苹果酸含量的测定苹果酸含量
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苹果有机酸的测定
一、实验目的
1、了解HPLC的工作原理及其构造
2、熟悉HPLC法测定有机酸的操作步骤
二、实验原理
三、实验仪器与试剂
1、仪器:Waters公司的HPLC分析仪(组合型)包括7725i六通阀,510型高压泵,481型紫外-可见光检测器,HW-2000型色谱工作站;CQ250型超声波提取器,高速离心机,Milli-Q超纯水制备装置;PH试纸。
2、试剂:甲醇(色谱纯),超纯水,磷酸二氢铵(分析纯,中国四川成都金山化工厂)。
七种有机酸的标品溶液:草酸(0.025mg/ml)、酒石酸(0.25 mg/ml)、苹果酸(0.75mg/ml)、乳酸(1.0 mg/ml)、乙酸(1.0 mg/ml)、柠檬酸(0.6 mg/ml)、琥珀酸(0.9 mg/ml)。
四、色谱条件:色谱柱:Hypersil BDS C18柱(4.6mm×250mm,5 m)
流动相:0.5% NH
4H
2
PO
4
(PH=2.5)
进样量:20ul
检测波长:210 nm
流速: 1.0ml/min
柱温:室温
五、样品预处理
苹果的预处理:准确称取苹果果肉2.0000g于研钵中,加少许80%乙醇研磨至糊状,移至10ml离心管(共用去80%乙醇5ml),4000rpmin,离心10min。
取上清液至蒸发皿水浴中70℃蒸干,冷却、加入流动相4ml溶解、10000rpmin离心10min,0.45μm超滤,上机。
六、撰写实验报告。
食品安全国家标准食品添加剂L-苹果酸1 范围本标准适用于以酶工程法、发酵法制得的食品添加剂L-苹果酸。
2 化学名称、分子式、结构式和相对分子质量2.1 化学名称L-羟基丁二酸2.2 分子式C4H6O52.3 结构式2.4 相对分子质量134.09(按2007年国际相对原子质量)3 技术要求3.1 感官要求感官要求应符合表1的规定。
表1 感官要求3.2 理化指标理化指标应符合表2的规定。
表2 理化指标附录A检验方法A.1 警示试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。
操作者应采取适当的安全和健康措施。
A.2 一般规定本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和GB/T 6682规定的三级水。
试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按GB/T 601、GB/T 602和GB/T 603的规定制备。
试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。
A.3 鉴别试验A.3.1 试剂和材料A.3.1.1 氨水溶液:2+3。
A.3.1.2 对氨基苯磺酸溶液:10 g/L。
A.3.1.3 亚硝酸钠溶液:200 g/L。
A.3.1.4 氢氧化钠溶液:40 g/L。
A.3.2 鉴别方法A.3.2.1 苹果酸氨盐呈色试验称取0.5 g试样,精确至0.01 g,置于50 mL试管中,加入10 mL水溶解。
用氨水溶液中和至中性,加入1 mL对氨基苯磺酸溶液,在沸水浴中加热5 min。
加入5 mL亚硝酸钠溶液,再置于水浴加热3 min 后,加入5 mL氢氧化钠溶液,试验溶液应立即呈红色。
A.3.2.2 旋光特性试验试验方法同A.5,试样水溶液应呈左旋特性。
A.4 L-苹果酸(C4H6O5)含量的测定A.4.1 方法提要以酚酞为指示剂,用氢氧化钠标准滴定溶液滴定试样水溶液,根据氢氧化钠标准滴定溶液的用量,计算以C4H6O5计的总酸含量为L-苹果酸含量。
A.4.2 试剂和材料A.4.2.1 无二氧化碳的水。
l-苹果酸质量标准
苹果酸是一种有机酸,也被称为苹果酸或2-羟基丁二酸。
它是
一种常见的食品添加剂,具有酸味和抗氧化性质,常用于食品和饮
料工业中。
关于苹果酸的质量标准,通常是根据不同国家或地区的
法规和标准来制定和执行的。
在美国,苹果酸的质量标准通常由美国食品药品监督管理局(FDA)监管。
根据FDA的规定,苹果酸必须符合《食品添加剂法典》(Food Chemicals Codex,FCC)中的规定。
这些规定包括苹果酸的
纯度、杂质含量、重金属含量等方面的要求。
另外,苹果酸作为食
品添加剂还必须符合《食品添加剂法》(Food Additives Amendment)中的相关规定,确保其在食品中的使用安全。
在欧盟,苹果酸的质量标准由欧洲食品安全局(EFSA)和欧盟
委员会制定和监管。
根据欧盟的规定,苹果酸必须符合《食品添加
剂法规》(Regulation on Food Additives)中的要求,包括纯度、残留溶剂限量、重金属残留限量等方面的规定。
