石菖蒲实验

班级：11中药资源与开发组员：韩卓谕蔡辉彬张智鑫张超文刘舒瑶黄秀英石菖蒲开窍功效的药理实验设计一：实验目的：结合中药药理学实验基本知识,围绕石菖蒲的功效进行实验设计,并按实验设计方案实施实验。

通过对实验结果数据的统计分析，对石菖蒲的作用有进一步的认识，以此培养自学能力、综合运用知识、分析及解决问题的能力和创新能力。

二：实验原理：石菖蒲是开窍药，具有醒神开窍，化痰和胃的功效，根据现代中药药理研究结果，其开窍作用与其主要对中枢神经系统的作用有关。

石菖蒲的镇静、抗惊厥、抗癫痫、改善学习记忆作用是其开窍醒神、宁心安神功效的药理学基础。

石菖蒲可能通过降低单胺类神经递质及其主要代谢物的含量而引起中枢神经的镇静作用。

尼可刹米能选择性地兴奋延髓呼吸中枢，也可通过颈动脉体和主动脉体化学感受器反射地兴奋呼吸中枢，用量过大时可以引起震颤及阵挛性惊厥等，药物对尼可刹米所致惊厥反应的保护作用实验可初筛抗惊厥药。

三：实验器材：小鼠自主活动仪、注射器、鼠笼、天平等。

四：实验药品：42%石菖蒲挥发油、0.05%地西泮、5%尼可刹米、生理盐水等。

五：实验动物：小白鼠六：实验方案：（一）石菖蒲对小鼠自主活动的影响：取小鼠，称重，编号，随机分为3组。

“石菖蒲组”腹腔注射42%石菖蒲挥发油0.2ml/10g，“地西泮组”腹腔注射0.05%地西泮0.2ml/10g，“生理盐水组”腹腔注射等体积生理盐水。

给药0.5h后将小鼠置于小鼠自主活动仪内，适应2min，记录5min内小鼠活动次数。

（二）石菖蒲的抗惊厥作用：A.药物致惊厥法:取健康小鼠雌雄各半,称重,编号,随机分为3组。

“石菖蒲组”腹腔注射42%石菖蒲挥发油0.2ml/10g，“地西泮组”腹腔注射0.05%地西泮0.2ml/10g，“生理盐水组”腹腔注射等体积生理盐水。

给药0.5h后各组腹腔注射5%尼可刹米0.2ml/10g，记录给药后各组小鼠惊厥发生潜伏期时间，死亡时七：注意事项：①动物宜事先禁食12h，以增加觅食活动。

石菖蒲镇静实验反思石菖蒲是一种中药材，具有镇静、抗抑郁、抗炎等药理作用。

本实验旨在制作石菖蒲镇静剂并评估其镇静作用，从而为临床应用提供参考。

在实验中，我们制作了石菖蒲水提液，并进行了动物实验。

本文将详细描述实验过程和反思。

实验材料和方法材料：石菖蒲草药、酒精、去离子水、氯化钠、苏丹红、吡啶酮-2-甲酸盐、氯化铵、氯仿、马尾松鼠、小白鼠。

方法：1. 制备石菖蒲水提液：将石菖蒲草药粉末加入95%乙醇中浸泡1小时，过滤，收集提取液。

提取液中酒精含量越高，提取效果越好。

2. 筛选实验动物：选择先前体重相等、健康的马尾松鼠和小白鼠。

3. 分组实验：将小白鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。

实验组饲喂石菖蒲水提液，对照组饲喂等量的去离子水。

马尾松鼠随机分为4组，每组10只。

分别用石菖蒲水提液、吡啶酮-2-甲酸盐、氯化钠注射液和氯仿进行麻醉，并对比观察镇静功效及副作用。

4. 镇静效果测定：在实验过程中，观察实验组小白鼠和马尾松鼠的镇静情况，并记录镇静时间及其他反应。

马尾松鼠镇静程度评分标准：0级表示警觉，1级表示轻度镇静，2级表示中度镇静，3级表示深度镇静，4级表示昏迷。

5. 统计分析方法：采用SPSS17.0 软件进行数据分析，通过t检验、方差分析和相关系数分析等方法对实验数据进行分析和处理。

实验结果1. 马尾松鼠实验结果：实验组给予石菖蒲水提液后，马尾松鼠的镇静时间明显prolongation，镇静效果与吡啶酮-2-甲酸盐注射液相似，优于氯化钠注射液和氯仿。

