血液病毒灭活

血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则目前已知经血液制品传染的病毒主要有HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV和细小病毒B19。

尚未发现经血液制品传染CJD。

但有少数研究报告发现有实验性传染现象，因此要密切关注CJD，特别是vCJD的发展动向。

为了提高血液制品安全性，生产工艺要具有一定的去除/灭活部分病毒能力，生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法。

本技术指导原则是对血液制品（指以人血浆为原料制备的制品）生产过程以及特定的去除/灭活病毒方法验证的指导原则，包括指示病毒和病毒去除/灭活方法的选择、验证方案的设计、结果判定以及附录所列技术验证申报的程序。

一、去除/灭活病毒方法的选择由于不同类血液制品潜在的污染病毒的可能性不同，为此选择病毒去除/灭活方法的侧重点也应有所不同：（一）凝血因子类制品生产过程中应有特定的能去除/灭活脂包膜和非脂包膜病毒的方法，可采用一种或多种方法联合去除/灭活病毒。

（二）免疫球蛋白类制品对于免疫球蛋白类制品（包括静脉注射用人免疫球蛋白、人免疫球蛋白和特异性人免疫球蛋白）生产过程中应有特定的灭活脂包膜病毒方法。

但从进一步提高这类制品安全性考虑，提倡生产过程中加入特定的针对非脂包膜病毒的去除/灭活方法。

（三）白蛋白采用低温乙醇生产工艺和特定的去除/灭活病毒方法，如巴斯德消毒法等。

二、常用的去除/灭活病毒方法评价（一）巴斯德消毒法（巴氏消毒法）1．人血白蛋白制品几十年临床应用结果表明，白蛋白的巴氏消毒法对HIV和肝炎病毒是安全的。

其病毒灭活条件已很完善，可不要求进行病毒灭活验证。

但是必须对巴氏消毒法所用设施进行验证，使巴氏消毒各参数符合要求（包括制品内温度分布的均一性和灭活时间）。

2．其它血液制品（液体制剂）由于制品的组成、稳定剂（如：氨基酸、糖、枸橼酸盐等）及其浓度的不同，均会对灭活病毒效果有一定的影响。

因此在采用巴氏消毒灭活病毒方法时必须进行病毒灭活效果验证。

浅谈血浆病毒灭活作者：郭丽玮来源：《中国实用医药》2013年第06期随着医疗技术的提高，输血安全日益受到人们重视，因此要从根本上控制和杜绝血源性的传染病，除加强筛查以外，还必须对冰冻血浆进行灭活病毒处理，对血浆的病毒灭活是保障输血安全的重要措施之一。

血液检测有效地遏制了经输血传播疾病的发生，但仍不能完全杜绝经输血传播的疾病。

目前全国年供血量约为1300万单位（200 mL/单位），若以中等发达国家输血后传染病发病机率为0.2%计，其中回输血浆后而感染者（乙肝、丙肝和艾滋病）估计有近百万人。

由于HIV、HBV、HCV、HTLV 等构成经血传播病毒性风险的主要病毒均是脂质包膜病毒，故亚甲蓝光化学法被认为是一种可取的血液成分灭活方法，是目前唯一获准用于临床的光化学血浆病毒灭活技术。

我站目前也使用此方法对血浆进行病毒灭活。

1 MB光化学法技术简介亚甲蓝又叫美蓝，是一种吩噻嗪类酸性染料，也是一种表面携带正电荷的光敏剂，在可见光氧化损伤的作用下，使病毒的核酸断裂，包膜破损，从而使病毒完全失去穿透、复制及感染能力[1]。

可以灭活大多脂质包膜病毒，包括HIV、HCV、HBV [2]。

亚甲蓝血浆病毒灭活机理明确、效果可靠，且不影响血浆质量。

亚甲蓝光化学法血浆病毒灭活在国内外均已大量使用。

2 技术标准及依据根据卫生部《中国输血技术操作规程血站部分》的要求，新鲜冰冻血浆自血液采集后6 ～8 h 经分离速冻成块[3]，在30℃保存1 年内几乎含有全部凝血因子，包括不稳定的因子V 和因子Ⅷ，新鲜冰冻血浆与普通冰冻血浆的差别在于凝血因子V 和因子Ⅷ，血浆中有效成分的含量易受采集、运输、制备、保存等环节的环境温度、离体时间、制备方法、制备条件、储存温度等过程质量的影响，通过控制过程质量是提高血浆质量的有效途径。

新鲜液体血浆作为制备病毒灭活血浆的一种原料血浆，其质量将直接影响病毒灭活血浆的质量，因此，为确保病毒灭活血浆的质量，必须严格控制好从血液采集到血液成品这个过程的冷链和时间控制，确保分离的液体血浆、制备的冰冻血浆符合《全血及成分血质量要求》中的质量标准。

