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第一章基因工程(时间：60分钟，满分：100分)一、选择题(共20小题，每小题2.5分，共50分)1.下列有关基因工程和酶的相关叙述，正确的是（）A.同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具备专一性B.载体的化学本质与载体蛋白相同C.限制性核酸内切酶不能切割烟草花叶病毒的核酸D.DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键解析：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割位点上切割DNA分子，因此具有专一性；载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，成分不单一，载体蛋白的本质是蛋白质；烟草花叶病毒的核酸为RNA，而限制性核酸内切酶不能切割RNA；DNA连接酶可催化具有互补黏性末端或平口末端的DNA 片段间磷酸二酯键的形成。
答案：C2.下列判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法，不属于分子检测的是（）A.通过观察害虫吃棉花叶是否死亡B.检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带C.检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D.检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带解析：通过观察害虫吃棉花叶是否死亡判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组，属于个体水平的检测。
答案：A3.下列哪项与基因工程无关（）A.培养利用“工程菌”生产胰岛素B.基因治疗C.蛋白质工程D.杂交育种解析：杂交育种的原理是基因重组，即通过杂交将生物体的优良性状集中在一个个体上，与基因工程无关。
答案：D4.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。
下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（）A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白解析：只有在受体细胞中检测到由目的基因控制合成的蛋白质，才能说明目的基因完成表达。
答案：D5.以下蛋白质工程中目前已成功的是（）A.对胰岛素进行改造，生产速效型药品B.蛋白质工程应用于微电子方面C.体外耐保存的干扰素D.用蛋白质工程生产高赖氨酸玉米解析：B、C、D目前尚未实现，只是蛋白质工程的发展前景，有待于进一步研究和设计。
高二生物基因工程练习题基因工程是一种通过改变生物体的遗传信息来获得特定目标的技术方法。
它可以被应用于医学、农业、工业等领域，为人类带来巨大的影响和改变。
本文将介绍一些高二生物基因工程练习题，以帮助学生更好地理解和掌握这一知识点。
第一题：请设计一个基因工程实验，将人类胰岛素基因导入大肠杆菌中，并使大肠杆菌能够大量产生胰岛素。
解答：要将人类胰岛素基因导入大肠杆菌中，首先需要获得人类胰岛素基因的DNA序列。
可以通过分离人类胰岛素基因的mRNA，逆转录为cDNA，并进行PCR扩增得到完整的胰岛素基因。
接下来，需要将胰岛素基因与适当的表达载体连接。
选择适宜的限制酶对载体进行线性化，再与胰岛素基因进行连接，利用DNA连接酶使两者连接成一个完整的质粒。
接下来，将质粒导入大肠杆菌中。
可以通过热冲击、电穿孔或者转化等方法将质粒导入大肠杆菌中，并利用选择性培养基筛选出带有胰岛素基因的转化子。
最后，通过培养大肠杆菌，提取并纯化胰岛素。
可以通过机械方法破碎细胞壁，离心去除细胞器和细胞碎片，再利用层析等技术手段纯化出胰岛素。
第二题：基因工程技术在农业领域也有广泛应用。
请设计一个基因工程实验，增加作物的抗虫能力。
解答：要增加作物的抗虫能力，可以选择合适的抗虫基因，并将其导入作物的染色体中。
首先，选择具有抗虫能力的基因，如Bt基因。
Bt基因可以通过特定的细菌株提供，或者利用PCR技术合成。
然后，将抗虫基因与选择性标记基因进行连接，并将其插入适当的表达载体中。
选择性基因可以使转基因植物在筛选培养基上产生抗性，方便筛选。
将载体导入植物体细胞中。
可以利用冷冻法、冲击法或者农杆菌介导转化法等技术将载体导入植物体细胞。
