三种骨修复材料植入兔股骨内组织病理学探究

•212«中国骨与关节损伤杂志2021年2月第36卷第2期Chin J Bone Joint Injury,Feb.2021,Vol.36.NO.2•临床论著•慢病毒介导hBMP-2转染BMSCs复合脱钙松质骨修复兔股骨缺损的实验研究陈佳滨打陈志达打肖莉莉食宋超-蔡役艺■,李强，，陶旋'1.解放军联勤保障部队第909医院（厦门大学附属东南医院）全军骨科中心，福建漳州363000；2.解放军联勤保障部队第909医院超声诊断科；3.桂林医学院创伤急救中心摘要：目的研究慢病毒介导人骨形态发生蛋白（Human bone morphogenetic protein,hBMP-2）转染骨髓间充质干细胞（Bone mesenchymal stem cells,BMSCs）植入脱钙松质骨后对兔股骨大段缺损的修复作用。

方法体外对兔BMSCs分离、培养、传代及表型鉴定后，采用慢病毒介导hBMP-2转染兔BMSCs,然后采用Western Blot法检测hBMP-2基因的表达情况。

兔股骨大段缺损模型制造成功后随机分为4组（n=6）,A组左侧股骨大段缺损区单纯行钢板螺钉内固定；B、C、D组左侧股骨大段缺损区行钢板螺钉内固定后分别植入脱钙松质骨.BMSCs复合脱钙松质骨、慢病毒介导hBMP-2转染BMSCs复合脱钙松质骨。

结果慢病毒介导hBMP2转染后的BMSCs细胞内hBMP-2基因能持续高效表达目的蛋白。

术后12周X线片显示，A、B、C组骨缺损修复未完成，D组左股骨缺损区骨痂开始塑形，骨缺损消失，髓腔再通，骨缺损修复完成：内固定取出后进行三维CT检查，A、B、C组左侧股骨缺损处再次发生骨折.D组并未再次发生骨折「结论慢病毒介导hBMP2转染后的兔BMSCs细胞内hBMP2目的基因能高效持续表达目的蛋白，能诱导兔BMSCs分化成骨从而促进兔股骨缺损的修复。

关键词：骨形态发生蛋白-2；慢病毒；骨髓间充质干细胞；兔股骨缺损；脱钙松质骨中图分类号:R-33文献标识码：B文章编号:1672-9935（2021）02-0212-03骨移植是目前治疗骨缺损的主要方法，包括自体骨移植和同种异体骨移植，自体骨移植来源有限且容易出现供区岀血、感染，同种异体骨来源较广但存在免疫排斥或感染等风险"7。

局解手术学杂志http ://2023,32（7）J REG ANAT OPER SURG 髓芯减压联合胶原基骨修复材料、VEGF 对股骨头坏死家兔骨密度及生物力学的影响吕亚军,李宜炯,赵振拴,张宇宸,王伟　（河北医科大学第一医院骨二科，河北 石家庄 050031）［摘要］　目的　探讨髓芯减压联合胶原基骨修复材料、血管内皮生长因子（VEGF ）对股骨头坏死（ONFH ）家兔模型的股骨头骨密度及生物力学的影响。

方法　30只家兔股骨头内注射无水乙醇建立ONFH 模型，随机分为健康对照组（A 组）、模型组（B 组）、髓芯减压联合自体松质骨组（C 组）、髓芯减压联合胶原基骨修复材料组（D 组）及髓芯减压联合胶原基骨修复材料和VEGF 组（E 组），每组6只。

治疗8周后，分别检测各组家兔股骨头的骨密度和生物力学参数（最大应力、弹性模量、刚度、最大载荷和能量吸收），HE 染色观察股骨头形态。

qRT -PCR 检测各组家兔的股骨头组织中骨保护素（OPG ）、血管内皮生长因子164（VEGF164）、血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）、核因子κB 受体活化因子配体（RANKL ）和核因子κB 受体活化因子（RANK ）的mRNA 水平。

结果　B 组的骨密度较A 组显著降低（P <0.05），E 组的骨密度显著高于B 组、C 组和D 组（P <0.05）。

与A 组相比，B 组的空骨陷窝比率显著增高（P <0.05）；与B 组相比，C 组、D 组和E 组的空骨陷窝比率均降低，以E 组最低（P <0.05）。

与A 组相比，B 组的股骨头生物力学参数显著降低（P <0.05）；与B 组相比，C 组、D 组和E 组的股骨头生物力学参数均升高，以E 组最高（P <0.05）。

与B 组、C 组和D 组相比，E 组股骨头组织中OPG 、VEGF164和VEGFR2的mRNA 水平均升高（P <0.05），RANKL 和RANK 的mRNA 水平均降低（P <0.05）。

