培养基及培养基灭菌设备
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组织培养过程中所用到的用具在植物组织培养过程中,使用的用具类型多样,如培养基配置用具、培养用具、接种用具等。
在使用这些用具时,必须了解它的基本用途并学会它们的基本用法。
1、培养基配置用具(1)烧杯用于盛放、溶解化学药剂等,常用的规格有50ml、100ml、200ml、250ml、500ml、1000ml等。
(2)容量瓶用于配制标准溶液,常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml 等。
(3)量筒用于量取一定体积的液体,常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml等。
(4)刻度移液管用于量取一定体积的液体,常用的规格有1ml、5ml、10ml、20ml等。
(5)吸管用于吸取液体,调节培养基的pH值及溶液定容时使用。
(6)玻璃棒用于溶解化学药剂时搅拌时用。
2、培养用具(1)试管植物组织培养中常用的一种玻璃器皿,适合少量培养基及实验不同配方用。
选用1.0cm*15cm和3.0cm*20cm规格的试管。
(2)三角瓶植物组织培养中常用的培养容器,适合各种培养,如固体培养或液体培养,大规模或一般的少量培养。
规格有50ml、100ml、150ml、200ml、500ml等,其口径均为25mm。
三角瓶的好处是采光好,瓶口较小不易失水。
3、接种用具(1)酒精灯用于金属接种工具的灭菌。
(2)手持喷雾器盛装70%的酒精,用于接种器材、外植体和操作人员手部等的表面灭菌。
(3)镊子使用于转移外植体和培养物,接种操作及继代培养时移取织物材料用。
(4)剪刀用于剪取外植体材料及接种时用。
3、小型器具移液枪用于配制培养基时添加各种母液及吸取定量植物生长调节物质溶液。
有固定式和可变式两种,规格有25、100、500、1ml、5ml、10ml。
微波炉、电炉等加热器具用于加热生化试剂时,溶解琼脂。
4、仪器(1)酸度计植物组织培养基的pH值的调整十分重要。
因此,配制培养基时,需要用酸度计来测定和调整pH值。
实验一微生物学实验室常用仪器和设备实验目的主要了解微生物学实验室常用的仪器和设备。
一、火焰灯火焰灯是接种工具灭菌及试管等物品无菌化处理的必备器材。
酒精灯、煤气灯是较理想的接种环灭菌器材,火焰的大小可根据需要自行调节。
火焰柱可分为两层:外焰和内焰。
外焰由于接触氧气丰富,热度很高,所以烧灼接种环或物品时应使用外焰。
近年来,市场上有电热接种环灭菌器,使用比较安全,特别适于结核杆菌实验操作。
二、接种工具可以分为接种环和接种针两类。
接种环用来挑取标本、菌液及划菌落涂平板等,直径一般为2~4mm,也可依需要自定。
接种针则用来挑取单个菌落,穿刺高层琼脂等。
为了适应不同的需要,接种器可以做成各种形式(见图1-1)图1-1细菌接种工具(有环者为接种环或称白金耳,无环者为接种针或称白金针)三、显微镜显微镜用于观察某些病原微生物和人体寄生虫的形态(包括病毒包涵体形态)。
一般的光学显微镜就可满足常规要求,其目镜常用5×、8×、10×,物镜常有10×、40×和100×(油镜),细菌和某些寄生虫虫卵等检验常用油镜,应注意保护油镜头。
有条件的实验室还可装备暗视野显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜、甚至能观察病毒等形态的电子显微镜。
四、温箱温箱是进行细菌培养的基本设备,可调控温度范围一般在20℃~60℃,其容积可根据实际要求进行选择,温箱有隔水式和非隔水式两种类型。
培养一般的细菌时,温箱的温度应定在37℃。
温箱应由控温仪进行温度控制,以避免由于温箱偶然升温使细菌死亡,或发育受影响。
另外,温箱也可依需要设定其它温度,如26℃、43℃等。
五、CO2培养设备用于分离和培养需要CO2气体才能生长的病原微生物。
市售专用的CO2培养箱但对于常规实验室来说成本太高,一般用蜡烛罐亦可满足要求以真空干燥罐、标本缸、甚至厌氧培养罐作为蜡烛罐,将接种的平板和试管放在罐内,然后放入点燃的蜡烛,再将罐盖盖好并用凡士林密闭,待蜡烛耗尽罐内的氧气,自行熄灭,即达到了所需的5~10%的CO2浓度。
灭菌柜工作原理灭菌柜,也叫外科手术室灭菌柜,是一种能够对实验室器材、培养基、药品等物品进行高温高压灭菌的设备。
常见的灭菌柜包括蒸汽灭菌柜和干热灭菌柜。
一、蒸汽灭菌柜的工作原理:蒸汽灭菌柜是一种利用高温高压蒸汽对物品进行灭菌的设备。
下面是它的工作原理:1.准备:在灭菌前,需要将要灭菌的物品彻底清洗,并使其表面干燥,以便蒸汽能够渗透到每个角落中。
2.填水:蒸汽灭菌柜的水箱要保持足够的水量,以达到所需的蒸汽灭菌压力。
3.装载:将物品放置到灭菌柜的送风口处。
要注意放置的位置应该均匀,以便蒸汽能够充分渗透到每个物品中。
4.开始:装好物品以后,关闭灭菌柜的门,按照操作手册的要求,启动灭菌柜。
蒸汽将自动进入灭菌柜,压力也将逐渐上升。
5.等待:当灭菌柜达到预设温度和压力时,持续时间要根据要灭菌的物品和规格确定。
灭菌完成后,打开灭菌柜的放气阀,缓慢地降低压力,避免物品受到剧烈的温度变化影响。
