生物化学——克隆
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生物化学名词解释新生物化学名词解释第一章蛋白质的结构与功能1.肽键:一分子氨基酸的氨基和另一分子氨基酸的羧基通过脱去水分子后所形成的酰胺键称为肽键。
2.等电点:在某一pH溶液中,氨基酸或蛋白质解离成阳离子和阴离子的趋势或程度相等,成为兼性离子,成点中性,此时溶液的pH称为该氨基酸或蛋白质的等电点。
3.模体:在蛋白质分子中,由两个或两个以上具有二级结构的肽段在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象,并发挥特殊的功能,称为模体。
4.结构域:分子量较大的蛋白质三级结构常可分割成多个结构紧密的区域,并行使特定的功能,这些区域被称为结构域。
5.亚基:在蛋白质四级结构中每条肽链所形成的完整三级结构。
6.肽单元:在多肽分子中,参与肽键的4个原子及其两侧的碳原子位于同一个平面内,称为肽单元。
7.蛋白质变性:在某些理化因素影响下,蛋白质的空间构象破坏,从而改变蛋白质的理化性质和生物学活性,称之为蛋白质变性。
第二章核酸的结构与功能1.DNA变性:在某些理化因素作用下,DNA分子稳定的双螺旋空间构象破环,双链解链变成两条单链,但其一级结构仍完整的现象称DNA变性。
2.Tm:即溶解温度,或解链温度,是指核酸在加热变性时,紫外吸收值达到最大值50%时的温度。
在Tm时,核酸分子50%的双螺旋结构被破坏。
3.增色效应:核酸加热变性时,由于大量碱基暴露,使260nm处紫外吸收增加的现象,称之为增色效应。
4.HnRNA:核内不均一RNA。
在细胞核内合成的mRNA初级产物比成熟的mRNA分子大得多,称为核内不均一RNA。
hnRNA在细胞核内存在时间极短,经过剪切成为成熟的mRNA,并依靠特殊的机制转移到细胞质中。
5.核酶:也称为催化性RNA,一些RNA具有催化能力,可以催化自我拼接等反应,这种具有催化作用的RNA分子叫做核酶。
6.核酸分子杂交:不同来源但具有互补序列的核酸分子按碱基互补配对原则,在适宜条件下形成杂化双链,这种现象称核酸分子杂交。
第 18 章基因工程根底单元自测题(一) 名词解释1. 遗传工程2.生物技术3.基因工程4.细胞工程5.蛋白质工程6.分子克隆7.载体8.转化和转染9.基因文库10. cDNA 文库(二) 填空1.自然界的常见基因转移方式有、、、。
2.不同DNA分子间发生的共价连接称为,有、两种方式。
3.基因工程的载体必需具备的条件有、、。
4.基因工程常用的载体DNA分子有、、和。
5.一个完整的DNA克隆过程应包括、、、、。
6.目的基因猎取的途径或来源有、、、。
7.基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有、、。
8.基因克隆真核生物表达体系常见的有、、表达体系。
9.依据重组体DNA的性质不同,将重组体DNA导入受体细胞的方式有、、等。
10.假设M13的外源基因被插入到lac Z 基因内,则在含有X-gal 的培育基上生长时会消灭色菌落,假设在lac Z基因内无外源基因插入,在同样的条件下呈现色菌落。
11.当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时,就可以从一个细胞(细菌)转移到另一细胞(细菌),这种类型的DNA转移称为作用。
12.重组DNA 技术中常用的工具酶有、、、。
(三) 选择题1.以下那种方式保证了免疫球蛋白的多样性?A.转化B. 转染C. 转位D. 转导2.微切割技术使目的基因可来源于以下那种物质?A.真核细胞染色体DNAB.人工合成DNAC. cDNAD. G-文库3.重组DNA 技术中常用的工具酶以下那项不是:A.限制性核酸内切酶B. DNA 连接酶C. DNA 聚合酶ID. RNA 聚合酶4.DNA 致癌病毒感染宿主细胞后,使之发生癌变是由于发生了:A. 转化B. 转导C. 接合D. 转座5.关于基因工程的表达,以下哪项是错误的?A.基因工程也称基因克隆B . 只有质粒DNA 可作为载体C . 重组体DNA 转化或转染宿主细胞D. 需获得目的基因6.有关质粒的表达,以下哪项是错误的?A.pB R322 含有β-半乳糖苷酶的α片段基因B.质粒较易转化C.质粒的遗传表型可作为转化子的筛选依据D.pB R322 的分子中仅有一个E.co R I 内切酶位点7.以下哪项不是重组DNA的连接方式?A.粘性末端与粘性末端的连接 B .平端与平端的连接C . 粘性末端与平端的连接D . 人工接头连接8.有关噬菌体的表达哪项不符合?A.感染大肠杆菌时仅把D NA注入大肠杆菌内B.