·论著·利用P L A、P G A、P L G A三种支架再生兔关节软骨陈哲峰范卫民刘峰【摘要】目的观察兔关节软骨细胞在聚乳酸(P L A),聚羟基乙酸(P G A),以及两者的共聚物P L-G A三种三维支架上的贴附和生长情况,利用组织工程技术培养工程化关节软骨。

方法多聚赖氨酸包埋P L A,P G A,P L G A三维细胞支架。

分离培养兔关节软骨细胞,体外扩增后种植到三种支架中。

在体外培养软骨细胞一支架复合物,4周终止培养,进行H E、M a s s o n组织学染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色。

结果(1)体外培养发现,软骨细胞在P L G A支架材料内贴附生长良好,长期培养仍保持软骨细胞特性,其贴附生长能力,分泌Ⅱ型胶原能力较P G A,P L A支架组强。

(2)支架经过多聚赖氨酸包埋后,软骨细胞的贴附生长及分泌Ⅱ型胶原能力均较对照组好。

结论多聚赖氨酸处理的P L G A三维支架适合软骨细胞贴附生长和分泌Ⅱ型胶原,可作为软骨组织工程的细胞载体。

【关键词】软骨细胞;细胞支架;多聚赖氨酸E x p e r i m e n t a l s t u d y o n r e g e n e r a t i o n o f a r t i c u l a r c a r t i l a g e o n P L A,P G A,P L G A s c a f f o l d b y t i s s u e e n g i n e e r i n g8/5).’2K2+,,A<);2%M%+,L I UA2+,N B2E-@3M2+3*K J@3’*E27%=Q,A%@Q3<K K%1%-327/*Q E%3-1,)-+G%+,C27%=-1U+%O2@Q%3D,)-+G%+,210029,8/I)<【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o s t u d y t h e a b i l i t y o f p o l y l a c t i c a c i d(P L A),p o l y g l y c o l i c a c i d(P G A),P L G A i ns u p p o r t i n g t h e g r o w t ho f r a b b i t c h o n d r o c y t e s,a n d t o r e c o n s t r u c t a r t i c u l a r c a r t i l a g eb y t i s s u e e n g i n e e r i n g.M e t h o d s C o a t e dP L A,P G A,P L G Aw i t h p o l y-l-l y s i n e,f r e e c h o n d r o c y t e s i s o l a t e d f r o m r a b b i t a r t i c u l a r c a r-t i l a g ew e r e s e e d e do n t o t h r e ek i n d s o f s c a f f o l d s a f t e r e x p a n s i o nb y i nv i t r o c u l t u r e.T h e c o m p l e xo f c e l l-s c a f f o l dw a s t h e n c u l t u r e d i n v i v o.A f t e r4w e e k s o f c u l t u r e,t h e c o m p l e xw a s a s s e s s e d b y h i s t o l o g i c a l s t a i-n i n g o fH-E a n dM a s s o n.I m m u n o h i s t o c h e m i c a l a n a l y s i sw a s p e r f o r m e d t o e v a l u a t e c o l l a g e n t y p eⅡs y n t h e-s i s.R e s u l t s(1)A r t i c u l a r c h o n d r o c y t e s w e r e w e l l d i s t r i b u t e d a n d a d h e r e d t o P G A,P L G A s c a f f o l d s a n dm a i n-t a i n e d t h e i r c h a r a c t e r i s t i c s o f a r t i c u l a r c a r t i l a g e t h r o u g h o u t t h e c u l t u r e p e r i o d.(2)C h o n d r o c y t e sw e r ew e l ld i s t r i b u te d a n d a d h e r e d t o s c af f o l d s a f t e r c o a t e dw i t h p o l y-l-l y s i n e,a n d s e c r e t e dm o r e t y p eⅡc o l l ag e n i n c o n-t r a s t t o n o n-c o a t e d s c a f f o l d s.C o n c l u s i o n P L G A s c a f f o l d c o a t e dw i t h p o l y-l-l y s i n e c a n s u p p o r t t h e c h o n d r o-c y t e p r o l i f e r a t i o nw i t hm a i n t e n a n c e o f t h e i r p h e n o t y p e,a nd c a n be s u i t a b l e c a r r i e r sf o r t i s s u e e ng i n e e r i n g o fa r t i c u l a r c a r t i l a g e.【K e y w o r d s】C h o n d r o c y t e;S c a f f o l d;P o l y-l-l y s i n e[(%-+,Q9C27(,<9,9Q32005,31(8):599S601N]由于软骨自身修复能力有限,创伤等病因导致关节软骨缺损后,常继发成为骨关节炎。

