病毒感染微生物学检查方法浅谈
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病毒感染的实验诊断病毒感染的实验诊断(一)● 考点病毒的生物学性状病毒的实验室检查方法常见病毒的感染 [讲义编号NODE70103300270100000101:针对本讲义提问]【内容讲解】第一节概述一类非细胞型微生物,个体极小,可通过细菌滤器,需用电子显微镜观察。
仅含一种核酸作为遗传物质,外被蛋白质衣壳或还有包膜。
病毒只能在活细胞内寄生,以复制的方式进行增殖。
在临床微生物感染中,近75%的传染病是由病毒引起的。
[讲义编号NODE70103300270100000102:针对本讲义提问]一、病毒的基本性状(一)形态结构 1.大小和形状:大小:测量单位用纳米表示,一般在20-300nm之间。
形态大致可分为:球形或近似球形、杆状、弹形、砖形、蝌蚪形等。
[讲义编号NODE70103300270100000103:针对本讲义提问]2.结构[讲义编号NODE70103300270100000104:针对本讲义提问](二)病毒的增殖病毒必须依赖宿主细胞,以特殊的自我复制方式进行增殖。
病毒的复制周期:吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装与成熟、释放6个阶段。
[讲义编号NODE70103300270100000105:针对本讲义提问]异常增殖:顿挫感染:病毒进入细胞后的环境不利于它的复制,不能合成本身的成分或不能组装和释放有感染性的病毒颗粒。
缺陷病毒:由于病毒基因组不完整或基因位点改变而不能进行正常增殖的病毒。
[讲义编号NODE70103300270100000106:针对本讲义提问]干扰现象:当两种不同的病毒或两株性质不同的同种病毒,同时或先后感染同一细胞或机体时,可发生一种病毒抑制另一种(三)噬菌体以细菌、真菌等为宿主,能引起细菌等裂解的病毒。
噬菌体特异性识别细菌表面受体,可用于进行细菌的鉴定与分型。
噬菌体感染细菌后产生两种后果:溶菌周期和溶源性周期。
[讲义编号NODE70103300270100000107:针对本讲义提问](四)非寻常病毒比病毒更小更简单的致病因子,又称为亚病毒因子,包括类病毒、卫星病毒和朊粒等。
浅谈微生物检验质量控制为了保证微生物检验结果的准确性和可靠性,微生物实验室必须建立质量控制体系,充分考虑到影响检验结果的因素并加以控制,可提高微生物检验工作的质量。
我们就如何为卫生防疫工作提供可靠的依据进行了探讨,主要有以下几点。
1 样品采集和交接质量管理样品由业务科室或业务科室会同检验人员采取。
采样时必须无菌操作,避免杂菌污染。
盛装检样的容器避免倒置或破碎,确保安全。
盛装检样的容器必须有标签,注明采样时间、采样来源及编号。
采取的样品应在规定的时间内(一般不超过3~4h)送到试验室,有的样品如病毒标本等要使用运送培养基或在特殊环境(冰瓶或其它冷藏器具)中运送。
运送血液应当避免剧烈震荡,防止溶血。
需要血清的检样,采血后使其在试管中凝固运送,并及时分离血清。
送往实验室的样品,必须附有样品检验单和样品交接单。
接受样品时,检验者必须核对无误。
由接收者在样品交接单上签字,同时进行检样登记。
瓶装启开或固体形状不完全、数量不足者都必须拒收[3]。
2 实验操作人员的作用微生物实验室的质量可以通过正确的操作来体现,例如,革兰氏染色,可以通过对标准质控菌株的染色来反映操作和试剂的质量,这是有形的、看得见的,然而,质量保证更依赖工作人员的认知能力。
一个受过充分培训的、能够严谨地分析实验结果的工作人员,不是只能忠实地记录实验数据,而是可以实施更加严格的标准。
在微生物检验中会遇到一些不常见结果或一些散在地发生的错误,例如,试验中发现的少见菌、从未见过的药敏表型、污染率的增加等,往往通过一些质控方法难以检查出来,但具有质量意识的微生物技术人员能对这些现象质疑,及时纠正,保证结果的准确可靠。
3 实验室内消毒灭菌质量控制无菌室应保证洁净、防潮、按时消毒,所用紫外线灯管应检验其性能,使用前必须开紫外线灯消毒45min以上。
消毒后2h内应无菌,每季度应进行一次“紫外线对空气消毒效果测定”。
如灯管发黑,超过使用期限,及时更换紫外线灯管。
微生物感染的病原学检查法文/ 张力平微生物感染的病原学检查可查明标本中的病原微生物并对其进行种属鉴定,必要时进行药物敏感试验和毒力检查等,从而协助医生对感染性疾病进行病因学诊断、指导合理用药或观察治疗效果。
微生物感染的病原学实验室诊断方法大致包括:①光学显微镜对标本或组织中的病原体的形态学检查;②病原体的分离培养和鉴定;③用免疫学技术对病原体抗原或相应抗体的检测;④用分子生物学方法对病原体特异性基因的检测。
标本的采集与送检微生物学检查的第一步,方法的正确与否直接影响病原体的检出率,因此应注意下述原则:1.采集标本时应无菌操作,尽量避免污染;盛放标本的容器和培养基应预先进行无菌处理并贴好标签。
2.应选择感染部位或病变明显的部位采集标本,避免周围组织、器官或分泌物中的杂菌污染。