只有裂解一种生活方式C . 溶源和裂解两种生活方式可以相互转变D. 噬菌体是由外壳蛋白和D NA 组装而成9.D NA 克隆不包括以下哪项步骤?A. 选择一个适合的载体B . 重组体用融合法导入细胞C . 用连接酶连接载体D NA 和目的D NA,形成重组体D . 用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌10.以下哪项不能作为表达载体导人真核细胞的方法?A.磷酸钙转染 B . 电穿孔 C . 脂质体转染 D . 氯化钙转染11.以下哪项不能作为基因工程重组体的筛选方法?A.PC R 技术B. 宿主菌的养分缺陷标志补救C . 抗药性标志选择 D. Southern 印迹12.关于转化错误的选项是:A.受体细胞获得的遗传表型B.外源D NA确定整合进受体细胞基因组C.自然界中较大的外源D NA转化几率较低D.自然界中较大的外源DNA 转化几率较高13.以下哪种酶是重组DNA 技术中最重要的?A. 反转录酶B. 碱性磷酸酶C. DNA 连接酶D. DNA 聚合酶I14.在分子生物学中,基因克隆主要指:A. DNA 的复制B. DNA 的转录C. DNA 的剪切D. RNA 的转录15.在分子生物学中,重组DNA 又称为:A. 酶工程B. 蛋白质工程C. 细胞工程D. 基因工程16.cDNA 是指:A.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB.在体外经反转录合成的与DNA 互补的DNAC . 在体外经反转录合成的与RNA 互补的RNAD. 在体内经反转录合成的与RNA 互补的RNA17.聚合酶链式反响常常缩写为:A. PRCB. PERC. PC RD. B C R18.在DNA序列的状况下,猎取目的基因的最便利的方法是:A.人工化学合成B. 基因组文库法C. cDNA 文库法D. PCR 法19.用于PC R 反响的酶是:A.DNA 连接酶B. TaqDNA 聚合酶C. 逆转录酶D. 碱性磷酸酶20.在cDNA 技术中,所形成的发夹环可用A.限制性内切核酸酶切除B. 用3′外切核酸酶切除C. 用S1 核酸酶切除D. 用5′外切核酸酶切除21,cDNA 文库包括该种生物的A. 某些蛋白质的构造基因B. 全部蛋白质的构造基因C. 全部构造基因D. 内含子和调控区22.关于感受态细胞性质的描述,下面哪一种说法不正确?A.具有可诱导性B. 具有可转移性C. 细菌生长的任何时期都可以消灭D. 不同细菌消灭感受态的比例是不同的23.在简并引物的3′端尽量使用具有简并密码的氨基酸,这是由于A.Taq 酶具有确定的不准确性B. 便于排解错误碱基的掺人C. 易于退火D. 易于重组连接24.变色的酚中含有氧化物,这种酚不能用于DNA分别,缘由主要是A.氧化物会转变pH 值B.氧化物可使DNA 的磷酸二酯键断裂C. 氧化物同DNA 形成复合物D. 氧化物在DNA 分别后不易除去(四) 是非题1. 基因表达的最终产物都是蛋白质。
生物化学教学大纲生物化学教学大纲一、课程基本概况课程名称:生物化学课程名称(英文):Biochemistry课程编号:B16015课程总学时:理论54学时实验40学时课程学分:4.5课程分类:必修课开设学期:第3、4学期适用专业:生物科学、生物技术本科先行课:《植物学》、《动物学》、《分析化学》、《有机化学》等后续课程:《植物生理学》、《分子生物学》、《基因工程》等二、课程性质、目的和任务生物化学课是生物科学专业必修的一门主干专业课,其先行课为物理学、化学、植物学、动物学、微生物学。
本课程的作用是为后续各专业课的学习打下理论基础,并提供实验技术和方法。
其任务是掌握植物生物化学的基本概念,认识和掌握植物细胞的基本物质组成及其结构、性质和功能,了解和掌握有机物代谢的途径和基本条件,了解代谢调控的方式、过程及意义。
三、主要内容、重点及难点绪论(一)目的要求掌握生物化学的定义、内容和任务,了解生物化学的发展和现状,了解生物化学与其它学科的关系。
(二)主要内容1.生物化学的定义2.生物化学的内容4.生物化学的发展及现状(三)重点生物化学的定义、内容和任务(四)难点生物化学与其它学科的关系第一章氨基酸(一)目的要求掌握蛋白质的基本组成单位——氨基酸的结构特点、性质。
(二)主要内容第一节氨基酸的结构与分类第二节氨基酸的性质(三)重点氨基酸的结构特点和性质(四)难点氨基酸性质第二章蛋白质(一)目的要求掌握蛋白质的结构、性质和功能,理解蛋白质的结构与功能的关系。
