菌落计数及报告方法
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(一)菌落计数1.细菌培养时间为72小时(3天),、分别在24小时及48小时,72小时,点记菌落数,一般以72小时菌落数为准,2:霉菌、酵母菌培养时间为120小时(5天),分别在48小时及72小时点记菌落数,一般以小时菌落数为准。
点计后,计算各稀释级的平均菌落数,按菌数报告规则报告菌数。
3.一般将平皿置菌落计数器或从平皿的背面直接以肉眼点计,以透射光衬以暗色背景,仔细观察。
勿漏计细小的琼脂层内和平皿边缘生长的菌落。
注意细菌菌落与霉菌菌落和酵母菌菌落以及它们与供试品颗粒、培养基沉淀物、气泡等的区别。
【必要时用放大镜或用低倍显微镜直接观察或挑取可疑物涂片镜检。
如仍难区别,可延长培养时间4~7天,细菌菌落常会生长增大而加以区别。
】(4.供试品如为微生物制剂,应将有效微生物菌落排除,不可点记在细菌、霉菌和酵母菌数内。
排除的方法须按该制剂微生物品种而定,并须观察菌落特征及染色形态。
)5.供试品稀释液常含有不溶性原料、辅料,(特别是1:10级别),培养基注皿后亦可能产生沉淀物,经过培养后有时形成数量很多且难与菌落用肉眼相区别的有形物。
(为了有利于菌落计数,可在操作时将适宜稀释级的供试液多增加注皿(1~2个平皿),注皿后不经培养而放置于冰箱(勿结冻)中,在计数菌落时作为对照。
或用0.001%TTC营养琼脂注皿,经培养后可将细菌菌落与其他有形物区别开来。
[0.001%TTC肉汤琼脂培养基(0.001%2、3、5氯化三苯四氮唑琼脂),TTC即为:2、3、5氯化三苯四氮唑琼脂在每1000ml营养琼脂内加入灭菌的1%TTC溶液1ml混匀后倾注平皿,防止菌落蔓延]。
)有些软膏等非水溶性供试品:经营养琼脂注皿后呈乳白色,培养后生长的菌落不易辨认和点计,【为防止这种情况,也可用0.001%TTC营养琼脂注皿,经培养后生长的菌落为红色,衬以白色背景上易于点计。
】若平板上有2个或2个以上菌落重叠,肉眼可辨别时仍以2个菌落或2个以上菌落计数;若片状菌落不到平板的一半,而余下的一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2代表全平板菌落数.若生长蔓延较大的片状菌落或花斑样菌落,一般不宜作为计数用。
微生物菌落计数实验报告实验目的:本实验旨在通过微生物菌落计数方法,确定水样中细菌和真菌的菌落数,以评估水质的卫生安全水平。
实验原理:微生物菌落计数是一种常用的微生物计数方法,通过将待检测样品在适当培养基上培养,促使微生物菌落形成,然后用目镜进行观察计数。
细菌和真菌在不同培养基上生长的特性不同,利用这一特性可以分别计数。
瓶子计数法和平板计数法是常用的微生物菌落计数方法。
实验步骤:1. 做好消毒准备,将取样瓶开盖,取适量水样。
2. 用无菌移液管分别移取水样至含有不同培养基的培养皿中。
3. 均匀涂抹样品,覆膜,进行培养。
4. 培养后观察培养皿上的菌落形成情况,用计数板进行计数。
5. 计算出每毫升水样中的微生物菌落数。
实验结果:根据观察和计数,得出水样中细菌和真菌的菌落数分别为XXX CFU/mL和XXX CFU/mL。
实验分析:通过微生物菌落计数实验,我们可以了解水质中微生物的富集情况,评估水样的卫生安全性。
根据实验结果,可以判断水样是否存在污染,进而采取相应措施提高水质。
结论:微生物菌落计数实验是一种简单而有效的水样检测方法,可以帮助我们及时了解水质情况,保障人们的健康。
在日常生活中,我们应该重视水质安全问题,做好水质检测和管理工作。
实验注意事项:1. 操作时要保持无菌环境,避免外界微生物的污染。
2. 操作时要注意个人防护,避免实验中发生意外伤害。
3. 实验后要及时处理实验用具,保持实验室整洁。
通过微生物菌落计数实验,我们可以更深入了解水质情况,及时采取措施改善水质,保障人们的生活健康。
愿我们在未来的生活中,都能享受清洁卫生的水资源,健康快乐地生活。
一、实验目的1. 掌握细菌菌落总数测定的原理和方法。
2. 学会使用细菌菌落计数器,并正确操作。
3. 通过实验了解不同样品中细菌菌落的生长情况,评估样品的卫生质量。
二、实验原理细菌菌落总数(Colony Forming Units, CFU)是指在一定条件下,一个细菌在固体培养基上生长繁殖所形成的可见菌落数量。
通过测定样品中的细菌菌落总数,可以评估样品的卫生质量。
实验原理基于以下步骤:1. 样品处理:将样品进行适当的稀释,以便在平板上形成单菌落。
2. 平板培养:将稀释后的样品涂布在含有营养物质的平板上。
3. 培养与计数:在一定温度下培养平板,待菌落生长成熟后,使用菌落计数器进行计数。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 样品:食品、水、土壤等。
- 培养基:营养琼脂平板。
- 稀释剂:生理盐水、无菌水等。
- 菌落计数器。
- 无菌操作台、无菌棉签、镊子等。
2. 实验仪器:- 电热恒温培养箱。
- 电子天平。
- 移液器。
- 烧杯。
- 移液管。
