北京大元环境检测技术研究中心
作业指导书生活饮用水中挥发酚类的测定编号
一、项目名称
4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度计法测定生活饮用水中挥发酚类的含量
二、适用范围
2.1 本标准规定了用4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度计法测生活饮用水及水源水的挥发酚类。
2.2 本法适用于生活饮用水及其水源水中挥发酚类的测定。
2.3 本法最低检测质量浓度为0.5μg挥发酚（以苯酚计）。若取250mL水样，则其最低检测浓度为0.002mg/L挥发酚（以苯酚计）。
水中还原性硫化物、氧化物、苯胺类化合物及石油等干扰酚的测定。硫化物经酸化及加入硫酸铜在蒸馏时与挥发酚分离；余氯等氧化剂可在采样时加入硫酸亚铁还原。苯胺类在酸性溶液中形成盐类不被蒸出。石油可在碱性条件下用有机溶剂萃取后除去。
三、测定原理
GB/T 5750.4-2006《4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度计法》。在pH10.0±0.2和有氧化剂铁氰化钾存在的溶液中，酚与4-氨基安替吡啉形成红色的安替吡啉染料，被三氯甲烷所萃取，并在460nm波长处具有最大吸收。
酚和对位取代基可阻止酚与安替吡啉的反应，但羟基（-OH）、卤素、磺酰基（-SO2H）、羧基（-COOH）、甲氧基（-OCH3）除外。此外，邻位硝基也阻止反应，间位硝基部分地阻止反应。
四、使用仪器
4.1 全玻璃蒸馏器，500mL。
4.2 分液漏斗，500mL。
4.3 具塞比色管，10mL。
4.4 分光光度计。
4.5 容量瓶，250mL。
注：不得使用橡胶塞、橡胶管连接蒸馏瓶及冷凝器，以防止对测定的干扰。
五、试剂
5.1 本法所用纯水不得含酚及游离氯。无酚纯水的制备方法如下：于水中加入氢氧化钠至pH为12以上，进行蒸馏。在碱性溶液中，酚形成酚钠不被蒸出。
5.2 三氯甲烷。
5.3 硫酸铜溶液(100g/L)：称取10g硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶于纯水中，稀释至100mL。
5.4 缓冲溶液（pH 9.8）：称取20g氯化铵（NH4C1）溶于100mL氨水（ρ=0.88g/mL）中，置冰箱中保存。
5.5 4-氨基安替吡啉溶液：称取0.5g 4-氨基安替吡啉（C11Hl3N3O）溶于纯水，稀释至25mL，临用时配置。
5.6 铁氰化钾溶液：称取2g铁氰化钾[K3[Fe（CN）6]溶于纯水，稀释至25mL，临用时配置。
5.7 溴酸钾—溴化钾标准溶液[（1/6KBrO3）：0.1mol/L]：精确称取2.78g干燥的（KBrO3）溶于水，加入10g溴化钾（KBr）使溶解，移入1000mL容量瓶中，稀释至刻度。
5.8 淀粉溶液：称取0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，加沸水稀释至100mL，临用时现配。
5.9 硫酸溶液（1+8）
5.10 酚标准溶液
5.10.1 酚的精制：取苯酚于具空气冷凝管的蒸馏瓶中，加热蒸馏，收集182℃～184℃的馏出部分。精致酚冷却后应为白色，密封处于冷暗处。
5.10.2 苯酚标准贮备液：称取1.00g白色苯酚（C6H5OH）溶于水，移入1000mL容量瓶中，稀释至刻度，置4℃冰箱内保存。贮备液的标定：
①吸取25.00mL苯酚贮备液于250mL碘量瓶中，加水稀释至100mL，然后移取25.00mL 0.1mol/L 溴酸钾—溴化钾溶液，立即加入5mL盐酸（ρ=1.19g/mL），盖好瓶塞，轻轻摇匀，于暗处放置10min。加入1g碘化钾，盖严瓶塞，摇匀，放置暗处5min。用硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加入lmL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录用量。
