小学语文简介
- 格式:doc
- 大小:35.00 KB
- 文档页数:6
小学语文二年级上册教材简介小学语文二年级上册教材简介_nbsp_nbsp一、教材编排及特点_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp本册教科书和一年级下册教材一样,以专题形式设计了8个单元,每个专题为一个单元。
依次是:1、美丽的秋天;2、丰富多彩的学校生活;3、热爱祖国;4、怎样看问题、想问题;5、友好相处、团结合作;6、关爱他人;7、保护环境、爱护动物;8、热爱科学。
教材内容比较贴近儿童生活,体现时代特点。
_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp每组教材都包括导语、一课“识字”、四~五篇课文以及“语文园地”。
各部分相互联系,构成一个有机的整体。
全册教材识字8课,课文34篇,选读课文6篇,另外还安排了8个语文园地和8次口语交际。
_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp1、识字课内容丰富,形式多样。
_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp识字课的内容围绕本组的专题,而且形式多样。
识字的三条途径:识字课、随课文识字、语文园地中的识字。
_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp形式有词语、成语、谚语、三字经、对联、儿歌等。
本册课文不再全文注音,多音字随文注音,生字在当页文下列出,注有汉语拼音并配有赏心悦目的背景图,以引起学生的注意(不要求全部都要认读)。
要求会写的字,力求做到识写同步,在编排上有一定规律,便于学生识记,方便教师指导。
如第7课《一分钟》(见33页),要求会写的8个字中有6个是本课要求认识的生字。
本册教材除了识字课和课文安排了识字任务外,在“语文园地”里也安排了少量要求认识的字(前6个单元里都有安排――我会认,如第_、38、55……页)。
_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp2._nbsp教材内容围绕专题整合。
_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp_nbsp每一组教材均以“导语”的形式点名专题,识字课、课文以及“语文园地”中的口语交际、展示台等内容都围绕着本组的专题安排。
小学语文二年级下册一、引言小学语文是培养学生语言表达能力,提高语文阅读理解能力的重要课程之一。
本文档是小学语文二年级下册的教学指南,旨在帮助学生更加深入地理解和掌握相关知识,提高语文综合素养。
二、教材概述本教材是小学语文二年级下册,主要包括课文、文言文、古诗词等多种文本类型。
通过学习这些文本,学生将会了解到不同形式和风格的语言表达方式,培养对语文的兴趣和理解能力。
三、主要内容1. 课文阅读本教材共包含十个单元,每个单元包括一个主题,涵盖了生活、自然、历史、文化等多个方面的内容。
通过阅读课文,学生可以了解不同领域的知识,培养对各种事物的观察和思考能力。
2. 语文知识点本教材涵盖了二年级下册的语文知识点,包括字词、句子、段落、语法等方面的内容。
通过学习这些知识点,学生可以提高语言表达的准确性和流畅度,培养对语文基础知识的掌握能力。
3. 阅读理解训练为了帮助学生提高阅读理解能力,本教材还包括了一些阅读理解训练题,通过阅读短文并回答问题,学生可以提高对文本的理解和分析能力,培养阅读的习惯和技巧。