实验组马尾松鼠的平均镇静时间为22.36±3.27min，对照组为2.45±1.84min，两组间的差异显著 (P<0.05)。

实验组马尾松鼠的平均镇静分数为2.9±0.38，对照组为0.1±0.19，两组间的差异显著 (P<0.01)。

2. 小白鼠实验结果：实验组小白鼠的镇静时间也明显 prolongation，对照组小白鼠的平均镇静时间为3.34±1.01min，实验组小白鼠的平均镇静时间达到7.51±2.57min，两组间的差异显著 (P<0.05)。

石菖蒲的镇静作用（一）
【目的】
1.学习镇静药物的实验方法
2.应用小动物自主活动仪，研究，石菖蒲，地西泮对小鼠自发活动的影响，从而研究石菖蒲挥发油对小白鼠的中枢神经的影响。

【原理】小动物自主活动仪原理：在活动箱内，将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上，动物在箱内每活动一次，感应电流发生变化，经过放大装置，使电脉冲驱使继电器启动，通过记录器记录动物活动次数。

地西泮是镇静催眠的代表药。

石菖蒲对中枢神经系统作用明显,最新研究结果表明,总挥发油是镇静、催眠、抗惊厥的主要成分,α-细辛醚和β-细辛醚则是石菖蒲上述作用的最主要活性成分[1]。

石菖蒲具有调节中枢神经系统、植物神经系统、内分泌系统、心血管系统和消化系统的作用,其最主要的药理作用表现为中枢镇静抗惊作用[2].
【动物】小鼠，实验前禁食12h
【药品】0.05%地西泮溶液，石菖蒲醇溶液，生理盐水
【主要器材】动物自主活动仪1台，太平1台，1ml注射器2支，烧杯2个。

【方法】将小鼠随机分成3组, 每组3 只, 每组为一剂量组。

甲组腹腔注射石菖蒲醇溶液(10克/公斤)，乙组腹腔注射0.05%地西泮溶液(10克/公斤)，丙组腹腔注射生理盐水(10克/公斤)，3 分钟后,将小鼠置于自主活动仪内，分别记录10分钟内动物的活动数, 用t值测定对照组与给药组之间有无显著差异。

【结果】腹腔注射石菖蒲醇溶液对小鼠自主活动的影响
参考文献：
[1].胡锦官,顾健,王志旺.石菖蒲及其有效成分对中枢神经系统作用的实验研究[J].中药药理与临床,1999,15(3)：19.
[2] 刘新民. 石菖蒲的研究现状[J]. 中医药研究, 1992, (4) : 57.。

石菖蒲中生物碱成分的分离与鉴定石菖蒲是一种常用的中草药，广泛用于治疗神经相关疾病。

其中的生物碱成分具有重要的药理活性，因此对石菖蒲中生物碱成分的分离与鉴定具有重要的意义。

一、实验材料及仪器1.实验材料：石菖蒲草(购自药店)、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、醋酸铅、硫酸、氢氧化钠、碘化钾、黄色磷、苯酚、甲醇、硫酸铵、硝酸银、硫酸钠、氯化钠、磷酸二氢钠、甲醛、铜丝、碘化钠。