最后，通过筛选培养基培养转基因植株，并进行抗虫性测试。
可以通过饲养害虫或者喷洒虫食物进行实验观察，比较转基因植株与野生型植株之间的虫害程度。
以上是两道高二生物基因工程练习题的解答。
通过这些实验题，学生不仅可以巩固对基因工程技术原理的理解，还能够培养实验设计和实施的能力。
专题1 基因工程 1。
5 蛋白质工程的崛起一、选择题1．蛋白质工程的实质是(）A．改造蛋白质B．改造mRNAC．改造基因D．改变氨基酸解析：蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特殊要求，对蛋白质的结构进行分子设计，由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质结构进行设计改造，必须从基因入手。
答案:C2．葡萄糖异构酶（GⅠ)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,科学家对GⅠ基因进行体外定点诱变,以脯氨酸（Prol38)替代Gly138，含突变体的重组质粒在大肠杆菌中表达,结果最适反应温度提高10～12 ℃。
这属于生物工程中的（)A．基因工程B．蛋白质工程C．发酵工程D．酶工程解析：酶工程的重点在于对已存在的酶合理充分利用（如：加酶洗衣粉、嫩肉粉等)，而蛋白质工程的重点则在于对已存在的蛋白质分子的改造。
通常所说的酶工程是用工程菌生产酶制剂，而没有经过由酶的功能来设计酶的分子结构，然后由酶的分子结构来确定相应基因的碱基序列等步骤。
答案:B3．下列哪项不是蛋白质工程中的蛋白质分子设计(）A．对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换B．对不同来源的蛋白质分子进行拼接组装C．从氨基酸的排列顺序开始设计全新蛋白质D．设计控制蛋白质合成的基因中的核苷酸序列解析：蛋白质工程的重要方面是蛋白质的分子设计,它可以分为三类：一是对已知蛋白质进行少数氨基酸的替换,二是对不同来源的蛋白质进行拼接组装，三是设计制造自然界中全新的蛋白质。
D项中的内容是合成基因，属于基因工程.答案：D4．下列不属于蛋白质工程成果的是(）A．改造酶的结构，提高酶的热稳定性B．生产出鼠—人嵌合抗体C．将t。
PA分子中的天冬酰胺替换为谷氨酰胺D．蛋白酶洗衣粉容易洗掉奶渍、血渍解析:A、B、C三项所述都是对现存的蛋白质分子进行改造，属于蛋白质工程的成果。
而加酶洗衣粉属于酶制剂的应用，属于酶工程的成果.答案：D5．下列关于蛋白质工程应用的叙述错误的是（）A．蛋白质工程可以改造酶的结构,提高酶的热稳定性B．通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性C．利用蛋白质工程可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素D．蛋白质工程可以对胰岛素进行改造和修饰，合成速效型胰岛素制剂解析：蛋白质工程是依据人们设计的蛋白质分子结构来改造基因，进而控制合成或改变自然界中的蛋白质，而在大肠杆菌中生产人胰岛素利用基因工程技术便可达到。
生物选修三第一章周测出题人：植秀燊一、单项选择题（本部分共24个小题，每小题2分，共48分。
每小题只有一项选项符合题意）1．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指( )A、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B、噬菌体、质粒、DNA连接酶C、DNA限制酶、RNA连接酶、质粒D、DNA限制酶、DNA连接酶、质粒2．基因工程的实质是（）A、基因重组B、基因突变C、产生新的蛋白质D、产生新的基因3．下列关于限制酶的说法不正确的是( )A.限制酶存在于各种生物中，尤其在微生物细胞中分布最多B.不同的限制酶识别不同的核苷酸序列C.限制酶能识别不同的核苷酸序列，体现了酶的专一性D.限制酶的作用只是用来提取目的基因4．转基因动物基因时的受体细胞是( )A、受精卵B、精细胞C、卵细胞D、体细胞5．运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是( )A、Bt基因的化学成分是蛋白质B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物6．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( )A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制C、使目的基因容易被检测出来D、使目的基因容易成功表达7．