4. 写作训练为了培养学生的写作能力,本教材还包括了一些写作训练题,通过对话、小作文等形式,让学生有机会进行写作实践,提高语言表达和写作技巧。
四、教学方法1. 情景教学法根据每个单元的主题,教师可以设计一些情景活动,让学生在真实情境中学习和运用语文知识,提高学生的学习兴趣和记忆能力。
2. 表演教学法通过剧本表演、角色扮演等形式,让学生在实践中体验语文的魅力,提高口语表达和语言表演能力。
3. 合作学习法通过小组合作学习,培养学生的团队合作精神和互助学习能力。
可以设计小组讨论、合作写作等活动,让学生通过合作获得更多的思维和学习资源。
4. 多媒体辅助教学利用多媒体资源,如图片、音频、视频等,增加教学内容的多样性,提高学生对语文的兴趣和理解能力。
五、教学评价根据每个单元的教学目标和内容,可以通过日常课堂表现、作业完成情况、阅读理解和写作训练的成绩等多个方面进行评价,全面了解学生的学习情况和进步。
三年级语文认识语文课是小学生学习的重要课程之一,尤其对于三年级学生来说,语文课程既是学习基础知识的开始,也是培养语文能力的关键时期。
在这篇文章中,我们将介绍三年级语文课的相关内容,包括课程目标、学习内容以及学习方法等,帮助孩子们更好地认识和学习语文。
一、课程目标三年级语文课程的主要目标是培养学生的阅读能力、写作能力、语言表达能力以及对文学作品的理解和欣赏能力。
在学习过程中,学生需要掌握基本的阅读技巧,能够正确理解课文的意思并进行分析;能够正确书写字母和汉字,形成良好的书写习惯;能够用正确准确的语言表达自己的想法和感受;能够读懂一些简单的文学作品,体验其中的情感和思想。
二、学习内容三年级语文课程的学习内容主要包括以下几个方面:1. 识字学习:学生需要学习掌握更多的汉字,了解字的结构和构造,并能正确书写。
教师可以通过教授常见的字词,培养学生的字意意识和书写能力。
2. 阅读理解:学生需要通过阅读各种形式的课文,理解课文的主题、情节和人物形象,从中学习语言表达的模式和技巧。
教师可以通过朗读、讲解课文,帮助学生理解并运用课文中的知识。
3. 写作训练:学生需要通过写作训练,提高自己的语言表达能力和思维逻辑能力。
教师可以从简单的句子开始,引导学生逐渐增加内容和难度,写出连贯清晰的文章。
4. 古诗文学习:学生需要学习一些简单的古诗文,了解其中的情感和意境,培养审美能力和文学素养。
教师可以通过赏析、默写等方法,帮助学生理解和记忆古诗文。
三、学习方法为了更好地完成语文学习任务,学生可以采用以下一些学习方法:1. 多读多练:语文学习需要不断的积累和练习,因此学生应该多读一些课外书籍、故事和诗歌,提高自己的阅读量和阅读速度。
同时,也需要多做一些练习题,加深对所学知识的理解和掌握。
2. 认真听讲:在上课过程中,学生应该认真听讲,做好笔记,及时解决自己的疑惑。
同时,也要积极参与课堂互动,提出自己的问题和观点。
3. 合理安排学习时间:学生需要合理安排自己的学习时间,保证每天有足够的时间用于语文学习。
2010年四年级人教版小学语文课本课本:2010年四年级人教版小学语文课本列表:1.课本内容简介2.阅读体验3.是非观点4.语言表达5.学习收获1.课本内容简介《2010年四年级人教版小学语文课本》是小学语文教材系列之一,是一本四年级学生必修的语文课本。
本书涵盖了中国传统文化、现代文化、科学知识、童话故事等丰富多彩的内容,以及重视学生思维训练和语文技能的培养。
同时,本书还注意与生活实际结合,以提升学生的学习兴趣和能力。
2.阅读体验阅读本书是一种愉悦的体验。
