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HPLC法测定番茄红素提取物中番茄红素的含量郭戎;包贝华;邵霞;张爱华;王丽君【摘要】目的:建立番茄红素提取物中番茄红素的测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Benetnach5-C18(150×4.6m,5μm),流动相为甲醇-乙腈(50:50),流速为1.2ml/min;检测波长为472nm;柱温为30℃;进样量为10μl.结果:番茄红素进样量在614.0～9820μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.99997,番茄红素的平均加样回收率为99.36%,RSD为2.81%.结论:应用高效液相色谱法测定番茄红素操作简单,准确性高,适应性强.【期刊名称】《江苏科技信息》【年(卷),期】2010(000)012【总页数】2页(P31-32)【关键词】番茄红素;高效液相色谱法;含量测定【作者】郭戎;包贝华;邵霞;张爱华;王丽君【作者单位】南京中医药大学;南京中医药大学;南京中医药大学;南京中医药大学;南京中医药大学【正文语种】中文番茄红素是一种天然色素，为类胡萝卜素中的一种，具有强抗氧化活性[1]，是常用的保健品。
研究表明，番茄红素具有调节人体免疫功能、抑制肿瘤、延缓衰老的保健作用[2-3]，人体每天摄入一定量的番茄红素，患有癌症、心血管疾病等某些慢性病的危险将相对降低[4]。
番茄红素因具有紫外吸收，因此，目前的测定常采用高液相色谱法，本文对采用超临界提取工艺提取的番茄红素提取物中的番茄红素进行了含量测定，为番茄红素提取物的开发利用提供了依据。
1.仪器与试药FA1104N电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司，精密度为0.1mg），Waters515高效液相色谱仪。
番茄红素对照品（纯度＞95%，上海融禾医药科技有限公司），番茄红素提取物由南京中科药业有限公司提供(批号为T1、T2、T3)，甲醇和乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2.方法与结果（1）色谱条件。
色谱柱：Benetnach5-C18(150×4.6mm,5μm)；选用甲醇-乙腈（50:50）为流动相；流速为1.2ml/min；检测波长为472nm；灵敏度为0.02AUFS；柱温为30°C；进样量为10μl，理论塔板数以番茄红素峰计应不低于1000。
HPLC法测定番茄红素胶囊中番茄红素的含量黄琦;章佳叶;鲍欣萍;谢琦敏;赵庭【摘要】HPLC method was developed for the determination of lycopeneby ODS column (150 mm × 4 .6 mm ,5μm) under the conditionsas:acetonitrile‐methyl alcohol‐dichloromethane(60∶25∶15)as the mobile phase ,UV detection wavelength at 472 nm and column temperature at32 ℃ .Experimental results showed that lycopene has a good linear relation over the range of 0 .2-40 μg/mL(r=0 .999 6)and the average recovery is over 96 .0 % .Lycopene andβ‐carotene are seperated well under the chromatographic conditions .The method proposed is accurate and reliable for determination of lycopene in lycopene capsule with satisfactory results .%建立了用 HPLC法测定番茄红素含量的分析方法，采用ODS色谱柱（150 mm ×4．6 mm ，5μm），流动相为乙腈‐甲醇‐二氯甲烷（60∶25∶15），检测波长472 nm ，柱温32℃。