四、实验步骤1. 样品处理:- 称取适量样品,用无菌水进行10倍递增稀释。
- 将稀释后的样品分别取1mL,涂布在营养琼脂平板上。
2. 平板培养:- 将涂布好的平板倒置放入电热恒温培养箱中,培养温度为37℃,培养时间为24小时。
3. 菌落计数:- 使用菌落计数器,在显微镜下观察菌落,记录每个平板上的菌落数。
- 计算每个样品的细菌菌落总数。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 样品A:细菌菌落总数为2.5×10^6 CFU/g。
- 样品B:细菌菌落总数为1.2×10^5 CFU/g。
- 样品C:细菌菌落总数为8.0×10^3 CFU/g。
2. 分析:- 样品A的细菌菌落总数较高,可能存在一定的卫生问题。
- 样品B的细菌菌落总数较低,卫生质量较好。
- 样品C的细菌菌落总数最低,卫生质量最佳。
六、实验结论通过本次实验,我们成功掌握了细菌菌落总数测定的原理和方法。
菌落计数及报告方法1、目的建立微生物实验中菌落计数及报告规范,从实际生长的菌落数中计算出较为科学的结果2、方法说明本文件采用平板计数法,产品中污染的细菌种类不同,每种细菌都有它一定的生理特性,培养时对营养要求,培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中,不可能做到满足所有菌的要求,因此所测定的结果,只包括在本方法所使用的条件下生长的微生物总数。
3、参考文件GB7918.2-1987化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定4、菌落计数方法先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用放大5~10倍的放大镜检查,以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后。
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时,该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘2,以代表全皿菌落数。
5菌落计数及报告方法5.1 首先选取平均菌落数在30~300之间的平皿,作为菌落总数侧定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表中例1) ,5.2 若有两个稀释度,其平均菌落数均在30~300个之间,则应求出两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于或等于2 ,应报告其平均数,若大于2则报告其中较小的菌落数( 见表中例2及例3),5.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300 个,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4),5.4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5),5.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在 30~300个之间,其中一个稀释度大于300个,而相邻的另一稀释度小于30个时,则以接近30 或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6),5.6 若所有的稀释度均无菌生长,报告数为每克或每毫升小于10 个。
5.7 菌落计数的报告,菌落数在10以内时,按实有数值报告之,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,应以四舍五入法计算。
(三)计数和报告1.操作方法:培养到时间后,计数每个平板上的菌落数。
可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。
在记下各平板的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数,计算处原始样品中每克(或每ml)中的菌落数,进行报告。
2.到达规定培养时间,应立即计数。
如果不能立即计数,应将平板放置于0-4℃,但不得超过24h。
3.计数时应选取菌落数在30~300之间的平板(SN标准要求为25~250个菌落),若有二个稀释度均在30~300之间时,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则其较小数字(有的规定不考虑其比值大小,均以平均数报告)。
4.若所有稀释度均不在计数区间。
如均大于300,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如均小于30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。
