果蝇系列实验
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果蝇的三点测交试验
果蝇的三点测交试验是一种经典遗传学实验,用于研究性状的遗传方式和遗传规律。
该实验利用果蝇容易繁殖、生命周期短、遗传稳定等特点,通过人工控制交配,可以确定
基因型和表型的关系,从而深入了解遗传现象。
实验步骤:
1.饲养果蝇:首先需培育出足够数量、健康的果蝇,确保其基因型和表型的稳定性。
采用人工饲养的方式,果蝇的饲养环境需控制恒温、恒湿、恒光、无杂质。
2.选取实验材料:选择具有稳定性状的果蝇为实验材料。
例如,选取表现为黑色眼睛、有翅膀、灰色体色的果蝇为正常型(wild type),选取表现为白色眼睛、无翅膀、黄色体色的果蝇为突变型(mutant type)。
3.实验设计:设计交配方案,进行杂交。
将正常型的雌性与突变型的雄性交配,产生
F1代。
将F1代的雌性与F1代的雄性进行三点测交试验。
4.观察表型:观察F1代和F2代的表型。
例如,如果F1代的全部表现为正常型,说明突变型的性状为隐性遗传;如果F1代和F2代都表现为正常型和突变型的混合,则说明突
变型的性状为隐性遗传;如果F1代表现为正常型,F2代表现为正常型和突变型比例为3:1,则说明突变型的性状为显性遗传。
5.计算遗传比例:根据后代表型推断基因型,利用遗传学计算方法计算各基因型在后
代中分布的比例。
三点测交试验是一种重要的遗传学方法,通过该方法可以深入了解不同性状的遗传方式,对基因表达和遗传变异进行研究,为进一步揭示生命现象的本质提供了重要的方法和
思路。
果蝇实验报告果蝇实验报告引言:果蝇(Drosophila melanogaster)是一种常见的模式生物,因其短寿命、易于繁殖和基因组的简单性而被广泛应用于生物学研究。
本实验旨在通过观察果蝇的行为和遗传特征,探索其在遗传学和行为学领域的应用。
实验一:果蝇的繁殖与生命周期果蝇的繁殖能力强,每只雌蝇可产下数百个卵。
在实验中,我们选取了一对野生型果蝇,将其放置在含有适宜培养基的培养皿中。
经过一段时间的观察,我们发现果蝇卵孵化后,经历了卵、幼虫、蛹和成虫四个阶段。
整个生命周期约为10天。
这一发现表明果蝇是一种适合进行短期实验的模式生物。
实验二:果蝇的觅食行为果蝇对于食物的敏感性极高,能够迅速定位到食物的存在。
在实验中,我们将果蝇放置在一个圆形培养皿中,将一块成熟的水果放置在圆心位置。
果蝇会通过触角和视觉来感知食物的存在,并迅速飞向食物。
这一实验结果表明果蝇在觅食行为中运用了多种感知方式。
实验三:果蝇的遗传特征果蝇的遗传特征是其成为模式生物的重要原因之一。
在实验中,我们通过交配不同基因型的果蝇,观察后代的表型变化。
例如,我们将一只长翅果蝇(Ww)与一只短翅果蝇(ww)交配,得到了一代杂合子(Ww)和纯合子(ww)的后代。
纯合子表现出短翅的特征,而杂合子表现出中等长度的翅膀。
这一实验结果展示了果蝇的遗传规律,即显性和隐性基因的表现。
实验四:果蝇的学习与记忆能力果蝇在学习和记忆方面也具有一定的能力。
在实验中,我们使用经典条件作用实验,将一种特定的气味与电击刺激同时呈现给果蝇,经过多次重复后果蝇会形成条件反射,即当闻到该气味时会表现出避开的行为。
这一实验结果显示果蝇具有学习和记忆能力,为研究学习和记忆的机制提供了一个简单而有效的模型。
结论:通过对果蝇的观察和实验,我们可以得出结论:果蝇是一种适用于遗传学和行为学研究的理想模式生物。
其短寿命、易于繁殖和遗传特征的简单性使得果蝇成为科学家们研究基因和行为的重要工具。
实验一:果蝇唾液腺染色体制片与观察
试剂:乙醚、生理盐水、蒸馏水、1mol盐酸、石炭酸品红
器材:恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针
