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还原糖脂肪蛋白质的鉴定教学目的初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
实验原理1．可溶性还原糖+本尼迪特试剂→（浅蓝-棕-）砖红色沉淀呈色反应 2．脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色（+苏丹Ⅳ染液→红色）3．蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应实验程序一、可溶性还原糖的鉴定选材：含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。
制浆制备组织液过滤（用一层纱布）取液呈色反应结论：可溶性还原糖与本尼迪特试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。
关键步骤：水浴加热。
二、脂肪的鉴定取材：花生种子（浸泡3-4小时）将子叶削成薄片（1）最理想的薄片（2）在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液（2-3min）制片（3）去浮色（4）制成临时装片观察：在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。
结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。
关键步骤：子叶削成理想薄片。
三、蛋白质的鉴定选材与制备组织样液：卵清或黄豆（浸泡1-2d）呈色反应结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
关键步骤：先加试剂A再加试剂B。
实验的注意事项1．还原性糖：分子中含有醛基的糖。
如葡萄糖、果糖、麦芽糖。
但是蔗糖不是。
2．双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（0．1g/ml的NaOH溶液），造成碱性的的反应环境后，再加试剂B（0．01g/ml的CuSO4溶液）。
否则，紫色会被Cu(OH)2的蓝色遮蔽。
实验二生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定班级姓名【同类题库】1．在还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，最佳的一组实验材料是①甘蔗的茎②油菜子③花生种子④梨⑤甜菜的块根⑥豆浆⑦鸡蛋清A．④⑦⑥ B．⑤①⑦ C．①②⑥ D．④③⑥2．从某生物体细胞中提取出物质A和B，分析其化学元素组成：A中主要含有C、H、O、N 等元素，B 中主要含有C、H、O、N、P等元素。
A与双缩脲试剂会产生颜色反应，B则易被碱性染料染成深色。
由此推断：A物质是，B物质是。
3．用本尼迪特试剂鉴定可溶性还原性糖时，溶液的颜色变化过程为A．浅蓝色→棕色→砖红色 B．无色→浅蓝色→棕色C．砖红色→浅蓝色→棕色 D．棕色→绿色→无色4．在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择，叙述错误的是A．甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定B．花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料C．大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料D．鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料5．鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是A．本尼迪特试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水6．（多选）鉴定脱脂淡．奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是A．本尼迪特试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水7．下列能与本尼迪特试剂反应生成砖红色沉淀的是①葡萄糖②果糖③蔗糖④麦芽糖⑤淀粉⑥纤维素A．①②⑤ B．②③④ C．①⑤⑥ D．①②④8．下列物质中，与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应最明显的是A．苹果组织样液 B．豆浆 C．浸软的油葵种子 D．马铃薯组织样液9．根据“生物组织中还原性糖的鉴定”的实验原理，设计一个鉴定淀粉酶对淀粉具有消化作用的实验。
生物实验生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验目的初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
二、实验原理1.还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。
它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基)，因此叫做还原糖。
蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。
本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。
Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
其反应式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHO H)4—COOH+Cu2O↓+2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
2.蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01g/mL(B)的硫酸铜溶液。
在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
3.脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色三、实验过程(见书P18)四、实验用品(见书P18)五、注意1.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。
注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1．实验原理可溶性糖中的还原糖（葡萄糖、果糖）与斐林试剂作用生成砖红色沉淀；脂肪被苏丹Ⅲ溶液或苏丹Ⅳ溶液染成橘黄色或红色；蛋白质与双缩脲试剂发生作用，能产生紫色反应。
2．材料用具做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量高，颜色为白色或近于白色的植物组织，以苹果、梨为最好，使实验效果明显；做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪含量高的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3~4 h；做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1~2 d的黄豆种子（或用豆浆），或用蛋清（必须稀释10倍后再使用）。
3．实验试剂由质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液刚配制而成的斐林试剂；苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ溶液；双缩脲试剂。
4．实验过程可溶性糖的鉴定：注意：蛋白质的鉴定在试剂使用上与还原糖鉴定不同的是，先加入质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液，造碱性环境，观察颜色变化后再加入3~4滴质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液，而不是混合使用。
讨论：（1）用斐林试剂鉴定可溶性糖（还原糖）时，溶液的颜色变化为什么是浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）？（提示：棕色为浅蓝色与砖红色的混合色）（2）鉴定可溶性还原糖试验中，苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的颜色反应最明显的是哪一种？（提示：经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜）在［实验1］生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但两者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同。
斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05 g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1 g/mL,CuSO4的浓度为0.01 g/mL。
（2）使用原理不同。
斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。
（3）使用方法不同。
实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
1．生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖.前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有,为非还原糖.实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。
可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
如:葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色）+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫（红）色(支链）。
2．脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理，适当提高温度（37℃—60℃）对组织切片染色效果是有好处的.脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定·实验指导（攻关不畏难）一．目的要求：1、初步掌握鉴定是生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的基本方法；2、识记鉴定所用材料、试剂、仪器，懂得选材的要求；3、能熟练使用低倍镜，制作徒手切片、临时装片，了解规范使用显微镜的方法；4、理解实验的目的、原理和方法步骤，进一步归纳出生物组织中可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定原理。
二．材料用具1、实验材料：1）做还原糖的鉴定，应该选择含糖量较高、颜色为白色的植物组织，以苹果、梨为最好。
2）做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3—4h。
3）做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1—2d的大豆种子（或用豆浆），或用鸡蛋蛋白。
2、仪器和试剂：1）仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。
2）试剂：斐林试剂（主要由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，）苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂，体积分数为50%的酒精溶液，蒸馏水。
三．实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有机化合物产生特定颜色的反应。
1、可溶性还原糖的鉴定原理：可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖）与斐林试剂发生作用，可以生面碳红色沉淀，斐林试剂实际是Cu2+的碱性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，Cu2+则被还原成硕红色的Cu2O沉淀，反应式为：CH2OH—（CHOH）4—CHO+2Cu（OH）2CH2OH—（CHOH）4—COOH+Cu2O +2H2O 用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液颜色变化过程为：浅蓝色棕色2、脂肪鉴定原理：脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色），苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大，当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹Ⅲ生进入脂肪中，将脂肪染成橘黄色。