如菌落数有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之间,则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。
有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。
5.不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近),即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。
如出现逆反现象,则应视为检验中的差错(有的食品有时可能出现逆反现象,如酸性饮料等),不应作为检样计数报告的依据。
6.当平板上有链状菌落生长时,如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,则应作为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算,不要把链上生长的每一个菌落分开计数。
如有片状菌落生长,该平板一般不宜采用,如片状菌落不到平板一半,而另一半又分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。
7.当计数平板内的菌落数过多(即所有稀释度均大于300时),但分布很均匀,可取平板的一半或1/4计数。
再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。
一、实验目的1. 了解细菌菌落总数的测定方法。
2. 掌握细菌菌落总数的计数技巧。
3. 分析实验数据,探讨影响细菌菌落数的因素。
二、实验原理细菌菌落总数(Colony-Forming Units,CFU)是指在一定条件下,一个细菌在固体培养基上生长繁殖所形成的肉眼可见的菌落。
通过测定一定量样品中的细菌菌落数,可以评估样品的卫生状况和微生物污染程度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:肉膏蛋白胨脂培养基、无菌水、无菌试管、无菌吸管、无菌培养皿、细菌样品等。
2. 实验仪器:高压蒸汽灭菌锅、电热培养箱、恒温箱、电子天平、移液器、显微镜等。
四、实验步骤1. 样品处理:取一定量的细菌样品,加入适量的无菌水,进行10倍递增稀释。
2. 制备平板:将肉膏蛋白胨脂培养基加热融化,待冷却至45-50℃时,用无菌吸管吸取适量稀释液,均匀涂布在培养皿上。
3. 培养与观察:将涂布好的培养皿倒置放入恒温箱中,37℃培养24小时。
4. 菌落计数:观察培养皿上的菌落,按照菌落形态、大小、颜色等特征进行计数。
5. 数据分析:根据实验数据,计算样品中的细菌菌落数。
五、实验结果与分析1. 实验结果本次实验中,样品A的细菌菌落数为3.2×10^6 CFU/g,样品B的细菌菌落数为1.5×10^5 CFU/g。
2. 结果分析(1)样品A的细菌菌落数明显高于样品B,说明样品A的微生物污染程度较重。
(2)实验过程中,操作人员的无菌操作对实验结果有一定影响。
无菌操作不规范可能导致样品受到污染,从而影响细菌菌落数的准确性。
(3)培养温度和时间对细菌菌落数也有一定影响。
本次实验采用37℃培养24小时,适用于大多数细菌的生长。
若培养温度过低或过高,或者培养时间不足,可能导致细菌菌落数偏低。
六、实验结论本次实验成功测定了样品中的细菌菌落数,结果表明样品A的微生物污染程度较重。
实验过程中,应注意无菌操作,严格控制培养温度和时间,以保证实验结果的准确性。
水质细菌总数的测定菌落计数1.适用范围本方法适用于测定饮用水、水源水、地表水细菌总数的测定。
2.原理平板计数法是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌密度的方法。
因为细菌在水中能以单独个体、成双成对、链状、成簇等形式存在,而且没有任何单独一种培养基或一套物理、化学条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求。
所以,由此法所得的菌落数可能要低于真正存在的活细菌的总数。
3.仪器高压蒸汽灭菌器电热干燥箱恒温培养箱冰箱解剖镜。
采样瓶、三角烧瓶、试管、平皿(直径9cm)、刻度吸管等器皿121°C(20min)高压蒸汽灭菌后于电热干燥箱中烘干。
培养基营养琼脂培养基:市售营养琼脂培养基,按说明配制,装于三角烧瓶中,经121C高压蒸汽灭菌15min,经无菌性检验和标准菌株检验后,贮存于暗处备用。
4.步骤4.1选择稀释度稀释度要选择适宜,以期在平皿上的菌落总数介于30〜300之间。
大多数饮用水水样,未经稀释直接接种1mL,所得的菌落总数可适于计数。
4.2水样的稀释方法①将水样用力振摇20〜25次,使可能存在的细菌凝团成分散状。
②以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样,注入盛有9mL灭菌水的试管中,混匀成1:100稀释液。
按同法依次稀释成1:1000、1:10000稀释液(稀释倍数按水样污浊程度而定)。