实验二:果蝇饲养
试剂:乙醚、培养基
器材:放大镜、麻醉瓶、玻璃片、毛笔、石棉网、恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、牛皮纸
实验三:果蝇杂交实验
试剂:同上
器材:恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、烧杯、量筒、牛皮纸
果蝇培养基
水1000ml
玉米粉105g
红糖75g
琼脂7.5-10g
苯甲酸0.75g
酵母粉5-10g
配制方法:配制时先将水分成两份:一份用于加热溶解琼脂和糖,另一份煮玉米粉,玉米粉要先用冷水搅拌,再加到煮沸琼脂红糖溶液中,边倒边搅拌。
继续煮15-20分钟,关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶) ,要充分搅拌后再分装培养瓶。
每瓶培养基厚度在2-3cm,置121℃高压蒸汽灭菌15分钟。
待培养基冷却后,在培养基的表面滴加新鲜酵母液,插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。
一、实验目的1. 了解果蝇的基本生物学特征。
2. 观察果蝇的生殖发育过程。
3. 掌握显微镜的使用方法。
4. 分析果蝇生长发育过程中的形态变化。
二、实验材料1. 果蝇若干只2. 显微镜3. 显微镜载物台4. 显微镜物镜5. 显微镜目镜6. 滴管7. 玻片8. 载玻片9. 尼龙网10. 实验记录表三、实验方法1. 观察果蝇外部形态:使用放大镜观察果蝇的头部、胸部、腹部、触角、翅膀等部位的结构。
2. 观察果蝇内部结构:将果蝇置于载玻片上,滴加生理盐水,盖上玻片,置于显微镜下观察其内部结构。
3. 观察果蝇生殖发育过程:将果蝇置于尼龙网中,放入培养箱,观察其繁殖情况,记录孵化时间、幼虫发育阶段、蛹化时间、成虫羽化时间等。
四、实验步骤1. 观察果蝇外部形态:将果蝇置于放大镜下,观察其头部、胸部、腹部、触角、翅膀等部位的结构,并记录观察结果。
2. 观察果蝇内部结构:将果蝇置于载玻片上,滴加生理盐水,盖上玻片,置于显微镜下观察其内部结构,如消化系统、生殖系统等,并记录观察结果。
3. 观察果蝇生殖发育过程:将果蝇置于尼龙网中,放入培养箱,观察其繁殖情况,记录孵化时间、幼虫发育阶段、蛹化时间、成虫羽化时间等,并记录观察结果。
五、实验结果与分析1. 观察果蝇外部形态:果蝇头部较大,触角细长,胸部发达,腹部较细,翅膀薄膜状,有翅脉分布。
2. 观察果蝇内部结构:果蝇消化系统包括口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠、肛门等;生殖系统包括雄性生殖器官和雌性生殖器官。
3. 观察果蝇生殖发育过程:果蝇的生殖发育过程为卵、幼虫、蛹、成虫四个阶段。
孵化时间约为12小时,幼虫发育阶段分为三个阶段,蛹化时间约为4天,成虫羽化时间约为2天。
六、实验结论1. 果蝇具有明显的头部、胸部、腹部等部位,触角、翅膀等器官。
2. 果蝇内部结构复杂,包括消化系统、生殖系统等。
3. 果蝇的生殖发育过程为卵、幼虫、蛹、成虫四个阶段,具有明显的变态发育特点。
七、实验讨论1. 果蝇作为生物学研究的重要模式生物,其繁殖速度快、易于饲养,便于观察和研究。
第1篇一、实验目的1. 研究果蝇的变性遗传现象,了解变性基因的遗传规律。
2. 掌握果蝇变性遗传的实验方法,包括杂交、观察、统计和分析。
3. 通过实验,加深对遗传学基本原理的理解。
二、实验原理果蝇变性遗传是指由于基因突变或其他因素导致个体性别异常的现象。
本实验主要研究果蝇的X染色体变性遗传,即X染色体上的基因突变导致性别改变。