每一次翻开本书,都能够找到自己喜欢的内容,无论是看一些寓言故事、还是学习汉字知识,或是阅读一些小课文,都能带来乐趣和愉悦。
本书后附的课外读物,也是很有趣的,让学生在阅读中获得更多的知识。
3.是非观点本书所呈现的是非观点十分明确,比如在批判战争的同时,强调爱和和平是生命的保障;在重视科学技术的同时,也提醒学生要珍惜自然资源;在提倡诚实守信的同时,谴责欺骗行为等。
所有这些观点都是体现现代社会的精神文明和社会义务,深受学生喜欢和肯定。
4.语言表达本书注重培养学生的语言表达能力,在阅读中引导学生学习语言,从而提高语言修养和语文能力。
在小课文中,课文的文笔流畅,富有生活气息,给学生留下了深刻印象。
同时,每篇课文中都有大量的生词、短语和句式,激发学生学习的热情。
5.学习收获学生可以从本书中获得知识和收获。
从本书中学习课文,可以提高阅读和理解能力;从课外读物中,可以增加知识和文化的成效;从语文表达方面,可以提高语言形式、语言规范和语言能力,从而对学生的未来发展产生积极影响。
小学语文二年级下册引言:小学语文二年级下册是小学生学习语文的重要阶段之一。
在这一阶段,学生将进一步扩充词汇量,提高阅读能力,培养写作能力,并深入学习语法知识。
本文档将对小学语文二年级下册的教学内容进行介绍,包括课本内容、教学目标、教学方法等。
一、课本内容小学语文二年级下册的课本主要包括阅读课、诗词课、写作课和语言表达课等。
其中,阅读课旨在培养学生的阅读理解能力,包括理解课文意思、把握文章结构、推理猜测等。
诗词课则重点培养学生对诗词的欣赏能力,以及对诗词的理解和表达能力。
写作课则注重培养学生的写作能力,包括日记、小记、作文等。
语言表达课则围绕语法知识展开,让学生掌握一定的基础语法知识,提高语言表达能力。
二、教学目标小学语文二年级下册的教学目标主要包括以下几个方面:1. 提高阅读理解能力:培养学生对课文的理解能力,包括理解词语的意思、推理文章结构等能力。
2. 培养诗词欣赏能力:通过学习诗词,培养学生对文学的热爱,提高对诗词的欣赏和理解能力。
3. 提高写作能力:通过写日记、小记、作文等形式的写作,培养学生的写作能力,提升语言表达能力。
4. 掌握基础语法知识:通过语言表达课的学习,让学生掌握一定的基础语法知识,为进一步的语文学习打下基础。
三、教学方法在小学语文二年级下册的教学中,可以运用以下教学方法,帮助学生更好地学习和理解:1. 阅读教学方法:可以采用小组讨论、问题导向等方式,引导学生主动思考,提高阅读理解能力。
2. 诗词欣赏教学方法:可以通过朗读、赏析、模仿等方式,培养学生对诗词的感受和理解。
3. 写作教学方法:可以采用写作实践、写作示范等方式,帮助学生提高写作能力,培养语言表达能力。
4. 语法教学方法:可以通过讲解、练习、运用等方式,让学生理解和掌握语法知识。
四、教学资源在小学语文二年级下册的教学中,可以使用以下教学资源,增强教学效果:1. 教辅材料:可以选择合适的教辅材料,如练习册、辅助阅读书籍等,帮助学生巩固和拓展所学内容。
北师大版义务教育小学语文教材知识体系整理简介本文档整理了北师大版义务教育小学语文教材的知识体系,旨在帮助教师和学生更好地了解教材内容和主题。
教材概述北师大版义务教育小学语文教材是根据国家教育部的要求和教学大纲编写的。
它致力于培养学生的语言表达能力、阅读理解能力和文学欣赏能力。
教材内容涉及语文基础知识、阅读、写作、口语表达、联想拓展等方面。
教材知识体系教材知识体系主要包括以下几个方面:1. 语文基础知识:包括字词、句子、语段的认读与理解,语音、词语意义、常用句型等方面的掌握。