试验结果表明，番茄红素在0．2～40μg／mL范围内线性关系良好（ r＝0．9996），加标回收率大于96．0％，并可同时分离番茄红素和共存的β‐胡萝卜素。
番茄红素含量报告引言番茄（学名：Solanum lycopersicum）是一种常见的蔬果，其红色的外皮和独特的味道深受人们喜爱。
番茄中含有丰富的番茄红素，这是一种天然的抗氧化剂，对于人体健康具有重要的意义。
本文将对番茄红素的含量进行测定和报告。
研究方法样品收集为了研究番茄红素的含量，我们选取了10个种类不同的番茄作为研究样本。
这些样本来自于当地的农田，并且在成熟的时候进行了采集。
样品处理在采集到番茄样本后，我们将其进行了处理以得到可测量的番茄红素。
处理方法如下：1.每个番茄样本被切成小块，并去掉番茄的皮；2.将切好的番茄块放入搅拌机中，加入适量的蒸馏水；3.打开搅拌机，将番茄块搅拌至均匀状态，制成番茄汁；4.将番茄汁过滤，去除固体残渣，得到纯净的番茄汁。
番茄红素含量的测定为了测定番茄红素的含量，我们使用了分光光度计。
测定步骤如下：1.将纯净的番茄汁分装到玻璃试管中，每管约装满2/3；2.将试管放入分光光度计中，设定波长为450nm；3.记录各样本的吸光度值；4.根据标准曲线，将吸光度值转换为番茄红素的浓度。
结果与讨论通过上述测定方法，我们得到了不同番茄样本中番茄红素的含量。
下表展示了10个样本的番茄红素含量（单位：mg/100g）：样本编号番茄红素含量1 8.52 9.23 7.84 6.95 7.36 8.17 9.68 6.59 7.710 8.9从上表可以看出，不同番茄样本中番茄红素的含量有所差异，最低的样本为6.5mg/100g，最高的样本为9.6mg/100g。
这说明了番茄红素的含量与番茄的品种或生长环境有一定关系。
番茄红素被广泛认为是一种有效的抗氧化剂，可帮助人体抵抗自由基的损害。
它还被发现具有抗炎、抗癌和心血管保护等多种保健功效。
因此，食用富含番茄红素的番茄是维护健康的一种选择。
结论本研究报告对10个不同种类的番茄进行了番茄红素含量的测定。
结果表明，番茄红素的含量在不同番茄样本中有所差异。
超高效液相色谱法测定番茄酱中4种苏丹红染料残留效果研究摘要建立了超高效液相色谱（UPLC）对番茄酱中4种苏丹红染料残留的分析方法。
方法以乙腈∶丙酮（v/v）=9∶1为提取溶剂，提取液过中性氧化铝层析柱净化，外标法定量。
结果表明，4种苏丹红染料在4 min全部分离，添加0.02～0.08 mg/kg浓度水平时，4种苏丹红染料加标回收率为83.1%～90.1%，相对标准偏差（RSD）为5.6%～7.2%。
方法检出限（S/N=3）为6.3～10.3 μg/kg，定量限（S/N=10）为18.6～30.4 μg/kg。
该方法简单快速，准确可靠，可用于番茄酱中4种苏丹红日常抽样快速检测。
关键词超高效液相色谱；番茄酱；苏丹红染料；检测苏丹红染料是非生物合成的亲脂性偶氮化合物，一般不溶于水，易溶于有机溶剂，常用于汽油、机油、鞋油和汽车蜡等工业产品的着色[1]。
近年来苏丹红染料被部分违法商家添加到食品表面着色以改善感官度[2]。
据世界卫生组织的国际癌症研究机构（IARC）1995年确定，苏丹红属第三类致癌物质，它能够使老鼠和兔子患癌症。
如果长期大剂量摄入会增加人体致癌的危险性。
欧盟国家已在1995年禁止其作为食用色素，我国在《食品添加剂使用卫生标准》中也禁止将苏丹红作为食品添加剂使用[3]。
在全国范围对食品中苏丹红染料进行了大规模的检测，并将其纳入了相关产品的必检指标[2]。
番茄酱是西餐中的一种重要调味品，是增色、添酸、助鲜、郁香的调味佳品。
被大量用于意大利粉中，也可蘸炸鸡、炸鱼和薯条。
