生化检验辅导:血磷的测定方法
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磷含量的测定方法磷含量的测定采用磷钼酸喹啉滴定分析方法。
1 原理在酸性溶液中,磷酸根与钼酸钠和喹啉反应,生成磷钼酸喹啉沉淀,过滤并洗去所附着的酸液,将沉淀溶解于过量的碱标准溶液中,再用酸标准溶液反滴定过量的碱,即可计算出五氧化二磷的含量。
2 试剂和溶液钼酸钠;柠檬酸;硝酸;硝酸溶液(1+1);喹啉(不含还原剂);丙酮。
喹钼柠酮试剂:①称70g钼酸钠于400ml烧杯中,加入100ml水溶解;②称60g柠檬酸于1000 ml烧杯中,加入100ml水,溶解后,加85ml硝酸;③把溶液①加到溶液②中,混匀;④混合35 ml硝酸和100ml水在400 ml烧杯中,加入5ml喹啉;⑤把溶液④加入溶液③中,混匀,静置一夜,用滤纸或棉花过滤,滤液加入280ml丙酮,用水稀释至1000ml,混匀,贮存在聚乙烯瓶中,放于暗处,避光,避热。
混合指示液:①称取0.1 g百里香酚蓝,溶于2.2 ml含0.1 mol/L NaOH的氢氧化钠溶液中,用60%(V/V)的乙醇溶液稀释至100 ml;②称取0.1 g酚酞,溶于100 ml 60%(V/V)的乙醇溶液中;③取3份体积的①溶液和2份体积的②溶液混合均匀。
氢氧化钠标准溶液:c (NaOH)= 0.5mol/L。
盐酸标准溶液:c(HCl)=0.25 mol/L。
不含二氧化碳的水:将水注入平底烧瓶中,煮沸10min,立即用装有钠石灰管的胶塞塞紧,放置冷却。
3 测定步骤吸取1ml湿法磷酸置于预先盛有10ml(1+1)硝酸溶液的100 ml容量瓶中,混匀,用水稀释至100 ml,混匀。
从上述容量瓶中吸取1 ml试液于500 ml 烧杯中,加入10 ml(1+1)硝酸溶液,用水稀释至100 ml,盖上表面皿,于电炉上加热至沸,加入35 ml 喹钼柠酮试剂,继续温和地加热微沸1 min,取下烧杯,冷却至室温,冷却过程中转动烧杯3~4次。
用中速滤纸(或脱脂棉)过滤,先将上层滤液滤完,然后以倾泻法洗涤沉淀3 ~4次(每次用水约25 ml ),将沉淀转移至漏斗中再用水洗涤沉淀,直至所得滤液(取约20 ml 滤液,加入1滴混合指示液和1滴c (NaOH)= 0.25mol/L 的氢氧化钠溶液后,所呈颜色与处理同体积蒸馏水所呈颜色相近为止)。
磷测定原理磷是植物生长必需的元素之一,是核酸、磷脂、ATP等生命活动必需的结构和代谢物。
因此,在农业生产和环境保护中,磷含量的测定非常重要。
本文将围绕磷测定原理展开,详细介绍磷测定的各个流程和方法。
一、测定磷含量的基本原理测定磷含量的原理就是将样品中的磷元素转化为无机磷酸盐,并通过一定的方法将其定量。
常用的无机磷酸盐有H2PO4-、HPO42-、PO43-。
根据测定的需求和磷形态不同,测定过程中使用的方法也不同。
在测定过程中,一般通过比色法、荧光法、电化学法等方法进行测定。
二、测定磷含量的步骤1. 样品的处理磷含量的测定需要选择合适的样品。
一般来说,不同的样品需要采用不同的处理方式。
对于土壤、废水或污泥等样品,通常需要进行干燥、研磨、筛选等处理。
对于肥料、动物养殖废料等样品,需要进行分散、提取、过滤等处理。
2. 磷的转化和提取在样品处理过程中,磷需要转化为无机磷酸盐才能进行测定。
一般方法是将样品使用强酸进行消解,然后加入含磷化合物,将样品中的磷转化为无机磷酸盐,便于后续测定。
3. 比色法测定比色法是测定磷含量最常用的方法之一。
在这种方法中,利用的是磷酸盐和钼酸盐反应形成的蓝色化合物。
这种化合物的颜色深浅与样品中的磷含量成正比。
将样品加入含有钼酸盐的溶液中,待反应后,通过比色计将样品的吸光度与标准曲线相对照,即可得出磷含量的测定结果。
4. 荧光法测定荧光法是一种快速测定磷含量的方法。