2. 阅读理解能力:培养学生对故事、文章、诗歌等文本的理解能力,包括主题概括、细节获取、推理判断等技巧。
3. 写作能力:培养学生的写作能力,包括议论文、记叙文、说明文等文体的写作,以及写作思路、结构和语言表达等方面的培养。
4. 口语表达:培养学生的口头表达能力,包括朗读、表演、演讲等方面的训练。
5. 联想拓展:通过对文本内容的联想与拓展,培养学生的想象力、创造力和批判思维能力。
教材特点北师大版义务教育小学语文教材具有以下几个特点:(请不要引用内容,以免引起法律纠纷)1. 内容丰富多样:教材内容涵盖了经典文学作品、现代散文、诗歌、小说等多种文本类型,丰富了学生的阅读体验。
2. 提供多元练:教材提供了丰富的练题和活动,帮助学生巩固知识、理解文本,提高语文水平。
3. 培养批判思维:教材注重培养学生的批判思维能力,在教学过程中引导学生深入思考,提出自己的见解和观点。
4. 强感教育:教材注重培养学生的情感体验和情感表达能力,通过文本的感染力激发学生的情感共鸣。
总结北师大版义务教育小学语文教材整理了丰富多样的知识内容,注重培养学生的语言表达能力、阅读理解能力和文学欣赏能力。
它的特点是内容丰富、练多元、注重批判思维和情感教育。
教师和学生可通过研究和运用这些知识,提高语文水平,培养综合素质。
---以上为对于北师大版义务教育小学语文教材知识体系的整理和总结,希望对您有所帮助。
人民教育出版社出版小学语文实验教科书简介(一)结构体系这套教科书在低年级着眼于对学生进行全面的语文启蒙教育,中、高年级则致力于全面提高学生的语文素养。
在编排上,避免烦琐,简化头绪,突出重点,加强整合。
一年级上册,从汉语拼音人手,结合汉语拼音的学习安排识字和读儿歌的内容。
汉语拼音之后是形式多样的识字课和内容丰富的课文。
口语交际和语文园地穿插其中。
从一年级下册开始,以专题组织单元,以整合的方式组织教材内容。
每册设八个专题,;分为八组。
每个专题内涵都比较宽泛,贴近儿童生活,体现时代特点,蕴涵教育价值,把知识、能力、方法、情感融为一体。
一年级下册和二年级上册中,每组包括导语、一课“识字”、四五篇课文和一个“语文园地”,各部分相互联系,构成一个有机的整体。
识字课形式多样,内涵丰富,意境优美,既便于学生识字,又便于学生积累语言。
“语文园地”包括四个栏目:“我的发现”——鼓励学生探究发现,掌握学习方法,低年级主要是发现识字的方法;“日积月累”——引导学生积累妙词佳句、优秀段篇;“口语交际”——与专题联系,在双向交流中培养学生的口语交际能力:“展示台”——给学生提供展示学习所得,特别是课外所得的舞台。
(二)主要特点1.教材内容——凸现时代特点和现代意识。
这套教科书中,新编选的课文占全部课文的一半以上,在继承人教版教材一贯的典范性标准的前提下,体现着鲜明的时代气息和丰富的文化内涵。
选文从儿童生活出发,从当代儿童的思想实际出发,充分反映儿童的经验世界和想像世界,反映信息社会所要求的现代意识。
例如:《借生日》,文中的小孩因为妈妈总把生日忘记,就要把自己的生日借给妈妈;《胖乎乎的小手》中,兰兰因为长辈喜欢自己的小手,就想用双手为大家做更多的事情。
完全是儿童的语言、儿童的想法,与儿童的心理没有丝毫距离。
又如:《赞美》中,小刺猬和小松鼠互相赞美,互相从对方的赞美中获得自信,体验快乐;《从现在开始》中,狮子想另选兽中之王接替自己,动物们最欢迎的是让大家“按照每个人自己喜欢的方式过日子”的小猴。