(二)主要内容第一节概述第二节蛋白质的结构一级结构;蛋白质分子中的非共价键;蛋白质的二级结构;蛋白质的三级结构;蛋白质的四级结构;蛋白质结构和功能的关系第三节蛋白质的性质蛋白质的理化性质;两性性质及等电点;胶体性质;蛋白质的沉淀;蛋白质的变性;蛋白质的颜色反应;蛋白质的分离与纯化。
(三)重点蛋白质的结构和性质(四)难点蛋白质的结构;蛋白质结构与功能的关系。
生物化学重要名词解释汇总等电点------在某一PH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时溶液的PH称为该氨基酸的等电点。
蛋白质变性:在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失。
主要为二硫键和非共价键的破坏,不涉及一级结构的改变。
变性后,其溶解度降低,粘度增加,结晶能力消失,生物活性丧失,易被蛋白酶水解。
常见的导致变性的因素有:加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂、超声波、紫外线、震荡等。
DNA变性:在某种理化因素作用下,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,使DNA双螺旋结构松散,变成单链Tm:紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度(Tm),一种DNA分子的Tm值大小与其所含碱基中的G+C比例相关,G+C比例越高,Tm值越高。
核酸分子杂交:如果把不同的DNA链放在同一溶液中作变性处理,或把单链DNA与RNA 放在一起,只要某些区域有成立碱基配对的可能,它们之间就有成立碱基配对的可能。
酶的活性中心由酶作用的必需基团组成,这些必需基团在空间位置上接近组成特定的空间结构,能与底物特异地结合并将底物转化为产物。
同工酶是指催化相同的化学反应,而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。
变构调节:体内一些代谢物可以与某些酶分子活性中心外的某一部位可逆地结合,使酶发生变构并改变其催化活性。
共价修饰调节:酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合,从而改变酶的活性,这一过程称为酶的共价修饰。
糖酵解:在缺氧情况下,葡萄糖或糖原分解成乳酸的过程。
葡萄糖有氧氧化:在有氧情况下,葡萄糖彻底氧化分解成水和co2的反应过程。
糖异生:由非糖物质转化成葡萄糖或糖原的过程。
脂肪的动员储存在脂肪细胞中的脂肪被脂肪酶逐步水解为游离脂肪酸(FFA)及甘油并释放入血以供其它组织氧化利用的过程。
A.链霉素B. 氯霉素C. 利福霉素D. 放线菌素E. 青霉素22. 蛋白质合成后加工,不包括A. 蛋白质磷酸化B. 信号肽切除C. 蛋白质糖基化D. 酶原切除部分肽段转变为酶E. 蛋白质乙酰化23. 核蛋白体转肽酶活性,需要的无机离子是A. Ca2+与K+B. Mg2+与K+C. Mg2+与Na+D. Zn2+与K+E. Ca2+与Na+24. 含有白喉酰胺的蛋白质因子,是A. EFTuB. EFT 1 C . EFTs D. EFT2 E. eIF125. 白喉毒素抑制蛋白质生物合成,是因为A.它可作用于EFTuB.它可直接作用于EFT2C. 它的A链有催化活性D.它可作用于EFTsE. 它可抑制EFT126. 信号肽位于A. 分泌蛋白新生链的中段B. 成熟的分泌蛋白N端C. 分泌蛋白新生链的C端D. 成熟的分泌蛋白C端E.分泌蛋白新生链的N端27. 多核蛋白体指A.多个核蛋白体B.多个核蛋白体小亚基C. 多个核蛋白体附着在一条mRNA上合成多肽链的复合物D.多个核蛋白体大亚基E.多个携有氨基酰tRNA的核蛋白体小亚基28. 关于密码子,错误的叙述是A. AUG表示蛋白质生物合成的启动B.密码子AUG代表甲酰蛋氨酸C.除AUG外,有时GUG是原核生物的启动信号D.并非所有的AUG都是启动信号E. 密码子AUG代表蛋氨酸29. 与核蛋白体无相互作用的物质,是A.氨基酰tRNAB.起动因子C.mRNAD.终止因子E.氨基酰tRNA合成酶30. 关于核蛋白体循环的叙述,错误的是A. 终止因子可识别UGAB. 终止因子与"受位"结合C. 终止因子可识别UAAD. 终止因子可识别UAGE. 终止因子与"给位"结合31. 核蛋白体"受位"的功能,是A.催化肽键生成B.从tRNA水解新生肽链C.转肽D.接受新进位的氨基酰tRNAE.活化氨基酸32. 氨基酰-tRNA中,tRNA与氨基酸的结合键,是A.盐键B. 磷酸二酯键C. 肽键D. 糖苷键E. 酯键33. 原核生物蛋白质合成的30S起动复合体,组成成分是A. 甲酰蛋氨酰tRNA, IF2,GTPB. 