实验六检测还原糖
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实验五纤维素酶活力测定(3,5-二硝基水杨酸法)实验六3,5-二硝基水杨酸法测还原糖姓名:周超同组者:刘炳煜班级:11级生命基地学号:201100140067【实验目的】1、学习用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖的方法2、学习用3,5-二硝基水杨酸法测定纤维素酶活力【实验原理】1、3,5-二硝基水杨酸法测纤维素酶活力的原理纤维素酶水解纤维素,产生纤维素二糖、葡萄糖等还原糖,能将3,5-二硝基水杨酸中硝基还原成橙色的氨基化合物,利用比色法测定还原物生成量来表示酶的活力。
2、3,5-二硝基水杨酸法测还原糖的原理还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈橘红色,在540nm处有最大吸收,在一定的浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可以测定样品中还原糖的含量。
【实验材料】一、器材比色管、水浴锅、电炉、分光光度计、容量瓶100ml、烧杯、移液枪二、试剂1、标准葡萄糖溶液(1.0mg/ml):准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg,溶于蒸馏水并定容至100ml,混匀,4°C 冰箱中保存备用。
2、3,5-二硝基水杨酸试剂:称取10克3,5-二硝基水杨酸,溶入蒸馏水中,加入20克分析纯氢氧化钠,200克酒石酸钾难,加水500毫升,升温溶解后,加入重蒸酚3克,无水亚硫酸钠0.5克。
加热搅拌,待全溶后冷却,定容至1000毫升。
存于棕色瓶中,放置一周后使用。
3、0.1摩尔PH4.5醋酸-醋酸钠缓冲溶液4、0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)水溶液,溶解后成胶装液,静置过夜,使用前摇匀。
5、西瓜汁6、酶液(10ug/ml)【实验步骤】一、纤维素酶活力测定(3,5-二硝基水杨酸法)1、标准曲线的绘制:分别吸取0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升的葡萄糖于6支试管中(分别记为1,2,3,4,5,6),均用蒸馏水稀释至1毫升,加3,5-二硝基水杨酸显色剂3毫升,在沸水浴中煮沸显色10分钟,冷却,加蒸馏水定容至25毫升,摇匀。
一、实验目的1. 理解还原糖的概念及其在生物体内的作用。
2. 掌握还原糖检测的原理和方法。
3. 通过实验操作,加深对还原糖检测原理的理解。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,包括单糖和含有游离醛基的二糖。
在碱性条件下,还原糖能够将斐林试剂中的Cu2+还原为Cu+,形成砖红色的Cu2O沉淀。
本实验采用斐林试剂检测还原糖,通过观察溶液颜色变化来判断样品中还原糖的存在。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:苹果、梨、白萝卜等富含还原糖的植物组织。
2. 实验仪器:试管、酒精灯、烧杯、滴管、电子天平、50~65℃温水浴锅、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备样品:取适量苹果、梨、白萝卜等植物组织,切成小块,用组织捣碎机捣碎,过滤取滤液。
2. 配制斐林试剂:将斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀,现配现用。
3. 取样:取2mL待测组织滤液于试管中。
4. 添加斐林试剂:向试管中加入1mL斐林试剂。
5. 加热:将试管放入盛有50~65℃温水的烧杯中,水浴加热约2min。
6. 观察颜色变化:观察试管中溶液的颜色变化,记录结果。
五、实验结果与分析1. 实验结果(1)苹果组织滤液:加入斐林试剂后,溶液颜色由浅蓝色变为砖红色沉淀。
(2)梨组织滤液:加入斐林试剂后,溶液颜色由浅蓝色变为砖红色沉淀。
(3)白萝卜组织滤液:加入斐林试剂后,溶液颜色由浅蓝色变为砖红色沉淀。
2. 实验分析根据实验结果,苹果、梨、白萝卜等植物组织滤液在加入斐林试剂后均出现砖红色沉淀,说明这些植物组织中富含还原糖。
通过本实验,我们掌握了还原糖检测的原理和方法,加深了对还原糖在生物体内作用的理解。