人教版小学语文教材1-6册体系结构特点《人教版小学语文一年级上册》简介新教材的编写着眼于提高学生的语文综合素养,注意培养学生的创新精神和实践能力,注重对学生进行思想品德教育和良好习惯的培养,力求促进每个学生的全面发展,为他们的终身学习、生活和工作奠定基础。
一、教材的编排这一册教材包括入学教育、汉语拼音、识字、课文四部分。
入学教育有四幅图,向学生进行爱学校、爱学习的教育。
“汉语拼音”13课,为便于巩固,将13课分为四组,每组之后安排一个复习。
“识字”全册共8课,分两次安排,每次学4课,独立成一组。
“课文”全册共20课,5课为一组,编成四组。
为了复习巩固所学内容,进行语文能力的培养,识字和课文后有练习题。
每组“识字”或每组“课文”后安排一个“语文园地”。
每个园地后安排一次“口语交际”,对学生进行听说训练。
书后有两个“生字表”。
“生字表(一)”是要求认识的字,“生字表(二)”是要求会写的字。
教材中还安排有大量的精美的图画。
图画是课本的重要组成部分,对一年级学生来说极为重要。
二、教材的特点1.综合性。
教材不但着力于提高学生理解和运用祖国语言文字的能力,丰富语文的积累,发展思维,使他们具有识字写字能力、阅读能力、口语交际能力,还重视提高学生的品德修养和审美情趣,提高学生的人文素养,加强情感、态度、价值观的培养,帮助学生形成良好的个性和健全的人格,促进德、智、体、美、劳的和谐发展。
2.科学性。
在教材中,各个部分、各个环节的安排,都注意遵循儿童学习语文的规律,重视培养学生的语文实践能力。
以识字和写字为例,本册教材突出识字这个重点,本着多认少写的原则,全册要求认字400个,写其中的100个。
认哪些字?应该是认最常用的、出现频率最高的字。
写哪些字?也应该科学。
应该是写笔画最简单、最常用的字。
从生字表(二)可以看出,所写的字绝大多数是独体字,笔画最多的不超过8画。
3.时代性。
教材大幅度更新内容。
主要体现时代的特点。
人教版小学一年级语文上册课本内容简介人教版小学语文一年级上册教材简介课程教材研究所小学语文课程教材研究开发中心义务教育课程标准实验教科书语文一年级上册》,是根据教育部课程改革的部署,以《全日制义务教育语文课程标准》为依据进行编写的。
新教材的编写着眼于提高学生的语文综合素养,注意培养学生的创新精神和实践能力,注重对学生进行思想品德教育和良好习惯的培养,力求促进每个学生的全面发展,为他们的终身学习、生活和工作奠定基矗下面从四个方面做介绍1.教材的编排2.教材特点3.教学目标与要。
4.教学内容与提示一、教材的编排这一册教材包括入学教育、汉语拼音、识字、课文四部分。
入学教育有四幅图,向学生进行爱学校、爱学习的教育。
汉语拼音13课,为便于巩固,将13课分为四组,每组之后安排一个复习。
识字全册共8课,分两次安排,每次学4课,独立成一组。
课文全册共20课,5课为一组,编成四组。
为了复习巩固所学内容,进行语文能力的培养,识字和课文后有练习题。
每组识字或每组课文后安排一个语文园地。
每个园地后安排一次口语交际,对学生进行听说训练。
书后有两个生字表。
生字表是要求认识的字,生字表是要求会写的字。
教材中还安排有大量的精美的图画。
图画是课本的重要组成部分,对一年级学生来说极为重。
二、教材特点1.综合性。
教材不但着力于提高学生理解和运用祖国语言文字的能力,丰富语文的积累,发展思维,使他们具有识字写字能力、阅读能力、口语交际能力,还重视提高学生的品德修养和审美情趣,提高学生的人文素养,加强情感、态度、价值观的培养,帮助学生形成良好的个性和健全的人格,促进德、智、体、美、劳的和谐发展。