甲酰蛋氨酰tRNA, IF2,ATPC. 蛋氨酰tRNA, IF3,GTPD. 甲酰蛋氨酰tRNA, IF2,ATPE. 甲酰蛋氨酰tRNA, IF1,GTP34. 原核生物的肽链延长因子,是A. EFTu, EFT1B. EFTs, EFGC.EFG, EFT2D. EFT1, EFT2E.EFT1, EFG35. 参与核蛋白体循环的亚氨基酸,是A.脯氨酸B.瓜氨酸C.赖氨酸D.组氨酸 E苏氨酸36. 一个氨基酸参入多肽链,需要A. 两个ATP分子B. 一个ATP分子,两个GTP分子C. 一个ATP分子,一个GTP分子D. 两个ATP分子,一个GTP分子E. 两个GTP分子37. 寡核苷酸pACGGUAC抑制翻译,其mRNA上结合序列是A.pACGGUACB.pUUCCUCUC.pUGCCAUGD.pACUUAAUE.pGUACCGU38. 关于mRNA成熟过程的叙述,正确的是A. 不需要加帽(7mGTP)B. 不需要加尾(聚A)C. 不需要剪切、拼接D. 不需要修饰E. 不需要在胞液中进行39. 氨基酰tRNA3'末端的核糖上与氨基酸相联的基团,是A. 3'OHB.2'OHC. 1'OHD. 5'磷酸E.3'磷酸40. 可鉴别核蛋白体"给位"与"受位"的抗生素,是A.链霉素B.嘌呤霉素C.放线菌素DD.环己酰亚胺E.氯霉素41. 成熟的真核生物mRNA 5'端具有A.聚AB.帽结构C. 聚CD. 聚GE. 聚U42. 蛋白质生物合成中搬运氨基酸的分子是A.18S rRNAB.5S rRNAC. 7SRNAD. mRNAE.甘氨酸tRNA43. 代表氨基酸的密码子,是A. UGAB.UAGC.UAAD.UGGE. UGA和UAG44.关于真核生物mRNA中的启动信号,正确的叙述是A.常在mRNA的3'端B. mRNA启动部位的AUGC. mRNA中任一AUGD. 苯丙氨酸的密码子E. 甲酰蛋氨酸的密码子45. 反密码子IGG的相应密码子是A.ACCB.GCCC.UCCAG46. 不稳定配对是指密码子第3个核苷酸与反密码子哪个核苷酸配对不按G-C,A-U原则A.第1或第3个B.第2个C.第3个D.第1个E.第2或第3个47. 简并指mRNA中的现象,是A. 一种密码子体现一种氨基酸B.一种氨基酸只有一种密码子C. 一种密码子不体现任何氨基酸E. 一种以上密码子体现一种氨基酸D. 一种密码子体现氨基酸,又是启动信号49. 关于密码子,错误的叙述是A.每一密码子代表一种氨基酸B.某些密码子不代表氨基酸C.一种氨基酸只有一种密码子D.蛋氨酸只有一种密码子E.密码子无种族特异性50. 氨基酸活化的特异性取决于A. rRNAB. tRNAC.转肽酶D.核蛋白体E.氨基酰-tRNA合成酶(二)多项选择题1. 新生肽链合成后加工,可被磷酸化的氨基酸是A.ThrB.HisC.TyrD.Ser2.细胞内不同的多核蛋白体可有如下差别A.合成的蛋白质不同B.与内质网结合状况不同C.所含核蛋白体个数不同D.所含mRNA不同3.真核生物合成蛋白质,需要ATP的阶段是A.氨基酸活化阶段B.启动阶段C.肽链延长阶段D.终止阶段4.无密码子的氨基酸,是A.精氨酸B.异亮氨酸C.羟脯氨酸D.鸟氨酸5. UGG是色氨酸的密码子,UUC,GUU是苯丙氨酸的密码子,GGU是甘氨酸的密码子,UCC是丝氨酸的密码子,CCC是脯氨酸的密码子。
生物化学名词解释第一章蛋白质的结构与功能1.肽键:一分子氨基酸的氨基和另一分子氨基酸的羧基通过脱去水分子后所形成的酰胺键称为肽键。
2.等电点:在某一pH溶液中,氨基酸或蛋白质解离成阳离子和阴离子的趋势或程度相等,成为兼性离子,成点中性,此时溶液的pH称为该氨基酸或蛋白质的等电点。
3.模体:在蛋白质分子中,由两个或两个以上具有二级结构的肽段在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象,并发挥特殊的功能,称为模体。
4.结构域:分子量较大的蛋白质三级结构常可分割成多个结构紧密的区域,并行使特定的功能,这些区域被称为结构域。
5.亚基:在蛋白质四级结构中每条肽链所形成的完整三级结构。
6.肽单元:在多肽分子中,参与肽键的4个原子及其两侧的碳原子位于同一个平面内,称为肽单元。
7.蛋白质变性:在某些理化因素影响下,蛋白质的空间构象破坏,从而改变蛋白质的理化性质和生物学活性,称之为蛋白质变性。
第二章核酸的结构与功能1. DNA变性:在某些理化因素作用下,DNA分子稳定的双螺旋空间构象破环,双链解链变成两条单链,但其一级结构仍完整的现象称DNA变性。
2. Tm:即溶解温度,或解链温度,是指核酸在加热变性时,紫外吸收值达到最大值50%时的温度。
在Tm时,核酸分子50%的双螺旋结构被破坏。