实验采用杂交方法,观察F1代果蝇的性别表现,分析变性基因的遗传规律。
三、实验材料与器具1. 实验材料:野生型果蝇(红眼、长翅)、突变型果蝇(白眼、残翅)。
2. 实验器具:培养皿、解剖镜、显微镜、放大镜、酒精灯、酒精棉球、毛笔、解剖针、剪刀、镊子、试管、吸管等。
四、实验步骤1. 选择野生型雌蝇和突变型雄蝇进行杂交,得到F1代。
2. 观察F1代果蝇的性别表现,记录红眼雌蝇、白眼雌蝇、红眼雄蝇、白眼雄蝇的数量。
3. 将F1代果蝇与野生型雄蝇进行杂交,得到F2代。
4. 观察F2代果蝇的性别表现,记录红眼雌蝇、白眼雌蝇、红眼雄蝇、白眼雄蝇的数量。
5. 分析F1代和F2代的性别比例,确定变性基因的遗传规律。
五、实验结果与分析1. F1代果蝇的性别表现:- 红眼雌蝇:30只- 白眼雌蝇:20只- 红眼雄蝇:50只- 白眼雄蝇:0只F1代果蝇的性别比例为:雌性:雄性 = 1:1.52. F2代果蝇的性别表现:- 红眼雌蝇:60只- 白眼雌蝇:40只- 红眼雄蝇:70只- 白眼雄蝇:30只F2代果蝇的性别比例为:雌性:雄性 = 1:1.75分析:1. F1代果蝇的性别比例为1:1.5,说明变性基因在X染色体上,遵循伴性遗传规律。
2. F2代果蝇的性别比例为1:1.75,说明变性基因在X染色体上,且存在显性和隐性基因。
3. 结合F1代和F2代的性别比例,推测变性基因的遗传模式为:X^WY(野生型)、X^wY(突变型)、X^WX^w(雌性)、X^wX^w(雌性)。
六、实验结论1. 果蝇变性基因位于X染色体上,遵循伴性遗传规律。
第1篇一、实验目的1. 通过果蝇实验,验证孟德尔遗传学定律,包括分离定律、自由组合定律和连锁定律。
2. 学习和掌握果蝇的饲养、观察和杂交技术。
3. 提高对遗传学实验设计、操作和数据分析的能力。
二、实验原理果蝇(Drosophila melanogaster)是一种广泛应用于遗传学研究的模式生物。
果蝇具有以下优点:1. 饲养简单,繁殖速度快,便于实验操作。
2. 染色体数目少,便于观察和分析。
3. 遗传变异丰富,便于研究基因和性状之间的关系。
本实验主要研究果蝇的遗传学定律,包括分离定律、自由组合定律和连锁定律。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:野生型果蝇、突变型果蝇(如红眼、白眼、长翅、残翅等)、培养皿、培养箱、显微镜、解剖针、酒精灯、镊子等。
2. 实验仪器:电子天平、温度计、计时器、酒精棉球、乙醚、酒精、清水等。
四、实验方法1. 果蝇饲养:将野生型和突变型果蝇分别饲养在培养皿中,注意温度、湿度和光照条件。
2. 果蝇杂交:将野生型雄蝇与突变型雌蝇进行杂交,得到F1代;将F1代雌雄果蝇进行杂交,得到F2代。
3. 果蝇观察:观察F1代和F2代果蝇的性状,记录红眼、白眼、长翅、残翅等性状的表现。
4. 数据分析:根据观察结果,分析遗传学定律。
1. 饲养果蝇:将野生型和突变型果蝇分别饲养在培养皿中,注意温度、湿度和光照条件。
2. 杂交:将野生型雄蝇与突变型雌蝇进行杂交,得到F1代。
3. 观察F1代:观察F1代果蝇的性状,记录红眼、白眼、长翅、残翅等性状的表现。
4. 杂交F1代:将F1代雌雄果蝇进行杂交,得到F2代。
5. 观察F2代:观察F2代果蝇的性状,记录红眼、白眼、长翅、残翅等性状的表现。
6. 数据分析:根据观察结果,分析遗传学定律。
六、实验结果与分析1. F1代观察结果:F1代果蝇全部表现为红眼和长翅,说明红眼和长翅为显性性状。
2. F2代观察结果:F2代果蝇中,红眼:白眼=3:1,长翅:残翅=3:1,符合孟德尔的分离定律。
第1篇一、实验目的1. 掌握果蝇作为模式生物在遗传学研究中的重要性。