例如感染性伤口,应从其深部而不是从表面采集标本;若采集龈沟液检查口腔厌氧菌,应将无菌滤纸条深入龈沟中,停留数秒后取出;怀疑细菌性痢疾时,应采集有粘液或脓血的粪便;采集病毒的标本应尽量含有感染的细胞。
3.根据病原体在感染性疾病的不同时期的体内分布和排出部位选择在最佳时间采集适宜标本。
例如,可疑伤寒的病人,在病程的1~2周内取血液,2~3周时则取粪便或尿液送检;怀疑流行性脑膜炎的病人,应选取脑脊液、血液或皮肤上的出血淤斑进行检测;如果进行病毒培养或其抗原检测,一般应取急性期标本,标本采集越早,病毒的阳性检出率越高。
4.对于怀疑细菌感染的标本,尽量在抗生素使用前采集,特别是对抗生素敏感的病原体,如乙型溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌。
病毒对抗生素不敏感,故无此限制。
而且用于病毒分离培养的标本应加入抗生素,以避免在病毒培养过程中的细菌污染。
5.检查病原体的特异性抗体IgG时,应采集急性期和恢复期双份血清,只有当恢复期血清抗体效价比急性期的效价明显升高达4倍或以上时,方有诊断价值。
检测血清特异性抗体的标本应保存在-20℃。
6.标本采集后应及时送检。
常见感染病原体及其检测方法:了解不同微生物的检测方式一、引言感染病原体是指能够进入人体并引发感染的微生物,包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。
这些微生物能够侵入人体,繁殖并对机体造成损害,引发各种感染性疾病。
为了及时、准确地诊断和治疗感染疾病,科学家们开发了一系列的检测方法,用以鉴定不同微生物的存在和病原性。
本文将带您了解常见感染病原体以及它们的检测方法,帮助我们更好地认识和抵抗这些微生物。
二、细菌2.1 培养法培养法是一种传统且常用的细菌检测方法。
它通过将患者样本(如血液、尿液或伤口渗出液等)接种到培养基上,利用培养基提供的适宜条件使细菌繁殖,从而使其形成可见的菌落。
通过观察和分析这些菌落的形态、染色特性和生理生化反应等,可以初步鉴定细菌属种。
2.2 免疫学方法免疫学方法主要利用抗原与抗体之间的特异性反应来检测细菌。
其中,酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫荧光技术是常用的检测方法。
ELISA利用特定的抗体与细菌或其分泌的抗原反应,通过测定产生的光学信号来定量检测细菌的存在。
免疫荧光技术则是在标本中加入荧光标记的抗体,通过观察标本中的荧光信号来判断是否存在细菌感染。
2.3 分子生物学方法分子生物学方法,如PCR和实时荧光定量PCR等,通过检测微生物的核酸特异性序列来定量和鉴定细菌。
这些方法利用特异引物与细菌基因组DNA或mRNA 发生特异性反应,扩增和检测目的序列。
由于其高灵敏度和高特异性,分子生物学方法在实验室中得到广泛应用。
2.4 质谱法质谱法是一种高灵敏度的检测方法,可以对微生物样本进行直接分析。
常用的质谱法包括质谱图谱法(MS)和质谱成像法(MSI)。
MS可以通过检测微生物代谢产物、蛋白质或特定化合物来鉴定微生物。
而MSI则是通过将样本直接贴附在载玻片上,利用激光扫描样本表面进行检测,实现对微生物的快速定性和定量分析。
三、病毒3.1 传统病毒培养法传统病毒培养法是一种检测和鉴定病毒的常用方法。
试述病毒微生物学诊断的方法与流程咱来唠唠病毒微生物学诊断这事儿哈。
一、标本采集。
这可是很关键的一步呢。
你得根据怀疑的病毒类型和感染部位去采集标本。
比如说吧,如果怀疑是呼吸道病毒感染,那像鼻咽拭子就很重要啦。
要是肠道病毒,那便便标本就少不了。
采集的时候一定要注意哦,得按照正确的方法来,不然标本不合格,后面的诊断就都白搭了。
就像你做饭,食材要是没选好,做出来的菜肯定也不好吃呀。
二、标本运送。
采好标本了就得赶紧送实验室。
这个过程可不能慢悠悠的,因为有些病毒很脆弱,在外界环境里待久了就可能死掉或者发生变化。
就像你送个小宝贝去某个地方,得小心翼翼还得快快的,不能让小宝贝在路上出啥岔子。
三、病毒的分离培养。
实验室里呢,有时候会进行病毒的分离培养。
这就像是给病毒盖个小房子,让它们在里面生长繁殖。
不过这个过程可不容易,不同的病毒需要不同的培养条件。
有些病毒需要特定的细胞来培养,就像不同的小动物要住在适合自己的小窝里一样。
而且这个培养的时间有时候还挺长的,要耐心地等着病毒慢慢长大。
四、病毒的形态学检查。
这一步就有点像给病毒拍个照片,看看它长啥样。
可以用电子显微镜来观察病毒的形态。
从显微镜里看到那些奇奇怪怪的病毒形状,就像发现了外星小生物一样有趣呢。
通过病毒的形态,能初步判断是哪种病毒哦。
五、血清学诊断。
这是看我们身体里的免疫反应啦。
检测血液里的抗体,如果抗体水平很高,那就说明我们的身体可能正在和病毒打仗呢。
就像身体里的小战士们在和病毒这个小怪兽战斗,然后留下了战斗的痕迹,我们就是通过检测这些痕迹来判断是不是感染了病毒。
六、核酸检测。
现在这个可流行啦。
检测病毒的核酸,就像找到病毒的小密码一样。
这种方法又快又灵敏。
如果在标本里发现了病毒的核酸,那基本上就能确定有病毒存在啦。
总之呢,病毒微生物学诊断是个很复杂但是又很有趣的过程。
每一步都很重要,就像一个小链条上的一个个小环,缺了哪一个都不行呢。