下列与基因工程无关的是( )A、培养利用“工程菌”生产胰岛素B、基因治疗C、蛋白质工程D、杂交育种8．上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，转基因动物是指（）A．提供基因的动物B．基因组中增加外源基因的动物C．能产生白蛋白的动物D．能表达基因信息的动物9．治疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传疾病的根本途径是（）A、口服化学药物B、注射化学药物C、利用辐射或药物诱发致病基因突变D、采取基因疗法替换致病基因10．当前医学上，蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂，则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是（）A、都与天然产物完全相同B、都与天然产物不相同C、基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同D、基因工程药物与天然产物不相同，蛋白质工程药物与天然产物完全相同11．有关基因工程的成果及应用的说法不正确的是（）①、用基因工程方法培育的抗虫植物和能抗病毒的植物②、基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培育体型巨大、品质优良的动物③、任何一种假单孢杆菌都能分解四种石油成分，所以假单孢杆菌是“超级菌”④、基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物A.①②B.③④C.②③D.②④12．下图所示限制酶切割基因分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列和切点是( )A．CTTAAG，切点在C和T之间 B．CTTAAG，切点在G和A之间C．GAATTC，切点在G和A之间 D．GAATTC，切点在C和T之间13．科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。
考点79 基因工程（一）高考频度：★★★☆☆ 难易程度：★★★☆☆1．基因工程的概念（1）供体：提供目的基因。
（2）操作环境：体外。
（3）操作水平：分子水平。
（4）原理：基因重组。
（5）受体：表达目的基因。
（6）本质：性状在受体体内的表达。
（7）优点：克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造生物的遗传性状。
2．DNA 重组技术的基本工具（1）限制性核酸内切酶(简称：限制酶)①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
②作用：识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③结果：产生黏性末端或平末端。
（2）DNA 连接酶①种类：按来源可分为E ·coli DNA 连接酶和T 4DNA 连接酶。
②作用：将双链DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③DNA 连接酶和限制酶的关系（3）载体①种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
②质粒的特点⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因考向一 限制性核酸内切酶、DNA 连接酶等酶的作用1．如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是A．①②③④B．①②④③C．①④②③D．①④③②【参考答案】C【试题解析】限制酶可在特定位点对DNA分子进行切割；DNA聚合酶在DNA分子复制时将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链；DNA连接酶可将限制酶切开的磷酸二酯键连接在一起；解旋酶的作用是将DNA 双链解开螺旋，为复制或转录提供模板。
解题技巧确定限制酶的种类（1）根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。
②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。
③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和Eco RⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。
