脑脊液实验室检查

脑脊液白细胞计数操作方法

脑脊液白细胞计数是一种常用的临床实验室检查手段，用于评估中枢神经系统炎症、感染以及其他疾病的存在与程度。本篇回答将详细介绍脑脊液白细胞计数的操作方法。

脑脊液白细胞计数是通过显微镜检查脑脊液中的白细胞数量来评估炎症状况的重要指标。操作方法如下：

1. 准备工作

- 确保操作环境洁净、无尘，并消毒操作台面、显微镜等工作区域。

- 准备所需的实验耗材，包括脑脊液收集容器、干净的玻璃划线板和显微镜盖玻片。

- 核对所使用的显微镜是否调整正常，并准备适当倍率的放大镜头。

2. 脑脊液采集

- 选择合适的采集位置：通常在腰椎下方的腰1-2椎间隙处进行穿刺，但也可根据具体情况选择其他穿刺位置。

- 术前准备：患者取侧卧位，将盆骨前下缘与脊椎棘突连线作为腰1-2椎间隙穿刺点的参考线。用酒精和碘酒交替擦拭穿刺部位，等待干燥。

- 行穿刺：穿刺者佩戴无菌手套和口罩，选择合适的针头（一般为20-22号），进行药棉球或无菌纱布的局部麻醉。然后用无菌手套进行穿刺，抽取约3-5毫升的脑脊液，放入无菌容器中。

3.标本处理

- 获得脑脊液标本后，立即封闭容器并进行标注，包括患者姓名、性别、年龄、标本采集时间和采集部位等相关信息。然后在实验室内尽快处理标本。

- 注意避免脑脊液样本暴露在阳光下，以免影响细胞的形态。

4. 细胞计数

- 使用管式计数室一侧缓慢填充脑脊液，直至计数室充满。注意尽量避免产生空气泡。

- 待计数室填满后，在计数室充满部分的较高平台位置上观察显微镜视野，在适当放大倍数下（如400倍），选择一个标准的小网格视野进行计数。

- 细胞计数方法：在视野中，细胞主要分为白细胞和红细胞两类。在标准小网格的每个大方格内计数白细胞的个数，并将其乘以一个特定因子来获得白细胞计数（通常为10）。

- 统计学数据处理：通常将细胞统计数据转换为每立方毫升脑脊液中的细胞数。这可以通过将计数值与补偿因子相乘来计算。补偿因子取决于所用计数室的特定类型。

脑脊液潘氏试验步骤

1.准备工作：

(1)检测器具：试纸、离心管、镊子、注射器、分装管、药用酒精、创可贴等。

(2)患者准备：检查前一小时禁食水和食物，避免过度劳累。

2.患者体位：

(1)侧卧位：患者侧卧，头稍微低于身体，以保持脑脊液流通。

(2)头正中位：患者头部正对前方，颈部略向胸前伸直。

3.皮肤消毒：

(1)用药用酒精擦拭检查部位，保证无明显污染。

(2)用干净的棉球将酒精擦拭干净，避免残留酒精进入脑脊液。

4.麻醉与穿刺：

(1)选取合适的穿刺点：一般选择第3、4腰椎间隙作为穿刺点。

(2)进行局部麻醉：将注射器中的适量麻醉药液通过刺激剂进入穿刺点周围皮肤和软组织。

(3)穿刺操作：将已经消毒的穿刺器从第3、4腰椎间隙的皮肤上方45度角注入，逐渐向下刺入。

(4)顺利穿刺后，用干净的纱布轻轻按压穿刺点，避免脑脊液外溢，并对穿刺点进行消毒。

5.收集脑脊液： (1)使用干净的离心管和有刻度的注射器，收集脑脊液。

(2)调整注射器的活塞，以避免打损脑脊液。

(3)将脑脊液缓慢抽取至预定容器中，适当分装以备实验室检测。

6.观察脑脊液外观：

(1)检查脑脊液的颜色：正常脑脊液呈透明无色，若呈现黄色或其他异常颜色，可能表示存在感染、出血等问题。

(2)检查脑脊液的清澈程度：正常脑脊液应该清澈透明，若呈现混浊情况，可能表示存在菌群、血细胞等异常。

7.测量脑脊液压力：

(1)使用水银柱或压力计等仪器测量脑脊液压力。

(2)用刻度纸记录脑脊液的压力值。

8.实验室检测：

(1)对脑脊液进行生化学分析：包括蛋白质、糖类、氯离子、钠离子等相关指标的测定。

(2)进行细胞计数：检测脑脊液中的红细胞、白细胞数量及形态等指标。

(3)其他检测项目：如培养细菌、病毒等，以确诊感染病例。

9.结束工作：

(1)测量脑脊液压力结束后，将针头拔出，并用创可贴进行止血。

(2)将采集的脑脊液用相应的容器密封，送至实验室检测。 (3)对穿刺部位进行消毒处理，告知患者注意事项，观察是否有异常症状。

脑脊液常规检查标准操作程序

1 检验目的

鉴别诊断及预后观察神经系统疾病及其并发症。

2 检测原理

一般性状检查采用目测法；细胞学检查采用显微镜手工检查法。

3 性能参数

脑脊液常规检查是手工试验，目前还没有试验性能指标。

4 标本采集与接收

4.1 脑脊液标本由临床医生进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。第一管作细菌学检查，第二管作化学或免疫学检查，第三管作常规检查。

