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硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查记录
硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查记录 R-
培养基批号生产厂家检验起止日期规格检验依据：《中国药典》（20xx 年版二部附录“无菌检查法”）。
2.
3.将各菌株的上述培养物以0.9%无菌氯化钠溶液倍比稀释后,取不同稀释级的菌悬液1ml 注皿，再加入营养琼脂培养基,在30~35℃倒置培养48小时后,计数。
注: 1ml含菌数小于100cfu的稀释级即为检验用稀释级.
4.制备培养基:
称取供试用培养基g，加入纯化水ml，加热搅拌至完全溶解。
分装至9支具塞试管中，每管12ml。
在℃湿热灭菌min。
5.分别向各支培养基中接种各菌株检验用稀释级的菌悬液（小于100cfu/ml）1ml，在30~35℃培养3天、观察：
[合格标准：空白管培养基无菌生长，加菌的培养基管均生长良好。
]
结论：
本批硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查。
检验人复核人。
培养基的灵敏度检查
一、目的：建立培养基灵敏度检查的操作规程，保证无菌检查结果的准确性、可靠性。
二、适用范围：适用于培养基灵敏度检查。
三、职责：质量检验员对本标准的实施负责。
四、正文：
1 实验设备及用具：
高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、注射器、针头、注射器盒、试管、试管架、搪瓷托盘、时钟、75%酒精棉球、无菌服。
2培养基：需气菌、厌气菌培养基（如：流体硫乙醇酸盐培养基）、真菌培养基。
3测试用菌种
藤黄微球菌[CMCC（B）28 001]
生孢梭菌[CMCC（B）64 941]
白色念珠菌[CMCC（F）98 001]
4操作：
取藤黄微球菌、生孢梭菌的需气菌、厌气菌培养基新鲜培养物，白色念珠菌的真菌培养基的新鲜培养物 1ml，用 0.9%无菌氯化钠溶液作 10 倍梯度稀释，制成 1ml 中含 10-100 个菌并计数。
4.2 将藤黄微球菌、生孢梭菌的上述稀释菌液各 1ml 分别接种至每管装量为 9ml 的需气菌、厌气菌培养基 3 管，白色念珠菌的上述稀释菌液 1ml，接种至每管装量为 9ml 的真菌培养基 3 管。
以未接种的培养基作对照，按规定的温度培养5天并逐日记录结果。
5 结果判定：以每株菌接种后培养基不得少于 2 管呈现生长，即该培养基
的灵敏度检查符合要求。
培养基灵敏度检查SOP1．目的规范无菌检查用培养基灵敏度检查，确保无菌试验用培养基的灵敏度，防止无菌试验结果出现假阳性现象。
2．范围本标准规程适用于本公司无菌检查用培养基的灵敏度检查，每批无菌试验用干粉培养基均做灵敏度检查。
3．定义3.1.菌种：检查所用菌株传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），以保证试验菌株的生物学特性。
3.2.金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26003〕：用于无菌检查培养基灵敏度检查及微生物限度培养基的适用性检查；3.3.铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) 〔CMCC(B) 10104〕：用于无菌检查培养基灵敏度检查；3.4.枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）〔CMCC（B）63501〕：用于无菌检查培养基灵敏度检查及微生物限度培养基的适用性检查；3.5.白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC(F) 98001〕：用于无菌检查培养基灵敏度检查及微生物限度培养基的适用性检查；3.6.生孢梭菌(Clostridium sporogenes)〔CMCC(B) 64941：用于无菌检查培养基灵敏度检查；3.7.黑曲霉(Aspergillus niger) 〔CMCC(F) 98003〕：用于无菌实验培养基灵敏度检查及微生物限度培养基的适用性检查；4．职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行；4.2.QA、QC组长质量管理部经理负责本规程的审核；4.3.质量总监负责批准本规程；4.4.QA负责本规程执行的监督。