3.增色效应:核酸加热变性时,由于大量碱基暴露,使260nm处紫外吸收增加的现象,称之为增色效应。
4. HnRNA:核内不均一RNA。
在细胞核内合成的mRNA初级产物比成熟的mRNA分子大得多,称为核内不均一RNA。
hnRNA在细胞核内存在时间极短,经过剪切成为成熟的mRNA,并依靠特殊的机制转移到细胞质中。
5.核酶:也称为催化性RNA,一些RNA具有催化能力,可以催化自我拼接等反应,这种具有催化作用的RNA分子叫做核酶。
6.核酸分子杂交:不同来源但具有互补序列的核酸分子按碱基互补配对原则,在适宜条件下形成杂化双链,这种现象称核酸分子杂交。
1.5转录因子腑彤研究概述1.5.1Nrf2的结构转录因子是具有真核启动子特定DNA序列结合活性的蛋白质分子,转录因子的DNA结构域有bZIP结构域、锌指结构域、MADS结构域、MYC结构域、MYB结构域、Homeo结构域以及AP2/EREBP结构域等。
碱性亮氮酸拉链(basicleucinezipper,bZip)蛋白是真核生物的转录因子和阻抑蛋白中最大而且最保守的类型之一,在高等植物和哺乳动物中广泛存在,在基因表达和调控中起重要作用。
b-Zip转录因子包括ChIC,Jun和los家族。
b-Zip转录因子ChIC(cap—ncollar)家族分为6类;口45,Nrfl,Nrf2、Nrf3、Bachl和Bach2。
在这6个成员中,Nrf2(NF-E2p45-relatedFactor)是细胞质蛋白质,是一个有效的转录激活因子。
在Nrf2中有6个功能Neh单位.Nehl、Neh2、NelG、Neh4、Neh5、Neh6,如图I.1所示。
在Nrf2蛋白的C端有一个碱性亮氨酸拉链结构.与/bMaf蛋白形成二聚体并结合到ARE顺式作用元件[36,37,381。
:在-Nrf2的N端有一个Neh2结构域,高度保守。
Nrf2有两个活化结构域Neh4和Neh5,在不同fI勺1Nrf2蛋白中是保守的[391,Neh4和Neh5与CBP互作[CREBcAMP一成答元件结合蛋白(CREB)],因而Nrf2有强的转录活性。
Nehl对应于bZip基元.调控DM的结合,与d、Maf蛋白形成二聚体。
同时CBP结合到Nrh4和Nda5这两个结构域,从而活化N啦靶基因的转录。
Keapl结合Neh2,抑制Nrf2转录活化作用,ETGE是在Neh2结构域中一段4个氨基酸序列,它是Nrf2--Keapl相互作用中的关键基元。
ETGE基元的点突变或缺失能消除活体Keapl的抑制活性,Nrf2和Keapl不能相互作用,从而使Keapl不能抑制№霞调控基因转录活性l帅.4”。
生物化学考研名词解释part1蛋白质化学两性离子指在同一氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷,又称兼性离子或者偶极离子。
氨基酸是含有一个碱性氨基与一个酸性羧基的有机化合物,氨基通常连在α-碳上。
等电点pI使分子处于兼性分子状态,在电场中不迁移(分子的静电荷为零)的pH值必需氨基酸指人体(与其它哺乳动物)自身不能合成,机体又必需,需要从饮食中获得的氨基酸。
凯氏定氮法蛋白质与亚硝酸反应,产生氮气,通过产生的氮气的量,来计算蛋白质的含量茚三酮反应在加热条件下,氨基酸或者肽与茚三酮反应生成紫色(与脯氨酸反应生成黄色)化合物的反应。
纸层析是用滤纸作为支持物的一种分配层析,他是利用极性与非极性氨基酸在水与有机溶剂中溶解度不一致的特点,在滤纸上进行分离的一种方法分配层析利用固定相与流淌相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离的一种方法Rf值样品中某成分在纸层析或者薄层层析特定溶剂系统中移动的距离与流淌相前沿的距离之比。
肽两个或者两个以上氨基通过肽键共价连接形成的聚合物肽键一个氨基酸的羧基与另一个的氨基的氨基缩合,除去一分子水形成的酰氨键。
双缩脲反应白质在碱性溶液中与硫酸铜作用形成紫蓝色络合物的呈色反应。
在540nm 波长处有最大汲取。
可用于蛋白质的定性与定量检测。
一级结构指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序,与二硫键的位置二级结构指在蛋白质分子中的局部区域内,多肽链沿一定方向盘绕与折叠的方式。
三级结构指蛋白质在二级结构的基础上借助各类次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的构象。
四级结构指多亚基蛋白质分子中各个具有三级结构的多肽链以适当方式聚合所呈现的三维结构。
超二级结构指蛋白质分子中相邻的二级结构单位组合在一起所形成的有规则的、在空间上能辨认的二级结构组合体。