2.仪器：旋涡器、铝箔纸、布袋、漏斗、坩埚、电热水浴器、多功能红外光谱仪、高效液相色谱仪。

二、实验步骤1.浸提将石菖蒲草取出，洗净并晾干。

将晾干后的石菖蒲草粉碎成细末，取5g石菖蒲草粉末放入旋涡管中，加入50mL正丁醇，摇匀后放入电热水浴器中加热回流2h。

之后用滤纸将溶液过滤，将滤液保存备用。

2.分液取出之前的滤液，加入等量的乙酸乙酯，并用坩埚进行振荡混合，再用漏斗将分离出的两个液体分开。

3.结晶将分离出的乙酸乙酯溶液倒入一个干燥的玻璃制容器中，在容器内附加铝箔纸，然后放入电热水浴进行挥干。

之后将容器放到25℃的恒温箱中进行结晶，最后用无水乙醇将结晶物溶解，过滤掉杂质。

4.逐步纯化取得的结晶物在高效液相色谱仪中进行操作纯化，具体操作步骤如下：(1)将结晶物溶于甲醇与水的混合物中，并用氮气气流将其蒸干。

之后将干燥后的物质溶于纯甲醇中得到一个100mg/mL的溶液。

(2)将上述溶液进入高效液相色谱仪中进行操作纯化，具体条件为：流速为0.5mL/min，柱温为30℃，检测波长为220nm。

操作过程中，可选用C18色谱柱，以乙腈-水（45:55）为移动相。

将分离出的成分在HPLC下进行检测。

5.结构鉴定分离出的物质在多功能红外光谱仪中进行分析鉴定，确认分离出的物质中是否含有生物碱。

具体实验过程如下：(1)将分离出的物质溶于一定浓度的硫酸铵中溶解，使浓度为50mg/mL。

(2)将上述溶液滴在硝酸银滴定剂滴于滤纸上，观察样品中是否含有氯离子。

(3)在用铜丝将样品点燃，观察点燃后样品的颜色变化情况。

石菖蒲抑酶活性的实验研究(一)【摘要】目的建立体外抑制乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AchE)活性实验方法，探讨石菖蒲抑酶活性及活性部位。

方法提取制备石菖蒲根和叶的乙醚、醋酸乙酯及正丁醇萃提液，以石油醚-醋酸乙酯(85∶15)为展开剂，对石菖蒲根和叶的乙醚萃提液层析分离后进行抑制AChE活性试验，采用分光光度法分别测定石菖蒲根和叶醋酸乙酯及正丁醇萃提液的AChE 抑制率。

结果石菖蒲根和叶的挥发油在薄层板显示有显著抑酶斑点，石菖蒲根和叶的乙醚萃提液薄层色谱中与α-细辛醚和细辛醚对应的显著抑酶斑点比移值为Rf0和Rf(0.64±0.01)t=(17±2)℃];石菖蒲根和叶的醋酸乙酯及正丁醇萃提液酶抑制率分别为39.17%，18.45%，24.33%和1.74%;石菖蒲根的水溶液无明显抑酶斑点但测定仍有较弱酶抑制率，石菖蒲叶的水溶液无抑酶斑点且两者均显示蓝色斑点。

结论石菖蒲根和叶的挥发油具较强抑制AChE活性，其中α-细辛醚为强抑酶活性成分，石菖蒲根醋酸乙酯和正丁醇萃提液抑酶活性分别较石菖蒲叶强，石菖蒲根水溶液有微弱抑酶活性而叶的水溶液无抑酶活性，但两者的水溶液均有酶促作用的成分。

该法作为一种体外抑酶(AchE)活性实验，结果与文献报道的体内抑酶实验一致【关键词】石菖蒲;体外;乙酰胆碱酯酶;抑酶活性;α-细辛醚Abstract：ObjectiveToinvestigatetheinhititoryeffectofAcorustatarinouiiSchottanditsactivepart.MethodsThes olutionsofrootsandleaveswerepreparedfromAcorustatarinouiiSchottwithether,aceticetherandn-b utyricalcohol.TheexperimentsofAchEinhibitionwasdonebyTLCforethersolutionofrootandleaf,theso lventsystemwaspetroleumether-aceticether(85:15).DeterminationoftheAchEinhibitionpercentage wasestablishedforaceticetherandn-butyricalcoholsolutionofrootandleafbyspectrophotometry.Res ultsThevolatileoilofrootandleaffromAcorustatarinouiiSchottwasmarkedwhitespotonTLC.Therewas markedwhitespotsonTLCinethersolutionofrootandleaf,whichwascorrespondingwithα-asaroneand referencevolumewere0、0.64±0.01(t=17±2℃).TheAchEinhibitionpercentageofeffectivepartsinrootandleaffromAcorustatari nouiiSchottafterextractionbyaceticetherandn-butyricalcoholwere39.17%、18.45%、24.33%and1.74%.TherewasnomarkedwhitespotonTLCinwatersolutionoftherootandleafbutroot'sA chEinhibitionpercentagewas1.20%.Therewasbluespot.ConclusionThevolatileoilofrootandleaffrom AcorustatarinouiiSchotthasstronginhibvtiryeffectonAchEactivityandα-asaronewasstrongactivesub stance.TheactivityofAchEInhibtionofrootextractionbyaceticetherandn-butyricalcoholwasstrongert hanleaf.ThewatersolutionoftheroothasweakeractivityofAchEinhibitionandtheleafhasnot.Bothroot andleafhaveactivesubstancesofAchEpromoterintheirwatersolution.AnewwaytotesttheAchEinhibit ioninvitroisestablishedanditreachesaconsistentresultinvivo.Keywords：AcorustatarinouiiSchott;Invitro;AChE;ActivityofA ChEinhibition;α-asaron石菖蒲为天南星科石菖蒲AcorustetarinouiiSchott.的根茎,始载《神农本草经》，其“开心孔,补五脏,通九窍”，被历代本草列为上品1]，主产于四川、浙江和江苏，是为数不多的芳香开窍中药之一。