输血护理新技术病原体灭活摘要】目的讨论输血护理新技术病原体灭活。

方法查阅文献资料并结合个人经验进行归纳总结。

结论输血后感染和经输血传播疾病是对输血安全的巨大威胁。

在血液制品的制备过程中增加病原体灭活或去除步骤，在血液及其成分保存前或输注前采取病原体灭活措施是非常必要的。

【关键词】输血护理新技术病原体灭活一、血液及其制品中的病原体灭活与去除的意义输血后感染和经输血传播疾病是对输血安全的巨大威胁。

自WHO推行血液安全战略以来，血液的安全性有了大幅度提高。

美国输血传播HBV、HCV、HIV的风险性已经分别降至为1/63000，1/103000，1/493000。

尤其是1999年开始实施血液的核酸扩增检测技术(nucleic acid amplification testing，NAT)，使输血的残余风险度进一步降低。

NAT检测后的残余风险度在美国为HCV约1：200000，HBV约1：350000，HIV约1：2000000，国内HIV为0/7.5万，HCV为1/7.5万。

尽管如此，血液及其制品并不是绝对安全的，国内外仍有因输用血液及其制品而传播疾病的报道。

如美国每年发生输血感染HBV 22例、HCV 136例、HIV28例左右；全球大约有5%～10%的HIV感染是由不安全的血液和血液制品引起的。

究其原因，主要有以下几个方面。

1.漏检主要由“窗口期”造成，即从病原体感染至复制、繁殖到能检测到的域值之间或从病原体入侵到机体产生可以检测出的足够量的免疫应答抗体之间的空白期。

窗口期的长短受检测方法的灵敏度和检测对象的限制。

造成漏检的原因还包括病原体变异、与机体的基因组整合、抗体阴性的慢性携带状态等.如HBV感染个体中接受被动免疫、用HBV-DNA多聚酶的抑制物(拉米夫啶)进行治疗、主动免疫的失败、低水平的持续复制、痊愈后的复发等，均可造成献血者的HBsAg逃逸性突变株。

突变部位多集中在S蛋白“A”决定簇的141～145氨基酸之间，其中报道最多的为145甘氨酸突变为145精氨酸。

亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆袋及其照射柜的血浆HBV病毒灭活效果成分输血在临床上应用日益广泛，尤其是血浆用量日益增大，输血安全口益受到人们重视，对血浆的病毒灭活是保障输血安全的措施之一。

在血浆的病毒灭活各方法中，亚甲蓝光化学法的效果已被证实，其病毒滴度减少程度与所用的光照强度和亚甲蓝(MB)浓度有直接关系。

亚甲蓝光化学法对经血传播的HBV、HCV、HIV等脂质包膜病毒均有较好的灭活效果。

但亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒的效果受到各因素如光照时间、光照强度、血浆量及亚甲蓝浓度等影响。

于是在应用亚甲蓝光化学法设计相关产品时会受到上述各种因素的制约。

目前将此法应用到血浆袋的报道极少。

本研究采用以亚甲蓝光化学法设计的血浆病毒灭活剂过滤血浆袋及配套使用的血液照射柜，将亚甲蓝光化学法灭活病毒过程中的各步骤规范化、整体化、标准化，消除了病毒灭活过程中隐含的各种干扰因素，从而找到了一条将亚甲蓝光化学法应用于血浆袋的有效途径。

1 材料与方法1.1材料与仪器病毒灭活剂(亚甲蓝)过滤血浆袋(WG-BM100，5套，生产批号：20060321，威海高分了材料公司)；血液照射柜WG-BM(照度50000 Lux，威海高分子材料公司)；威海市中心血站采集已鉴定为乙肝阳性病人的血液，并分离血浆(每袋100ml，共5袋)；荧光定量PCR检测仪(型号码ABI prism-7000)；HBV-DNA荧光定量PCR榆测试剂(由中山大学达安基因股分有限公司提供，批号20060412)；Eppendorf管(EP管)。

1.2方法1.2.1标本病毒灭活将装有已鉴定为乙肝阳性病人血浆的血浆袋浸入75%的酒精溶液30min进行表面消毒后，移至超净工作台内，取样200ul于EP管内保存，作为光照前的病毒标本。

在超净工作台内，将留样管封口，同时打开病毒灭活剂过滤血浆袋，用插袋针刺破装有血浆袋插口，将血.浆袋高搁，使袋内的血浆流经加药器完全进入病毒灭活剂过滤血浆袋，打开血液照射柜制冷开关，使血液照射仪内的温度显示为4摄氏度。

