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百日咳实验室诊断标准引言：百日咳是一种由百日咳杆菌引起的传染病，主要通过飞沫传播。
由于百日咳症状多变、病程长，并且可能与其他呼吸道感染混淆，因此确诊百日咳需要依赖实验室诊断标准。
本文将为您介绍百日咳实验室诊断标准的详细内容。
一、病原学检测：1. 咽拭子采集及培养：采集咽拭子进行百日咳杆菌的培养。
培养结果呈阳性，能够证实百日咳杆菌的存在。
2. PCR检测：采用聚合酶链反应技术，检测咽拭子中百日咳杆菌的特异性基因。
若PCR结果呈阳性，可确诊百日咳感染。
二、血清学检测：1. 抗百日咳抗体检测：通过血清学检测，测定患者体内针对百日咳杆菌的特异性抗体水平变化。
常见的检测方法包括ELISA和免疫荧光法等。
2. IgA抗体测定：通过测定患者血清中的百日咳IgA抗体水平，以及抗百日咳抗体滴度，从而判断患者是否感染百日咳。
三、特殊检测方法：1. 纤维支气管镜检查：通过纤维支气管镜检查，可观察到百日咳引起的支气管粘膜炎症状况。
此项检查特异性较高，但操作较为复杂。
2. 细菌毒力因子检测：通过检测百日咳杆菌产生的毒力因子，如百日咳毒素等，可以进一步确认百日咳感染。
四、诊断根据：根据上述实验室检测结果，结合患者的临床症状及流行病学史，可以进行百日咳的确诊。
1. 临床症状：百日咳的典型症状包括持续的咳嗽、咳出稠厚的白色或黏液状痰，呼吸困难等。
但部分患者可能仅表现为轻度咳嗽，并有可能与其他呼吸道感染混淆。
2. 流行病学史：百日咳主要通过飞沫传播，因此密切接触患者或流行病区的历史对于诊断具有重要意义。
结论：百日咳是一种需要依靠实验室检测来确诊的传染病。
通过病原学检测、血清学检测以及特殊检测方法，结合患者的临床症状和流行病学史，可以准确判断患者是否感染百日咳。
在实际诊断过程中，医生需要综合各项检测结果做出最终诊断，并及时对患者进行治疗，以减少疾病的传播和并发症的发生。
百日咳疫苗在青少年和成人中的免疫效果评估百日咳（Pertussis），又称为百日咳病，是由百日咳杆菌引起的一种呼吸道传染病。
百日咳可引起长时间持续的咳嗽发作，严重时可能导致呼吸困难、肺部感染以及并发症如肺炎、脑炎等。
该疾病主要对婴儿和幼儿造成威胁，但成人和青少年也可能受到感染，传播给未接种疫苗的婴幼儿。
为了预防百日咳的传播和减轻患者症状，百日咳疫苗的广泛接种成为一项重要的公共卫生措施。
本文将对百日咳疫苗在青少年和成人中的免疫效果进行评估。
百日咳疫苗主要有两种类型，一种是百日咳细胞百白破联合疫苗（DTaP），用于婴儿和幼儿接种；另一种是百日咳成人无细胞百白破疫苗（Tdap），用于成人和青少年接种。
这两种疫苗的主要成分是对百日咳杆菌的毒素或外膜蛋白的抗原，能够激活人体的免疫系统，并产生特异性的免疫应答。
接种疫苗后，人体会产生抗百日咳的抗体和免疫记忆细胞，从而在接触到百日咳病原体时迅速产生保护性的免疫应答。
研究表明，百日咳疫苗在青少年和成人中具有良好的免疫效果。
根据美国疾病控制和预防中心（CDC）的数据，接种Tdap疫苗后，青少年和成人的百日咳感染风险显著降低。
根据一项针对14至18岁美国青少年的研究，疫苗接种后的第一年，百日咳的发病率降低了77%。
此外，成人接种百日咳疫苗对于保护婴儿和幼儿免受感染也非常重要。
因为成人可能是未接种疫苗的婴儿和幼儿感染百日咳的主要来源，他们接种疫苗后不仅自身受益，还能够减少传播给婴幼儿的风险。
然而，尽管百日咳疫苗在青少年和成人中的免疫效果被广泛认可，但疫苗的保护效果可能会随时间的推移而减弱。
一项追踪研究发现，在接种Tdap疫苗后的4至6年内，免疫效果逐渐下降。
这意味着接种者可能需要定期接种以保持持久的免疫保护。
此外，疫苗的保护效果在个体之间可能存在差异，部分人可能对疫苗产生较弱的免疫应答。
因此，定期进行免疫效果评估，以及改善疫苗的免疫原性和持久性，是保持人群免疫水平的关键。
人百日咳（PT）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
96T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中百日咳（PT）表达。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人百日咳（PT）表达。