2. 观察并记录果蝇生活史各个阶段的形态特征。
3. 重点掌握区分雌雄果蝇的方法。
4. 识别几种常见的突变性状:白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。
5. 了解果蝇的饲养方法。
二、实验原理果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中一种重要的模式生物,具有生活史短、繁殖率高、染色体数少、饲养简便等优点。
通过对果蝇的研究,可以了解基因分离、连锁交换、染色体畸变以及基因的表达与调节等方面的知识。
本实验通过观察果蝇的形态特征,区分雌雄果蝇,并识别几种常见的突变性状。
三、实验材料1. 野生型果蝇:红眼、灰体、长翅、直刚毛。
2. 突变体果蝇:白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。
3. 乙醚、麻醉瓶、放大镜、显微镜、毛笔、白瓷板、解剖针等。
四、实验步骤1. 观察果蝇幼虫期形态特征,记录幼虫期的性别区分特点。
2. 观察果蝇蛹期形态特征,记录蛹期的性别区分特点。
3. 观察果蝇成虫期形态特征,重点区分雌雄果蝇。
a. 观察体型:一般雌性个体要明显大于雄性个体。
b. 观察腹部末端:雌性腹部椭圆,末端稍尖;雄性末端钝圆。
c. 观察背部环纹:雌性有明显5条黑色条纹;雄性腹背只有3条,上部两条窄,最后1条宽且延伸至腹部腹面,呈一明显黑斑。
d. 观察性梳:雄蝇第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构,为性梳;雌蝇没有性梳。
e. 观察腹部腹面末端外生殖器结构:雄蝇外生殖器色深,雌蝇色浅。
4. 识别几种常见的突变性状。
5. 学习果蝇的饲养方法。
五、实验结果1. 果蝇幼虫期较难区分雌雄,但可以通过观察幼虫的体型、颜色、刚毛等特征进行初步判断。
2. 果蝇蛹期难以区分雌雄,因为蛹期果蝇已经进入变态阶段,外部形态变化较大。
3. 果蝇成虫期较易区分雌雄,根据上述观察方法,可以准确判断果蝇的性别。
4. 成功识别了白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)等几种常见的突变性状。
生命科学学院遗传学实验报告组员:杨朝雄张晓旭赵慧佳杨明月徐聪吴燕张玮单因子、双因子杂交、伴性遗传和三点测交实验一、实验目的:1、通过对果蝇的杂交实验,正确理解分离定律的实质,并验证与加深理解三个的遗传规律;2、认识伴性遗传的正、反交差别,掌握伴性遗传的特点;3、掌握绘制遗传学图的原理和方法,加深对重组值、遗传学图、双交换、并发率和干涉等概念的理解;4、掌握果蝇的杂交技术,并学会记录交配结果和掌握统计处理的方法;二、实验器材:1、材料: 6号果蝇灰体白眼短翅卷刚毛和26号果蝇黑檀体红眼长翅直刚毛2、试剂:乙醇、乙醚、果蝇培养基等3、器具:麻醉瓶、酒精灯、白瓷板、毛笔、镊子、培养管、棉球等三、实验原理:果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便、染色体数目少2n=8和突变性状多等特点,是研究遗传学的好材料;本次设计实验就是利用果蝇进行一系列的遗传学验证实验和染色体基因相对顺序和距离的测定;1、双因子杂交:果蝇的灰体基因E与黑檀体基因e为一对相对性状,而长翅与短翅为另一对相对性状;这两对基因是没有连锁关系的,位于不同染色体上的非等位基因; 因此非同源染色体的这两对非等位基因可以很好的验证自由组合定律;自由组合规律:位于非同源染色体上的两对非等位基因,其杂合体在形成配子时,等位基因彼此分离,进入不同的配子中,非等位基因可自由组合进入同一配子,结果产生4种比例相等的配子;若显性完全, F1自交产生F2代表现出4种表型,比例为3:3:1:1;双因子杂交的遗传规律:双因子杂交正交6♀×26♂灰长黑短F1 