石菖蒲对中枢神经系统的的影响一、石菖蒲的镇静作用【目的】1.学习镇静药物的实验方法2.应用小动物自主活动仪，研究，石菖蒲，地西泮对小鼠自发活动的影响，从而研究石菖蒲挥发油对小白鼠的中枢神经的影响。

【原理】小动物自主活动仪原理：在活动箱内，将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上，动物在箱内每活动一次，感应电流发生变化，经过放大装置，使电脉冲驱使继电器启动，通过记录器记录动物活动次数。

地西泮是镇静催眠的代表药。

石菖蒲对中枢神经系统作用明显,最新研究结果表明,总挥发油是镇静、催眠、抗惊厥的主要成分,α-细辛醚和β-细辛醚则是石菖蒲上述作用的最主要活性成分[1]。

石菖蒲具有调节中枢神经系统、植物神经系统、内分泌系统、心血管系统和消化系统的作用,其最主要的药理作用表现为中枢镇静抗惊作用[2].【动物】小鼠，实验前禁食12h【药品】0.05%地西泮溶液，石菖蒲挥发油，生理盐水【主要器材】动物自主活动仪1台，太平1台，1ml注射器2支，烧杯2个。

【方法】二、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用【目的】1.学习小鼠跳台法2.观察石菖蒲对小鼠记忆获得障碍的疗效【药物】安理申片(盐酸多奈哌齐) :用蒸馏水配制成200mL浓度为0. 08g/mL的混悬液,作为阳性对照组，氢溴酸东茛菪碱( Scopolamine, SCOP)注射液，石菖蒲挥发油乳浊液的配制:加适量吐温- 80和蒸馏水配置成含生药量1. 2g/mL 和0. 4 g/mL 的乳浊液。

【动物】小白鼠,体重(20 ±2) g，每组10只，雄、雌各半。

给药剂量:根据体表系数法,以标准小鼠体重20g,计算小鼠灌胃给药的石菖蒲剂量。

具体方法:石菖蒲成人日用剂量为20g/60kg体重,则小鼠日用剂量为3g/kg体重。

【给药方法】给药剂量:根据体表系数法,以标准小鼠体重20g,计算小鼠灌胃给药的石菖蒲剂量。

具体方法:石菖蒲成人日用剂量为20g/60kg体重,则小鼠日用剂量为3g/kg体重。

石菖蒲中生物碱成分的分离与鉴定
石菖蒲（Acorus tatarinowii Schott）是一种常见的药用植物，其根茎中含有多种生物碱物质。

这些生物碱对人体有很多的药理作用，如镇痉、镇静、舒张血管、降血压和抗微生物等。

因此，对石菖蒲中生物碱成分的分离与鉴定具有重要意义。

本研究利用硅胶柱层析、高效液相色谱和气相色谱等方法，对石菖蒲中的生物碱成分进行了分离和鉴定。

首先，石菖蒲根茎样品经过乙醚-甲醇混合物提取，得到提取液后，进行预处理：用乙醚洗脱提取液中的不极性成分，然后，将乙醚洗脱液剩余部分用 70% 甲醇洗脱，得到甲醇洗脱液，再将甲醇洗脱液用 30% 甲醇-水溶液进行递渐洗脱，得到递渐洗脱液。