基因工程的应用［基础全练］1．下列哪一项不是动物基因工程的应用前景( )A．转入外源生长激素基因的鲤鱼B．将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组C．乳腺生物反应器表达医药产品D．利用工程菌生产干扰素解析：转入外源生长激素基因的鲤鱼是动物基因工程在提高动物生长速度方面的应用，选项A正确；将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组是动物基因工程在改善畜产品品质方面的应用,选项B正确;乳腺生物反应器表达医药产品是动物基因工程在药物生产上的应用，选项C正确;利用工程菌生产干扰素是基因工程制药的代表，属于微生物基因工程的应用，不属于动物基因工程的应用，选项D错误。
答案：D2．下列转基因植物与所选用的目的基因对应错误的是( ）A．抗虫棉-—Bt毒蛋白基因B．抗病转基因烟草——几丁质酶基因C．抗盐碱和抗旱植物——调节细胞渗透压的基因D．耐寒的番茄——抗冻基因解析：抗病转基因植物常使用病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因。
几丁质酶基因及抗毒素合成基因一般用作抗真菌转基因植物的目的基因，故选项B错.答案:B3．我国转基因技术发展态势良好，农业部依法批准发放了转植酸酶基因玉米、转基因抗虫水稻的生产应用安全证书。
下列关于转基因玉米和转基因水稻的叙述,不正确的是（)A．转植酸酶基因玉米的外源基因是植酸酶基因B．转基因抗虫水稻减少了化学农药的使用，减轻了环境污染C．转基因抗虫水稻是否具有抗虫性，可通过饲养卷叶螟进行检测D．转基因抗虫水稻的外源基因是几丁质酶基因解析：转植酸酶基因玉米的外源基因是植酸酶基因，转基因抗虫水稻的外源基因是Bt毒蛋白基因，而几丁质酶基因是抗真菌转基因植物常用的基因，A正确，D错误；转基因抗虫水稻减少了农药的使用，减轻了环境污染，同时降低了农业生产的成本，B正确；检测目的基因是否表达最简便的方法是进行个体水平的检测，C正确。
答案：D4．运用基因工程技术,可让羊合成并由乳腺分泌抗体.相关叙述正确的是( )①该技术将定向改造生物的性状②限制酶和DNA聚合酶是构建基因表达载体必需的工具酶③受精卵是理想的受体细胞④目的基因与运载体混合后，只能得到一种重组DNA分子A．①③B．①④C．③④ D．①②解析：基因工程可以定向改造生物的性状，①正确；限制酶和DNA 连接酶是构建基因表达载体必需的工具酶，②错误;转基因动物中常用的受体细胞是受精卵，③正确;目的基因与运载体混合后，可能得到三种DNA分子：外源DNA自连、重组DNA、运载体DNA自连，④错误。
高中生物选修三现代生物技术专题全套教学案含单元检测专题一基因工程本专题包括基因工程的发展过程；DNA重组技术的基本工具；基因工程的基本操作程序；基因工程的应用；蛋白质工程的崛起等部分。
b5E2RGbCAP基因工程是一门20世纪70年代以来新兴的生物科学与工程技术相结合的科学。
也叫DNA重组技术。
它是按照人类的意愿，将某种基因有计划地转移到另一种生物中去的新技术。
现已成为生命科学中发展最快、最前沿的学科，有关生物工程的内容，己成为近几年生物高考的热点内容。
其中基因工程的操作工具和基因工程操作的基本步骤以及基因工程的成果及应用前景将是近年命题的新热点plEanqFDPw基因工程操作的三种基本工具，四项基本操作程序等内容将成为考查学生分析综合问题能力的材料；另外，针对生物工程在医药、食品、农林等高新技术产业中的应用，运用有关的生物知识指导生产和实践，对有关的生产方案、生产过程进行分析、综合评价，这也是高考的另一热点。
有关基因工程的备考，今后高考中可能涉及到本考题的热点问题，有如下几个方面：DXDiTa9E3d1•基因工程的基本步骤：目的基因的获取、基因表达运载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因表达的检测与鉴定几个步骤。
RTCrpUDGiT2•转基因技术的应用：（1）转基因动植物，如抗虫、抗病、抗逆、抗除草剂，抗倒伏的植物；产肉、产蛋量高、生长快、耐粗饲料的动物；此外，转基因动物为人类异体器官移植提供了可能。
（2）基因药物：如人造胰岛素、人造生长激素、溶血栓的尿激酶原等。
（3）基因治疗：美国对复合型免疫缺陷症的治疗；糖尿病的治疗：许多科学家希望利用基因工程手段将正常的合成胰岛素基因导入患者体内，并准确表达，以此来修复或替代失去正常功能的胰岛B细胞，从而维持机体血糖平衡。
（4）利用遗传工程培养转基因固氮绿色植物的展望。
地球上的固氮途径有三条：生物固氮、工业固氮、高能固氮。