结构域指蛋白质多肽链在二级结构的基础上进一步卷曲折叠成几个相对独立的近似球形的组装体。
构型指在立体异构体中不对称碳原子上相连的各原子或者取代基团的空间排布。
构型的转变伴随着共价键的断裂与重新形成。
GSH:还原性谷胱甘肽,是某些酶的辅酶,在体内氧化还原过程中起重要作用。
DNFB:2,4-二硝基氟苯,可以与氨基酸反应生成稳定的2,4-二硝基苯氨基酸,可以肽的N 端氨基酸测定。
PI:等电点,指使两性电解质所带电荷为零时的外界容易ph值。
RNA:核糖核酸,转录DNA的遗传信息并指导蛋白质的合成。
T:胸腺嘧啶,组成核酸的一种嘧啶碱基。
A TP:三磷酸腺苷,生物体中重要的能量载体物质。
cAMP:3,5-环腺苷酸,第二信使,在激素调节中起作用。
cGMP:3,5-环腺苷酸,第二信使,在激素调节中起作用。
Tm:熔解温度,核酸紫外吸收增量达到最大增量一半时的温度。
Ta:退火温度,使热变性的DNA缓慢冷却却使其复性时的温度,一般以低于变性温度Tm20—25为宜。
tRNA:转移核糖核酸,与氨基酸结合,携带氨基酸进入mRNA-核糖体复合物的特定位置用于蛋白质合成。
mRNA:信使核糖核酸,转录DNA的遗传信息,指导蛋白质的合成。
rRNA:核糖体核糖核酸,与蛋白质一起构成核糖体的结构骨架。
dA TP:脱氧腺苷三磷酸,DNA的合成原料之一。
hnRNA:核不均一RNA,mRNA的前体,加工后可转变为MrnaKm:米氏常数,表示反应速度达到最高反应速度一半时的底物浓度。
CoASH:辅酶A,乙酰基团载体。
NAD+:氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,脱氢酶的辅酶,为脱氢反应转移H原子或者电子。
NADPH:还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,还原力,为生物体合成反应提供【H】。
FMN:黄素腺嘌呤单核苷酸,脱氢酶的辅基。
FAD:黄素腺嘌呤二核苷酸,脱氢酶的辅基。
PLP:磷酸吡哆醛,转氨酶的辅基。
TPP:焦磷酸硫氨酸,脱羧酶的辅酶。
THF:四氢叶酸,一碳单位的载体。
UDPG:鸟苷二磷酸葡萄糖,是合成蔗糖时葡萄糖的供体。
ADPG:腺苷二磷酸葡萄糖,是合成淀粉时葡萄糖的供体。
PEP:磷酸烯醇式丙酮酸,含高能磷酸键,属于高能磷酸化合物,在糖酵解过程中生成。
生物化学——克隆学校:院系:生物技术班级:xxx班学号:xx姓名:songxw克隆克隆是英文"clone"或"cloning"的音译,而英文"clone"则起源于希腊文"Klone",原意是指以幼苗或嫩枝插条,以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物,如扦插和嫁接。
在大陆译为“无性繁殖”在台湾与港澳一般意译为复制或转殖或群殖。
中文也有更加确切的词表达克隆,“无性繁殖”、“无性系化”以及“纯系化”。
克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖,以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。
通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。
另有相关书籍和影视作品以此为题。
克隆的历史:鲤鱼:1963年,中国科学家童第周早在1963年就通过将一只雄性鲤鱼的遗传物质注入雌性鲤鱼的卵中从而成功克隆了一只雌性鲤鱼,比多利羊的克隆早了33年。
绵羊:1996年,多利(Dolly)猕猴:2000年1月,Tetra,雌性猪:2000年3月,5只苏格兰PPL小猪;8月,Xena,雌性牛:2001年,Alpha和Beta,雄性猫:2001年底,CopyCat(CC),雌性鼠:2002年兔:2003年3-4月分别在法国和朝鲜独立地实现;骡:2003年5月,爱达荷Gem,雄性;6月,犹他先锋,雄性鹿:2003年,Dewey马:2003年,Prometea,(普罗米修斯)雌性狗:2005年,韩国首尔大学实验队,史纳比猪:2005年8月8日,中国第一头供体细胞克隆。
克隆的定义:1963 年J.B.S.Haldane在题为“人类种族在未来二万年的生物可能性”的演讲上采用“克隆(Clone)”的术语。
科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫“克隆”,这门生物技术叫“克隆技术”,其本身的含义是无性繁殖(中国大陆的翻译),即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系,该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。