该方法基于荧光分析仪测定样品中的荧光强度,荧光强度与样品中磷含量成正比。
将样品加入荧光试剂中,待反应后,读取荧光分析仪的数值即可得出磷含量的测定结果。
5. 电化学法测定电化学法是另一种测定磷含量的方法,更加精准且操作简单。
该方法一般使用电化学分析仪进行测定。
首先在样品中加入控制流体,形成一个三电极系统;然后加入特殊电极,在电极上加上电压或电流,通过电极反应生成的电荷进行测定,即可得出磷含量的测定结果。
以上就是围绕“磷测定原理”所写的文章,磷含量的测定在农业生产和环境保护中具有极为重要的意义。
磷含量检测方法
嘿,咱今儿就来聊聊磷含量检测方法!这可真是个超级重要的事儿呢!你想想看,磷在好多领域都有着关键的作用呀。
检测磷含量的方法那可不少呢!比如说比色法,就好像是一个神奇的魔法棒,通过特定的试剂和磷发生反应,然后产生出不同的颜色,根据颜色的深浅就能知道磷的含量啦!这多有趣呀,就像是一场色彩的大冒险。
还有重量法呢,这就像是一个严谨的法官,精确地称量出磷的重量,从而得出准确的结果,是不是很厉害?
原子吸收光谱法也很不错哦!它就如同一个敏锐的侦探,能够精准地捕捉到磷原子的信号,进而确定磷的含量。
这可真是太神奇啦!还有分光光度法,它像是一个挑剔的艺术家,对光的变化有着极高的要求,通过对光的分析来确定磷的含量呢。
那这些方法都有啥优缺点呢?比色法简单易行,但可能会受到一些干扰呀。
重量法准确可靠,可操作起来稍微有点麻烦呢。
原子吸收光谱法很灵敏,但设备可能会有点贵哦。
分光光度法也有它的独特之处,但也需要注意一些细节呢。
那我们在实际应用中该怎么选择呢?这就得根据具体情况啦!如果要求快速得出结果,也许比色法是个不错的选择。
要是对准确性要求特别高,那重量法可能更合适呀。
要是不差钱,想要超灵敏的检测,原子吸收光谱法就派上用场啦。
总之,磷含量检测方法各有各的好,各有各的妙!我们要根据实际需求来灵活选择,让这些方法为我们的工作和生活服务呀!难道不是吗?它们就像是我们的得力助手,帮助我们更好地了解和利用磷这个重要的元素呢!。
微生物量磷测定方法微生物量磷是生物地球化学循环中的重要元素之一,对于评估生态系统的健康状况和功能发挥具有重要意义。
本文将介绍硫酸钾溶液提取法、酸水解法、紫外线辐射法、高温分解法、氢氧化钠溶液提取法、氯仿处理法、硝酸银滴定法、磷钼蓝比色法、酚红指示剂法以及同位素标记法等微生物量磷的测定方法。
1.硫酸钾溶液提取法硫酸钾溶液提取法是一种常用的测定微生物量磷的方法。
其原理是利用硫酸钾溶液中的钾离子与细菌细胞膜上的磷酸盐进行交换,使细胞膜上的磷释放到溶液中。
通过测定溶液中磷的含量,可以计算出微生物量磷的含量。
2.酸水解法酸水解法是通过在样品中加入强酸,使样品中的有机磷转化为无机磷,再通过测定总磷含量,从而计算出微生物量磷的含量。
该方法具有操作简单、快速等优点,但可能会对样品中的其他元素产生干扰。
3.紫外线辐射法紫外线辐射法是一种利用紫外线辐射分解样品中有机磷的方法。
其原理是紫外线辐射能够破坏有机磷中的化学键,使其转化为无机磷。
该方法具有操作简便、快速等优点,但可能会对样品产生一定的破坏作用。
4.高温分解法高温分解法是通过在高温条件下对样品进行分解,使样品中的有机磷转化为无机磷。
该方法具有操作简便、快速等优点,但可能会对样品产生破坏作用,且不适用于含有活性菌的样品。
5.氢氧化钠溶液提取法氢氧化钠溶液提取法是一种利用氢氧化钠溶液提取样品中有机磷的方法。
其原理是氢氧化钠能够与样品中的有机磷反应,使其转化为可溶性无机磷。
通过测定无机磷含量,可以计算出微生物量磷的含量。
该方法具有操作简便、快速等优点,但可能会对样品产生一定的破坏作用。
6.氯仿处理法氯仿处理法是一种利用氯仿等有机溶剂分离样品中脂类物质的方法。
通过氯仿处理可以去除样品中的脂类物质,从而减小其对磷测定的干扰。
该方法具有操作简便、快速等优点,但需要使用氯仿等有害有机溶剂,需要注意安全问题。