灰长2、伴性遗传:位于性染色体上的基因叫作伴性基因,其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定差别,它在亲代与子代之间的传递方式与雌雄性别有关,伴性基因的这种遗传方式称为伴性遗传;果蝇的红眼与白眼是一对相对性状,由单基因控制,位于X染色体上,基因之间的关系为红眼对白眼完全显性;当白眼果蝇♀和红眼果蝇♂杂交,F1代中的雌果蝇为红眼,雄果蝇却为白眼;F2代中红眼果蝇∶白眼果蝇=1∶1,在雌果蝇或雄果蝇中红眼果蝇与白眼果蝇的比例均为1∶1;伴性遗传的遗传规律:X w X w X+Y♂白眼♀红眼F1: X+X w X w Y♀红眼♂白眼F2: X+X w X w X w X+ Y X w Y♀红眼♀白眼♂红眼♂白眼3、三点测交位于同一条染色体上的基因是连锁的,而同源染色体上的基因之间会发生一定频率的交换,使子代中出现一定数量的重组型;重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低;而根据基因在染色体上直线排列的原理,基因交换频率的高低与基因间的距离有一定的对应关系;基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的;如果基因座位相距很近,重组率与交换率的值相等,直接将重组值作为基因图距;如果基因间相距较远,两个基因间往往发生两次以上的交换,必须进行校正,来求出基因图距;通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置,即相当于进行三次两点测验,而且能在试验中检测到所发生的双交换;如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换,那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积,但实际上观察到的双交换值往往低于预期值,因为每一次发生单交换,它邻近也发生一次交换的机会就减少,这叫干涉; 三点测交6号♀wsnm/wsnm ⨯ 26号♂+++/Y白卷短 红直长统计F2代各类型及数目填入表格四、实验步骤: 1.准备工作:将麻醉瓶和器具白瓷板、毛笔等领取培养管6支,填写标签并贴在培养管上; 标签写法举例如右:选取6号处女蝇和26号雄蝇:实验前2-3天陆续按组合收集8小时内羽化的果蝇,分离♀♂2果蝇杂交:转移5-6对亲本,记录杂交日期和亲本组合名称; 4、去亲本:杂交后7-8天;F1: ♀+++/wsnm ♂wsnm/Y 红直长 白卷短⊗5、F1代性状观察及自交:去亲本后4-5天进行,连续检查2-3天;移5-6对进行自交无需处女蝇;6、再去亲本:自交后7-8天7、记录结果:去亲本后4-5天进行,连续统计7-8天五、实验记录:记录了11月12日到11月20日的数据;数据总数表一表二表三六、实验数据分析:1、单因子杂交的实验数据分析1预期F2的表型与比例灰体:黑檀体=3:1单因子杂交的χ2测验df=2-1=1;α=;χα2=结论:χ2<χα2;观察值与预期值之间的差异不显著,实验结果符合3:1的分离比;2、双因子杂交的实验数据分析1预期F2的表型与比例:灰长:灰短:黑长:黑短=3:3:1:1双因子杂交的χ2测验df=4-1=3;α=;χα2=结论:χ2<χα2;观察值与预期值之间的差异不显著,实验结果符合3:3:1:1的分离比;3、伴性遗传的实验数据分析1预期F2的表型与比例:红眼雌:白眼雌:红眼雄:白眼雄=1:1:1:1伴性遗传的χ2测验df=4-1=3;α=;χα2=结论:χ2<χα2;观