克隆也可以理解为复制、拷贝和翻倍(港澳台的意译),就是从原型中产生出同样的复制品,它的外表及遗传基因与原型完全相同,但大多行为思想不同。
时至今日,“克隆”的含义已不仅仅是“无性繁殖”,凡是来自同一个祖先,无性繁殖出的一群个体,也叫“克隆”。
这种来自同一个祖先的无性繁殖的后代群体也叫“无性繁殖系”,简称无性系。
简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。
但克隆与无性繁殖是不同的。
克隆是指人工操作动物繁殖的过程,无性繁殖是指:不经过两性生殖细胞的结合由母体直接产生新个体的生殖方式,常见的有孢子生殖、被子生殖出芽生殖和分裂生殖。
由植物的根、茎、叶等经过压条、扦插或嫁接等方式产生新个体也叫无性繁殖。
绵羊、猴子和牛等动物没有人工操作是不能进行无性繁殖的。
——因此,高中一些练习题里将扦插排除在“克隆”之外。
另外,花药离体培养成单倍体,不受精的卵细胞孤雌发育成个体如雄蜂雄蚁,叫做单性繁殖,严格来说也不算克隆。
而试管婴儿由于有受精过程所以也不属于克隆。
科学要求严谨,定义非常关键,有时候概念的内涵和外延变化了,我们大部分人还使用旧有的内容,这样就造成了混淆和混乱。
克隆的定义二:克隆,是指通过无性生殖而产生的遗传上均一的生物群,即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者生物的个体。
克隆在希腊语中是“小树枝叶”的意思,用以指无性增殖物。
现在则指个体、细胞、基因等不同水平上的无性增殖物。
(1)个体水平:在植物的无性增殖中,植物的发芽、插条等由同一个体通过无性生殖而增长的个体群均被视为克隆。
采用组织培养方法可使植物细胞培养发育成完全的个体(愈伤组织),采用这种方法得到的具有相同基因型的个体群,也被称为克隆;在动物的无性增殖中,典型的例子是采用核移植实验方法,把分化细胞的核移植到一个事先去核的蛙卵中,让其发育并得到克隆蛙。
克隆动物具有均一遗传性质,在研究环境条件对发育、分化的影响以及药物的检测方面都是重要的实验材料。
在哺乳动物中,由于细胞分化,核异质化的程度加剧,因此核移植尚无成功的例子。
(2)细胞水平:由一个细胞经过有丝分裂生成的细胞群叫克隆。
但如果培养细胞发生转化,则很容易引起染色体变异。
(3)基因水平:利用基因重组操作技术,使特定的基因与载体结合,在细菌等宿主中进行增殖,有可能得到均匀的基因群。
克隆基因在基因功能与精细结构的关系等基础研究及在有用物质的生产方面,均已得到应用。
克隆种类1.由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系(每个基因彼此相同)。
2.先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的受体卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体。
(与提供细胞者基因相同)基本过程:先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物子宫中使动物怀孕,便可产下与提供细胞核者基因相同的动物。
这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。
克隆鲫鱼出世前后1979年春,中国科学院武汉水生生物研究所的科学家,用鲫鱼囊胚期的细胞进行人工培养,经过385天59代连续传代培养后,用直径10微米左右的玻璃管在显微镜下从培养细胞中吸出细胞核。
与此同时,除去鲫鱼卵细胞的核,让卵细胞留出空间做好接纳囊胚细胞核的准备。
一切准备就绪后,把玻璃管吸出的核移放到空出位置的鲫鱼卵细胞内。
得到了囊胚细胞核的卵细胞在人工培养下大部分夭亡了。
在189个这种换核卵细胞中,只有两个孵化出了鱼苗,而最终只有一条幼鱼渡过难关,经过80多天培养后长成8厘米长的鲫鱼。
这种鲫鱼并没有经过雌、雄细胞的结合,仅仅是给卵细胞换了个囊胚细胞的核,实际上是由换核卵产生的,因此也是克隆鱼。
克隆绵羊“多利”1997年2月27日出版的英国《自然》杂志公布了爱丁堡罗斯林研究所威尔莫特等人的研究成果:经过247次失败之后,他们在1996年得到了一只名为“多利”的克隆雌性小绵羊。
“多利”绵羊是如何“创造”出来的呢?威尔莫特等学者先给“苏格兰黑面羊”注射促性腺素,促使它排卵。
得到卵之后,立即用极细的吸管从卵细胞中取出核。