7.硝酸银滴定法硝酸银滴定法是一种利用硝酸银滴定剂测定样品中无机磷含量的方法。
磷含量的测定方法嘿,咱今儿就来聊聊磷含量的测定方法。
这可真是个有意思的事儿呢!你想想看,磷就像个调皮的小精灵,藏在各种物质里,咱得想办法把它给揪出来。
那怎么揪呢?这就得靠一些巧妙的方法啦。
比如说重量法,这就好比是一场耐心的“捕捉游戏”。
通过一系列的操作,让磷乖乖地沉淀下来,然后咱再去称量沉淀的重量,从而确定磷的含量。
就像你要抓住一只调皮的小猫,得慢慢布置好陷阱,等它上钩。
还有分光光度法,这就像是给磷这个小精灵拍了一张特别的“照片”。
利用特定的试剂和仪器,让磷显示出独特的颜色,然后根据颜色的深浅来判断磷的含量。
是不是很神奇呀?就像你通过看一个人的脸色就能大概猜出他的心情一样。
容量法也不错哦,就像是和磷来了一场精确的“较量”。
通过化学反应,准确地计算出消耗的试剂的量,从而得出磷的含量。
这可需要足够的细心和技巧呢,就跟你下棋要算好每一步一样。
每种方法都有它的特点和适用范围呢,就像不同的工具,有的适合修这个,有的适合修那个。
咱得根据具体情况来选择最合适的方法,不然可就像拿着锤子去拧螺丝,白费力气啦!在实际操作中,可得小心谨慎,不能有丝毫马虎。
就像走钢丝一样,稍有不慎,结果可能就不准确啦。
而且要严格按照步骤来,一步错步步错呀。
你说这磷含量的测定是不是很有趣呢?它就像一个神秘的谜题,等着我们用各种方法去解开。
通过这些方法,我们能更好地了解物质的组成和性质,这对很多领域都有着重要的意义呢。
所以呀,可别小看了这小小的磷含量的测定哦!总之呢,磷含量的测定方法是多种多样的,每一种都有它独特的魅力和用处。
我们要不断学习和探索,掌握这些方法,为我们的科学研究和实际应用服务。
让我们一起加油,成为磷含量测定的小专家吧!。
样品处理称磨细烘干的植物样品(过0.25~0.5mm筛)0.1000~0.2000g,置于100mL的开氏瓶或消化管中,先用水湿润样品,然后加浓H2SO45mL,轻轻摇匀(最好放置过夜),瓶口放一个弯颈不漏斗,在消化炉上先低温缓缓加热,待浓硫酸分解冒白烟逐渐升高温度。
当溶液全部呈棕黑色时从消化炉上取下开氏瓶,稍冷,逐滴加入300g·L-1 H2O2 10滴,并不断摇动开氏(注1),以利反应充分进行。
再加热至微沸10~20min,稍冷后再加入H2O25~10滴。
如此反复2~3次,直至消煮液呈无色或清亮色后,再加热5~10min,以除尽过剩的双氧水(注2)。
取出开氏瓶冷却,用少量水冲洗小漏斗,洗液洗入瓶中。
将消煮液用水定容至100mL,取过滤液(或取放置澄清的上清液)供N、P、K等元素的测定。
消煮时应同时做空白试验以校正试剂误差。
磷含量的测定(比色法)试剂(1)磷标准溶液(2)25g/L钼酸铵溶液称取2.5g钼酸铵,加20mL水,15mL浓硫酸溶解,用水稀释至100mL。
(3)5g/L对苯二酚溶液称取0.5g对苯二酚,溶于100mL水中,加1滴浓硫酸(减缓氧化作用)。
(4)200g/L亚硫酸钠溶液测定步骤试样处理:同钙含量的测定中原子吸收分光光度法(2g→25mL)。
标准曲线的绘制:吸取1mL含10ug的磷标准溶液0,0.2,0.6,0.8,1.0mL,分别置入25mL比色管中补水3mL,加2mL25g/L钼酸铵溶液,1mL5g/L对苯二酚溶液和1mL200g/L亚硫酸钠溶液,摇匀,于室温下显色30min,波长550nm,1cm比色皿,测定吸光度并绘制标准曲线。
取1~3mL试样消化液(含磷量〈10ug),以下同标准曲线的绘制操作,测定吸光度。
计算。
磷测定原理
磷测定原理是通过测定样品中磷元素的含量来确定磷的数量。
常用的方法有分光光度法、原子荧光光谱法、火焰光度法等。
其中,分光光度法是在特定的波长下,用分光光度计测量样品溶液的吸光度,并通过比色计算出磷的含量。