六、实验总结1. 通过本实验,我们了解了还原糖的概念、性质和在生物体内的作用。
2. 掌握了还原糖检测的原理和方法,学会了使用斐林试剂检测还原糖。
3. 通过实验操作,提高了我们的实验技能和观察能力。
4. 本实验具有一定的实践意义,有助于我们更好地理解生物学知识。
5. 在实验过程中,需要注意以下几点:(1)实验操作要规范,避免交叉污染。
滴定法还原糖含量测定一、实验目的:1、学习和掌握滴定法测定还原糖含量的原理和方法;2、加深对还原糖的特性和测定方法的理解。
二、实验原理:还原糖是具有还原性的单糖和少量的异构体,在碱性条件下能够将还原剂还原为氧化剂,自身被氧化为相应的酸,色变反应用铜离子与氧化的还原糖生成沉淀,滴定沉淀的含量,即可测定还原糖的含量。
三、实验步骤:1、将样品粉碎成细粉末,取 1-2 g由蒸馏水稀释10倍后摇匀并过滤备用。
2、用蒸馏水润洗紫色过滤棉,收集过滤液和洗涤液。
3、取滤液 10.00 mL,加入 1.00mL Fehling's溶液A 和 1.00mL Fehling's溶液B,放在沸水中加热,不停搅拌,约5min后,还原糖会发生反应并生成一种棕色沉淀。
4、用蒸馏水洗涤收集沉淀,连同过滤棉和洗涤液,用蒸馏水冲洗至洗涤液的体积为20.00mL,加入几滴醋酸作为指示剂。
5、转移到滴定管中,用标准 0.1mol/LNaOH滴定至棕色沉淀消失,取得滴定值(V)。
6、根据实验公式计算出还原糖的含量,(含量% =vx1000x正碘量(g)/样品重量(g)*100%)四、实验注意事项:1、取样品后样品应粉碎成细粉末,以充分增加其溶解和反应速率。
2、Fehling's溶液A&B混合后容易发生氧化,必须在使用前彻底振摇,如果出现沉淀就不能使用。
3、滴定前一定要冷却至室温。
4、掌握并准确使用橡胶头滴定管,滴定过程中尽量不要挥霍溶液,避免误差。
五、实验测定数据及处理:还原糖含量公式还原糖含量%=(V*0.1*60.08*1000*100)/m其中,0.1为NaOH标准溶液浓度(M),60.08为还原糖摩尔质量,1000为体积单位的转换(溶液为毫升,要转化为升),100为计算单位的转换(要转化为百分数)。
本实验样品用量为2g,测得滴定值为(所用NaOH溶液为0.1mol/L)一二三平均滴定体积 (mL) 26.15 25.90 26.05 26.03平均滴定体积(V)=26.03 mL六、实验结论:本实验利用滴定法对糖含量进行测定,实验结果显示,样品中还原糖含量为0.7865%,满足实验要求。
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类,它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子,生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液(含CuSO₄的碱性溶液)和斐林B液(含NaOH的碱性溶液)组成,两种试剂混合后,Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂:- 斐林A液:称取硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)0.1g,溶于100mL水中,加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液:称取NaOH 2g,溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液:准确称取葡萄糖1.0000g,溶于1000mL水中,配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液:取一定量的待测样品,用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器:- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液:准确移取1mL标准葡萄糖溶液,加入9mL蒸馏水,配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂:将斐林A液和斐林B液等体积混合,立即使用。
3. 取一支试管,加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂,混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管,观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6,制作标准曲线。
