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《酶工程》要点1、酶工程：酶的生产、改性与应用的技术过程。
酶的生产：获得酶的技术——微生物发酵产酶、动植物培养产酶和酶的提取与分离。
酶的改性：改进酶的催化特性技术过程——酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化和酶定向进化。
酶的应用：获得所需物质或除去不良物质技术过程——酶反应器的选择与设计以及酶在各个领域的应用。
2、酶工程的主要内容：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等。
3、酶的催化特点：（1）酶催化的专一性强——绝对与相对（2）酶催化效率高（3）作用条件温和4、影响酶催化作用的因素：（1）底物浓度——催化反应速度先随底物浓度增加而增加，达最大是趋于平衡，过量时反而下降。
（2）酶浓度——成正比。
（3）温度——过高过低影响酶活性，最适温度。
（4）PH——最适PH，极端PH酶分子空间构象改变而失活。
（5）抑制剂——可逆，不可逆。
（6）激活剂。
（7）底物结构类似物。
5、抑制机理：（1）竞争性抑制——抑制剂和底物竞争与酶分子的结合，V m不变，K m变小。
（2）非竞争性抑制——抑制剂和底物分别与酶分子结合，V m变小，K m不变。
（3）反竞争性抑制——抑制剂与中间复合体结合，V m和K m都变小。
6、酶的分类与命名：蛋白类酶——1氧化还原酶，2转移酶，3水解酶，4裂合酶，5异构酶，6连接酶（合成酶）。
四码编号法：第一个号码为六大类酶，第二个号码为亚类，第三个号码亚类中的小类，第四个号码该小类中的序号。
7、酶活力：一定条件下酶催化反应的初速度。
酶活力单位：特定条件下每1min催化1µmol 的底物转化为产物的酶量为1个酶活力单位。
酶的比活力：特定条件下单位质量（mg）蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。
酶比活力=酶活力/mg蛋白质（RNA）8、酶的生产方法：（1）提取分离法——盐溶液提取、酸碱溶液提取、有机溶剂提取。
酶，指具有生物催化功能的高分子物质，在酶的催化反应体系中，反应物分子被称为底物，底物通过酶的催化转化为另一种分子。
几乎所有的细胞活动进程都需要酶的参与，以提高效率。
与其他非生物催化剂相似，酶通过降低化学反应的活化能（用Ea或ΔG表示）来加快反应速率，大多数的酶可以将其催化的反应之速率提高上百万倍；事实上，酶是提供另一条活化能需求较低的途径，使更多反应粒子能拥有不少于活化能的动能，从而加快反应速率。
酶作为催化剂，本身在反应过程中不被消耗，也不影响反应的化学平衡。
酶有正催化作用也有负催化作用，不只是加快反应速率，也有减低反应速率。
与其他非生物催化剂不同的是，酶具有高度的专一性，只催化特定的反应或产生特定的构型。
虽然酶大多是蛋白质，但少数具有生物催化功能的分子并非为蛋白质，有一些被称为核酶的RNA分子也具有催化功能。
此外，通过人工合成所谓人工酶也具有与酶类似的催化活性，包括人工合成的DNA。
有人认为酶应定义为具有催化功能的生物大分子，即生物催化剂。
酶的催化活性会受其他分子影响：抑制剂是可以降低酶活性的分子；激活剂则是可以增加酶活性的分子。
有许多药物和毒药就是酶的抑制剂。
酶的活性还可以被温度、化学环境（如pH值）、底物浓度以及电磁波（如微波）等许多因素所影响。
一、研究历史1773年，意大利科学家斯帕兰扎尼（L.Spallanzani，1729—1799）设计了一个巧妙的实验：将肉块放入小巧的金属笼中，然后让鹰吞下去。