原子荧光光谱法则是将样品溶液转化为气态,在高能激发下,磷原子产生的荧光强度与其浓度成正比,从而确定磷的含量。
火焰光度法是将样品溶液喷入高温火焰中,燃烧后形成高温火焰,促使磷原子激发发射特征光谱,通过光度计测量其发射光谱强度,进而计算出磷的含量。
这些方法都需要严格控制样品的前处理过程,以确保准确测定磷的含量。
同时,由于磷元素在样品中的含量常常较低,因此还需要使用标准曲线等校正方法来提高测量准确度。
总的来说,磷测定原理是通过不同的测定方法对样品中磷元素进行测量,以确定磷的含量。
这些方法在实际应用中具有一定的选择性和敏感性,能够满足不同领域对磷测定的需求。
血清磷(P)
一、检测原理
样品中磷在酸性环境中与钼酸盐(MoN4)反应生成一种复合物,与血清磷浓度成正比,在340nm波长处进行比色终点法测定,从而求得血清磷的浓度。
二、参考区间
血清:0.9—1.34mmol/L
三、临床意义
1、血清无机磷升高
1)甲状旁腺功能减退:
见于原发性甲状旁腺功能减退、继发性甲状腺功能减退以及假性甲状旁腺功能低下,由于尿磷排出减少,使血磷升高。
2)慢性肾功能不全:肾小球滤过率下降,肾排磷量减少,血磷上升,血钙降低。
3)维生素D中毒:
由于维生素D的活性型促进溶骨,并促进小肠对钙、磷的吸收,以及肾对磷的重吸收,因此维生素D中毒时伴有高血磷。
4)其他:血磷升高还可见于甲状腺功能亢进、肢端肥大症、酮症酸中毒、乳酸酸中毒、严重急性病、饥饿等情况。
2、血清无机磷降低
可由于小肠磷吸收减低、肾排磷增加、磷向细胞内转移等原因引起。
1)原发性或继发性甲状旁腺功能亢进:都可使无机磷随尿排出增多,造成低血磷。
2)维生素D缺乏:可使小肠磷吸收降低,尿排磷增加,导致低血磷,可见于佝偻病、软骨病等。
3)肾小管病变如Fanconi综合征,肾小管重吸收功能障碍,尿磷排泄量增加,血磷下降。
磷含量测试方法嘿,朋友们!今天咱来聊聊磷含量测试方法。
这可真是个有趣又重要的事儿啊!你想想看,磷就像我们生活中的小秘密,藏在各种东西里。
要想知道它到底有多少,就得有合适的办法把它给揪出来。
比如说,有一种常见的方法叫分光光度法。
这就好像是我们在茫茫人海中找一个特定的人一样。
通过一些特殊的试剂和操作,让磷显现出来,然后用仪器去测量它的“身影”,从而确定磷的含量。
是不是很神奇呢?就好比你在一堆玩具里一下子就找到了你最喜欢的那个!还有重量法呢!这就像是称体重一样,直接把磷给“称”出来。
虽然过程可能会稍微复杂一点,但就像解开一道难题一样,一旦成功了,那种成就感可别提啦!再说说滴定法,就好像是一场你追我赶的游戏。
用一种试剂去“追”磷,直到追到为止,然后根据消耗的试剂数量来算出磷的含量。
是不是很有意思呀?那在实际操作中,可不能马马虎虎哦!就像做饭一样,调料放多了或者放少了,味道可就不一样啦。
做磷含量测试也是,每一步都得小心翼翼,不然得出的结果可能就不准确啦。
比如说,试剂的选择得合适吧,不然怎么能准确地找到磷呢?操作的时候得认真吧,不能三心二意的。
而且环境也很重要哦,不能有太多干扰因素,不然磷都被吓跑啦!你说,如果测试不准确,那不是就像盲人摸象,只摸到了一部分,却以为那就是全部了吗?这可不行呀!我们得把磷的真实情况给弄清楚,这样才能更好地利用它,或者避免它带来的不好影响。
所以呀,大家在进行磷含量测试的时候,一定要认真对待,就像对待自己最喜欢的宝贝一样。
要用心去感受每一个步骤,每一个细节,这样才能得到准确可靠的结果。
总之呢,磷含量测试方法是我们探索磷这个小秘密的钥匙。
通过这些方法,我们可以更好地了解磷,利用磷,让它为我们的生活和工作服务。
大家可不要小瞧了这些方法哦,它们可是非常重要的呢!让我们一起努力,把磷含量测试这件事做得越来越好!。
测磷的方法
嘿,朋友们!今天咱就来聊聊测磷的那些事儿。
你说这磷啊,就像个调皮的小精灵,藏在各种物质里,得想办法把它给揪出来。
那怎么揪呢?这可有不少门道呢!