同时,苹果酸作为
食品添加剂还必须通过EFSA的评估,确保其对人体健康安全。
除了以上提到的两个地区外,其他国家和地区也都有针对苹果
酸的质量标准,这些标准通常由当地的食品药品监管机构或标准化
组织制定和监管。
总的来说,苹果酸的质量标准通常涉及到其纯度、杂质含量、重金属残留、微生物限量等方面的要求,以确保其安全
有效地用于食品和饮料工业中。
d苹果酸质量标准
苹果酸是一种有机酸,常用于食品添加剂、食品酸味调节剂和饮料制造中。
以下
是苹果酸的质量标准:
1.外观:应为白色结晶性粉末或颗粒。
2.纯度:苹果酸的纯度应不低于99.0%。
3.水分:水分含量应不超过0.5%。
4.重金属:重金属(以铅计)的含量应不超过10毫克/千克。
5.铅:铅(Pb)的含量应不超过2毫克/千克。
6.砷:砷(As)的含量应不超过3毫克/千克。
7.汞:汞(Hg)的含量应不超过1毫克/千克。
8.微生物:总菌落数不得超过1000个/克。
以上是一般的苹果酸质量标准,不同国家和地区可能会略有差异,具体的标准应以当地法规为准。
在购买苹果酸时,应注意查看产品的质量标准,并选择符合要
求的产品。
苹果酸含量测定方法----酸碱滴定法
以娃哈哈果奶中苹果酸含量的测定为实训案例,介绍酸碱滴定法测定苹果酸含量的方法。
1. 测定原理
在酚酞指示剂存在的前提下,用已知浓度的碱标准溶液滴定试样中的水溶液,测出试样中的总酸度(以C4H6O5计)。
2.试剂
(1)0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液
(2)1%的酚酞指示剂
3.仪器
(1)锥形瓶,250mL;
(2)碱式滴定管
4. 操作步骤
称取试样1.5g,精确至0.0002g,加水溶解,移至2 50mL的容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。
用移液管取25mL置于锥形瓶中,加酚酞指示剂2滴,用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色,保持30s不退色,为滴定终点,同时做空白试验。
5. 结果计算
将实验结果记录在下表(表8)
表8:苹果酸含量测定结果记录表
相对平均偏差/%
计算公式:
w—苹果酸含量(以C4H6O5计),%
V1--试样消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,mL
V2--空白滴定消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,mL
c—氢氧化钠标准滴定溶液的浓度,mol/L
m—称取样品质量
0.06704—与1.00mL的1mol/L氢氧化钠标准溶液相当的以克表示的苹果酸质量。
25/250----从250mL溶液中取25mL溶液进行测定。
两种方法测定苹果汁中总酸的含量的比较发布时间:2021-03-04T10:51:45.677Z 来源:《科学与技术》2020年10月29期作者:张冰清戚培培董敏王林邰亮刘天左[导读] 目的探究两种方法测定苹果汁中总酸的区别。
方法用滴定法和酸度计法分别测定张冰清戚培培董敏王林邰亮刘天左宝应县产品质量综合检验检测中心江苏宝应 225800摘要:目的探究两种方法测定苹果汁中总酸的区别。
方法用滴定法和酸度计法分别测定,计算得出总酸含量。
结果滴定法和pH计法测得苹果汁总酸含量皆为5.27和2.82,相对偏差为0%。
结论两种方法测得苹果汁总酸含量一致。
关键词:苹果汁;总酸;酸碱滴定法;pH计法 Abstract:Object To explore the differences between two methods for the determination of total acid in apple juice.Methods Titrimetric method and pH meter were used to determine the content then calculated The total acid。
Results The total acid content of apple juice was 5.27 and 2.82 by titration and pH meter. The relative deviation is 0% Conclusion The two methods was consistent. KEY WORDS:Apple Juice;Total acid;Acid base titration;pH meter 1 引言苹果汁中含有人体所需的多种维生素、矿物质、糖、蛋白质、脂肪和氨基酸等成分。
有机酸对人体的主要作用是维持体内酸碱平衡,刺激胃肠道消化液分泌,有利于食物消化吸收。