骨髓间充质干细胞与壳聚糖复合修复关节软骨损伤陈路;夏先学;蒋科【摘要】背景：创伤等导致的关节软骨缺损是国内外骨科界面临的难题，组织工程学技术为软骨缺损的修复提供了新方法。

目的：探讨壳聚糖-骨髓间充质干细胞复合材料修复兔膝关节软骨缺损的可行性。

方法：将培养的兔骨髓间充质干细胞种植到壳聚糖支架上体外构建壳聚糖-骨髓间充质干细胞复合材料，移植到兔关节软骨缺损处为实验组，不予以特殊处理为对照组。

术后6，12周，大体观察以及甲苯胺蓝染色评定两组软骨组织修复情况。

结果与结论：术后6周，对照组仅有纤维组织增生，实验组关节软骨缺损处有软骨样组织生成。

术后12周，对照组软骨缺损边缘可观察到少量类透明软骨组织，实验组缺损区完全覆盖有光滑、透明软骨组织。

术后12周，对照组甲苯胺蓝染色较淡，有少量软骨组织生成，实验组甲苯胺蓝染色较明显，缺损完全被透明软骨组织所覆盖，软骨细胞较多。

结果表明兔骨髓间充质干细胞-壳聚糖支架复合材料能更好的引导软骨组织的生成，促进软骨缺损修复。

%BACKGROUND:Trauma easily leads to the emergence of articular cartilage defects, which is a difficult problem in the orthopedics field. Tissue engineering technology provides a new method for cartilage repair. OBJECTIVE:To explore the feasibility of combining chitosan and bone marrow mesenchymal stem cels to repair injured articular cartilage in rabbits. METHODS: Cultured rabbit bone marrow mesenchymal stem cels were seeded onto chitosan scaffold, and then the composite material was implanted into the defect as experimental group. Rabbits with no treatment served as control group. Gross observation and toluidine blue staining were carried out at 6 and 12 weeks after operation. RESULTS ANDCONCLUSION:At 6 weeks after operation, the control group had only fibrous tissue hyperplasia, and in the experimental group, cartilage-like tissues were generated at the defect site. At 12 weeks after operation, a smal amount of hyaline cartilage-like tissues were observed in the control group, and the defects in the experimental group were covered with smooth and hyaline cartilage tissues. After 12 weeks, the toluidine blue staining was light in the control group with a smal amount of cartilage tissues; in the experimental group, the toluidine blue staining was remarkable, and the defects were completely covered with hyaline cartilage tissues, and cartilage cels were increased in number. The findings indicate that chitosan-bone marrow mesenchymal stem cels composite material is better to induce cartilage tissue formation and promote cartilage defect repair.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(000)045【总页数】5页(P7254-7258)【关键词】干细胞;骨髓干细胞;软骨缺损;关节软骨;软骨修复;组织工程学;壳聚糖;细胞支架;骨髓间充质干细胞;动物模型【作者】陈路;夏先学;蒋科【作者单位】川北医学院附属医院骨科，四川省南充市 637000;川北医学院附属医院骨科，四川省南充市 637000;川北医学院附属医院骨科，四川省南充市637000【正文语种】中文【中图分类】R394.2文章亮点：1关节软骨缺损是一种常见的病变类型，临床治疗可选择不同的方法，但大多无法获得理想的效果。

纳米晶胶原基骨和骨髓间充质干细胞复合修复兔股骨头坏死缺损的研究孙伟1　李子荣1　史振才1　张念非1　李艳2　崔福斋2 【摘　要】 目的　探讨采用纳米晶胶原基骨(nano-hydro xy apatite collagen,nHA C)和骨髓间充质干细胞(marr ow mesenchym al stem cells,M SCs)复合材料修复兔股骨头坏死骨缺损的可行性。

　方法　2004年6月～10月,取45只成年新西兰大白兔制成双侧股骨头内骨缺损模型,随机分为3组进行修复,A组:骨缺损不填充任何材料;B组:骨缺损填充单纯nHAC;C组:骨缺损填充nHA C与M SCs的复合材料。

术后3组分别于4、8和12周对股骨头行影像学和组织学观察。

　结果　影像学和组织学显示C组复合材料有良好的诱导成骨能力,术后4周即有明显的成骨反应和新骨形成,12周基本修复股骨头的骨缺损区;B组材料修复能力较C组差,但B组和C组均优于A组。