过一段时间他将小笼取出，发现肉块消失了。
于是，他推断胃液中一定含有消化肉块的物质。
但是什么，他不清楚。
1833年，法国的培安和培洛里将磨碎麦芽的液体作用于淀粉，结果发现淀粉被分解，于是将这个分解淀粉的物质命名为Diastase，也就是现在所谓的淀粉酶。
后来，Diastase在法国成为用来表示所有酶的名称。
1836年，德国马普生物研究所科学家施旺（T.Schwann，1810—1882）从胃液中提取出了消化蛋白质的物质，解开消化之谜。
酶工程第一节概述一、酶的概念和作为生物催化剂的特点1、酶的概念：酶是由生物产生的具有催化作用的生物大分子，大部分在体内，小部分在体外，具有活性中心和特殊构象2、作为催化剂的特点1）极高的催化效率2）高度专一性——绝对专一性（一种酶只作用于一种底物）相对专一性（作用于一类底物或一种化学键）立体异构专一性（对底物立体构型的特异要求）3）活性可调节性（合成的诱导和阻碍、降解的促进、激活物和抑制物的调节作用，代谢物对酶的反馈调节，酶的变构调节、酶的化学修饰）4）酶的不稳定性（一定的ph和温度）二、酶的化学组成、结构和催化机理1.酶的化学本质和组成：本质是蛋白质（检测高度纯化和结晶的酶一级结构）根据组成分为：单纯酶（组成成分仅为氨基酸的一类酶）和结合酶（蛋白质-酶蛋白+非蛋白的小分子-辅助因子）全酶=酶蛋白+辅助因子2.酶的辅助因子酶蛋白—酶反应的专一性辅助因子—传递电子、原子、某些化学基团酶含有的金属离子—酶活性中心组成部分、连接底物盒酶分子的桥梁、稳定酶蛋白分子构像的必需品：常见的有k，na，mg，cu,Zn,Fe等3.酶结构与功能结构特征：一级结构：酶蛋白的20种氨基酸种类、数目和排列顺序（-sh参与组成酶活性中心）空间结构—维持酶活性中心所必需的构象。
肽链ß折叠—保持酶分子的球状椭圆状为主，折叠结构之间å以及折叠肽段相连功能部位：酶分子表面多种功能性区域。
酶活性中心与必需基团：酶活性中心：活性部位。
由在一级结构上可能很远但在空间结构上彼此靠近的氨基酸残基，集中在一起形成的，具有一定空间结构的区域，该区域与底物相结合并催化底物转化为产物。
活性中心的必须基团：分为结合基团、催化基团。
是酶发挥催化作用与底物直接接触的基团。
诱导契合作用：底物接近酶是，诱导酶分子的构象变得能与底物配合，进而催化底物分子发生化学变化。
4.催化机理：降低反应活化能、中间产物学说、酶作用高效率机理（邻近效应、定向效应、底物分子变形或扭曲、酸碱催化、共价催化、金属离子的催化、活性中心的低介电信、协同催化）活化能：从初态到活化态所需的能量5.酶的分类：氧化还原酶（乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶）转移酶类（甲级转化酶、氨基转化酶、己糖激酶、磷酸化酶）水解酶类裂合酶类异构酶类连接酶类三、酶的分类和命名第二节酶促反应动力学（反应速度规律和因素）一、底物反应动力学1.单底物反应动力学-异构、裂解酶（仅底物浓度变化，与酶促反应关系——一级反应-混合级反应-零级反应）米氏方程km米氏常数=酶促反应为最大速度一半时的底物浓度mol／L2.双底物反应动力学（1）序列反应二、抑制反应动力学抑制剂-不变性，活性下降1不可逆抑制作用的抑制剂以共价键与酶的必需基团进行结合专一性不可抑制剂非专一性不可你抑制剂（一类或者几类基团）2.可逆抑制作用抑制剂以解离平衡为基础，非共价结合，物理方法去除后，活性恢复（1）竞争性抑制作用—与底物结构相似，竞争酶活性中心（2）非竞争性抑制作用—与活性中心以外的必需基团结合，不影响酶和底物。