其中，生物固氮是植物可利用氮的主要来源。
专题1 基因工程一、选择题：〔单项选择题〕1.在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶2.基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④D.①②④3.有关基因工程的表示正确的答案是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4.如下哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA5.基因工程是在DNA分子水平上进展设计施工的。
在基因操作的根本步骤中，不进展碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达6.不是基因工程方法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗7.在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8.如下哪项表示不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点9.水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能到达检测疾病的目的。
这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成β—球蛋白的DNAD.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11.基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内别离出来，这要利用限制性内切酶。
分子生物学与基因工程试题库（1）一、选择题(单选或多选) (每题2分，共计20分)1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是：( )(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂(b)DNA突变导致毒性丧失(c)生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子(e)真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2. tRNA参与的反应有：( )(a)转录(b)反转录(c)翻译(d)前体mRNA的剪接(e)复制3. DNA的复制：( )(a)包括一个双螺旋中两条子链的合成(b)遵循新的子链与其亲本链相配对的原则(c)依赖于物种特异的遗传密码(d)是碱基错配最主要的来源(e)是一个描述基因表达的过程4. 关于DNA的修复，下列描述中，哪些是不正确的?( )(a)UV照射可以引起嘧啶碱基的交联(b)DNA聚合酶Ⅲ可以修复单链的断裂(c)双链的断裂可以被DNA聚合酶Ⅱ修复(d)DNA的修复过程中需要DNA连接酶(e)细菌可以用一种核酸内切酶来除去受损伤的碱基(f)糖苷酶可以切除DNA中单个损伤的碱基5. 理论上自发突变是随机发生，并均匀分布于基因组中。
然而，精细分析表明，DNA中的某些位点较其他位点更易发生突变。
这些“热点”突变是由于：( )(a) DNA的空间结构选择性地使部分DNA暴露在诱变因子的作用下(b) 存在可被进一步修饰(如脱氨基)的已修饰碱基(如甲基化)，导致碱基转换并通过复制产生突变(c) 被修饰(如甲基化)碱基的存在，易于发生错配复制并因此产生突变(d) DNA中富含A-T区域的存在，使得自发解链及错配碱基的掺人(e) 对沉默突变的选择压力很低，因此热点多为密码子第三位的碱基6.λ阻遏蛋白是一种DNA结合蛋白，它属于以下哪一组?( )(a)螺旋—环—螺旋蛋白(b)螺旋—转角—螺旋蛋白(c)锌指蛋白(d)亮氨酸拉链蛋白(e)DNA脱甲基化酶7. 标出以下所有正确表述： ( )(a)转录是以半保留方式获得序列相同的两条DNA链的过程(b)依赖DNA的DNA聚合酶是多亚基酶，它负责DNA的转录(c)细菌的转录物(mRNA)是多基因的(d)巧因子指导真核生物hnRNA的转录后加工，最后形成mRNA(e)促旋酶在模板链产生缺口，决定转录的起始和终止8. IS元件： ( )(a)全是相同的(b)具有转座酶基因(c)是旁侧重复序列(d)引起宿主DNA整合复制(e)每代每个元件转座103次9.基因组是：( )(a)一个生物体内所有基因的分子总量(b)一个二倍体细胞中的染色体数(c)遗传单位(d)生物体的一个特定细胞内所有基因的分子的总量10. DNaseI的超敏位点：( )(a)对消化的敏感程度比一般染色质强约100倍以上(b)是一些不带有核小体的DNA区域(c)是一些不带有蛋白的DNA区域(d)通常仅在基因正在表达时出现(e)能在启动子、DNA复制起点、着丝粒区发现(f)能通过DNA复制得以保持二、判断题（每题1分，共计10分）1．以λ噬菌体为载体的筛选方法比较简便，凡能形成噬菌斑的就一定是重组体。