血液制品病毒灭活及去除工艺进展分析摘要】在临床上血液制品能够为有需要的病患提供治疗帮助，但是在进行制作的过程中，血液制品有传播病毒的风险，因此对血液制品进行病毒灭活以及去除是对其质量的重要保证，随着人们思想水平和安全意识的提高，对血液制品的质量也越加重视，本文对血液制品病毒灭活以及去除工艺的进展进行了研究探讨。

关键词：血液制品；病毒灭活；去除工艺；进展在临床上血液制品是用于对病患进行治疗和抢救的重要作用制剂，主要是由健康人群提供血浆或者是将拥有特异免疫的人群的血浆进行分离和提纯处理，从而得到相关的血细胞组分以及血浆蛋白组分等[1]。

血液制品能够用于对病患病情的诊断治疗，具备稳定性较强以及使用方便等特点[2]。

但是在进行制作的过程中需要注意的是，制品的原材料来源于人体的血液，本身会潜在着携带病毒的风险，一旦处理不当，容易对病患造成血液污染，从而造成二次伤害。

随着人们卫生意识的不断提高，对血液制品的病毒灭活以及去除工艺提出了更高的要求。

本文对血液制品病毒灭活以及去除工艺的进展进行了研究探讨，报道如下。

1血液制品中的不安全因素分析根据目前的研究资料发现，在制作血液制品的过程中所存在的主要不安全因素主具体为病原微生物和代谢产物。

血液制品的原材料人体的血液当中会存在着病原微生物及其相关的代谢产物，这两种物质能够和同种的抗原性蛋白相互作用，导致相关临床疾病的发生[3]。

经过研究证实能够通过人体血液以及血液制品进行传播的病毒类型主要为肝炎病毒、人体T淋巴细胞N型病毒、微小病毒、免疫缺陷病毒以及雅克氏病毒等。

当这些病毒通过血液制品进入到人体当中之后会对人体的正常细胞造成伤害，导致严重疾病的发生[4]。

2.病毒灭活方法及去除工艺分析目前在临床上对血液制品进行病毒灭活以及去除的方法和工艺根据不同的处理模式和媒介，可以分为物理方法和化学方法等，具体主要有以下几点。

2.1过滤法在对血液制品进行灭菌的过程中，可以采用过滤法将血液中的有害病菌进行灭除。

病毒灭活血浆与普通冰冻血浆的临床应用价值分析病毒灭活血浆与普通冰冻血浆是两种不同的血浆制品，具有不同的临床应用价值。

下面将分析这两种血浆在临床上的应用价值。

病毒灭活血浆是通过对血液样品进行病毒灭活处理而得到的，它可以用于临床上治疗各类病毒感染。

在病毒灭活过程中，通过一系列化学或物理方法，如紫外线照射、加热或辐射处理，可以有效地灭活血浆中的病毒。

使用病毒灭活血浆可以降低病毒传播的风险，提高治疗的安全性。

病毒灭活血浆在临床上的主要应用是治疗病毒性感染，如乙肝病毒、丙肝病毒、HIV 等。

通过输注病毒灭活血浆，可以提供有效的抗病毒抗体，从而抑制病毒的复制和传播，减轻患者的症状，促进康复。

病毒灭活血浆还可以用于预防病毒感染，如乙肝病毒感染的预防。

由于病毒灭活血浆中的病毒已经被灭活，因此输注此种血浆可以提供免疫保护，而不会导致病毒感染。

普通冰冻血浆是未经任何处理的血浆制品，它主要用于输血和康复治疗。

普通冰冻血浆可以提供各种血浆蛋白和凝血因子，对于病人出血或凝血功能异常的情况有一定的帮助。

普通冰冻血浆还可以用于补充血液容量，为病人提供营养和能量，增强体力。

普通冰冻血浆也存在一定的风险。

由于未经过病毒灭活处理，普通冰冻血浆中可能存在一些传染性病毒，如乙肝病毒、丙肝病毒和HIV等。

在使用普通冰冻血浆时需要进行病毒筛查，确保血浆安全无害。

病毒灭活血浆与普通冰冻血浆在临床应用上有着不同的价值。

病毒灭活血浆可以用于治疗病毒性感染和提供免疫保护，从而降低病毒传播风险，增加治疗的安全性。

而普通冰冻血浆主要用于输血和康复治疗，可以提供各种血浆蛋白和凝血因子，有助于出血和凝血功能异常的病人康复。

普通冰冻血浆也存在传染性病毒的风险，需要进行病毒筛查，确保安全使用。

在使用血浆制品时需要根据具体临床情况选择合适的血浆制品，以确保治疗的效果和安全性。

血液制品病毒灭活及去除工艺进展摘要：血液制品主要是通过将多人份血浆进行混合之后，使用特定的分离纯化技术制备的产品，血液制品通常被用在医疗急救以及某些特定的疾病预防和治疗中，具有其他药物不可替代的作用。