用纯化的人百日咳（PT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中百日咳（PT）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的百日咳（PT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人百日咳（PT）的存在与否。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
抗体检测方法都有哪些
抗体检测方法常用的有以下几种：
1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：在试验中，将待检测抗体与特定抗原结合，然后通过标记抗体的酶来检测抗体的存在。
该方法广泛应用于许多领域，包括医学诊断和科学研究。
2. 免疫荧光法：使用特定荧光标记的抗体来检测抗体与抗原的结合。
当抗体与抗原结合时，荧光信号被激活，可以使用荧光显微镜观察。
3. 免疫印迹法（Western blot）：通过将待检测抗体与蛋白质混合，然后通过电泳将混合物分离出不同的带，再用特定抗体探测特定的带，从而确定抗体的存在与否。
4. 中和试验：将抗体与病原体或毒素混合，观察它们是否可以相互中和。
这种方法常用于研究抗体对病原体的保护作用，以及对疫苗的效果评估。
5. 聚合酶链反应（PCR）：通过扩增特定的DNA序列来检测是否存在特定的抗体。
这种方法通常用于检测病原体或其他生物分子的存在。
6. 微阵列技术（Microarray）：通过将大量特定抗原固定在固定基质上，然后与待检测抗体反应，从而快速同时检测多个抗体。
7. 化学发光法：将特定化学物质标记的抗体与待测样品中的抗体反应，然后通过检测化学发光信号来确定抗体的存在与否。
这种方法常用于高通量筛选和体外诊断。
百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体检测试剂盒（胶体金法）说明书【产品名称】通用名称：百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体检测试剂盒（胶体金法）【包装规格】条型：100人份/盒（25人份/筒×4）【预期用途】本产品用于体外定性检测人血清、血浆或全血样本中的百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体。
适用于百日咳杆菌感染的辅助诊断，检测抗百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体。
百日咳是由革兰氏阴性的百日咳杆菌引起的呼吸道传染病，主要表现为迁延数周的咳嗽，以有吸气性“尾声”的剧烈阵发性痉咳为特征，婴幼儿的临床表现最为严重。
百日咳的病原体为百日咳鲍特菌，是一种小的、营养需求苛刻的革兰氏阴性球杆菌，专门附着在人呼吸道的粘膜层。
有时，其他传染源，尤其是副百日咳鲍特菌，也可引起百日咳样疾病。
鲍特氏菌属可因环境条件改变而发生表型变化，毒力因子的表达也可不同。
这些因子包括百日咳毒素（PT）、丝状血凝素（FHA）、百日咳粘着素（PRN）、菌毛（FIM）2型和3型、腺苷酸环化酶毒素（ACT）、气管细胞毒素（TCT）、脂低聚糖和百日咳鲍特菌内毒素。
虽然百日咳的发病机制尚不完全清楚，但FHA、PRN和菌毛可帮助细菌粘附在宿主细胞上，PT、TCT和ACT可使细菌破坏上皮层，并躲避宿主的免疫系统。
这些都是重要的致病因素。
百日咳的病原体仅在发病早期患者的鼻咽部可以检出，经9～10 天（范围：6~20 天）的潜伏期，患者出现卡他症状（包括咳嗽）。
1～2周内，出现阵发性痉挛性咳嗽，并带有特征性的鸡鸣样尾音。
典型表现是夜间咳嗽特别严重，咳后常伴有呕吐。
在婴幼儿中，百日咳可引发呼吸暂停和发绀，但可无咳嗽；在青少年和成人中，非特异性的、经久不愈的咳嗽可能是惟一的临床表现。
疾病的卡他期、阵发期和恢复期可持续数月。
虽然大部分临床上可辨别的百日咳病例发生在1～5 岁的儿童，但报告的严重病例和死亡病例主要发生于出生后数周或数月。
在大龄儿童、青少年和成人中，由于其病程常常不典型，通常未被辨识为百日咳。
测抗体的方法
1. 免疫组化法（Immunohistochemistry，IHC）：将标记有特定抗体的染色剂与组织样本中的目标抗原结合，通过显色或荧光等方式观察抗原的存在和定位。
2. 免疫荧光法（Immunofluorescence，IF）：使用荧光标记的
抗体与组织样本中的抗原结合，通过荧光显微镜观察抗原的存在和定位。
