能是个体。

( )答案:错4.世界上第一例转基因植物是转基因烟草。

( )答案:对5.世界上第一个转基因动物是转基因小鼠。

( )答案:对第二章1.最早分离得到的限制性核酸内切酶是( )型限制性核酸内切酶。

答案:Ⅰ2.分离得到的第一个Ⅱ型限制性核酸内切酶是( )。

答案:Hind Ⅱ3.进行不完全酶切消化时可采取的方法有( )。

答案:降低反应温度;缩短反应时间;减少酶的用量;增加反应体积4.在大肠杆菌及其它细菌中，DNA连接酶催化的连接反应是利用NAD(或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)作能源。

在动物细胞及噬菌体中，则是利用ATP(或腺苷三磷酸)作能源。

答案:对5.选择在12℃~16℃之间用DNA连接酶进行黏性末端连接反应，是为了达到( )之间的平衡。

答案:黏性末端的退火;反应速率;酶活性第三章1.基因工程中的质粒载体必须包含哪些组成部分( )。

答案:选择标记基因;酶切插入位点;复制必需区2.第一个用于基因克隆的天然质粒是( )质粒。

答案:pSC1013.在λ噬菌体裂解周期的早期，环状的λ DNA分子按( )方式进行复制答案:θ型双向4.在λ噬菌体裂解周期的晚期，环状的λ DNA分子按( )方式进行复制。

答案:滚环5.λ噬菌体头部外壳蛋白只能容纳相当于λ噬菌体基因组大小的( )比例的DNA分子。

答案:75%~105%第五章1.全部DNA双链完全解离时的温度称为解链温度，以Tm表示。

答案:错2.PCR扩增DNA的特异性由引物决定，扩增DNA的长度由使用的聚合酶决定。

答案:错3.普通Taq DNA聚合酶的有效扩增范围在2kb左右，但扩增1kb之内的片段效率最高。

答案:对4.在PCR扩增反应起始时和结束时通常设置预变性和终延伸的处理。

基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。

答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。

答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。

答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。

在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。

2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。

四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。

答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。

重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。

然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。

《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。

基因工程复习题题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。

第一章绪论1.名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。

遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。

包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。

狭义：基因工程。

克隆：无性(繁殖)系或纯系。

指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。

2．什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。

A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。

4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释：限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。

回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。

同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。

同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。

平末端：DNA片段的末端是平齐的。

基因工程原理习题集1、ＤNＡ分子克隆技术:克隆，指含有单一得ＤNA重组体得无性繁殖系,或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系得过程。

ＤNＡ分子克隆技术也称基因克隆技术,就是在体外将DNＡ分子片段与载体D ＮA片段连接,转入细胞获得大量拷贝得过程。

其基本步骤包括:制备目得基因→将目得基因与载体用限制性内切酶切割与连接,制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增与表达。

载体在细胞内自我复制,并带动重组得分子片段共同增殖,从而产生大量得DＮA分子片段。

主要目得就是获得某一基因或ＤＮA片段得大量拷贝,有了这些与亲本分子完全相同得分子克隆,就可以深入分析基因得结构与功能,随着引入得DＮA片段不同，有两种DNA库，一种就是基因组文库,另一种就是cDNA库。

2、分子杂交:两条不同来源得DNA(或RNA)链或ＤNA与RNA之间存在互补顺序时,在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子,这种分子称为杂交分子。

形成杂交分子得过程称为分子杂交。

３、限制性片段长度多态性:从不同个体制备得DNＡ,使用同一种限制性内切酶酶切，切得得片段长度各不相同。

酶切片段得长度可以作为物理图谱或者连接图谱中得标记子。

通常就是在酶切位点处发生突变而引发得。

4、报告基因:一种编码可被检测得蛋白质或酶得基因,也就就是说,就是一个表达产物非常容易被鉴定得基因、5、多聚酶链式反应(PCR）:一种体外扩增DＮA得方法。

PCR使用一种耐热得多聚酶，以及两个单链引物。

以过高温变性将模板ＤNA分离成两条链。

低温退火使得引物与一条模板单链结合,然后就是中温延伸，反应液得游离核苷酸紧接着引物从5／端到3/端合成一条互补得新链。

而新合成得DNA又可以继续进行上述循环,因此DNA得数目不断倍增。

6、核酸得凝胶电泳:将某种分子放到特定得电场中，它就会以一定得速度向适当得电极移动。

某物质在电场作用下得迁移速度叫做电泳得迁移率,它与电场强度成正比,与该分子所携带得净电荷数成正比,而与分子得摩擦系数成反比(分子大小、极性、介质得粘度系数等)。

基因工程原理习题参考答案资料基因工程原理习题集参考答案一、名词解释 1 、 DNA 分子克隆技术：克隆，指含有单一的组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。

外将DNA 分子片段与载体DNA 片段连接，括：制备目的基因7将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成 DNA 重组7导入宿主细胞7筛选、鉴定7扩增和表达。

载体在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的 DNA 分子片段。

主要目的是获得某一基因或 DNA 片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的 DNA 片段不同，有两种 DNA 库，一种是基因组文库，另一种是 DNA 重组体的无性繁殖系，或指将DNA 重 DNA 分子克隆技术也称基因克隆技术，是在体转入细胞获得大量拷贝的过程。

其基本步骤包cDNA 库。

2、分子杂交：两条不同来源的 DNA (或RNA )链或DNA 与RNA 之间存在互补顺序时, 在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，过程称为分子杂交。

这种分子称为杂交分子。

形成杂交分子的DNA ，使用同一种限制性内切酶酶切，切得通常是3、限制性片段长度多态性：从不同个体制备的的片段长度各不相同。

酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子。

在酶切位点处发生突变而引发的。

4、报告基因：一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应(PCR ): 一种体外扩增DNA 的方法。

PCR 使用一种耐热的多聚酶，以及两个单链引物。

以过高温变性将模板 DNA 分离成两条链。

低温退火使得引物和一条模板单链结合，然后是中温延伸，反应液的游离核苷酸紧接着引物从 5/端到 3/端合成一条互补的新链。

而新合成的DNA 又可以继续进行上述循环，因此 DNA 的数目不断倍增。

6、核酸的凝胶电泳：将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动。