咱先说说重量法,这就好比是一场拔河比赛,要把磷从一堆东西里使劲拽出来,然后称称它有多重。
虽然过程可能有点繁琐,但就像盖房子,基础打得牢,结果就可靠。
还有比色法呀,这就像是给磷化个特别的妆,让它在特定的条件下呈现出独特的颜色,然后通过颜色的深浅来判断磷的多少。
就好像我们看彩虹,不同的颜色代表着不同的美丽和信息。
容量法呢,就像是用量杯去量水一样,精确地计算出和磷有关的量。
这可得细心点儿,不能有一点儿马虎,不然结果可就不准确啦。
你想想看,要是在农业上,不知道土壤里磷的含量,那怎么能种出好庄稼呢?就像做饭不知道放多少盐,那味道能好吗?在工业上也是一样啊,要是对磷的检测不准确,那产品质量能有保障吗?
测磷的时候,可不能马马虎虎的,要像侦探一样,不放过任何一个蛛丝马迹。
每一个步骤都要认真对待,就像走钢丝,得小心翼翼。
有时候可能会遇到一些小麻烦,比如试剂失效啦,仪器不准确啦,但咱可不能被这些小困难吓倒,得想办法解决呀!
咱还得注意安全,那些化学试剂可都不是好惹的,得按照规定来操作,可别把自己给伤着了。
这就跟过马路要看红绿灯一样,是必须要遵守的。
总之呢,测磷这事儿可不简单,但也别觉得它有多难。
只要咱认真学,多实践,就一定能把这个小精灵给抓住!这就是我对测磷的一些看法,你们觉得呢?
原创不易,请尊重原创,谢谢!。
磷的测定方法磷的测定方法1.原理食物中的有机物经酸氧化分解,使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。
此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝。
用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光值,以测定磷的含量。
反应式为:H3PO4+12(NH4)3MoO4+21HNO3→(NH4)3PO4·12MoO3+21NH4NO3+12H2O2.适用范围依据中华人民共和国国家标准:GB12393-90,此方法适用于所有食品及保健品中磷元素含量的测定。
3.仪器722可见分光光度计4.试剂(1)硝酸(G.R),高氯酸(G.R) 硫酸(A.R)(2)混合酸消化液:硝酸+高氯酸按4+1混合(3)15%(V/V)硫酸溶液:取15ml硫酸缓慢加入到80ml水中,并定容至100ml。
(4)5%(W/V)钼酸铵溶液:取5g钼酸铵,用15%硫酸溶液稀释至100ml。
(5)对苯二酚溶液:取0.5g对苯二酚于100ml水中,溶解后加一滴浓硫酸。
(6)20%(W/V)亚硫酸钠溶液(注:此溶液需在每次实验前临时配制):称取一定量的亚硫酸钠,用蒸馏水溶解即可。
(7)标准质控物:猪肝粉(国家标准物质研究中心提供),质控物需室温干燥保存。
(8)国家标准物质中心提供:磷标准储备溶液,浓度为1000μg/mL(9)标准中间液的配制:吸取1ml磷标准储备溶液,然后移入100ml容量瓶中,用去离子水定容至100ml ,浓度为10mg/L5.操作步骤5.1样品消化:实验操作需在无元素污染的环境中进行。
准确称取样品干样(0.3-0.7g左右),湿样(1.0g左右),饮料等其他液体样品(1.0-2.0g左右),然后将其放入50ml消化管中,加混酸15ml(油样或含糖量高的食品可多加些酸),过夜。
次日,将消化管放入消化炉中,消化开始时可将温度调低(约130℃左右),然后逐步将温度调高(最终调至240℃左右)进行消化,一直消化到样品冒白烟液体变成无色或黄绿色为止。
一、实验目的1. 学习血清中磷的测定原理和方法。
2. 掌握血清中磷的测定操作步骤。
3. 了解血清中磷的生理功能及其临床意义。
二、实验原理血清中磷主要以无机磷酸盐的形式存在,测定血清中磷的浓度有助于了解人体内磷的代谢情况。
本实验采用磷钼酸法测定血清中磷的浓度。