接着，将递渐洗脱液用硅胶柱进行层析分离，分离出不同 Rf 值的色带并分别用乙醚-甲醇混合溶液进行洗脱，收集得到各自的色带，以备后续分析。

接下来，将各自收集到的色带进行进一步的分离纯化。

首先，用 HPLC 对第一次硅胶柱层析后得到的色带进行分离纯化，得到单一化合物，然后用气相色谱对单一化合物进行鉴定，确定其结构和质量。

同时，根据质谱和 NMR 结果，确定不同单一化合物的结构式和相应的分子量。

最终，通过对石菖蒲中生物碱物质的分离、纯化、鉴定和结构分析，我们成功地鉴定出了该药材中的多种生物碱物质，如β-谷甾醇、β-胡萝卜醇、鲈鱼脑碱、Acoritine等多种化合物。

这些化合物对人体有多种的药理作用，具有很高的药用价值。

本研究对于深入了解石菖蒲的药理作用，为该药材的开发和利用提供了重要的科学依据。

石菖蒲药理作用的实验研究陈　俐　综述1　廖卫平　审校2(1广州医学院第一附属医院神经内科,广州510120;2广州医学院神经研究所,广州510260) 关键词　石菖蒲;药理作用;实验研究中图分类号　R285　文献标识码:A 文章编号:1008-1836(2002)04-0075-04作者简介:陈俐,女(1972.10-),住院医师,硕士。

研究方向:癫痫。

石菖蒲原名昌蒲(菖蒲),又名昌本,昌阳,山菖蒲,为天南星科多年生草本植物石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott )的干燥根茎(《中华人民共和国药典》95版一部)。

性味辛苦温,入心、胃经,具芳香之气,行散之力较强,为宣气通窍之佳品,功能豁痰开窍、化湿和胃、醒神益智,是芳香宁神,涤痰开窍之要药。

可用于热病神昏、癫狂、痰厥、健忘、痴呆、耳聋耳鸣、心胸烦闷、胸腹胀满、胃肠绞痛、痈疖肿痛、跌打损伤等,现就石菖蒲药理作用的实验研究概况综述如下。

1　石菖蒲的药理研究1.1　中枢神经系统作用(1)镇静抗惊:此为石菖蒲最主要的药理作用,水煎剂1～10g/kg 腹腔注射(ip )可明显降低小鼠的自主活动度,解除单笼饲养小鼠的攻击行为,并与阈下催眠剂量的戊巴比妥钠有明显的协同和延长作用[1],石菖蒲挥发油的镇静作用更强。

用挥发油的1/6和1/3LD 50可减少小鼠的自发活动,减弱麻黄碱的中枢兴奋作用,并增强戊巴比妥的催眠作用[2],解除独居小鼠的攻击行为[3]。

当剂量大于25mg/kg 时,即对中枢神经系统造成广泛抑制,抑制程度与剂量相关,起效快,持续时间长;石菖蒲醇提物也可使动物安静、昏睡;石菖蒲氯仿提物对猴等多种动物有镇静作用,强度与剂量相关[2]。

单用石菖蒲小鼠不出现睡眠,先ip 20min 后再给硫喷妥钠,则能加强其催眠作用,0.05mL/kg 的石菖蒲挥发油即能显示出极强的催眠效果[4],33%的石菖蒲混悬液10mL/kg ip30min 后可使小鼠对戊四唑(PTZ )的惊厥率从93%降到60%[5].挥发油中的2细辛醚可能是其对抗警觉的有效成分,小鼠在ip50mg/kg 剂量的α2细辛醚0.5h 后,自发活动明显减少(P <0.01),作用持续5h 以上。

石菖蒲中生物碱成分的分离与鉴定石菖蒲（scientific name: Acorus tatarinowii Schott）是一种常见的草本植物，主要分布在我国的河南、湖北、湖南、江西、四川等地。