高二生物选修3第一章基因工程习题一．单选题：每小题只有一个选项最符合题意。
1．下列有关基因工程的叙述，正确的是：（C ）A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等2．下列关于基因工程的叙述，正确的是：（B ）A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B．细菌质粒是基因工程常用的运载体C．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA D．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体3．与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是：（C ）A．反转录酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．解旋酶4．限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是：（D ）A．G与A之间的键B．G与C之间的键C．A与T之间的键D．磷酸与脱氧核糖之间的键5．下面图中a、b、c、d代表的结构正确的是：（D ）A．a—质粒RNA B．b—限制性外切酶C．c—RNA聚合酶D．d—外源基因6．除下列哪一项外，转基因工程的运载体必须具备的条件是：（D ）A．能在宿主细胞中复制并保存B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接C．具有标记基因，便于进行筛选D．是环状形态的DNA分子7．目的基因与运载体结合所需的条件是：（D ）①同一种限制酶②具有标记基因的质粒③RNA聚合酶④目的基因⑤DNA连接酶⑥四种脱氧核苷酸⑦A TPA．①②③④⑤⑥⑦B．①②④⑤⑥⑦8．下列关于染色体和质粒的叙述，正确的是：（C ）A．染色体只存在于真核生物细胞中，质粒只存在于原核生物细胞中B．在基因工程中染色体和质粒均可以作为运载体C．染色体和质粒均与生物的遗传有关D．染色体和质粒的化学本质相同9．苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否已表达，其检测方法是：（C ）A．是否有抗生素抗性B．是否能检测到标记基因C．是否有相应的性状D．是否能分离到目的基因10．如果科学家通过转基因工程，成功地把一名女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。
名词解释问题： Primer参考答案：引物。
是 DNA 复制的先锋，就象结晶过程中的晶核，引导 DNA 的合成。
名词解释问题： Northern blot参考答案： Northern 杂交。
用于检测细胞或组织样品中是否存在与探针同源的 mRNA 分子的检测方法。
过程与 Southern 杂交相似，只不过在 Blotting 过程中转移的是 RNA 而不是 DNA 。
名词解释问题：α-complementation参考答案：α-互补。
指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的α-半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现的互补。
这两个无酶学活性的产物混合在一起时，可恢复α-半乳糖苷酶的活性。
名词解释问题： Real time PCR参考答案：实时 PCR 。
通过特定设计的 PCR 仪器来实时检测 PCR 扩增过程每一轮循环产物的累积数量，推算模板的起始浓度，这种工作方式就称为实时 PCR 。
名词解释问题： Southern blot参考答案： Southern 杂交。
一种检测 DNA 分子的方法。
将 DNA 片段从琼脂糖凝胶转移到滤膜，结合了 DNA 分子的滤膜先与特定的预杂交液进行预杂交，然后与标记的核酸探针和滤膜混合。
如果滤膜上的 DNA 分子存在与探针同源的序列，那么探针将与该分子形成杂合双链，从而吸附在滤膜上。