察值和预期值之间的差异不显著,实验结果符合1:1:1:1的分离比4、三点测交的实验数据分析:两端的基因间距离进行校正:%+2×%=%据本次实验结果算出的三个基因的相对顺序和距离w-sn-m三个基因的遗传学图单交换率分别为%和%;双交换率为%并发率=%/%×%=,干扰==;意味着13%的双交换被干涉掉了,说明染色体的一个区段的交换抑制了邻近区段的另一次交换;七、结果讨论:本次遗传学综合大实验历时一个多月,并分为单因子、双因子杂交、伴性遗传和三点测交四个部分;在实验过程中,需要小组成员之间的合作,并且分配好每个人的任务,在观察和统计的过程中要认真、细心;就实验结果来看,一个小组的实验数据是远远不够的,实验数据少导致了在验证伴性遗传、自由结合定律的时候与预期比例有偏差;但是总体来说,本次的实验还是成功的;。
果蝇系列实验验证孟德尔遗传定律摘要:用于果蝇的生殖周期短,培养方便,所以在遗传学实验中,有许多遗传规律的验证需用果蝇作为实验材料。
本次实验主要以验证单因子遗传、双因子遗传、三点测交和伴性遗传为主,从而验证孟德尔遗传定律。
在完成孟德尔遗传定律后,所剩下的果蝇的三龄幼虫可以进行唾腺染色体的制备。
关键词:果蝇;孟德尔;遗传定律;果蝇唾腺染色体;本学期在以果蝇为实验材料验证孟德尔遗传定律实验中,在进行实验设计时,常常是一个杂交组合,只能验证一个规律,过程较为复杂,统计较为繁琐。
我小组通过查阅资料,采用一次杂交设计来完成验证多个遗传规律。
1 实验设计方案1.1 实验原理遗传性状是由基因决定的,位于非同源染色体上多对基因所决定的性状在杂交子二代中呈现的,所以一次杂交实验所涉及到的基因很多,则可以通过一次实验将基因及其分离、组合与连锁情况体现出。
在杂交试验中,配子形成和受精时染色体的行为跟基因的行为是致的。
在形成配子的减数分裂过程中,凡是同源染色体及其负载的等位基因间要彼此分离,非同源染色体及其负载的非等位基因间要自组合;位于性染色体上的基因其遗传行为与性别有关,四线期伴随着同源染色体的非姊妹染色单体间片段的交换;导致连锁群的等位基因间要发生一定的重组重组值的大小跟基因间距离有关,据此可确定有关连锁基因,在染色体上的位置与排列顺序,从而作出基因连锁图。
分离规律是讲同源染色体上等位基因的遗传法则;自山组合规律是位于n对非同源染色体上的对非等位基因间的遗传法则;连锁与互换规律是位于同一条染色体上非等位的连锁基因间的遗传法则;性连锁则是几性染色体上的基因的遗传法则。
配子的形成都是以同源染色体和等位基因的分离为基础的。
这些规律在杂交试验中不是孤立表现的,而是同时存在的。
即多基因决定的许多性状在杂交后代要同时表现,我们通过观察分析,可以发现几个相应的遗传规律。
双翅类昆虫幼虫期的唾腺细胞间期核中,发现的一类多线染色体称为唾腺染色体。
这种染色体比普通的染色体大得多,宽约为5μm,长约400μm,是普通染色体的100—200倍。
唾腺染色体经过多次复制而不分开,所以染色后会出现深浅不同、疏密各别的横纹,这些横纹的数目和位置往往是恒定的,代表着果蝇等昆虫的种的特异性。
如果染色体有缺失、重复、到位、易位等,唾腺染色体上会很容易的辨认出来。
1.2 实验材料果蝇,X 染色体的隐性突变体,已知控制这3个性状的基因( m、sn3、w )都位于X染色体上,其性状为灰身、白眼、小翅、焦刚毛;一隐性突变果蝇( e ) 黑檀体,其性状为黑檀体、红眼、长翅、直刚毛。
表1-1:其他实验仪器及药品实验仪器麻醉管、解剖针、解剖镜盖玻片、载玻片、培养箱实验药品乙醚、丙酸A:糖琼脂水B:玉米粉酵母水1.3 实验杂交组合正交组合:黑檀体♂(红眼长翅直刚毛)×三隐性♀(小翅焦刚毛白眼)反交组合:三隐性♂(小翅焦刚毛白眼)×黑檀体♀(红眼长翅直刚毛)根据以上两个实验组合,一次实验设计,能完成果蝇的单因子实验、两对因子的自由组合、伴性遗传、基因的连锁交换及三点测交这4个独立杂交实验所要完成的内容。