教材内容的安排重点突出,加强整合注重情感态度和知识能力之间的联系,有助于学生语文素养的整体提高,在教材中汉语拼音、识字、写字、阅读、口语交际等方面的内容都不是孤立安排的,而是有计划地安排在一个有机的整体里,如汉语拼音第四课,要学的拼音字母是 d t n l 4个声母。
植物基因工程叶绿体遗传转化系统研究进展专业:植物姓名:战战学号:2010916254叶绿体遗传转化系统研究进展摘要:植物基因工程另一目标:叶绿体遗传转化。
本文介绍了叶绿体的简介;叶绿体基因及基因组;叶绿体遗传转化的原理和方法;叶绿体转化的优点;叶绿体遗传转化的表达载体构建的简介以及关于叶绿体遗传转化国内外研究新进展。
关键词:叶绿体遗传转化叶绿体基因组叶绿体基因表达载体近二十几年来核转化技术是植物基因工程的主要方法,培育出了高产、优质和抗逆性强的转基因新品种,取得了可喜成果。
然而,外源基因在转基因植物中表达效率低,表达不稳定,基因易失活和基因随即插入而造成的位置效应等是该方法的不足之处。
而且,转基因植物田间释放后,转基因随花粉转移到环境中,会造成“基因污染”,打破原有的生态种群平衡。
近几年,Losey等人的实验表明抗虫转基因玉米的花粉对非目的昆虫蝴蝶能产生毒害,这更加重了人们对转基因植物的担忧。
为减轻目的基因大量表达对植物造成的伤害,叶绿体基因工程成了人们新的关注焦点。
近年来的研究表明,将外源基因导入叶绿体基因组有望克服核转化中存在的弊端。
到目前为止,已在烟草、水稻、拟南芥、马铃薯和油菜5种植物中实现了叶绿体转化。
这一转化体系已开始成为植物基因工程中新的增长点。
l 叶绿体简介叶绿体是绿色植物光合作用的场所,来源于古代的衣藻类原核生物。
在高等植物的细胞中,细胞核叶绿体和线粒体都含有DNA,它们构成了既相对独立又相互联系的遗传系统。
以细胞核为外源基因受体的植物基因工程已被广泛地应用于重要农作物的改良。
但核基因转化仍存在一系列难以解决的问题,如细胞核基因组大、背景复杂;外源基因的表达效率低,后代不稳定;环境安全难以保证等。
为克服核基因转化存在的不足,1988年,Boynton等以衣藻为材料用基因枪进行源基因对叶绿体的转化,首次证实了叶绿体转化的可行性。
这项工作使人们意识到植物的叶绿体不仅是光合作用的重要场所,也可以作为植物基因工程的新的转化和表达受体叶绿体转化系统现已成为植物基因工程的新热点。
叶绿体转化系统研究进展1987年,自基因枪转化方法建立后,次年.Boynton等即利用该方法对衣藻的叶绿体用外源基因进行遗传转化,首次证明了植物叶绿体基因组可以被转化开始.目的基因导人叶绿体的方法一直作为研究重点除基因枪转化法外,还相继出现了一些新的将外源基因导人叶绿体的方法。
但是,一系列的实验结果证实,基因枪转化法仍是最有救的叶绿体转化方法。
叶绿体含有双链环状DNA(Manning,1971)有IRA和IRB两个反向重复序列(分别位于A链和B链),两者基因大小完全相同,只是方向相反,它们之间有一个大的单拷贝区(1arge single copy region,LSC),大小约80kb,和一个小的单拷贝区(small single copy region,SSC),大小约20kb。
多数叶绿体DNA 大小在120~160kb,最大2000kb(伞藻),最小85kb(刺海松)L1]。
叶绿体基因组中的基因在漫长的进化历程中,有许多转移到了核中,遗留在叶绿体中的基因是功能必需的一些基因,有巨大的拷贝数(一个叶绿体中,基因拷贝数可达上百个;一个细胞中,基因的拷贝数可达上万个),而且它们都是原核生物来源的,具有原核生物基因的特点叶绿体基因多为多顺反子转录单位,这些转录单位中基因的排列顺序是高度保守的。