472019.6红葡萄酒中苹果酸测定方法的比较赵永春,袁猛,袁晓林,车兆虹,田宝荣(中国长城葡萄酒有限公司,河北怀来 075400)Comparison of determination methods of malic acid in red wineZHAO Yongchun, YUAN Meng, YUAN Xiaolin, CHE Zhaohong, TIAN Baorong(China Great Wall Wine CO. LTD, Huailai 075400, China)摘 要:苹果酸含量是判断苹果酸-乳酸发酵(Malolactic Fermentation ,MLF )进程的重要指标,传统上常用纸层析法来测定,该方法不仅用时长,还有污染重的缺点。
本文对FOSS 仪和Y15两种仪器的检测结果进行评价,并与纸层析法进行了对比。
结果表明,FOSS 仪检验结果中,苹果酸含量在0.6 g/L 处时,层析结果出现显著改变;Y15检测结果在0.4 g/L 处,层析结果出现显著变化。
经过卡方检验证明,采用FOSS 仪和Y15检测苹果酸含量来判断MLF 进程,均比纸层析法用时短、效果好,能更好的满足生产需要。
关键词:苹果酸-乳酸发酵;苹果酸;FOSS 分析;Y15分析;纸层析法中图分类号:TS262.61 文献标志码:A DOI :10.13414/ki.zwpp.2019.06.008收稿日期:2019-07-03作者简介:赵永春,女,主要负责葡萄酒制品的检验等工作。
E-mail: zhaoyongchun1994@Abstract : Malic acid content is an important index to judge the process of malic acid-lactic acid fermentation (MLF).Traditionally, paper chromatography is often used to determine malic acid content, which is not only used for a long time, but also has the disadvantage of heavy pollution. Compared them with paper chromatography, the test results of FOSS instrument and Y15 instrument were evaluated. The results showed that when the content of malic acid was 0.6 g/L by FOSS, the chromatography results changed significantly; when the content of malic acid was 0.4 g/L by Y15, the chromatography results changed significantly. It was proved by chi-square test that using FOSS and Y15 to detect malic acid content to judge the process of MLF was shorter and more effective than the method of paper chromatography, and could better meet the needs of production.Key words : malolactic fermentation; malic acid; FOSS method; Y15 method; paper chromatography苹果酸-乳酸发酵(Malolactic Fermentation ,MLF )是在乳酸菌的作用下将苹果酸分解成乳酸和CO 2的过程。
葡萄酒中苹果酸的测定葡萄酒是一种古老的酿造饮料,它源于欧洲,现已成为全球享誉盛名的美酒之一。
在葡萄酒制作的过程中,苹果酸是一个重要的组成部分,它可以影响葡萄酒的酸度、口感和质量等特征。
因此,在葡萄酒生产和贸易中,苹果酸的测定是必不可少的。
葡萄酒中苹果酸的含量与品种、地理区域、气候、酿造技术等诸多因素有关。
因此,对于酿造商来说,测定葡萄酒中苹果酸含量的准确性和可靠性非常重要,它可以指导生产过程、调整配方、控制质量等,从而确保葡萄酒的口感和品质在适宜范围内。
目前,测定葡萄酒中苹果酸的方法主要有光度法、电化学法和色谱法等。
其中,光度法是最常用的方法之一。
这种方法使用紫外光谱仪或分光光度计对酸溶液的吸收特性进行测定,从而确定葡萄酒中苹果酸的浓度。
在测定过程中,首先将葡萄酒加入到硫酸中,使其达到酸度适宜的水平,然后加入铜盐、磷酸和异丙胜光,最后对于样品进行测定。