8. 根据标准曲线,计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标,沉淀颜色深浅为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算:根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅,在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中,斐林试剂需现配现用,以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子,影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内,以免沉淀颜色过深,影响准确度。
一、实验目的1. 掌握还原糖的测定原理和方法。
2. 学习使用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖浓度。
3. 培养实验操作能力和数据分析能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,如葡萄糖、果糖、半乳糖等。
在碱性条件下,还原糖可以将3,5-二硝基水杨酸还原成棕红色的化合物,该化合物在540nm波长处有最大吸收。
在一定浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系。
因此,通过测定样品在540nm波长处的光吸收值,可以计算出还原糖的浓度。
三、实验材料1. 试剂:3,5-二硝基水杨酸、氢氧化钠、苯酚、亚硫酸钠、酒石酸钾钠、葡萄糖、蒸馏水。
2. 仪器:可见分光光度计、电子天平、真空干燥箱、数显恒温水浴锅、离心机、移液器、枪头、500mL容量瓶、试管、500ml烧杯、1000ml烧杯。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制(1)配制葡萄糖标准溶液:准确称取0.1g葡萄糖,溶解于100mL蒸馏水中,配制成1mg/mL的葡萄糖标准溶液。
(2)取6个试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL的葡萄糖标准溶液。
(3)向每个试管中加入1.0mL 3,5-二硝基水杨酸溶液,摇匀。
(4)将试管置于水浴锅中,加热煮沸5分钟。
(5)取出试管,冷却至室温。
(6)使用可见分光光度计,在540nm波长处测定吸光度。
(7)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品还原糖浓度的测定(1)准确称取一定量的样品,溶解于蒸馏水中。
(2)取6个试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL的样品溶液。
(3)按照标准曲线绘制步骤,测定吸光度。
(4)根据标准曲线,计算出样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制根据实验数据,绘制标准曲线如图1所示。
图1 葡萄糖标准曲线2. 样品还原糖浓度的测定根据标准曲线,计算出样品中还原糖的浓度为X mg/mL。
六、讨论1. 实验过程中,样品的称量、溶液的配制、吸光度的测定等步骤要准确无误,以保证实验结果的准确性。
高中生物教材六个检测类实验以下是高中生物教材中的六个检测类实验的范例,供您参考:一、实验一:生物组织中还原糖的检测1. 实验原理:利用斐林试剂与还原糖在水浴加热的条件下产生砖红色沉淀的原理。
2. 实验材料:苹果、梨、白色甘蓝叶等。
3. 实验步骤:制备组织样液→加斐林试剂(甲液和乙液等量混合均匀后再加入样液中)→水浴加热→观察颜色变化。
4. 实验结果:如果出现砖红色沉淀,说明样液中含有还原糖。
二、实验二:生物组织中脂肪的检测1. 实验原理:利用脂肪可以被苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染成橘黄色或红色的特性。
2. 实验材料:花生种子(取子叶)、甜菜等。
3. 实验步骤:制作临时装片→染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴)→洗去浮色(用50%酒精洗去浮色)→制作装片→镜检观察。