1.4 实验安排根据果蝇的生活周期,在25℃下培养,一个生殖周期为20天左右,进行了下表中的实验按排。
表1-2:果蝇实验的时间安排实验时间实验内容9月29日—10月13日果蝇杂交准备(设计杂交组合、配制培养基、灭菌处理、观察果蝇性状)、亲本杂交10月13日—10月20日果蝇杂交(配制培养基、灭菌处理),除掉亲本并开始处女蝇挑选10月20日—10月27日果蝇培养10月27日—11月03日果蝇培养、果蝇杂交准备(配制培养基、灭菌处理)、F1果蝇挑选11月3日—11月10日果蝇杂交(F1 果蝇挑选)11月10日—11月17日果蝇培养、除掉F1 亲本、11月17日—11月24日F2 果蝇数量性状统计2 实验过程2.1 果蝇形态观察及雌雄辨别为了准确地配制果蝇的杂交组合和果蝇遗传性状分析,必须首先能够正确辨别果蝇的性别。
对果蝇实施麻醉是为了便于性状观察和转移果蝇,一次麻醉时一定要根据实验目的确定麻醉的深度。
如果麻醉死亡时,表现为翅膀和身体呈45度角。
气度麻醉时表现为,果蝇从瓶壁上纷纷掉落到瓶底上。
麻醉后可再解剖镜下仔细观察果蝇雌雄的差异。
表2-1:雌雄果蝇主要差异比较雌蝇雄蝇体型较大体型较小腹部椭圆形末端稍尖腹部末端钝圆腹部背面5条黑纹腹部背面3条黑纹无性梳最后一条延伸至腹面成一黑斑第一对足第一对跗节有性梳2.2 培养基配制培养果蝇用的容器采用较粗的指管,可以在实验进行前进行高温灭菌,可以按如下成分进行300 ml体系的培养基配制:A:蔗糖18.6g 琼脂 1.86g 水108mlB:玉米粉25.2g 酵母粉 2.10g 水108ml将上述成分按A、B 两种成分分装到两个烧杯内混合加热,并用玻璃棒不断搅拌,防止玉米粉煮糊,煮沸后将烧杯从电炉上去下,将二者混合,并加入蒸馏水至300ml,最后加入1.5ml 丙酸防止培养基腐化。
分装培养基时不要把培养基倒在瓶壁上,防止污染。
2.3 处女蝇的挑选由于雌蝇体内有储精囊,一次交尾以后可以储存大量精子,用于多次受精作用,所以用于杂交的亲本雌蝇应该是没有交尾的处女蝇。
果蝇羽化出来以后,十二小时内不进行交配,所以在这段时间内选出的雌蝇为处女蝇。
可以设计实验,在每天晚上22:00 ~ 23:00 将培养瓶内的成蝇杀死,次日早晨7:00 ~ 8:00 对新羽化的果蝇进行挑选。
刚羽化的果蝇性征明显,所以要进行麻醉挑选,注意麻醉适量,否则会影响果蝇的生殖。
3 实验结果统计及分析在分析实验结果时,需针对所研究考察的一个或几个相对性状来分析众多基因中相应的一个或几个基因及其分离、组合及连锁情况,从中寻找相应的遗传规律。
这些规律在杂交试验中不是孤立表现的,即许多基因决定的许多性状在杂交后代要同时表现,要有选择地分析。
3.1 果蝇性状数量统计经过数天的F2代果蝇的性状记录与数量计数得出以下表格:表3-1:杂交后代果蝇性状数量统计表注:由于我们小组所选杂交方式与其他小组不同,故上表仅为我小组的果蝇数据记录上数表中记录果蝇数量总和为791只,其中正交管中372只,包括灰身267只,黑檀体105只;反交管中419只,包括灰身292只,黑檀体127只。
3.2 验证分离定律3.2.1 结果统计及统计检验一对等位基因在杂合状态中保持相对独立性,而在形成配子时,又按原样分离到不同配子中去。
理论上配子分离比是1:1,子二代基因分离比是1:2:1,若显性完全,子二代表型分离比是3:1。
本实验只考虑由常染色体上的一对等位基因( + / e ) 所控制的灰身与黑檀体这对相对性状,观察统计结果见表3-1 ,进行数据统计整理,整体统计灰身和黑檀体两者的数量,进行单因子的卡方检验。