注意:吸取不同浓度的稀释液时,必须更换吸管。
4.3操作方法①以无菌操作方法用1mL灭菌吸管吸取充分混匀的水样或2〜3个适宜浓度的稀释水样ImL,注入灭菌平皿中,倾注约15mL已融化并冷却到45°C左右的营养琼脂培养基,并立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。
每个水样应倾注两个平皿。
②待琼脂冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于37C恒温箱内培养24h,进行菌落计数。
4.4菌落计数培养之后,立即进行平皿菌落计数。
如果计数必须暂缓进行,平皿需存放于5〜10C冰箱内,且不得超过24h。
但是不可以使这种做法成为常规的操作方式。
一、菌落介绍:菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细胞集合而成。
当样品稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数:在一定条件下(需养、营养条件、PH、培养温度和时间等)每克或毫升检样所生长出来的细菌菌落总数。
需氧、37度、48H二、检验方法菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中取出1ml置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度条件下,培养48小时后,记录每个平皿中形成的菌种数量,依据稀释倍数,计算出每克或毫升原始样品中所含杨的细菌菌落总数。
基本操作步骤:样品的稀释》倾注平皿》培养48h》计数报告三、具体步骤(一)样品的处理和稀释1、操作方法:以无菌操作取检样25g或ml,放于225ml灭菌生理盐水或被其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠),经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。
(固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均匀器中以8000—10000r/min的速度处理1min。
)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。
甲溶液浓度为0.1。
我们取甲溶液1毫升,再加9毫升蒸馏水,制得乙溶液(浓度变为0.01)。
再取乙溶液1毫升,加蒸馏水9毫升,制得丙溶液(浓度变为0.001)再取丙溶液1毫升,加蒸馏水9毫升,制得丁溶液(浓度变为0.001)再取丙溶液1毫升,加蒸馏水9毫升,制得丁溶液(浓度变为0.001)依次类推,可得到0.0001、0.00001、0.000001。
这样的溶液。
这个过程就是十倍递增稀释。
另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。
2、无菌操作:操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的,不得残留有细菌或抑菌物质。
化妆品微生物标准检验方法总则的菌落计数及报告方法6 菌落计数方法先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用放大5~10倍的放大镜检查,以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后,求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时,该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘以2,以代表全皿菌落数。
7 菌落计数及报告方法7.1 首先选取平均菌落数在30~300个之间的平皿,作为菌落总数测定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表1中例1)。
7.2 若有两个稀释度,其平均菌落数均在30~300个之间,则应求出两菌落总数之比值来决定,若其比值小于或等于2,应报告其平均数,若大于2则报告其中稀释度较低的平皿的菌落数(见表1中例2及例3)。
7.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300个,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例4)。
7.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30个,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1例5)。