在经过一定的洗涤程序将游离的探针分子除去后，通过放射自显影或生化检测，就可判断滤膜上是否存在与探针同源的 DNA 分子及其分子量。
名词解释问题： lytic growth参考答案：裂解生长状态。
噬菌体侵染宿主细胞后，大量复制并组装成子代噬菌体颗粒，导致宿主细胞裂解的现象称裂解生长状态。
名词解释问题： Genomic DNA library参考答案：指将某生物体的全部基因组 DNA 用限制性内切酶或机械力量切割成一定长度范围的 DNA 片段、与合适的载体体外重组并转化相应的宿主细胞获得的所有阳性菌落。
名词解释问题： Shuttle vector参考答案：穿梭载体。
能够在两类不同的宿主中复制、增殖和选择的载体称为穿梭载体。
名词解释问题： P1 artificial chromosomes参考答案： P1 人工染色体载体。
结合了 P1 载体和 BAC 载体的特性，是 P1 噬菌体载体的改进载体。
重组分子不能通过体外包装来感染宿主细胞，而只能通过电转化来将重组分子导入宿主细胞。
名词解释问题： Single strand binding protein参考答案：单链结合蛋白。
此蛋白能协同地与 ssDNA 结合而不与 dsDNA 结合，可以削弱链内二级结构的稳定性，从而加速互补多核苷酸的重新退火，并通过消除阻碍 DNA 聚合酶前进的链内二级结构，而提高这些聚合酶的持续作用能力。
填空题问题：在 DNA 测序中， Primer walking 的定义是（）。
参考答案：从目的片段的一端开始，利用载体上的序列为依据，设计第一次反应的引物进行测序，然后，依次根据前一次测序结果，设计下一次反应引物，递进测序，直至完成。
填空题问题：（）即为质粒的拷贝数，按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为（）和（），（）质粒多数是一些具有转移能力的大质粒；（）质粒多数是一些不具有转移能力的小质粒。
参考答案：单个细胞中所含有的质粒 DNA 分子数目；严谨型；松弛型；严谨型；松弛型填空题问题：热起始是一种在 PCR 反应中优化目标扩增产物的方法，它可抑制（）扩增。
参考答案：非特异性填空题问题：基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning）， gene cloning 的基本要点有（），（）和（）。
参考答案：克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择填空题问题：绿豆核酸酶来源于绿豆芽，与 S1 酶相似，但比 S1 酶更温和，在（）上才切割，可使 DNA 突出端变成平端。
参考答案：大切口填空题问题：有关感受态出现的机制，目前主要有两种假说：（）和（）。
参考答案：局部原生质化；酶受体假说填空题问题： E.coli DNA 连接酶与 T4 DNA 连接酶相似，但需（）的参与，且其平端连接效率低常用于置换合成法。
参考答案：烟酰胺－腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）填空题问题： Ecok 的一般分子组成为 R2M2S ，在这些亚基中， R 亚基具有（）的作用， M 亚基具有（）的作用， S 亚基具有（）的作用，当该该酶发生作用时，需用到的辅因子有：（）、（）、（）。
参考答案：限制酶；甲基化；识别 DNA 序列；ATP；SAM；Mg2+填空题问题：在 RNA 的分离、纯化和检测过程中，需控制 RNA 酶的活性，常用的 RNA 酶抑制剂有（）、（）、（）。
参考答案：人胎盘 Rnase 抑制剂；氧铜核糖核苷复合物；硅藻土填空题问题：核糖核酸酶 A 来源于牛胰，为内切核酸酶，可特异攻击（）。
可除去 DNA:RNA中未杂交的 RNA 区，可用来确定 DNA 或 RNA 中单碱基突变的位置。
参考答案： RNA 上嘧啶残基的 3' 端填空题问题：大肠杆菌中至少有三种依赖于甲基化的限制系统（）、（）、（）。
它们识别的序列各不相同，但只识别经过甲基化的序列，都限制 CpG 甲基化酶作用的 DNA 。
参考答案： mcrA；mcrBC；mrr填空题问题： YAC 载体基本组成元件有（），（），（），（）和（）。
参考答案：复制起点；着丝粒；端粒；MCS；筛选标记填空题问题：染色体步查指（）。
参考答案：采用一段分离自某一重组体一端的非重复 DNA 片段作为探针以鉴定含有相邻序列的重组克隆。
填空题问题：转化（Transformation）是在 1928 年由格里菲思在对（）菌进行研究时发现的。
转导（Transduction）是 1952 年由莱德伯格在研究（）菌的遗传重组时发现的。