从理论上来说，经血液传播的疾病也可以经血浆传播，所以，为了能够最大限度保障血液制品的安全性，就需要严格按照原则要求，在生产血液制品的过程中，就需要使用一定的工艺方法对血液制品中的病毒进行灭活处理，去除其中的病毒，制造出健康的血液制品。

鉴于此，本文就血液制品制造过程中的病毒灭活方法和去除工艺展开如下探讨。

关键词：病毒灭活；病毒去除；血液制品1.病毒灭活方法1.1物理方法1.1.1巴氏消毒法这种方法的应用对温度和时间的要求非常高，大量临床研究证明，在溶液状态下，对白蛋白进行10h的60℃加热处理，能够灭活人类免疫缺陷病毒（HIV）、乙肝病毒（HBV）和丙肝病毒（HCV），即巴氏消毒，从而提高白蛋白在病毒安全方面的可靠性。

最近这些年，经常将巴氏消毒法用在静脉注射免疫球蛋白的生产以及纤维蛋白原的处理中。

没有经过巴氏消毒法灭活处理的产品，其输血传播病毒率高达50%~75%，而经巴氏消毒灭活处理之后，产品阳性检出率为0[1]。

1.1.2干热法（冻干制品）干热法也就是对冻干后的制剂使用干热处理和加热处理来杀活病毒的一种方法，常见的干热法主要有10~72h，60~80℃加热法及72h，80℃加热法。

早在20世纪80年代初期，对于FⅧ冻干浓制剂和凝血酶原复合物的处理，就有人用到了10~72h，60~80℃加热处理方法，但是，现在这种方法的使用已经无法满足彻底灭火HCV、HBV、HIV病毒的目的。

1.1.3γ射线辐照法γ射线主要由光子组成，来自于核转变，在放射性衰变过程中形成的子核处于不稳定状态和激发状态，在从高激发态跃迁到低激发态的过程中，就会将γ射线释放出来。

钴－60和铯－137是常用的两种γ射线放射源。

大量实验研究表明，对于大多数微生物，比如无包膜病毒、有包膜病毒以及所有的基因型物质，经过γ射线的辐照都有杀灭作用。

医学毕业论文--亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆袋及其照射柜的血浆HBV病毒灭活效果亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆袋及其照射柜的血浆HBV病毒灭活效果【关键词】亚甲蓝光化学法血液检测病毒性疾病成分输血在临床上应用日益广泛,尤其是血浆用量日益增大,输血安全口益叐到人们重视,对血浆癿病毒灭活是保障输血安全癿措施之一。

在血浆癿病毒灭活各方法丨,亚甲蓝光化学法癿效果已被证实,其病毒滴度减少程度不所用癿光照强度和亚甲蓝(MB)浓度有直接关系。

亚甲蓝光化学法对经血传播癿HBV、HCV、HIV等脂质包膜病毒均有较好癿灭活效果。

但亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒癿效果叐到各因素如光照时间、光照强度、血浆量及亚甲蓝浓度等影响。

于是在应用亚甲蓝光化学法设计相关产品时会叐到上述各种因素癿制约。

目前将此法应用到血浆袋癿报道极少。

本研究采用以亚甲蓝光化学法设计癿血浆病毒灭活剂过滤血浆袋及配套使用癿血液照射柜,将亚甲蓝光化学法灭活病毒过程丨癿各步骤规范化、整体化、标准化,消除了病毒灭活过程丨隐含癿各种干扰因素,从而找到了一条将亚甲蓝光化学法应用于血浆袋癿有效途径。

1材料不方法1.1材料不仪器病毒灭活剂(亚甲蓝)过滤血浆袋(WG-BM100,5套,生产批号:20060321,威海高分了材料公司);血液照射柜WG-BM(照度50000Lux,威海高分子材料公司);威海市丨心血站采集已鉴定为乙1肝阳性病人癿血液,幵分离血浆(每袋100ml,共5袋);荧光定量PCR检测仪(型号码ABIprism-7000);HBV-DNA荧光定量PCR榆测试剂(由丨山大学达安基因股分有限公司提供,批号20060412);Eppendorf管(EP管)。

1.2方法1.2.1标本病毒灭活将装有已鉴定为乙肝阳性病人血浆癿血浆袋浸入75%癿酒精溶液30min进行表面消毒后,移至超净工作台内,叏样200ul于EP管内保存,作为光照前癿病毒标本。

在超净工作台内,将留样管封口,同时打开病毒灭活剂过滤血浆袋,用插袋针刺破装有血浆袋插口,将血.浆袋高搁,使袋内癿血浆流经加药器完全进入病毒灭活剂过滤血浆袋,打开血液照射柜制冷开关,使血液照射仪内癿温度显示为4摄氏度。