7.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300个之间,其中一个稀释度大于300个,而相邻的另一稀释度小于30个时,则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例6)。
7.6 若所有的稀释度均无菌生长,报告数为每g或每mL小于10CFU。
7.7 菌落计数的报告,菌落数在10以内时,按实有数值报告之,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,应以四舍五入法计算。
为了缩短数字后面零的个数,可用10的指数来表示(见表1报告方式栏)。
在报告菌落数为“不可计”时,应注明样品的稀释度。
表1 菌落计数结果及报告方式例一:稀释了100倍就乘上100164x100=16400例二:稀释了100倍菌落总数为295x100稀释了1000倍菌落总数为46x1000两菌落总数之比值(1000倍菌落总数作为分子而100倍菌落总数作为分母)为因为比值少于2,所以应报告其平均数例三:稀释了100倍菌落总数为271x100稀释了1000倍菌落总数为60x1000两菌落总数之比值(1000倍菌落总数作为分子而100倍菌落总数作为分母)为因为比值大于2,所以报告其中稀释度较低的平皿的菌落数稀释了100倍菌落总数为例四:稀释了100倍的平均菌落数为4650>300稀释了1000倍的平均菌落数为513>300按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告在实际生产情况,则需要重新取样进行微生物检验,同时解决生产过程存在的污染因素例五:稀释了10倍的平均菌落数为27<30稀释了100倍的平均菌落数为11<30稀释了1000倍的平均菌落数为5<30按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告27x10=270例六:稀释了100倍的平均菌落数为305接近300305x100=30500。
第1篇一、实验目的1. 掌握细菌菌落计数的原理和方法。
2. 学会使用平板菌落计数法对细菌进行计数。
3. 了解不同细菌的生长特性和培养条件。
二、实验原理细菌菌落计数是微生物学中常用的实验方法,通过在固体培养基上培养细菌,观察并计数菌落,从而了解样品中细菌的数量。
实验原理基于以下步骤:1. 样品处理:将待测样品进行适当的稀释,以使菌落数量达到可计数的范围。
2. 接种:将稀释后的样品涂布在固体培养基上,使菌落分散生长。
3. 培养和观察:在一定条件下培养涂布后的培养基,观察菌落生长情况。
4. 计数:选择平均菌落数在30~300之间的平板进行计数,计算菌落数。
三、实验材料1. 样品:实验室自备的细菌样品。
2. 培养基:营养琼脂培养基、牛肉膏蛋白胨培养基等。
3. 仪器:无菌操作台、移液管、培养皿、酒精灯、恒温培养箱等。
4. 其他:无菌水、酒精、生理盐水、无菌棉签等。
四、实验方法1. 样品处理:将待测样品进行适当的稀释,以使菌落数量达到可计数的范围。
2. 接种:用无菌棉签将稀释后的样品涂布在固体培养基上,使菌落分散生长。
3. 培养和观察:将涂布后的培养基置于恒温培养箱中,在一定条件下培养。
4. 计数:观察菌落生长情况,选择平均菌落数在30~300之间的平板进行计数。
五、实验步骤1. 样品处理:取1mL待测样品,加入9mL无菌水中,进行10倍稀释。
2. 接种:用无菌棉签蘸取稀释后的样品,涂布在营养琼脂培养基上。
3. 培养和观察:将涂布后的培养基置于37℃恒温培养箱中,培养24小时。
4. 计数:观察菌落生长情况,选择平均菌落数在30~300之间的平板进行计数。
六、实验结果1. 样品1:菌落总数为100个。
2. 样品2:菌落总数为200个。
3. 样品3:菌落总数为150个。
七、实验分析1. 样品1的菌落总数较少,可能是因为样品中细菌数量较少或细菌生长条件不适宜。
2. 样品2的菌落总数较多,可能是因为样品中细菌数量较多或细菌生长条件适宜。
一、实验目的1. 掌握菌落总数的测定原理和方法。
2. 了解菌落总数在食品卫生学评价中的意义。
3. 通过实验,学会正确操作实验仪器和试剂,提高实验技能。
二、实验原理菌落总数是指在一定条件下,单位体积(或重量)样品中生长的细菌菌落数量。
本实验采用平板计数法,通过将样品进行稀释,涂布在琼脂平板上,在一定条件下培养,统计菌落数量,从而估算样品中的菌落总数。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 食品样品(如蛋糕、饮料等)- 稀释剂(如无菌生理盐水)- 营养琼脂平板- 铅笔- 灭菌棉签- 灭菌镊子- 培养箱- 移液器- 移液管- 计数器2. 实验仪器:- 电子天平- 高压蒸汽灭菌锅- 恒温水浴锅- 超净工作台四、实验步骤1. 样品准备:- 称取适量样品,用无菌生理盐水进行10倍稀释。
- 将稀释后的样品涂布在营养琼脂平板上。
2. 培养与观察:- 将涂布好的平板放入培养箱中,在适宜的温度下培养24小时。
- 观察平板上的菌落生长情况。
3. 菌落计数:- 选择菌落数量适中的平板,用铅笔在平板背面标记菌落位置。
- 用计数器对菌落进行计数。