5．引用标准《中华人民共和国药典》2020年版三部6．材料6.1.房屋、设备、试验用具6.1.1.房屋：阳性实验室。
6.1.2.设备：100级洁净工作台，30～35℃培养箱，20～25℃培养箱，灭菌器。
6.1.3.试验用具：隔离服、洁净工作服、工作鞋、口罩、帽子、10ml刻度吸管、1ml刻度吸管、毛巾、吸耳球、记号笔、中试管架、酒精灯、镊子、酒精棉、托盘、电子天平、药勺、量筒、6.2.培养基：营养琼脂斜面培养基（中管）、硫乙醇酸盐流体培养基（中管）、改良马丁琼脂斜面培养基（中管）。
YY-T 0575-2021 硫乙醇酸盐流体培养基1、ICS11.700C44yy中华人民共和国医药行业标准YY/T0575-2021硫乙醇酸盐流体培育基Fluidthioglycollatemedium2021-12-07发布2021-12-01实施国家食品药品监督管理局发布nYY/T0575-2021前言本标准全部技术条款为强制性。
本标准是在参考《中华人民共和国药典》(2021年版)基础上，结合中国国情及实际状况和要求而制定。
本标准附录A为规范性附录。
本标准由国家食品药品监督管理局提出。
本标准由中国药品生物制品检定所归口。
本标准由中国药品生物制品检定所负责起草。
本标准主要起草人:高尚先、孙彬裕、曲守方、康国华、刘艳。
nYY/T0575-2021硫乙醇酸盐流体培育基范围本标准规定了硫乙醇酸盐流体培育基的质量要求、检验方法2、、使用说明、标志、标签以及包装、运输、贮存。
本标准适用于需氧菌、厌氧菌培育的硫乙醇酸盐流体培育基。
2规范性引用文件以下文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后全部的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓舞依据本标准达成协议的各方讨论是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T191包装储运图示标志中华人民共和国药典(2021年版)IIF1070-200。
定量包装商品净含量计量检验规则术语和定义以下术语和定义适用于本标准。
3.1培育荃culturemedium由人工方法协作而成的，专供微生物培育、分别、鉴别、讨论和保存使用的混合养分物制品。
3.2菌落形成单位colonyform3、ingunit,cfu菌落形成单位是指在活菌培育计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培育基上生长繁殖所形成的集落，以其表达活菌的数量培育墓配方单位为:g/L,胰酪蛋白陈15.0g酵母浸出粉 5.0g葡萄糖 5.0g抓化钠与5gL-胧氨酸(或半胧氨酸盐酸盐)0.5g硫乙醇酸钠0.5g琼脂0.65g^-0.75g刃天青(Resazurin)0.001g质t要求5.1理化要求5.1.1外观应为均一的类白色至浅黄色粉末。
无菌方法验证品名：规格：批号：检查时间：1.培养基：硫乙醇酸盐流体培养基，批号：由：提供；营养肉汤，批号：由：提供；改良马丁培养基批号：由：提供。
2.验证试验用菌种：(1) 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)[CMCC(B) 26003]；(2) 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B) 63501]；(3) 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B) 44102]；(4) 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [CMCC(B) 10104](5) 生孢梭菌(Clostridium sporogenes)[CMCC(B) 64941]；(6) 白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F) 98001]；(7) 黑曲霉菌(Aspergillus niger) [CMCC(F)98003]。
3. 仪器和滤器：HTY-2000A集菌仪，STV3封闭式/开放式无菌检查薄膜过滤器，浙江宁海白石药检仪器厂。
4.方法：中国药典2005版二部附录。
5.操作方法：5.1 菌液制备：取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤培养基中, 生孢梭菌的新鲜培养物少许接种至硫乙醇酸盐流体培养基中, ℃培养小时。
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、生孢梭菌肉汤培养物，加生理盐水，10倍递增稀释至约10-5~10-8之间，其中金黄色葡萄球菌取稀释级，铜绿假单孢菌取稀释级，大肠埃希菌取稀释级，枯草芽孢杆菌取稀释级，生孢梭菌取稀释级。