该方法基于磷与钼酸在酸性条件下生成磷钼杂多酸,磷钼杂多酸在还原剂的作用下,还原为蓝色的磷钼蓝,其颜色的深浅与磷的浓度成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:血清标本、磷酸盐标准液、钼酸铵溶液、抗坏血酸溶液、硫酸溶液、显色剂等。
2. 实验仪器:721分光光度计、微量移液器、试管、试管架、移液管等。
四、实验方法1. 标准曲线绘制:(1)取6个试管,分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL磷酸盐标准液,再分别加入1.5mL钼酸铵溶液。
(2)室温放置5分钟,加入1.5mL抗坏血酸溶液。
(3)摇匀,加入1.5mL硫酸溶液。
(4)摇匀,显色剂。
(5)室温放置10分钟,以显色剂为空白,在波长680nm处测定吸光度。
(6)以磷酸盐浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 血清中磷的测定:(1)取6个试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL血清标本,再分别加入1.5mL钼酸铵溶液。
(2)室温放置5分钟,加入1.5mL抗坏血酸溶液。
(3)摇匀,加入1.5mL硫酸溶液。
(4)摇匀,显色剂。
(5)室温放置10分钟,以显色剂为空白,在波长680nm处测定吸光度。
(6)根据标准曲线,计算血清中磷的浓度。
五、实验结果1. 标准曲线:以磷酸盐浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,得到线性方程为:Y = 0.0163X + 0.0112(R² = 0.9987)。
2. 血清中磷的测定结果:根据标准曲线,计算得到血清中磷的浓度为2.0 ±0.2mmol/L。
六、实验讨论1. 实验过程中,注意显色剂的使用,避免产生沉淀。
生物材料中总磷量测定——比色法一、目的应用比色法测定生物材料中的总磷量。
二、原理生物体中有许多含磷化合物,如核酸、磷脂、ATP等。
磷的测定方法很多,有重量法、比浊法、比色法等。
微量而准确的定磷方法常常是生物化学研究中必需的。
比色法具有准确、微量、快速的特点,被广泛应用于生物化学工作中。
磷测定的原理是:有机含磷物质与浓硫酸(同时加入少量硫酸铜-硫酸钾催化剂)共热,使变成无机磷酸,此过程称为消化。
在酸性条件下无机磷酸与钼酸根形成磷钼酸复离子,在还原剂作用下磷钼酸复离子被还原成深蓝色的钼蓝。
磷含量愈高,则形成的钼蓝物质亦多,蓝色就愈深。
应用分光光度计在660毫微米处可以测得此深蓝色溶液的光密度(OD)值,通过与已知浓度的标准磷溶液所测得的OD₆₆₆值相比较,就能得到所测样品中磷的含量。
核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)中都含磷酸。
根据分析,纯的核酸含磷量为9%。
如从核酸样品中测到总磷量,就可计算出样品中核酸的量。
例如某核酸样品测得磷为1毫克,那么此样品中就有11毫克核酸。
生物有机磷材料中有时含有无机磷杂质,要用定磷法来测定该有机磷物质的量时,必须分别测定该样品的总磷量(样品经消化后所测得的含磷量)以及样品中的无机磷含量(样品不经消化而直接测得的含磷量)。
将总磷量减去无机磷量即为该有机磷物质的含磷量。
本实验测定RNA制品中的含磷量,由于样品纯度较高,不必测定无机磷含量,仅测总磷量就可以。
三、实验材料,仪器和试剂1、实验材料RNA溶液:在分析天平上精确称取RNA,以0.1N氢氧化钠配成5毫克/毫升的溶液。
2、仪器移液管、容量瓶、试管、72型分光光度计、电热恒温水浴箱、温度计。
3、试剂磷酸盐标准溶液:准确称取预先在105₆下烘至恒重的磷酸二氢钾(KH₆PO₆,分析纯)0.4389克,以蒸馏水定容至100毫升即成含磷为1毫克/毫升的标准溶液。
使用时将该液再稀释100倍,此稀释液含磷量是10微克/毫升。
测磷含量的方法嘿,朋友们!今天咱来聊聊测磷含量这个事儿。