最初,来自突变体的16s rRNA基因的壮观霉素抗性被作为筛选标记,但转化效率较低之后,Svab等选用编码壮观霉素和链霉素抗性的aadA基因作为筛选标记基因,在很大程度上克服了突变核糖体RNA筛选标记基因不易被检出的缺点,可将叶绿体转化率提高100倍,几乎达到核转化水平近几年,绿色荧蛋白(GYP)作为筛选标记应用于这一领域大大方便了筛选过程。
GFP基因的表达产物存在于植物细胞质中时,会对其表型及生殖产生一定影响,但定位于叶绿体后,即使大量表达,受体植物也不会出现明显不良反应,这表明GYP适用于叶绿体转化系统。
最近,Bateman等提出aphA-6基困编码的氨基糖苷磷酸转移酶可作为叶绿体转化筛选标记。
这些新的筛选标记的出现,使叶绿体转化受体植物范围扩大至一些因无合适组织培养筛选标记而不能进行叶绿津转化的植物,为其广泛应用打下了基础目前.叶绿体转化的植物种类也有所扩展,在高等植物中,除已获得稳定的转基因烟草植株外,还获得了在植物叶绿体中稳定表达GFP基因的转基因水稻、马铃薯植株。
2 关于叶绿体基因组和叶绿体基因叶绿体是绿色植物进行光合作用重要细胞器,同时是一个半自主性的细胞器,含有自己的DNA分子,能进行自我复制。
大部分叶绿体DNA都是共价闭合的双链环状分子。
少数为线状分子。
叶绿体DNA分子一般长为120~160kb。
每一叶绿体中一般含有多拷贝DNA,但拷贝数不等,据报道在20~9OO之间。
DNA分子存在于叶绿体基质中。
常以10—20个分子聚成一簇,与叶绿体的内膜或类囊体膜结合。
叶绿体中的DNA约为片中全部DNA的10%~20%。
叶绿体基因组不仅比核基因组小得多,就连大肠杆菌染色体基因组也要比它大出10余倍甚至20多倍。
这无疑给叶绿体基因的克隆与遗传操作带来许多方便。
另外大多数植物的叶绿体DNA都有一个突出的特点。
即环状DNA分子上均存在两个反向重复序列(inverted repeat sequence)IAA和IRB。
两个反向重复序列之间有一个大单拷贝区(1arge single—copy region,LSC)和一个小单拷贝区(small single—copy region,SSC),前者一般长约80kb,后者长约20。
豌豆和蚕豆等植物的叶绿体DNA中则没有反向重复序列。
3 叶绿体遗传转化的原理叶绿体遗传转化的概念叶绿体遗传转化即以叶绿体基因组为外源DNA受体的一种遗传转化。
叶绿体遗传转化的基本原理外源基因通过同源片段的双交换,定点整合到叶绿体基因组中4 叶绿体遗传转化的方法目前,叶绿体的遗传转化技术主要有:①基因枪法;②玻璃珠搅拌法;③紫外激光微束法:④PEG处理法;⑤气溶胶基因导入法等。
但除基因枪法外,其余几种方法转化效率很低。
基因枪法[即以外力驱动包裹有外源DNA的金属微粒(金粉或钨粉),使其获得高速而冲击植物材料,从而把外源DNA导入叶绿体1因其安全性好、重复性好、残留在细胞上的有毒金属颗粒少、转化频率高而成为最成功的叶绿体遗传转化法。
但由于基因枪是一种相当昂贵和复杂的仪器,一般实验室很难具备,因此通过离体叶绿体体外转化和细胞融合技术实现植物的转化因其廉价、简单可行而成为可能。
而叶绿体的体外培养使其保持一定时间的活性是通过原生质细胞融合技术进行叶绿体转化的一个重要环节。
5 叶绿体转化的优点叶绿体作为遗传转化受体具有诸多方面的独特性:高拷贝的叶绿体DNA分子可以提高外源基因的表达量:可以做到外源基因的定点整合;外源基因性状稳定快:直接表达原核基因;利于同时进行多基因转化;产物区域化;生物安全性高。
6 叶绿体遗传转化的表达载体的构建要实现外源基因在叶绿体基因组的整合及有效表达,载体的构建方法与细胞核表达载体有所不同。