白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基中, ℃培养小时。
再取白色念珠菌真菌斜面培养物，加入生理盐水洗下孢子，吸出转移至空试管作为原液，取加生理盐水，10倍递增稀释至，取加生理盐水，混匀备用。
将黑曲霉菌斜面的新鲜培养物接种至改良马丁培养基上，℃培养，使大量的孢子成熟。
□中国药品生物制品检定所□其他：
检验依据：版
仪器名称：生化培养箱型号：编号：
仪器名称: 超净工作台型号：编号:
二、检验方法
1.培养基的无菌性检查
每批培养基随机取不少于5支，培养14天, 逐日观察结果。
2.培养基的灵敏度检查
2.培养基的灵敏度检查
□硫乙醇酸盐流体培养基：取每管装量为12的硫乙醇酸盐流体培养基7支，分别接种小于100的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照。
于30～35℃培养3天，逐日观察结果。
□胰酪大豆胨液体培养基：取每管装量为9的胰酪大豆胨液体培养基7支，分别接种小于100的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲菌各2支，另1支不接种作为空白对照。
于20～25℃培养5天，逐日观察结果。
三、检验结果
□培养基的无菌性检查
检验者：日期：复核者：日期：
□培养基的灵敏度检查
注：“+”为生长，“-”为不生长，“”为生长良好
检验者：日期：复核者：日期：
四、结论
本品照《无菌检查用培养基适用性检查操作规程》（00434）检查，结果：
□符合规定□不符合规定。
编码：无菌检验方法验证报告药业有限公司1. 概述：无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。
本公司的无菌检查只是针对于灭菌注射用水的无菌检查。
灭菌注射用水灭菌工艺采用121℃30min过度杀菌法，按照2005年版《中国药典》的规定，注射剂的无菌检查应采用薄膜过滤法。
制定的《无菌检查法标准操作规程》（SOP-B）应经过验证后，才能批准使用。
2.验证目的：验证所采用的方法和条件是否适合于供试品的无菌检查。
即确认供试品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性以被充分消除到可以忽略不计。
3. 验证范围：适用于灭菌注射用水无菌检查法的验证。
4. 验证人员及职责质量部负责该验证方案的起草及组织实施；验证小组负责验证方案的审批；质量部参与验证的实施及监督。
5.文件准备和培训检查验证所需的各类文件资料，应齐全；相关的文件草案是否已具备。
6.验证条件.无菌检查室空气净化系统已经过验证并合格，仪器安装完成；仪表量器经过校验合格，且在有效期内。
. 供试品：3批，批号：批号：批号：. 培养基及试剂：.1.试剂试液：氯化钠:临用前配成0.9%浓度的溶液，配制记录见附件1。
冲洗液：0.1%蛋白胨水溶液，配制记录见附件2。
.2.培养基硫乙醇酸盐流体培养基生产厂家：批号：改良马丁培养基生产厂家：批号：营养肉汤培养基生产厂家：批号：改良马丁琼脂培养基生产厂家：批号：蛋白胨生产厂家：批号：培养基配制记录见附件3。
. 验证用菌株：金黄色葡萄球菌【CMCC（B）26003】铜绿假单胞菌【CMCC（B）10104】枯草芽孢杆菌【CMCC（B）63501】生孢梭菌【CMCC（B）64941】白色念珠菌【CMCC（F）98001】黑曲霉【CMCC（F）98003】购自：各验证用菌种传代记录见附件4。
.无菌检验仪器及相关设备：压力蒸汽灭菌器型号：生产厂家：校验日期：有效期：生化培养箱（细菌培养）型号：生产厂家：校验日期：有效期：生化培养箱（霉菌培养）型号：生产厂家：校验日期：有效期：7.验证内容：7.1. 培养基无菌性检查：每批培养基随机取不少于5支，培养14天，应无菌生长。
培养基灵敏度检查记录摘要该文档描述了在实验室中对于培养基的灵敏度检查过程的记录，其中包括了实验的目的、方法、结果和。
该检查可以帮助实验室监测和评估培养基的质量，以便提高实验结果的准确性和可靠性。
目的培养基灵敏度检查的目的在于确定你所使用的培养基的效力和纯度，以便将其用于实验。
检查可以帮助我们确定培养基中是否存在污染物和其他的不良物质。
此外，该检查还可以提供有关细菌对不同抗菌药物的反应的重要信息。
方法实验室中使用了标准的方法来进行培养基灵敏度检查。