参考答案：肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）；鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）填空题问题： Gene cloning 是指（），基因文库（Gene library）是指（）。
答案：利用重组DNA技术分离目的基因；由大量的含有基因DNA（即某一生物的全部DNA顺序）的不同DNA片段的克隆所构成的群体填空题问题：常用的双脱氧终止法测定 DNA 序列，其长度一般不会超过 1Kb ，因此进行大分子 DNA 测序时，需（），常用的方法有（）、（）和（）。
参考答案：打断大段目标 DNA ，生成大小适合测序的小片断 DNA ；限制酶消化；超声处理；在 Mn2＋存在下用胰 DNA 酶Ⅰ消化填空题问题：重组 DNA 导入宿主的一般方法有（），（），（），（）和（）等。
参考答案：转化；转导；转染；感染；接合填空题问题：利用 PCR 技术介导的定点诱变（Site-directed mutagenesis）。
较常用的方法一般有三种即（），（）和（）。
参考答案：同源重组法；DpnⅠ法；重叠延伸填空题问题：重叠基因（Overlapping gene）是指（），间隔基因（Interrupted gene）是指（）参考答案：一个基因的序列中，单个 DNA 序列可编码一个以上的蛋白质；在编码序列中间插入的一段无编码作用的碱基序列填空题问题： 1 单位NaeⅠ或NarⅠ的定义：（）参考答案：切割 1μg 腺病毒 2 DNA 在 50ul 体系中 1 小时所需的酶量填空题问题：质粒载体的附加功能要素主要有（），（），（）等。
参考答案：α－互补；ssDNA phage origin，promotor填空题问题：基因突变（Gene mutation）的类型有（），（），（）等。
参考答案：简单的插入或缺失；单个碱基的置换；系统的缺失、插入或成串碱基的置换填空题问题：构建 Gene library 时，应根据所要分离的外源基因的大小选择合适的载体，这些载体通常包含有λ噬菌体、YAC 以及（）、（）和（）等。
参考答案：粘粒（cosmid）；BAC（细菌人工染色体）；质粒（plasmid）填空题问题：启动子（Promotor）是指（）。
通常一个 Gene 是否表达，（）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程中，Promoter 还是（）的结合位点。
参考答案：基因转录过程中控制起始的部位；转录起始；RNA 聚合酶填空题问题：DnaseⅠ为内切核酸酶，在不同的辅因子条件下，产生不同的酶切效果，当 Mg2+ 存在时（）；当 Mn2+ 存在时（）。
参考答案：独立作用于每条 DNA 链，且切割位点随机；可在两条链的大致同一位置切割 dsDNA ，产生平端或 1 到 2 个核甘酸突出的 DNA 片断选择题问题： SDS 是分离 DNA 时常用的一种阴离子去污剂，下列对其作用描述不正确的是（）参考答案： D 消除反应中的泡沫点评：消除反应中的泡沫的是异戊醇。
选择题问题：下列 DNA 聚合酶中，哪一种酶只切割双链 DNA 中的一条链，产生单链切口，即切口酶（）参考答案： A DnaseⅠ点评：在 Mg2+ 存在下，独立作用于每条 DNA 链，且切割位点随机。
在 Mn2+ 存在下，它可在两条链的大致同一位置切割 dsDNA ，产生平端或 1～2 个核苷酸突出的 DNA 片段； Klenow DNA 聚合酶是 E.coli DNA polymerase 经蛋白酶（枯草杆菌蛋白酶）裂解而从全酶中除去 5'--3' 外切活性的多肽大片段，而聚合活性和 3'--5' 外切活性不受影响； T4 噬菌体 DNA 聚合酶与 Klenow DNA 聚合酶相似，但 3'--5' 外切活性强 200 倍，且不从单链 DNA 模板上替换引物； T7 噬菌体 DNA 聚合酶的活性功能与 T4 噬菌体 DNA 聚合酶和 Klenow DNA 聚合酶类似，但 3'--5' 外切活性为 Klenow 的 1000 倍。
选择题问题：粘粒（cosmid）是一种人工建造的载体，下列对它的描述中哪一项是不正确的（）参考答案： D 进入受体细胞后，可引起溶源化反应点评：粘粒指带有将 DNA 包装到噬菌体颗粒中所需的 cos 序列的质粒。
包括质粒复制起点，可以像质粒一样转化并增殖；包括 cos 位点，可以像噬菌体颗粒一样包装、侵染。
选择题问题：以下各项中不是 PCR 反应所必须的是（）参考答案： D 甘油点评：甘油可以增加引物与 DNA 链的结合，但不是必需的。
选择题问题：限制性内切核酸酶可以特异性地识别（）参考答案： C 双链 DNA 的特定碱基序列点评：了解限制性内切酶的识别序列。