- 根据稀释倍数,计算样品中的菌落总数。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 蛋糕样品的菌落总数为5.0×10^6 CFU/g。
- 饮料样品的菌落总数为1.2×10^5 CFU/mL。
2. 分析:- 蛋糕样品的菌落总数较高,可能是由于生产过程中受到污染或保存不当。
- 饮料样品的菌落总数相对较低,可能是由于生产过程中严格把关,保证了产品的卫生质量。
六、实验讨论1. 影响菌落总数测定的因素:- 样品处理方法:样品处理不当会导致菌落总数测定结果不准确。
- 稀释倍数:稀释倍数过大或过小都会影响菌落总数的测定。
- 培养条件:培养温度、湿度等条件会影响菌落的生长。
2. 提高菌落总数测定准确性的方法:- 严格遵循实验操作规程,确保样品处理、稀释、涂布等步骤的正确性。
- 选择合适的稀释倍数,保证菌落数量适中。
菌落总数实验报告菌落总数实验报告一、引言菌落总数是指在一定面积的培养基上,通过观察和计数菌落的数量来评估样品中微生物的总体数量。
菌落总数实验是微生物学中常用的定量分析方法,对于食品、水质、环境等领域的微生物研究具有重要意义。
本实验旨在通过菌落总数实验,了解样品中微生物的数量及其变化情况,为后续的微生物研究提供基础数据。
二、实验原理菌落总数实验基于菌落形成的原理。
当微生物落在含有适宜营养物质的培养基上,经过一段时间的培养,会形成可见的菌落。
菌落总数实验通过将待测样品制备成适当浓度的稀释液,然后将稀释液均匀涂布在培养基表面,培养一定时间后,观察和计数菌落的数量,从而推算出样品中微生物的总体数量。
三、实验步骤1. 准备工作:清洗培养皿、试管、移液器等实验器材,准备好所需培养基和稀释液。
2. 样品制备:将待测样品取适量加入稀释液中,进行适当的稀释,制备出不同浓度的稀释液。
3. 涂布培养基:将不同浓度的稀释液取适量涂布在培养基表面,用无菌棉签均匀涂布,避免菌落重叠。
4. 培养:将涂布好的培养基培养在适当的温度和湿度条件下,一般为37摄氏度,培养时间根据样品的预期菌落总数而定。
5. 计数:培养时间结束后,使用菌落计数器或显微镜观察培养基上的菌落,记录菌落的数量。
6. 数据分析:根据不同浓度的稀释液和菌落的数量,推算出样品中微生物的总体数量。
四、实验结果与讨论根据实验数据统计,我们得到了不同样品的菌落总数。
通过对比不同样品的菌落总数,我们可以发现不同样品中微生物的数量差异。
例如,食品样品中的菌落总数可能较高,说明该食品可能受到了微生物的污染。
而水质样品中的菌落总数较低,可能说明该水源相对较为清洁。
这些结果对于食品安全和环境卫生的评估具有一定的参考价值。
在实验过程中,我们还发现了一些问题。
首先,菌落总数实验只能评估微生物的数量,而不能确定微生物的种类。
因此,在实际应用中,我们需要结合其他的微生物检测方法,来全面了解样品中微生物的情况。
菌落总数计数方法菌落总数是指在一定条件下,通过培养基和培养方法,将微生物在培养基上生长形成的一个个可见的菌落进行计数,从而得到微生物在样品中的数量。
菌落总数计数方法是微生物学中常用的一种方法,下面将介绍几种常见的菌落总数计数方法。
首先,最常用的方法是平板计数法。
平板计数法是将待测样品经过适当稀释后,均匀涂布在含有培养基的平板上,然后进行培养,待菌落生长后进行计数。
这种方法简单易行,适用于各种微生物的计数,但需要注意的是,对于含有大量细菌的样品,需要进行适当的稀释,以避免菌落过多导致计数困难。
其次,滤膜计数法也是一种常见的菌落总数计数方法。
这种方法适用于水样、空气样等液态或气态样品的微生物计数。
首先,将待测样品通过滤膜过滤器过滤,然后将滤膜放置在含有培养基的平板上进行培养,待菌落生长后进行计数。
这种方法操作简单,适用范围广,但需要注意滤膜的选取和过滤条件的控制,以确保计数结果的准确性。
另外,膜过滤计数法也是一种常用的菌落总数计数方法。
这种方法同样适用于水样、空气样等液态或气态样品的微生物计数。
首先,将待测样品通过膜过滤器过滤,然后将膜放置在含有培养基的平板上进行培养,待菌落生长后进行计数。
这种方法操作简便,计数结果准确,但需要注意膜的选择和过滤条件的控制,以确保计数结果的准确性。
最后,荧光染色计数法是一种新兴的菌落总数计数方法。
这种方法利用荧光染色剂对微生物进行染色,然后通过荧光显微镜或自动计数仪进行计数。
这种方法操作简单,计数速度快,适用于各种微生物的计数,但需要注意染色条件的控制,以确保计数结果的准确性。
综上所述,菌落总数计数方法有多种多样,每种方法都有其适用的范围和注意事项。
在进行菌落总数计数时,需要根据样品的特点和实验的要求选择合适的方法,并严格按照操作规程进行操作,以确保计数结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的菌落总数计数方法能够为相关科研工作提供一定的参考价值。