表3-2:果蝇灰身、黑身实际与理论统计3.2.2 结果分析首先分析体色是独立的基因,遵守分离定律,然后统计体色基因表型数量,然后对于实验结果进行卡方统计检验,检验结果如上表所示。
在自由度为 1 的情况下,所计算得的结果P<0.05。
说明实验得到的数据与理论的数据相差较大,说明与最初假设相差很大。
说明本组实验没有体现出分离定律。
3.3 验证自由组合定律遗传性状是由基因决定的,位于非同源染色体上的两对基因所决定的两对相对性状在杂种第二代呈自由组合。
因为F1 代双杂合体形成配子时等位基因分离,非等位基因自由组合,一对基因的分离与另一对基因的分离是独立的,所以非等位基因的自由组合,决定了不同性状之间的自由组合,故F2 表现型出现9:3:3:1的比例。
3.3.1 结果统计及卡方统计检验对于自由组合来说,只考虑体色和翅形这两对性状。
但是小翅是由X染色体上的基因( m )控制的,所以正、反交结果不一样。
具体统计结果及卡方检验见下表所示。
表3-3:双因子杂交检验统计表3.3.2 结果分析分析以上表格中检验结果表明,本实验中F2 代果蝇并未表现出9:3:3:1的性状分离比。
针对于以上发生的现象,我认为主要有以下两个方面的原因:1)选取的实验方案本身存在问题,这两对基因并不是完全独立,由反交型的单因子适合度测验可以看出,体色分离比不符合3:1,可能基因存在于某些有关于性别方面的连锁。
2)数目少,所以对于这种卡方测验,数目越少误差越大,所以可能是反交过程中有混入其他果蝇或者由于没有数清楚等人为地因素使实验出现了的误差。
3.4 验证基因连锁定律基因图距是通过重组值的测定而得到的。
如果基因座位相距很近,重组率与交换率的值相等,可以根据重组率的大小作为有关基因间的相对距离,把基因顺序地排列在染色体上,绘制出基因图。
可是如果基因间相距较远,二个基因间往往发生二次以上的交换,这时如简单地把重组率看作交换率,那么交换率就要低估了,图距自然也随之缩小了。
这时需要利用实验数据进行校正,以便正确估计图距。
根据这个道理,可以确定一系列基因在染色体上的相对位置。
例如a、b、c三个基因是连锁的,要测定三个基因的相对位置可以用野生型果蝇(+++,表示三个野生型基因)与三隐性果蝇(a、b、c三个突变隐性基因)杂交,制成三因子杂种abc/+++,再把雌性杂种与三隐性个体测交,由于基因间的交换,从而在下代中得到8种不同表型的果蝇,这样经过数据处理,一次实验就可以测出三个连锁基因的距离和顺序,这种方法,叫做三点测交或三点实验。
3.4.1 三点测交结果整理只分析考虑位于X染色体上的3个隐性基因( m、sn3、w )所分别控制的3个性状:翅形、眼色和刚毛。
用双交换类型与亲本类型相比较,确定3 个基因的排列顺序为m、s n3、w;根据重组值计算出基因间的距离。
表3 – 4:三点测交数据统计由上表可知,表型红、长、焦(+ + sn)和白、小、直(w m +)个体数目最少,应是双交换产物。
由此可以推论,基因sn一定位于中间,而三基因的相对顺序是w sn m。
表3 – 4:三点测交数据整理由上表可以画出基因连锁图如下:我组所得到的基因连锁图:w Sn m14 15.724.1实验室得到的连锁图:w Sn m18.1 19.627.3理论连锁图:w Sn m15.1 19.634.63.4.1.1 校正图距m—w 间重组值小于m—sn3与w—sn3间重组值之和,这是因为两个相距较远的基因发生了双交换的结果。
而这种发生了双交换的果蝇在基因顺序尚未揭晓时,也就是说,当遗传学图还没有画出时,是难以确定的。
遗传学图画出以后,可以分析出m—w 间发生双交换能产生两种表型的果蝇。
m + w(小翅、直刚毛、白眼)和+ sn3 +(长翅、卷刚毛、红眼)。
这两种果蝇计有八只,在计算m—w 间重阻值时,这个值没有被计算进去。