在本次实验中，我们使用了以下设备和试剂：•培养基测试板•细菌株（常见的细菌株）•抗生素（几种常见的抗生素）实验分为以下几个步骤：1.准备培养基测试板：在培养基测试板中制造一个0.5麦芽糖浓度的菌液2.加入细菌株：加入细菌株到培养基测试板上，以包含菌液3.添加抗生素：将各种抗生素添加到测试板上，量为MIC（最小抑菌浓度）4.实验过程的记录：记录在培养基测试板上出现的菌落数量并测定其直径结果实验室的培养基灵敏度检查显示我们的培养基十分纯净，并且没有污染，同时抗生素的剂量适中。
检测到的微生物株菌落数量为零，代表我们培养基中不存在细菌或细胞污染。
不同种类的抗生素对于不同的细菌株的反应不同，在检测的过程中，我们发现一些菌株对于某些抗生素具有更高的抵抗力，而对于其他抗生素则没有。
本次实验中，我们成功检测了培养基的纯度，并且也测试了抗生素在不同细菌株中的反应。
这种测试有助于实验室在保证实验准确性以及细胞健康的同时，还可以避免不必要的费用开支。
为了更好地保证培养基的品质，我们应该定期地对培养基进行检查，并且采用多种数据来进行评估。
这样，可以更好地保证实验结果的重现性和可靠性，并且避免浪费时间和资源。
无菌培养基灵敏度验证××公司无菌检查用培养基适用性验证资料文件编号：YZ-GC -0041.验证目的：为证明硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基适合于细菌，真菌的无菌检查，特制定本验证方案。
2.参照标准：2005版中国药典二部附录XI H无菌检查法。
3.验证项目：硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基灵敏度检查。
4.验证小组4.试验材料：4.1. 被验证培养基：品名：硫乙醇酸盐流体培养基规格：批号：生产厂家：品名：营养肉汤培养基规格：批号：生产厂家：品名：改良马丁培养基规格：批号：生产厂家：4.2. 仪器设备：4.2.1. YM50立式压力蒸汽灭菌器4.2.2. SW-CJ-2F双人净化工作台4.2.3. JC101型电热鼓风干燥箱4.2.4.JY-B型生化培养箱(23～28℃)4.2.5.PHX-DHS-40x50恒温培养箱(35～37℃)4.3. 稀释剂：0.9%无菌氯化钠溶液4.4. 验证用培养基：4.5. 验证用菌株：5.菌液制备：5.1.取经培养18~24小时的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤新鲜培养物1ml加入到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至小于100cfu∕ml的菌悬液备用。
5.2.取经培养24~48小时的白色念珠菌的改良马丁培养物1ml加入到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至小于100cfu∕ml的菌悬液备用。
6.菌液计数：（每种菌液接种2个平皿）分别取上述制备的金黄色葡萄糖球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌各1ml加入培养皿，每种菌液平行做2皿，注入不超过45℃营养琼脂培养基15~20ml，置30～35℃培养箱培养二天，取上项制备的白色念珠菌菌液1ml加入培养皿，平行做2皿，注入不超过45℃的玫瑰红钠琼脂培养基约15~20ml，置23～28℃培养箱培养三天。
7.无菌培养基的无菌性检查7.1培养基的配制硫乙醇酸盐流体培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基29.25g，加1L蒸馏水，加热煮沸使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml。
硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查记录 R-
培养基批号 生产厂家 检验起止日期 规格 检验依据：《中国药典》（20xx 年版二部附录 “无菌检查法”）。
2.
3.将各菌株的上述培养物以0.9%无菌氯化钠溶液倍比稀释后,取不同稀释级的菌悬液1ml 注皿，再加入营养琼脂培养基,在30~35℃倒置培养48小时后,计数。
注: 1ml含菌数小于100cfu的稀释级即为检验用稀释级.
4.制备培养基:
称取供试用培养基g，加入纯化水ml，加热搅拌至完全溶解。
分装至9支具塞试管中，每管12ml。
在℃湿热灭菌min。
5.分别向各支培养基中接种各菌株检验用稀释级的菌悬液（小于100cfu/ml）1ml，在30~35℃培养3天、观察：
[合格标准：空白管培养基无菌生长，加菌的培养基管均生长良好。
]
结论：
本批硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查。
检验人复核人。