国内对辣椒酱中苏丹红染料的检测有较多报道[2-4]，但番茄酱较少。
而国内已有文献报道检测苏丹红染料残留方法均为高效液相色谱法（HPLC）[1-2，4]，但是方法普遍存在样品分析时间长、检出限高等缺点。
而UPLC由于采用了1.7 μm的小粒子填充柱，柱效提高，有更好的分离效率，缩短了检测时间。
超高效液相色谱快速检测苏丹红染料的方法具有简单、灵敏度高和稳定性好等特点，能够满足批量样品检测的工作要求。
番茄红素含量测定检测1、外观：目测2、含量：高效液相法流动相：乙腈：甲醇：二氯甲烷=7：7：2波长：472nm色谱柱：C18柱样品：称样0.02g，用二氯甲烷溶解至100ml 容量瓶中3、灰分：称1g样品，用电炉炭化，再放马福炉中灼烧（600℃）4、砷：原子吸收法5、重金属：原子吸收法6、微生物：常规检测番茄红素含量测定方法1、试剂：无水乙醇分析纯苏丹1色素精制品2、仪器和用具电子天平十万分之一分光光度计波长360—600nm容量瓶刻度吸管3、绘制标准曲线称取0.025g苏丹1，精确到0.0001g ,用少量无水乙醇溶解定量移入50ml容量瓶中，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
准确吸取上述标准溶液0.26、0.52、0.78、1.04、1.30ml 分别注入一组50ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀后，即相当于0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/ml番茄红素标准溶液。
然后，依次注入1cm比色皿，在番茄红素抽提液的最大吸收波长下（约484nm），以蒸馏水为空白溶液，分别测定其吸光度，以测得的吸光度为纵坐标，苏丹1色素标准溶液所相当的番茄红素浓度为横坐标，绘制标准曲线。
4、样品测定精密称取番茄红素0.01g—0.1g，稀释后使溶液的吸收度在0.2—0.4之间，在484 nm，以纯化水为空白溶液，用分光光度计测定吸光度。
从标准曲线中查得番茄红素的浓度。
5、计算结果番茄红素的含量C（%）按下式计算V×NC= ×100W×106式中：C——试样中番茄红素含量%V——最终稀释体积mlN——最终稀释液中番茄红素的浓度（从标准曲线中查得）μg/mlW——试样质量g。
番茄酱中番茄红素的测定
番茄红素的测定方法
【专利摘要】本发明涉及一种番茄红素的测定方法，属于食品添加剂及其检测方法领域。
所述本发明所述的番茄红素的测定方法,包括以下步骤：将1mg标准品用流动相溶解后，定容至50mL，配制成20μg/mL的标准溶液，在一定的色谱条件下进样20μL，以相对峰面积Y对浓度X进行回归，计算得回归方程；然后准确称取0.2g 样品，先加少量二氯甲烷溶解，然后用流动相定容至200mL，在一定的色谱条件下进样20μL，根据得到的相对峰面积计算浓度。
本发明所述的检测方法采用HPLC法测定番茄红素的含量，具有简便、准确、可靠等优点，适宜一般实验室使用。
HPLC法测定番茄酱中八氢番茄红素的含量作者：吴增宝等来源：《安徽农业科学》2014年第14期摘要[目的] 建立高效液相色谱法测定番茄酱中八氢番茄红素的含量。
[方法] 色谱条件为：色谱柱为Agilent AT C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇THF（75∶25）；检测波长为287 nm；流速为1.0 ml/min；温度为30 ℃；进样量为50 μl。
[结果] 八氢番茄红素在0.186～1.116 μg 范围内线性关系良好（R=0.999 9），平均回收率为103.8%，RSD为1.47%；测得市售某品牌番茄酱中的八氢番茄红素含量为107.0 mg/kg。
[结论] 该方法简单、准确、快速、可靠，可用于番茄酱中八氢番茄红素的含量测定。