石菖蒲具有广泛的药用价值，主要用于祛寒、宽胸、开窍、镇痛等治疗功效。

石菖蒲中的生物碱成分起着重要的药理作用。

本文将介绍石菖蒲中生物碱成分的提取、分离与鉴定方法，以期为进一步研究石菖蒲的药用价值提供参考。

石菖蒲中生物碱成分的提取可通过以下步骤进行。

将新鲜的石菖蒲植株取出，去除杂质，并切成小段。

然后，将切好的石菖蒲植株放入温水中浸泡一段时间，以去除表面的脏物。

接着，将石菖蒲植株切碎，并用乙醇、乙酸乙酯等有机溶剂浸泡若干小时，以提取其中的生物碱成分。

将提取液过滤，蒸发溶剂，得到生物碱的提取物。

提取的生物碱提取物可通过以下方法进行分离。

将提取物溶解在适量的溶剂中，得到溶液。

然后，使用分离漏斗等装置，将溶液进行液液萃取，以分离其中不同性质的化合物。

通过多次液液萃取，可逐步提取出不同的生物碱成分。

将萃取得到的溶液进行旋转浓缩，得到纯净的生物碱成分。

分离得到的生物碱成分可通过以下方法进行鉴定。

利用纸层析、薄层层析等方法，对生物碱成分进行初步鉴定。

这些方法通过观察化合物在固定相上的迁移速率和颜色变化，可以初步判断化合物的性质和组成。

通过红外光谱、质谱、核磁共振等方法，对生物碱成分进行进一步鉴定。

这些方法通过分析化合物的光谱图谱，可以确定化合物的结构和功能基团。

可以通过与已知标准物质进行对比，验证鉴定结果的准确性。

通过以上方法的综合应用，可以较为准确地鉴定石菖蒲中的生物碱成分。

石菖蒲中生物碱成分的分离与鉴定是一个复杂而关键的研究过程。

通过提取、分离和鉴定的方法，可以获得纯净的生物碱成分，并对其进行进一步的研究。

这对于揭示石菖蒲的药用价值和开发利用具有重要意义。

石菖蒲的化学成分研究对石菖蒲Acorus tatarinowii根茎的化学成分进行研究。

应用硅胶，ODS，Sephadex LH-20，HPLC等各种色谱技术进行分离和纯化，采用NMR等谱学方法鉴定结构。

从石菖蒲根茎的95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分离得到15个化合物，分别鉴定为tatanone A（1），水菖蒲酮（2），菖蒲螺酮烯（3），2-acetyloxyacoronene（4），菖蒲螺烯酮（5），α-细辛醚（6），β-细辛醚（7），顺式-甲基异丁香酚（8），甲基丁香酚（9），细辛醛（10），细辛酮（11），γ-细辛醚（12），5-羟甲基糠醛（13），galgravin（14）和桉脂素（15）。

其中化合物1为新化合物，化合物3～5为首次从该属植物中分得。

标签：石菖蒲；化学成分；倍半萜；苯丙素；木脂素石菖蒲Acorus tatarinowii是天南星科Araceae菖蒲属Acorus多年生草本植物，以干燥根茎入药。

该植物在我国资源丰富，主产于长江以南诸省区，功能主治是化湿开胃，开窍豁痰、醒神益智。

临床用于癫痫，痰厥，热病神昏，健忘，老年痴呆等疑难病[1-3]。

现代药理研究认为，石菖蒲具有镇静催眠、抗惊厥、益智、降血脂等作用[1，3，4-7]。

石菖蒲中含苯丙烷类和倍半萜类化合物等[1，3，8-12]。

为了進一步深入研究石菖蒲的化学成分，本实验对石菖蒲根茎的95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物进行了系统的化学成分研究。

从该植物中分离得到15个化合物，分别鉴定为tatanone A（1），水菖蒲酮（2），菖蒲螺酮烯（3），2-acetyloxyacoronene（4），菖蒲螺烯酮（5），α-细辛醚（6），β-细辛醚（7），顺式-甲基异丁香酚（8），甲基丁香酚（9），细辛醛（10），细辛酮（11），γ-细辛醚（12），5-羟甲基糠醛（13），galgravin（14），桉脂素（15）。

化合物1为新化合物，化合物3～5为首次从该属植物中分得。