在电化学法中,常用的方法是电位滴定法。
这种方法可以利用滴定计对葡萄酒中的苹果酸进行测定,并且可以确定葡萄酒中苹果酸含量的电位滴定点。
此外,还可以通过电位差法和电导法等方法来测定葡萄酒中苹果酸的含量。
在色谱法中,气相色谱法和液相色谱法是最常用的方法之一。
这些方法可以通过对葡萄酒中苹果酸的色谱图进行分析,来确定其浓度。
这些方法的优点在于可以同时测定多种有机酸,而且敏感度高、准确性好,但相对而言要更加复杂和昂贵。
总之,测定葡萄酒中苹果酸的浓度是关键的步骤之一,因为它对葡萄酒的口感和品质都有重要的影响。
对于酿造商来说,应该选择最适合自己的方法来测定葡萄酒中苹果酸的浓度,在生产过程中保证葡萄酒的质量和口感。
同时,研究测定方法的可靠性、准确性和精度等关键因素,可以进一步提高测定的可靠性和准确性,为葡萄酒的开发和贸易提供更好的服务。
学生姓名:
学号:
专业:应用化学
年级班级:12级C班
课程名称:现代仪器分析实验实验时间:2015年4月24日
0.02mo l/L KH2PO4溶液
的配制:磷酸二氢钾(KH2PO4,M=136)
将磷酸二氢钾溶液用蒸馏水稀释到1000ml的容量瓶中,是其浓度变为0.02mol/L,PH=2.75(用盐酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4溶液。
计算:有公式m=cv*M=(0.02mol/L*1000ml/1000)*136
需要磷酸二氢钾的质量m=2.72g
苹果酸样品
的配制:将果实样品破碎除籽后研磨成粉状,之后准确称取1.000g样品,加入含0.008mol/L磷酸的蒸馏水25ml,在25摄氏度的水浴中震荡浸泡10min,然后在800r/min、4摄氏度的条件下离心20min,取上清液,用0.45pm的水系滤膜过滤后用与HPLC分析。
纯甲醇CH3OH(M=34)
2实验所得高效液相谱图:
高效液相图
特殊实验条件
泵B浓度95.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐)泵A浓度5.0%(纯甲醇)标准谱图
山西谱图山东谱图
甘肃谱图浓度
泵B浓度90.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐),泵A浓度10.0%(纯甲醇)高效液相图
特殊实验条件
标准图谱
山西谱图
山东图谱甘肃图谱
3苹果酸含量计算
实验1:实验2:
苹果产地:山西样品
称取量:
1.0903
g
容量瓶
体积:
25
ml
苹果
产地:
山西样品
称取量:
1.0903
g
容量瓶
体积:
25
ml
实验条件:流速为1ml/min,温度为 25℃, 用全波
分析, 采用0.02mol/L,PH=2.75(用盐
酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓
冲盐,并加以适量的纯甲醇,限制最大压
力17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min,PDA停止时间10min,
模式为二元高压梯度。
实
验
条
件:
流速为1ml/min,温度为 25℃, 用全波分
析, 采用0.02mol/L,PH=2.75(用盐酸调
节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐,
并加以适量的纯甲醇,限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min,PDA停止时间10min,
模式为二元高压梯度。
特殊实验条件:泵B浓度95.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐),
泵A浓度5.0%(纯甲醇)
特殊
实验
条件:
泵B浓度90.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐),
泵A浓度10.0%(纯甲醇)
苹果酸含量计算苹果酸含量计算
标准曲线:
由于峰往后移了,检测出来的含量为零。
所以用保留时间5.604,峰面积为69562计算得出浓度为13.96ug/ml。
用外标法计算。
函数为F(x)=4975.23*X+123.23
得X=13.96ug/ml
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=13.96*25*134/1.0903
=42892ug/g 标准曲线
正常出峰
在保留时间4.357,峰面积10835时测得苹果酸浓度为2.334ug/ml
用外标法计算
函数为F(X)=5123.99*X-1125.04
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=2.334*25*134/1.0903