与此同时,从怀孕三个月的“芬多席特”六龄母羊的乳腺细胞中取出核,立即送入取走核的“苏格兰黑面羊”的卵细胞中。
手术完成之后,用相同频率的电脉冲刺激换核卵,让“苏格兰黑面羊”的卵细胞质与“芬多席特”母羊乳腺细胞的核相互协调,使这个“组装”细胞在试管里经历受精卵那样的分裂、发育而形成胚胎的过程。
然后,将胚胎巧妙地植入另一只母羊的子宫里。
到去年7月,这只“护理”体外形成胚胎的母羊终于产下了小绵羊“多利”。
“多利”不是由母羊的卵细胞和公羊的精细胞受精的产物,而是“换核卵”一步一步发展的结果,因此是“克隆羊”。
克隆技术造福人类:克隆技术会给人类带来极大的好处。
例如,英国PPL公司已培育出羊奶中含有治疗肺气肿的α-I抗胰蛋白酶的母羊。
这种羊奶的售价是6000美元一升。
一只母羊就好比一座制药厂。
用什么办法能最有效、最方便地使这种羊扩大繁殖呢?最好的办法就是“克隆”。
同样,荷兰PHP公司培育出能分泌人乳铁蛋白的牛,以色列LAS公司育成了能生产血清白蛋白的羊。
这些高附加值的牲畜如何有效地繁殖?答案当然还是“克隆”。
母马配公驴可以得到杂种优势特别强的动物——骡,然而骡不能繁殖后代,那么,优良的骡如何扩大繁殖?最好的办法也是“克隆”。
我国的大熊猫是国宝,但自然交配成功率低,因此已濒临绝种。
如何挽救这类珍稀动物?“克隆”为人类提供了切实可行的途径。
除此之外,克隆动物对于研究癌生物学、研究免疫学、研究人的寿命等都有不可低估的作用。
近年来重要成果∶克隆羊“多莉”的诞生在全世界掀起了克隆研究热潮,随后,有关克隆动物的报道接连不断。
1997年3月,即公布“多莉”培育成功后近1个月的时间里,美国、中国台湾和澳大利亚科学家分别发表了他们成功克隆猴子、猪和牛的消息。
不过,他们都是采用胚胎细胞进行克隆,其意义不能与“多莉”相比。
同年7月,罗斯林研究所和PPL公司宣布用基因改造过的胎儿成纤维细胞克隆出世界上第一头带有人类基因的转基因绵羊“波莉”(Polly)。
这一成果显示了克隆技术在培育转基因动物方面的巨大应用价值。
1998年7月,美国夏威夷大学Wakayama等报道,由小鼠卵丘细胞克隆了27只成活小鼠,其中7只是由克隆小鼠再次克隆的后代,这是继“多利”以后的第二批哺乳动物体细胞核移植后代。
此外,Wakayama等人采用了与“多利”不同的、新的、相对简单的且成功率较高的克隆技术,这一技术以该大学所在地而命名为“檀香山技术”。
此后,美国、法国、荷兰和韩国等国科学家也相继报道了体细胞克隆牛成功的消息;日本科学家的研究热情尤为惊人,1998年7月至1999年4月,东京农业大学、近畿大学、家畜改良事业团、地方(石川县、大分县和鹿儿岛县等)家畜试验场以及民间企业(如日本最大的奶商品公司雪印乳业等)纷纷报道了,他们采用牛耳部、臀部肌肉、卵丘细胞以及初乳中提取的乳腺细胞克隆牛的成果。
至1999年底,全世界已有6种类型细胞——胎儿成纤维细胞、乳腺细胞、卵丘细胞、输卵管/子宫上皮细胞、肌肉细胞和耳部皮肤细胞的体细胞克隆后代成功诞生。
2000年6月,中国西北农林科技大学利用成年山羊体细胞克隆出两只“克隆羊”,但其中一只因呼吸系统发育不良而早夭。
据介绍,所采用的克隆技术为该研究组自己研究所得,与克隆“多利”的技术完全不同,这表明中国科学家也掌握了体细胞克隆的尖端技术。
2012年3月18日凌晨,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所胚胎工程与繁殖技术室在昌平试验牛场通过剖腹产,获得体细胞克隆公牛1头,母牛妊娠期279天,牛犊出生重58.2千克,目前生理指标一切正常。
经北京华大方瑞鉴定中心鉴定,该克隆后代与细胞来源的供体公牛DNA一致。
这是我国首次采用无透明带克隆方法获得的荷斯坦种公牛体细胞克隆后代,也是第三例荷斯坦种公牛体细胞克隆公牛。
在不同种间进行细胞核移植实验也取得了一些可喜成果,1998年1月,美国威斯康星一麦迪逊大学的科学家们以牛的卵子为受体,成功克隆出猪、牛、羊、鼠和猕猴五种哺乳动物的胚胎,这一研究结果表明,某个物种的未受精卵可以同取自多种动物的成熟细胞核相结合。
虽然这些胚胎都流产了,但它对异种克隆的可能性作了有益的尝试。
1999年,美国科学家用牛卵子克隆出珍稀动物盘羊的胚胎;中国科学家也用兔卵子克隆了大熊猫的早期胚胎,这些成果说明克隆技术有可能成为保护和拯救濒危动物的一条新途径。
应用前景∶奇妙的克隆技术已展示出广阔的应用前景,概括起来大致有以下四个方面:(1)培育优良畜种和生产实验动物;(2)生产转基因动物;(3)生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法;(4)复制濒危的动物物种,保存和传播动物物种资源。