4.2 标本采集后要立即送检，因为放置时间过久，其性质可能发生改变，可能影响检验结果。采集的脑脊液标本应尽量避免混入血液。

5 设备和试剂

5.1 仪器：复星公司 ACT-2000 超高倍显微镜系统，Sysmex XT-4000i 分析仪。

5.2 试剂：冰醋酸。

5.3 设备：血细胞计数池。

6 容器和添加剂

脑脊液常规检查试验的容器为消毒的玻璃试管，一般情况下无任何添加剂(如遇高蛋白标本时，可用 EDTA 盐抗凝)。

7 操作步骤

7.1 检验申请单及标本的审核

整理脑脊液常规检验申请条码及标本，审核合格后，对脑脊液检验申请单姓名和标本标识进行复查，确认一致后进行检测。

7.2 一般性状检查：脑脊液的颜色和透明度测量采用目测法。

7.3 细胞计数

7.3. 1 手工法：对澄清的脑脊液混匀后用滴管直接滴入一次性计数板，用低倍镜计数全部方格内细胞数；混浊或带血的脑脊液可用细胞稀释液或者生理盐水稀释后加入事先准备好的管壁带有冰乙酸的小试管中，混匀后滴入一次性计数板内，用低倍镜计数全部方格内细胞数。

7.3.2 仪器法：取混匀好的标本直接在 XT-4000i 上用体液模式进行检测，并记录结果。

7.3.3 有核细胞分类计数

7.3.3.1 直接分类法：如果白细胞数不超过 0.015×109 /L，可不分类计数；如超过 0.015×109 /L 应分类 计数。在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单核细胞(包括淋巴细胞和单核细胞)与多核细胞，计数100 个白细胞，以百分比表示。

脑脊液常规和生化检测

Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】 脑脊液常规和生化检测

（一）一般性状检查，

1.颜色 正常脑脊液为无色透明液体。

（1）红色；：常因出血引起，主要见于穿刺损伤、蛛网膜下腔或脑室出血。

（2）黄色：常因脑脊液中含有变性血红蛋白、胆红素或蛋白量异常增高引起，见于蛛网膜下腔出血，血清中胆红素超过256/μmol/L或脑脊液中胆红素超过μmol/L时，可使脑脊液黄染；椎管阻塞（如髓外肿瘤）、多神经炎和脑膜炎时，脑脊液中蛋白质含量升高（>L）而呈黄变症。

（3）乳白色；多因白细胞增多所致，常见于各种化脓菌引起的化脓性脑膜炎。

（4）微绿色；见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎等。

（5）褐色或黑色；见于脑膜黑色素瘤等。

2.透明度 正常脑脊液清晰透明。病毒性脑膜炎、流行性乙型脑膜炎、中枢神经系统梅毒等由于脑脊液中细胞数仅轻度增加，脑脊液仍清晰透明或微浊；结核性脑膜炎时细胞数中度增加，呈毛玻璃样混浊；化脓性脑膜炎时，脑脊液中细胞数极度增加，呈乳白色混浊。

3.凝固物 正常脑脊液不含有纤维蛋白原，放置24h后不会形成薄膜及凝块。当有炎症渗出时，因纤维蛋白原及细胞数增加。可使脑脊液形成薄膜及凝块。急性化脓性脑膜炎时，脑脊液静置1～2h即可出现凝块或沉淀物；结核性脑膜炎的脑脊液静置12～24h后，可见液面有纤细的薄膜形成。蛛网膜下腔阻塞时，由于阻塞远端脑脊液蛋白质含量常高达15g/L，使脑脊液呈黄色胶胨状。医学教 育网搜集整理

4.压力 正常成人卧位时脑脊液压力为～（80～180mmH20）或40～50滴/min，随呼吸波动在10mmH20之内。儿童压力为～（40～100mmH2O）。若压力超过200mmH2O，放出脑脊液量不应该超过2ml，若压力低于正常低限可做动力试验，以了解蛛网膜下腔有无阻塞。脑脊液压力增高见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎等颅内各种炎症性病变；脑肿瘤、脑出血、脑积水等颅内非炎症性病变；高血压、动脉硬化等颅外因素；还有其他如咳嗽、哭泣，低渗溶液的静脉注射等。脑脊液压力减低主要见于脑脊液循环受阻；脑脊液流失过多；脑脊液分泌减少等因素。