4. 实验结果:橘黄色脂肪颗粒。
三、实验三:生物组织中蛋白质的检测1. 实验原理:蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
2. 实验材料:豆浆、鸡蛋清、牛奶等。
3. 实验步骤:制备组织样液→加双缩脲试剂(先加A液1mL,再加B液4滴)→观察颜色变化。
4. 实验结果:如果出现紫色反应,说明样液中含有蛋白质。
四、实验四:观察叶绿体1. 实验原理:叶绿体主要存在于绿色植物的叶肉细胞里,叶绿体中含有叶绿素,故叶肉细胞呈绿色,可以利用高倍显微镜观察叶绿体的形态和分布。
2. 实验材料:新鲜藓类的叶、黑藻的叶。
3. 实验步骤:制片→低倍镜观察→高倍镜观察。
4. 实验结果:可以在高倍显微镜下观察到叶绿体的形态和分布。
五、实验五:观察细胞的有丝分裂1. 实验原理:有丝分裂过程中,染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化,因而可据此识别该细胞所处的有丝分裂时期。
2. 实验材料:洋葱根尖(分生区是根尖的一部分,也叫生长点,是具有强烈分裂能力的、典型的顶端分生组织)。
3. 实验步骤:解离根尖→漂洗→染色→制片→观察。
4. 实验结果:观察到细胞有丝分裂各时期的特点。
六、实验六:观察细胞的减数分裂1. 实验原理:减数分裂是原始生殖细胞产生配子的特殊方式,其特点是染色体复制一次,细胞连续分裂两次,分裂的结果是新细胞染色体数减半。
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。
5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
检验还原糖的实验步骤一、取样1.从待检测的样本中取出适量,确保样本具有代表性。
2.将取出的样本放入离心管中,以便后续制备组织匀浆。
二、制备组织匀浆1.在离心管中加入适量的缓冲液,用搅拌棒搅拌均匀。
2.将离心管放入离心机中,以一定的速度离心,分离出组织中的细胞成分和溶解物。
3.将离心后的上清液倒出,得到组织匀浆。
三、离心1.将制备好的组织匀浆放入离心管中。
2.设定离心机的转速和时间,使组织匀浆充分沉淀。
3.倒出上清液,保留沉淀物,以备后续实验使用。
四、加入试剂1.在沉淀物中加入适量的斐林试剂,用搅拌棒搅拌均匀。
斐林试剂是用于检测还原糖的特殊试剂,由硫酸铜和酒石酸钾钠混合而成。
2.将离心管放入水浴锅中加热至一定温度,使还原糖与斐林试剂发生反应。
五、水浴加热1.将离心管放入水浴锅中,加热至一定温度(一般为50-60℃)。
2.保持一定的时间(一般为1-2分钟),使还原糖与斐林试剂充分反应。
六、观察颜色变化1.加热完成后,观察离心管中的颜色变化。
还原糖与斐林试剂反应后会产生砖红色沉淀物。
2.记录观察到的颜色变化情况,以便后续结果判断。
七、结果判断1.根据观察到的颜色变化情况,判断是否含有还原糖。
如果产生砖红色沉淀物,则说明样本中含有还原糖;如果没有产生沉淀物或颜色变化不明显,则说明样本中不含还原糖或含量较低。
2.根据实验结果,可以进一步分析还原糖的种类和含量,为后续的实验或研究提供依据。
八、清洗实验器具1.在实验结束后,将使用过的离心管、搅拌棒等器具清洗干净。
2.将清洗干净的器具晾干,以便下次使用。
一、实验目的1. 了解还原糖的概念和性质。
2. 掌握鉴定还原糖的原理和方法。
3. 熟悉实验操作步骤,提高实验技能。
二、实验原理还原糖是一类具有还原性的糖类,如葡萄糖、果糖等。
它们在碱性条件下能与斐林试剂(Fehling试剂)或班氏试剂(Benedict试剂)发生氧化还原反应,生成砖红色的沉淀。
通过测定沉淀的颜色深浅,可以判断样品中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 苹果、梨、葡萄等水果样品- 葡萄糖、果糖、蔗糖等标准糖溶液- 斐林试剂、班氏试剂、NaOH、CuSO4等试剂- 蒸馏水、酒精灯、试管、试管架、滴管、移液管等实验用具2. 实验仪器:- 分析天平- 烧杯- 烧瓶- 水浴锅- 显微镜- 移液器- 比色计四、实验步骤1. 样品处理:- 将水果样品洗净,去皮,切成小块。
- 将小块水果放入榨汁机中榨取汁液,过滤,取滤液备用。
2. 标准糖溶液制备:- 根据需要,配制一定浓度的葡萄糖、果糖、蔗糖标准溶液。
3. 斐林试剂或班氏试剂制备:- 按照斐林试剂或班氏试剂的配制方法,分别配制斐林试剂和班氏试剂。
4. 实验操作:- 取试管若干,分别编号。