二、干热灭菌柜的工作原理:干热灭菌柜是利用高温高能量的干热对物品进行灭菌的设备,适用于一些特殊的物品,比如玻璃面板、电路板等。
1.干热杀菌:可以在高温干热下通过氧化、脱水反应杀灭病菌,半导体器件也能在不使用水的情况下杀菌。
2.精准控制:采用先进的触摸式程序炉控系统和车间温度传感器,使温度、时间和湿度均可实现PLC Microcomputer智能控制。
3.无需补充水分:在杀菌期间不涉及液体或蒸汽因无需补充或去除,消除了对于水分的要求。
4.电子双回路控制技术:在高温杀菌时,精确控制温度、时间及湿度,实现最优化灭菌效果。
总的来说,不管是蒸汽灭菌柜还是干热灭菌柜都是基于高温、高压或高能量的杀菌原理,使得病菌、细菌不能在高温下生存,从而起到完全杀菌的效果。
灭菌柜广泛应用于医疗、实验室、医药科研、食品加工等各个领域,为人类的健康和安全提供了可靠的保障。
培养基和培养皿的灭菌方法一、前言在微生物学和生物学实验中,培养基和培养皿的灭菌是非常重要的步骤。
如果没有彻底灭菌,会导致实验结果不准确甚至失败。
因此,本文将介绍培养基和培养皿的灭菌方法。
二、材料准备1. 培养基:选择合适的培养基,根据需要添加相应的试剂。
2. 培养皿:选择合适的大小和形状,根据需要选择不同种类的培养皿。
3. 灭菌设备:可以使用高压蒸汽灭菌器、紫外线灯或者烘箱等设备进行灭菌。
4. 灭菌液:可以使用75%乙醇或者84消毒液等消毒液进行表面消毒。
5. 其他材料:酒精棉球、无尘纸巾等。
三、高压蒸汽灭菌法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿,并放入高压蒸汽灭菌器中。
2. 根据设备说明书设置温度和时间,一般为121℃,15-20分钟。
3. 开始启动高压蒸汽灭菌器,等待灭菌完成。
4. 灭菌完成后,关闭高压蒸汽灭菌器,等待冷却。
5. 取出培养基和培养皿,注意不要碰触到未消毒的表面。
6. 使用酒精棉球擦拭外部表面,避免污染。
四、紫外线灭菌法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿,并放入紫外线灯下。
2. 打开紫外线灯,照射15-30分钟。
3. 灭菌完成后,关闭紫外线灯。
4. 取出培养基和培养皿,注意不要碰触到未消毒的表面。
5. 使用酒精棉球擦拭外部表面,避免污染。
五、烘箱灭菌法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿,并放入烘箱中。
2. 根据需要设置温度和时间。
一般为160℃,2小时或180℃,1小时。
3. 开始启动烘箱,等待灭菌完成。
4. 灭菌完成后,关闭烘箱并等待冷却。
5. 取出培养基和培养皿,注意不要碰触到未消毒的表面。
6. 使用酒精棉球擦拭外部表面,避免污染。
六、表面消毒法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿。
2. 使用酒精棉球或者喷雾器喷洒75%乙醇或84消毒液等消毒液进行表面消毒。
3. 等待消毒液挥发干燥后,即可使用。
七、注意事项1. 在进行灭菌前,必须确保培养基和培养皿的外部表面已经清洁干净。
2. 在进行灭菌时,必须按照设备说明书上的要求设置温度和时间,并确保设备正常运行。
实验一培养基的配制及灭菌培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
各类微生物对营养的要求不尽相同,因而培养基的种类繁多。
在这些培养基中,就营养物质而言,一般不外乎碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等几大类。
培养基的配制,一是要求在营养成分上能满足所培养微生物生长发育的需要,二是培养基在使用前不带菌,三是以灭菌后和保存过程中营养成分不发生变化。
培养基的灭菌通常在培养基配制后进行,其目的是杀灭培养基中残存的微生物或活的生物残体,保证培养基在贮存过程中不变质,也防止其他生物对培养的污染。
一、实验目的1.掌握实验室常用玻璃器皿的清洗、干燥和包扎方法。
2.明确培养基的配制原理。
3.掌握配制培养基的一般方法和步骤。
4.了解湿热和干热灭菌的原理,并掌握有关的操作技术。
二、实验原理灭菌是指杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽孢的过程。
消毒是指用物理、化学或生物的方法杀死病原微生物的过程。
灭菌的原理就是使蛋白质和核酸等生物大分子发生变性,从而达到灭菌的作用,实验室中最常用的就是干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固缓慢。
因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度高(160~170℃),时间长(1~2h)。
但干热灭菌温度不能超过180℃。
否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧。
高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌器内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在同一温度下,湿热的杀菌效力比干热大。