关键词番茄；八氢番茄红素；高效液相色谱；含量测定中图分类号R284.1；S641.2文献标识码A文章编号0517-6611（2014）14-04436-02Determination of Phytoene in Tomato Ketchup by HLPCWU Zengbao et al （Shihezi University， Shihezi， Xinjiang 832000）Abstract [Objective] The aim was to establish a HPLC method for determination of phytoene in tomato ketchup. [Method] The Agilent AT C18 column （250 mm×4.6 mm，5 μm） was used， and mobile phase was MethanolTHF （75∶25）. Detection wavelength was at 287 nm， the flow rate was 1.0 ml/min， and the column temperature was at 30 ℃，the sample size was 50 μl. [Result] The linear response range from 0.186-1.116 μg，R=0.999 9. The average recovery rate was 103.8%，with RSD 1.47%， and the average content was 107.0 mg/kg. [Conclusion] The method is simple，accurate， rapid and convenient. It can be used for the determination of phytoene in tomato ketchup.Key words Tomato； Phytoene； HPLC； Content determination加工番茄是重要的保健和功能性蔬菜食品，又具有潜在的药用价值。
现有研究表明，加工番茄中主要的保健功能性成分为类胡萝卜素。
类胡萝卜素可以预防前列腺癌、乳腺癌及消化道器官包括结肠、直肠、胃的癌变，并可降低皮肤癌与膀胱癌的发病率，同时可以预防和治疗心脑血管、动脉硬化等疾病，增强机体免疫功能和抗衰老等重要作用[1-3]。
番茄中主要的类胡萝卜素为番茄红素和八氢番茄红素，早在1982年就有报道八氢番茄红素的抗癌作用[4]。
八氢番茄红素对皮肤癌具有预防作用[5]，能抑制乳腺癌细胞的分化和癌症的发生[6]，控制癌症的发展[7]，能有效清除体内的自由基，抑制LDL的氧化[8]，阻止紫外线对皮肤的损伤和抑制皮肤癌的发生，以及保护DNA免受损伤等作用[9]。
但是目前对八氢番茄红素的研究远远没有番茄红素研究的深入，关于采用HPLC法测定八氢番茄红素含量的研究更是鲜有报道。
笔者以HPLC法测定番茄主要产品番茄酱中八氢番茄红素的含量，以期为番茄的开发利用提供理论依据。
1材料与方法1.1材料1.1.1研究对象。
市售某品牌番茄酱，购自新疆石河子市。
1.1.2主要仪器。
Shimazu高效液相色谱仪，配有Shimazu LC20AT四元泵，CMB20 A控制器，SPD20 A紫外检测器，SIL20A自动进样器，CTO10As柱温箱，LC Solution工作站。
1.1.3主要试剂。
八氢番茄红素对照品为石河子大学药学院实验室通过液相制备纯化（面积归一法纯度>99%），通过1H NMR和质谱、UV光谱确定为八氢番茄红素；甲醇、四氢呋喃（THF）为色谱纯，购自Sigma公司；水为重蒸馏水；其他试剂为分析纯，购自天津富宇有机精细化工有限公司。
1.2方法1.2.1色谱条件。
色谱柱为Agilent AT C18 （250 mm×4.6 mm，5.0 μm），流动相为甲醇THF（75∶25），流速为1 ml/min，温度为30 ℃，检测波长287 nm，该波长为八氢番茄红素的最大吸收波长，进样量为50 μl，理论板数按八氢番茄红素峰计算不低于3 000。
1.2.2溶液的制备。
1.2.2.1对照品溶液的制备。