1)利用同源重组片段实现定点整台2)利用叶绿体特异的启动子和终止子实现基因表达3)利用筛选标记基因实现叶绿体基因组的同质化4)已在叶绿体中实现表达的外源目的基因高等植物中的叶绿体转化豫了在模式植物烟草已有许多报道获得了稳定的转基因植株以外,在拟南芥、水稻和马铃薯分别只有一倜研究报道,叶绿体遗传转化研究工作在我国还雕刚开始。
Kota等认为,限制高等植物叶绿体转化的主要瓶颈,是大多敷植物的叶绿体基因组序列不清楚,因此无法确定用于载体掏建的同潦重组片段和外糠基因的插入位点。
Daniell等构建的通用载体无疑为这一问题的解决提供了方便。
最近,侯丙凯等参考烟草的叶绿体基因组序列,从油菜叶绿体基因组克隆得到rps7和ndhB基因,发现这两个基因在油莱中也是相互毗邻的,并由此构建了适于油菜叶绿体转化的表达载体。
应用此表达载体进行转化,已成功地将杀虫蛋白基因定点插入油菜的叶绿体基因组中(有关转化结果已投稿),这一工作对于叶绿体基因组序列束知的植物(包括经济作物)如何构建载体和进行遗传转化提供了重要参考。
叶绿体遗传转化技术的发展前景是诱人的,目前已开始引起国内许多学者的关注相信在科学工作者的不懈努力下,这一技术将为遗传工程带来新的生机与活力,也将更广泛地应用到叶绿体基因组研究和重要农作物的遗传改良中7 国内外研究现状7.1 国际研究现状 1962年Ris和Plaut利用电镜首次证明叶绿体中含有DNA;最早有关叶绿体转化的报道是离体叶绿体的转化;1987年基因枪转化法确立使叶绿体植物体转化成为可能;1988年Boynton利用基因枪法。
用带有atpB野生型基因的叶绿体DNA直接轰击3个含atpB突变型基因的衣藻细胞,使其完全恢复了光合能力,证明植物叶绿体基因组可以被转化:1990年.外源基因首次于高等植物叶绿体中获得瞬间表达:其后,Ye等又对所创建的轰击转化系统进行改进,建立了一种较为有效的叶绿体转化方法。
至目前为止,有多种目的基因构建在叶绿体表达载体中并被转入叶绿体基因组,结果发现这些基因均能获得已高水平表达1)杀虫蛋白基因在叶绿体基因组中的表达在已有的关于叶绿体表达载体构建和转化研究中。
以转移杀虫蛋白基因的报道最多。
例如:McBride等首次将Bt crylA(c)杀虫蛋白基因转入烟草叶绿体。
Bt毒蛋白的表达量可达到叶子总蛋白的3%一5%:Kota等将BtcrylAa2基因转入烟草叶绿体.也发现毒蛋白在烟草叶子中表达量很高。
转基因烟草对具有330~390倍Cry2Aa2抗性的烟青虫、棉铃虫和甜菜蛾表现出100%毒杀作用。
2) 抗除草剂基因在叶绿体基因组中的表达Daniell等首次将抗除草剂基因(草甘膦)的5一烯醇式丙酮酸莽草酸一3磷酸合酶基因(EPsPs)转入烟草叶绿体.获得的转化体对除草剂的抵抗力提高了十倍.并且不会出现“基因逃逸”现象。
3) 作为“生物反应器”生产药用蛋白由于叶绿体可超量表达外源蛋白,植物的叶绿体有可能成为工业用酶或药用蛋白等产品的“生物反应器”。
例如:具有多种医用价值的多肽药物“GVGVP”已在烟草叶绿体中得到了超常量表达,其表达量为细胞核表达的100倍。
美国孟山都公司蛋白质技术研究所的Stawb等人报道。
经外源基因转化的叶绿体具有较高的生产重组蛋白的能力。
他们利用烟草叶绿体成功地表达了有生物学活性的人生长激素,而且表达量占可溶性蛋白7.0%。
比细胞核转化高300倍。
4) 光合调控基因的研究叶绿体的主要功能是光合作用,通过叶绿体转化,改变或替换与光合作用调控有关的基因,可望增强作物的光合效率,提高产量。