=7171ug/g
实验1:实验2:
苹果产地:山东样品
称取量:
1.2084
g
容量瓶
体积:
25
ml
苹果
产地:
山东样品
称取量:
1.2084
g
容量瓶
体积:
25
ml
实验条件:流速为1ml/min,温度为 25℃, 用全波
分析, 采用0.02mol/L,PH=2.75(用盐
酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓
冲盐,并加以适量的纯甲醇,限制最大压
力17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min,PDA停止时间10min,
模式为二元高压梯度。
实
验
条
件:
流速为1ml/min,温度为 25℃, 用全波分
析, 采用0.02mol/L,PH=2.75(用盐酸调
节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐,
并加以适量的纯甲醇,限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min,PDA停止时间10min,
模式为二元高压梯度。
特殊实验条件:泵B浓度95.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐),
泵A浓度5.0%(纯甲醇)
特殊
实验
条件:
泵B浓度90.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐),
泵A浓度10.0%(纯甲醇)
苹果酸含量苹果酸含量
标准曲线:
由于峰往后移了,检测出来的含量为零。
所以用保留时间5.593,峰面积为20080计算得出浓度为4.011ug/ml。
用外标法计算。
函数为F(x)=4975.23*X+123.23
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=4.011*25*134/1.2084
=11120ug/g 标准曲线
正常出峰
在保留时间4.410,峰面积6672时测得苹果酸浓度为1.522ug/ml
用外标法计算
函数为F(X)=5123.99*X-1125.04
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=1.522*25*134/1.2084
=4219ug/g
实验1:实验2:
苹果产地:甘肃样品
称取量:
1.0123
g
容量瓶
体积:
25
ml
苹果
产地:
甘肃样品
称取量:
1.0123
g
容量瓶
体积:
25
ml
实验条件:流速为1ml/min,温度为 25℃, 用全波
分析, 采用0.02mol/L,PH=2.75(用盐酸
调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲
盐,并加以适量的纯甲醇,限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min,PDA停止时间10min,
模式为二元高压梯度。
实
验
条
件:
流速为1ml/min,温度为 25℃, 用全波分
析, 采用0.02mol/L,PH=2.75(用盐酸调
节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐,
并加以适量的纯甲醇,限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min,PDA停止时间10min,
模式为二元高压梯度。
特殊实验条件:泵B浓度95.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐),
泵A浓度5.0%(纯甲醇)
特殊
实验
条件:
泵B浓度90.0%(KH2PO4低浓度的缓冲盐),
泵A浓度10.0%(纯甲醇)
苹果酸含量苹果酸含量
标准曲线:
由于峰往后移了,检测出来的含量为零。
所以用保留时间5.599,峰面积为69577计算得出浓度为13.36ug/ml。
用外标法计算。
函数为F(x)=4975.23*X+123.23
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=13.36*25*134/1.0123
=44874ug/g 标准曲线
正常出峰
在保留时间4.410,峰面积5657时测得苹果酸浓度为1.324ug/ml
用外标法计算
函数为F(X)=5123.99*X-1125.04
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=1.324*25*134/1.0123
=4381ug/g。