精密称取真空干燥后的八氢番茄红素对照品0.93 mg溶解于丙酮中，定容至10 ml，此时标准液的浓度为93 μg/ml。
经微孔滤膜滤过，滤液作为对照品溶液备用。
1.2.2.2供试品溶液的制备。
精密称取番茄酱约1 g，精密称重1.005 74 g，置50 ml容量瓶中，加入丙酮适量，超声提取15 min，将上清液吸入另一个50 ml容量瓶，多次，至最后上清液及番茄酱均接近无色，用丙酮定容至50 ml，摇匀，微孔滤膜过滤即得。
1.2.3系统适应性试验。
取制备的对照品和供试品溶液，按“1.2.1”色谱条件进行测定，考察系统的适应性。
1.2.4方法学考察。
1.2.4.1线性关系的考察。
分别精密量取2、4、6、8、10、12 μl对照品溶液，注入高效液相色谱仪中，测定，以对照品量浓度（X，μg）为横坐标，以峰面积（Y）为纵坐标，建立标准曲线。
1.2.4.2精密度试验。
取“1.2.2.2”中供试样品溶液，连续进样6次，每次50 μl，记录峰面积，并计算RSD。
1.2.4.3稳定性试验。
取同一批样品提取的提取液，分别于0、2、4、8、12、18、24 h进行测定，计算RSD。
1.2.4.4重现性试验。
取同批次样品6份，按照“1.2.2.2”方法制备供试品溶液，按样品分析方法测定峰面积，计算RSD。
1.2.4.5加样回收率试验。
分别取该品6份，精密称定每份0.5 g，置于6个50 ml的容量瓶中，加入含八氢番茄红素510 μg的八氢番茄红素对照液，按“1.2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“1.2.1”项下的色谱条件测定，进样量为50 μl，计算平均回收率和RSD。
1.2.5样品的含量测定。
精密吸取按“1.2.2.2”方法制备的供试品溶液，进样50 μl（3次平行），按“1.2.1”项下的色谱条件进行测定。
2结果与分析2.1系统性试验试验得出，对照品保留时间为11.8 min，样品中的八氢番茄红素与其他各峰之间分离良好（图1）。
图1八氢番茄红素对照品与番茄酱样品HPLC色谱2.2方法学考察2.2.1线性关系考察。
试验计算得回归方程为Y=352 934x-1 626.7（R=1.000 0），结果表明八氢番茄红素在0.186～1.116 μg范围内线性关系良好。
2.2.2精密度试验。
试验测定并记录峰面积，计算得RSD为0.66% （n=6），表明仪器精密度良好。
2.2.3稳定性试验。
试验计算RSD为0.78%（n=6），结果表明该样品在24 h内稳定性良好。
2.2.4重现性试验。
试验计算得RSD为2.56%，表明重现性良好。
2.2.5加样回收率试验。
试验计算得到平均回收率为103.8%，RSD为1.47%（表1）；加样回收率试验合格。
2.3样品的含量测定取“1.2.2.2”中番茄酱提取液50 μl（经0.22 μm滤膜过滤），平行进样3次，按外标法计算样品中八氢番茄红素的含量，用以上方法测得市售某品牌番茄酱中八氢番茄红素的含量为107.0 mg/kg。
3结论与讨论目前关于番茄中八氢番茄红素的含量测定鲜有报道，试验为进一步研究番茄中八氢番茄红素的含量测定提供了依据。
因为八氢番茄红素为脂溶性色素，可溶于其他脂类和非极性溶剂，不溶于水，曾选用正己烷、正戊烷和丙酮作为浸提剂，结果发现正己烷和正戊烷对八氢番茄红素几乎没有提取，而丙酮作为浸提剂溶解色素的能力较强，易于回收，所以最后选用丙酮作为提取剂。
用高效液谱法测定番茄样品时，流动相曾选甲醇∶乙腈（3∶7），所得色谱峰严重拖后，在60 min内，番茄红素及八氢番茄红素均不出峰。
选用甲醇∶乙腈（1∶9），能观察到番茄红素及八氢番茄红素色谱峰，但保留时间过长，不符合含量测定快速的要求；选四氢呋喃∶乙腈（1∶3），八氢番茄红素出峰时间为11.8 min，且达到基线分离。
所以最后选定25%四氢呋喃∶75%乙腈作为流动相。
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