②同时以水代替苯酚贮备液做空白试验，记录硫代硫酸钠标准溶液用量。
③苯酚贮备液浓度由下式计算：
式中：ρ（C6H5OH）——酚标准溶液（以苯酚计）的浓度，单位为mg/mL。 V1 ——空白试验中消耗的硫代硫酸钠标准溶液（6.11）体积（mL）； V2 ——滴定苯酚贮备液时消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积（mL）； C ——硫代硫酸钠标准溶液浓度（mol/L）； 15.68——摩尔质量（1/6C6H5OH）（g/mo1）。
5.10.3 苯酚标准使用液[ρ（C6H5OH）=1.00μg/mL]：临用时将酚标准储备液用纯水稀释为[ρ（C6H5OH）=10.00μg/mL]。再将此溶液稀释成[ρ（C6H5OH）=1.00μg/mL]。酚标准使用液。
5.11 硫代硫酸钠标准滴定溶液[C（Na2S2O3·5H2O）=0.05mmol/L]：
①称取25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）溶于1000mL煮沸放冷的水中，加入0.4g氢氧化钠或0.2g无水碳酸钠，储存于棕色瓶中，7d～10d后进行标定。
②标定：准确称取0.1g（精确到0.0001g）干燥至恒重的重铬酸钾于250mL碘量瓶中，，加2g碘化钾，再加20mL硫酸（1＋8），加塞摇匀，置暗处放置10min，加100ml纯水，用0.1mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加lmL淀粉溶液，继续滴定至蓝色变为亮绿色。同时做空白试验。平行滴定的误差不得大于0.2%。
③按下式计算硫代硫酸钠溶液浓度（mol/L）：
式中：C（Na2S2O3·5H2O）——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，单位为mol/L； V1 ——硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定用量（mL）； V0 ——空白试验硫代硫酸钠溶液的用量（mL）； 0.04903 ——重铬酸钾（1/6K2Cr2O7）摩尔质量，g/mol。
六、分析步骤
6.1 水样处理
（1）量取250mL水样置于500mL蒸馏瓶中。加入二滴甲基橙指示液，用硫酸溶液调节至pH≤4（溶液呈橙色），加5.0mL硫酸铜溶液，加数粒小玻璃珠以防暴沸，。（2）连接冷凝器加热蒸馏，至蒸馏出约225mL时，停止加热，放冷。向蒸馏瓶中加入25mL水，继续蒸馏，直到收集250mL为止。
注：蒸馏过程中，如发现甲基橙的红色褪去，应在蒸馏结束后，再加1滴甲基橙指示液。如发现蒸馏后残液不呈酸性，则应重新取样，增加磷酸加入量，进行蒸馏。如加入硫酸铜溶液后产生较多量的黑色硫化铜沉淀，则应摇匀后放置片刻，待沉淀后，再加硫酸铜溶液，直至不再产生沉淀为止。由于酚随水蒸气挥发，速度缓慢，收集馏出液的体积应与原水样体积相等。若馏出液的馏出体积与原水样不相等，将影响回收率。
6.2 比色测定
6.2.1 将水样馏出液全部转入500mL分液漏斗中，另取酚标准使用溶液0mL、
0.5mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL，分别置于预先装有100纯水的500mL分液漏斗内，最后补加纯水至250mL
6.2.2 向各分液漏斗中加入2mL氨水—氯化铵缓冲液，混匀。再各加入1.5mL4-氨基安替吡啉溶液，混匀，最后加入1.5mL铁氰化钾溶液，充分混匀，准确静置10min。加入10.0mL三氯甲烷，振摇2min（一般为200次），静置分层。在分液漏斗颈部塞入滤纸卷将三氯甲烷萃取溶液缓缓放入干燥比色皿中，用分光光度计，于460nm波长，用2cm比色皿，以三氯甲烷为参比，测量吸光度。