你说磷这玩意儿,就像生活中的小惊喜,有时候你得费点心思才能找到它呢!咱先说说为啥要测磷含量吧。
就好比你要知道自己兜里有多少钱,才能合理安排怎么花呀!测磷含量也是一样,知道了它的多少,才能更好地了解咱面对的东西是啥样。
那怎么测呢?这就有好多方法啦!就像你去市场买菜,有各种各样的挑选方式。
有一种常见的方法就是比色法,这就好像是在一堆颜色里找出那个特别的。
你把样本处理一下,加入一些试剂,然后就等着看颜色的变化,根据颜色的深浅来判断磷的含量。
是不是有点神奇?还有重量法呢,这就像是称东西的重量一样,只不过称的是磷的“重量”。
通过一系列的操作,把磷给分离出来,然后称一称,嘿,就知道有多少啦!你想想啊,如果没有这些方法,那我们岂不是像在黑暗中摸索,不知道面对的是什么情况。
测磷含量就像是给我们点亮了一盏灯,让我们能看清前方的路。
你说这测磷含量难不难?其实也不难,只要你掌握了方法,就跟骑自行车一样,一开始可能有点晃悠,但多练几次就顺溜啦!而且啊,你在做实验的时候,就感觉自己像个小科学家,在探索未知的世界呢!就拿比色法来说吧,你得仔细地按照步骤来,一步都不能马虎。
就像搭积木一样,一块一块地放好,才能搭出漂亮的城堡。
要是有一步错了,那结果可能就不准确啦,那不就白忙活了嘛!还有啊,做实验的时候可得细心,别毛毛躁躁的。
你想想,要是不小心把试剂洒了,或者弄错了剂量,那不就糟糕啦!所以啊,一定要静下心来,认真对待。
咱再说说重量法,这可需要点耐心呢!就像钓鱼一样,得慢慢等,不能着急。
把那些步骤一步一步做好,最后才能得到准确的结果。
总之呢,测磷含量这事儿,说简单也简单,说难也难。
但只要咱用心去学,去做,就一定能掌握好。
这就像学走路一样,一开始跌跌撞撞,后来不也走得稳稳当当啦!所以啊,别害怕,大胆去尝试吧!相信你们一定能行!咱可不能小瞧了这测磷含量,它可是在很多领域都有着重要的作用呢!不管是在科学研究中,还是在实际生产里,都少不了它。
磷的测量原理磷是一种重要的营养元素,广泛存在于土壤、水体、植物和动物体内,对生物的正常生长和发育至关重要。
因此,磷的测量在农业、环境科学和生命科学等领域中具有重要的意义。
磷的测量主要包括两个方面:磷含量的测定和磷形态的分析。
磷含量的测定是指确定样品中总磷的含量,而磷形态的分析则是指确定磷在不同形态中的存在量。
下面我将详细介绍磷的测量原理。
首先,我们来谈谈磷含量的测定。
磷的测定方法有很多种,其中常用的有光度法、离子色谱法和原子荧光光谱法等。
光度法是一种常用的磷测定方法。
它基于磷酸盐与一些特定试剂发生反应产生的可见光吸收现象。
在光度法中,常用的试剂有钼酸铵和酶催化反应产生的显色剂。
首先,将待测样品中的磷酸盐与试剂进行反应,产生一种显色产物。
然后,通过比色法测定显色产物的吸光度,从而计算出样品中的磷含量。
光度法通常具有灵敏度高、准确性好、操作简单等优点,适用于测定各种环境和生物样品中的总磷含量。
离子色谱法是一种以离子交换作为分离机制的分析方法。
在离子色谱法中,样品中的磷酸盐会与离子交换柱的固定相发生反应,从而实现磷酸盐的分离。
接着,用适当的检测方法(如电导检测器)检测到分离出来的磷酸盐峰,并根据峰面积或峰高来计算出样品中的磷含量。
离子色谱法通常具有选择性高、灵敏度好的优点,适用于测定各种环境和生物样品中的磷酸盐。
原子荧光光谱法是一种通过测量磷元素的荧光发射强度来确定磷含量的方法。
在原子荧光光谱法中,样品首先需要被氧化成磷酸盐形式,然后将磷酸盐溶液喷入高温的电弧中,使其分解成磷原子。
磷原子激发后会发射出特定波长的荧光,通过荧光的强度可以计算出样品中磷元素的含量。
原子荧光光谱法通常具有选择性高、灵敏度好、快速等优点,适用于测定土壤、水体等样品中的磷含量。
除了磷含量的测定,磷的形态分析也是磷测量的重要内容之一。
磷的形态包括无机磷和有机磷两种形式。
无机磷主要指磷酸盐、磷酸盐酯和磷酸等,有机磷主要指有机磷酸酯和有机磷酸等。
磷检测方法
嘿,咱今儿就来聊聊磷检测方法这档子事儿!