B组和C组对nHA C无明显异物反应。

　结论　nHAC有较强的传导成骨作用,是修复兔股骨头骨缺损的良好移植材料;复合M SCs后能促进骨缺损的修复,对股骨头坏死的治疗有较大价值。

【关键词】 股骨头 坏死 纳米晶胶原基骨 骨髓间充质干细胞 复合材料 修复中图分类号:R681.8　R318 文献标识码:AEFFECT OF NANO-HYDROXYAPATITE C OLLAGEN BONE AND MARROW MESENCHYMAL STEM CELL ON TREATMENT OF RABBIT OSTEONECTOSIS OF THE FEMORAL HEAD DEFECT/SU N W ei,L I Zir ong,S H I Zhencai,et al.Center f or Osteonecr osis and J oint P r eser ving&Reconstruction,China-J ap an Fr iend ship H osp ital, Beij ing,100029,P.R.ChinaCorr esp onding author:L I Zir ong,E-mail:L ZR96@【Abstract】 Obj ective　T o eva luate the effect o f nano-hydro x yapatit e colla gen(nHA C)bone and m arr ow mesenchy mal stem cells(M SCs)o n t he t reatment o f r abbit osteo necr osis o f t he femo ra l head(ON F H)defect.Methods Fr om June to O ctober2004,animal mo dels of O NF H defect w er e est ablished in45N ew Z ealand ra bbit s.T hey wer e divided into3g ro ups r ando mly:In g ro up A,as the contr ol g ro up,defect w as not filled w ith any implant s;In g ro up B w ith nHA C;I n g ro up C with nHA C+M SC.I maging and hist olog ical o bser va tio n w er e m ade4,8,12w eeks after oper atio n.Results　g ro up C had a better o steog enesis ability t han g ro up B and gr o up A.gr oup B had a better osteo genesis a bility than g r oup A.O bv io us new bones and o steog enesis w ere observ ed in gr o up C4w eeks after oper atio n.T he defect areas in g ro up C w ere almo st r epair ed12w eeks after oper atio n.Conclusion　nHA C has a better effect of osteo co nductio n and it is a superior mater ial fo r repair ing bo ne defect of ON FH and o f g reat value in tr eating ON F H when compounded w ith M SCs.【Key words】 F emo ral head Osteo necr osis N ano-hy dr ox y apat ite collagen M ar ro w mesenchymal stem cells Compound mat erial R epairFoundation items:Capital M edicine Development Research Fund(2002-1007);K ey Clinical R esear ch F und of M inist ry of Chinese Public Health(2004-2006) 股骨头坏死(o steonecrosis of the fem oral head, ONFH)为进展性和致残性疾病,常累及中青年,且多为双侧发病,保存自身股骨头的治疗是临床的一大难题。

利用PLA、PGA、PLGA三种支架再生兔关节软骨陈哲峰;范卫民;刘峰【期刊名称】《江苏医药》【年(卷),期】2005(31)8【摘要】目的观察兔关节软骨细胞在聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸(PGA),以及两者的共聚物PLGA三种三维支架上的贴附和生长情况,利用组织工程技术培养工程化关节软骨.方法多聚赖氨酸包埋PLA,PGA,PLGA三维细胞支架.分离培养兔关节软骨细胞,体外扩增后种植到三种支架中.在体外培养软骨细胞一支架复合物,4周终止培养,进行HE、Masson组织学染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色.结果 (1)体外培养发现,软骨细胞在PLGA支架材料内贴附生长良好,长期培养仍保持软骨细胞特性,其贴附生长能力,分泌Ⅱ型胶原能力较PGA,PLA支架组强.(2)支架经过多聚赖氨酸包埋后,软骨细胞的贴附生长及分泌Ⅱ型胶原能力均较对照组好.结论多聚赖氨酸处理的PLGA三维支架适合软骨细胞贴附生长和分泌Ⅱ型胶原,可作为软骨组织工程的细胞载体.【总页数】3页(P599-601)【作者】陈哲峰;范卫民;刘峰【作者单位】210029,南京医科大学第一附属医院骨科;210029,南京医科大学第一附属医院骨科;210029,南京医科大学第一附属医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.骨髓基质干细胞复合PLGA支架修复兔关节软骨缺损 [J], 刘方红;张秋芳2.PLGA-Ⅱ型胶原复合rhBMP-2/bFGF修复兔膝关节软骨的缺损 [J], 束志勇;查振刚;汪炬;黄春华;刘宁;吴昊;王双利3.PLGA复合Ⅱ型胶原和生长因子诱导组织工程软骨修复兔关节软骨缺损 [J], 熊高鑫;李劼若;查振刚;谭文成;吴昊;林宏生;夏吉生;黄馨霈;屠美;张嘉晴4.载淫羊藿素多孔PLGA/TCP联合微骨折术修复兔膝关节软骨缺损的初步观察 [J], 李伟;王战伟;伍晓;于斐;张文涛;江长青5.利用PLGA细胞支架再生人关节软骨的实验研究 [J], 王卫国;娄思权;郑多;夏家辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。