食品中菌落总数测定操作步骤一、器皿、药品试剂准备1、检查高压灭菌锅水水位(完全淹没发热管且与锅底支架相平),通电预热,检查恒温水浴锅水位,通电,设定为46度,加热恒温;2、取8套直径90毫米的培养皿用报纸包裹严密或用布袋封装,放入高压灭菌锅;3、称量4.3克氯化钠于500毫升三角瓶中,用500毫升量桶量取500毫升水加入其中,溶解;4、取一250或300毫升的三角瓶、三支试管,用量桶量取225毫升上述(第3步所培溶液)生理盐水于三角瓶中,用10毫升刻度吸管分别量取9毫升上述(第3步所培溶液)生理盐水于三支试管中,用透气塞或棉塞封口,放入高压灭菌锅;5、称取4.7克平板计数琼脂培养基于250毫升三角瓶中,加200毫升水,溶解,用透气塞或纸封口,放入高压灭菌锅;6、取6支1毫升刻度吸管,用报纸包裹严密或用布袋封装,放入高压灭菌锅;7、盖好锅盖(双手对角拧紧),使密闭步漏气,打开排气阀,排尽冷空气,关闭排气阀,观察压力表指针变化,从压力表指针达121度时开始计时,使温度保持121度15分钟(根据不同的型号需手动或自动控制),15分钟后断电,自然冷却使压力表指针回到零位。
二、样品稀释和培养1、打开超净工作台风机;2、打开压力锅盖,取出包裹严密的8套直径90毫米的培养皿,放入超净工作台;3、取出装有225毫升生理盐水和200毫升培养基的三角瓶(保持封口密闭)、编号-1,放入恒温在46度的水浴锅中;4、取出装有9毫升生理盐水的支试管(置于试管架上),分别编号-2、-3、K,放入超净工作台;5、取出包裹严密的6支刻度吸管,放入超净工作台;6、无菌操作称取25克样品,于超净工作台中放入装有225毫升无菌生理盐水的三角瓶中,用均质器处理1至2分钟,配成-1的阳平均液;7、用1毫升灭菌刻度吸管从-1样品均液中量取1毫升放入-2试管,混匀,制成1:100的样品均液;8、用1毫升灭菌刻度吸管从-2样品均液中量取1毫升放入-3试管,混匀,制成1:1000的样品均液;9、打开培养皿包裹物,培养皿分别编号1:100、1:1000、1:10000、空白(各2皿);10、对应试管和培养皿的编号,用刻度吸管分别吸取1毫升样液于对应的培养皿中;11、将46度恒温的培养基均匀倒入上述8个培养中,每皿20至25毫升;12、静置,冷凝后翻转培养皿,放入36度培养箱培养48小时,计数。
菌落计数及报告方法
1、目的
建立微生物实验中菌落计数及报告规范,从实际生长的菌落数中计算出较为科学的结果
2、方法说明本文件采用平板计数法,产品中污染的细菌种类不同,每种细菌都有它一定的生理特性,培养时对营养要求,培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中,不可能做到满足所有菌的要求,因此所测定的结果,只包括在本方法所使用的条件下生长的微生物总数。
3、参考文件GB7918.2-1987化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定
4、菌落计数方法先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用放大5~10倍的放大镜检查,以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后。
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时,该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘2,以代表全皿菌落数。
5菌落计数及报告方法
5.1 首先选取平均菌落数在30~300之间的平皿,作为菌落总数侧定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表中例1) ,
5.2 若有两个稀释度,其平均菌落数均在30~300个之间,则应求出两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于或等于2 ,应报告其平均数,若大于2则报告其中较小的菌落数( 见表中例2及例3),
5.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300 个,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4),
5.4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5),
5.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300个之间,其中一个稀释度大于300个,而相邻的另一稀释度小于30个时,则以接近30 或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6),
5.6 若所有的稀释度均无菌生长,报告数为每克或每毫升小于10 个。
5.7 菌落计数的报告,菌落数在10以内时,按实有数值报告之,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,应以四舍五入法计算。
为了缩短数字后面零的个数,可用10的指数来表示(见下表报告方式栏)。
在报告菌落数为“不可计”时,应注明样品的稀释度。