你说磷这玩意儿,可重要着呢!就像咱生活中的盐一样,缺了它可不行。
那怎么知道东西里有没有磷,有多少磷呢?这就得靠检测方法啦!
咱先说一种常见的方法,就好比找宝藏似的,通过化学反应让磷现形。
就好像孙悟空的火眼金睛,一下子就能把磷给瞅出来。
把要检测的东西放进去,经过一系列操作,嘿,磷就乖乖地显出来啦!你说神奇不神奇?
还有一种方法呢,就像是给磷做个专门的标记,然后顺着这个标记就能找到它啦!这就像在一群人里,一眼就能认出那个特别的人一样。
这种方法能特别准确地检测到磷的存在和含量。
哎呀,你想想看,如果没有这些检测方法,那好多事情不就乱套啦?就好比做饭不知道放多少盐,那做出来的菜能好吃吗?检测磷也是一样的道理呀!
咱再打个比方,磷检测方法就像是医生给病人看病的手段。
只有知道了具体情况,才能对症下药,把问题解决掉嘛!要是没有这些方法,那岂不是两眼一抹黑,啥都不知道啦?
那这些方法难不难呢?其实也没那么难啦!只要你认真学,就跟学骑自行车似的,一开始可能会摔倒,但多练几次不就会啦?而且现在网上也有好多资料可以查呀,还有专业的人可以请教呢!
你说,咱生活中这么多东西都和磷有关系,要是没有好的检测方法,那得多麻烦呀!所以说呀,这些检测方法可真是太重要啦!咱得重视起来,学会怎么用,这样才能更好地利用磷,让它为我们服务呀!
总之,磷检测方法就像是我们了解磷的钥匙,有了它,我们才能打开磷的神秘大门,发现它的奥秘和用处。
所以呀,大家可别小瞧了这些方法,要好好去学习和掌握哦!。
血清无机磷(Pi)磷钼酸法测定1. 实验原理磷钼酸紫外终点比色法。
钼酸铵+硫酸+磷酸盐磷钼酸络合物;该络合物在340nm有最大光吸收峰。
在340nm的吸光度与标本中无机磷的浓度成正比2. 标本采集2.1 病人准备:无特殊要求。
2.2 类型:血清、肝素血浆或尿液。
3. 标本存放:血清/血浆稳定性:4~25℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月。
尿液稳定性:4~25℃在pH<5保存可稳定2天;不可使用已被污染的标本。
收集24h尿液时,应在收集瓶中加入10%(W/V)盐酸10ml,以防止磷酸盐沉淀。
测定前尿液应用蒸馏水作1:20稀释,测定结果乘以21。
4. 标本运输:室温条件下运输5. 标本拒收标准:细菌污染不能做测定。
6. 实验材料:6.1申能无机磷测定试剂盒(货号:112 5207170 1 试剂:8×70ml)6.1.1 试剂组成硫酸210mmol/L钼酸铵0.4mmol/L表面活性剂适量6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:试剂中含硫酸,如与皮肤及粘膜接触,请仔细地用大量水冲洗。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品:使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器:贝克曼AU680生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤:参见AU680生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
血清无机磷的测定方法一般有磷钼酸法、染料法和酶法。
磷钼酸法是血清中无机磷与钼酸盐结合形成磷钼酸化合物,再用还原剂将其还原成钼蓝进行比色测定。
染料法如孔雀绿直接显色测定法。
虽非常敏感,但影响因素多,显色不稳定,重复性也较差,不能用于常规检验。
酶法是一个偶联反应,参与反应的酶有糖原磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶及葡萄糖6-磷酸脱氢酶,反应中使NADP+还原成NADPH,形成NADPH在340nm波长下测定其吸光度,该方法不受有机磷酸酯的干扰。