3. 酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）：将目标抗原与固相载体结合后，使用特异性抗体进
行检测，通过底物的酶反应生成显色或荧光信号来定量测定抗体的含量。
4. 免疫印迹法（Western Blot，WB）：通过将蛋白质样本经SDS-PAGE电泳分离后，将目标蛋白迁移到膜上，然后使用特异性抗体与目标蛋白结合，通过显色剂检测抗体和蛋白质的结合情况。
5. 流式细胞术（Flow Cytometry）：将荧光标记的抗体与单个
细胞或细胞悬液中的目标抗原结合，通过流式细胞术仪器检测细胞的荧光强度和分布，分析抗体的亲和力和细胞表面蛋白的表达情况。
6. 中和试验（Neutralization Assay）：用抗体与病原微生物进
行体外中和反应，观察抗体对病原微生物感染能力的抑制作用。
以上仅为常用的几种测量抗体的方法，具体的方法选择要根据研究目的和实验条件来确定。
花季少年咳嗽不止：原来是百日咳来自美国波士顿哈佛大学医学院的Wessels 医生等报道了一例百日咳引起的咳嗽，发表在近期的NEJM 杂志上。
患者为16 岁男孩，春季末因咳嗽于呼吸科就诊。
3 周前，患者出现咳嗽和鼻塞，症状持续，无发热和寒颤。
接受盐酸非索非那定治疗后，症状无改善。
3 天前，患者出现夜间咳醒，咳嗽剧烈，咳嗽后出现呕吐和呼吸困难。
遂于外院急诊就诊，行体格检查时，患者无呼吸窘迫，体温 37℃，血压 152/87mmHg，脉率 107 次 / 分，呼吸频率为 18 次 / 分，呼吸周围空气时血氧饱和度为 100%。
咽后壁可见鹅卵石样改变，悬雍垂位于正中，扁导体无肿大，无脓性分泌物。
鼻塞，鼻粘膜湿润，双侧鼓膜后可见大量渗出物。
呼吸音清，未闻及干湿啰音。
余体查未见异常。
诊断为过敏性鼻炎引起的上气道咳嗽综合征（鼻后滴流），予以氟替卡松鼻喷雾剂和苯佐那酯（200mg，一日3 次）治疗。
次日，患者咳嗽依然存在，再次因剧烈咳嗽而咳醒，咳嗽持续约 10 分钟，期间呕吐 2 次，并再次到外院就诊。
患者无胸痛、发热、盗汗或体重减轻。
体查时患者状态良好，无咳嗽。
体温为 36.8℃，血压15,1/87mmHg，脉率 93 次 / 分，呼吸频率为 18 次 / 分，呼吸周围空气时血氧饱和度为 97%。
轻度鼻塞，咽后部可见红斑，余体查未见异常。
胸片正常。
疑诊支气管痉挛。
疑诊格鲁布喉炎，遂采用地塞米松治疗和沙丁胺醇雾化。
建议患者到儿科门诊就诊。
随后两天咳嗽持续，无间歇。
就诊前的一晚，患者出现两次剧烈咳嗽，随后吸气出现呛声。
本次就诊当日，患者到学校上课。
患者咳嗽时出现鼻衄，咳嗽时患者被呛到。
患者无头痛和听力下降，胸痛，非咳嗽时无呼吸困难，无腹痛、腹泻和便秘。
患者有收缩压升高，BMI 指数偏高。
无规律用药史。
儿童时期按时接种疫苗，包括 5 次百白破（DTaP）疫苗，4 次流感嗜血杆菌 B 型疫苗，3 次乙肝疫苗，和 2 次麻疹 - 流行性腮腺炎 - 风疹疫苗（婴幼儿时期），还有 2 次流脑疫苗（分别在 11 岁和 16 岁时），1 次吸附百日咳疫苗、白喉和破伤风类毒素混合疫苗（Tdap），1 次人类乳头瘤病毒疫苗（16 岁时），无肺炎球菌或流感疫苗接种史，无药物过敏史。
百日咳检查方法
1.临床意义
百日咳是一种由百日咳杆菌引起的急性呼吸道传染病，自从广泛实施百日咳菌苗免疫接种后,本病的发生率已经大为减少。
百日咳的临床特征为咳嗽逐渐加重，呈典型的阵发性、痉挛性咳嗽，咳嗽终末出现深长的鸡啼样吸气性吼声，病程长达2～3个月，故有百日咳之称。
2.检查方法：
2.1.白细胞计数
卡他期及痉咳期末可见外周血白细胞计数明显增高，可达（20～50）×109/L，分类中淋巴细胞占0.60～0.80，无幼稚细胞。
如有继发感染时，淋巴细胞即相对减少。
2.2.细菌培养
卡他期及痉咳早期使用鼻咽拭子，或用咳碟法收集标本，用薄-姜氏（B-G）培养基做细菌培养，可获得阳性结果。
2.3.荧光抗体染色法检查
用鼻咽拭子涂片，用荧光标记的特异性抗体染色，在荧光显微镜下检查病原体有快速诊断的优点，但本法特异性稍差，仅作辅助诊断之用。
2.4.血清学检查
做双份血清凝集试验及补体结合试验，如抗体效价递升可予确诊。
近年有用酶联免疫吸附试验测定免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白A（IgA）抗体，对早期诊断有所帮助。
也有用单份恢复期血清凝集抗体1：320效价作为阳性诊断值者。
2.5.细菌特异性核酸检测
可使用DNA聚合酶链式反应技术（PCR）法扩增细菌特异性核酸，据报道此法特异性及敏感性均较好。