- 向各试管中加入不同浓度的标准糖溶液或样品滤液。
- 向各试管中加入斐林试剂或班氏试剂。
- 将试管放入水浴锅中加热,观察颜色变化。
5. 结果分析:- 通过比较标准糖溶液和样品滤液的颜色变化,判断样品中还原糖的存在与否。
- 利用比色计测定沉淀颜色的深浅,计算还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验现象:- 标准糖溶液在斐林试剂或班氏试剂的作用下,均出现砖红色沉淀。
- 样品滤液在斐林试剂或班氏试剂的作用下,部分出现砖红色沉淀,说明样品中含有还原糖。
2. 结果分析:- 通过实验结果,可以判断样品中还原糖的存在与否。
- 通过比色计测定沉淀颜色的深浅,可以计算出样品中还原糖的含量。
六、实验结论1. 本实验成功实现了还原糖的鉴定,掌握了鉴定还原糖的原理和方法。
一、实验目的1. 理解还原糖的化学性质及其在生物体内的作用。
2. 掌握使用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖含量的原理和方法。
3. 通过实验,学会正确使用实验仪器和试剂,提高实验操作技能。
二、实验原理还原糖是一类具有还原性的糖类,在生物体内具有重要的生理功能。
3,5-二硝基水杨酸法是测定还原糖含量的常用方法,其原理是:还原糖在酸性条件下与3,5-二硝基水杨酸反应,生成红色复合物,通过比色法测定还原糖含量。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁等。
2. 试剂:3,5-二硝基水杨酸、硫酸铜、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。
四、实验仪器1. 分析天平2. 恒温水浴锅3. 离心机4. 分光光度计5. 移液管6. 试管五、实验步骤1. 标准曲线的制作:(1)分别配制0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL的葡萄糖标准溶液。
(2)取5支试管,分别加入不同浓度的葡萄糖标准溶液各1 mL。
(3)向每支试管中加入3,5-二硝基水杨酸溶液2 mL,混匀。
(4)将试管放入恒温水浴锅中加热5分钟。
(5)取出试管,用蒸馏水定容至10 mL。
(6)用分光光度计在波长540 nm处测定吸光度。
(7)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定:(1)分别取葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁各1 mL于试管中。
(2)向每支试管中加入3,5-二硝基水杨酸溶液2 mL,混匀。
(3)将试管放入恒温水浴锅中加热5分钟。
(4)取出试管,用蒸馏水定容至10 mL。
(5)用分光光度计在波长540 nm处测定吸光度。
(6)根据标准曲线,计算样品中还原糖含量。
六、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:标准曲线如图所示,线性回归方程为y = 0.0034x + 0.0128,相关系数R² = 0.9989。
2. 样品测定:葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁中还原糖含量分别为2.34 mg/mL、0.86 mg/mL、0.23 mg/mL、1.12 mg/mL、0.89 mg/mL。
一、实验目的1. 掌握还原糖的检测原理和方法。
2. 学会使用本尼迪克特试剂(Benedict's reagent)检测还原糖。
3. 了解实验操作步骤和注意事项。
二、实验原理还原糖是一类具有还原性的糖类,如葡萄糖、果糖等。
在碱性条件下,还原糖可以还原铜离子(Cu²⁺)为亚铜离子(Cu⁺),生成红色的氧化亚铜(Cu₂O)沉淀。
本尼迪克特试剂中含有碱性铜盐,可以与还原糖反应生成红色沉淀,通过观察沉淀颜色的深浅可以判断还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 样品:苹果汁、梨汁、橙汁等含有还原糖的果汁。
- 本尼迪克特试剂:称取10g硫酸铜(CuSO₄·5H₂O),加入50mL蒸馏水溶解,加入100mL氢氧化钠(NaOH)溶液,再加入100mL柠檬酸钠溶液,混合均匀,室温下保存。
2. 实验仪器:- 电子天平- 移液器- 试管- 烧杯- 水浴锅- 滴定管- 移液管四、实验步骤1. 准备样品:取适量苹果汁、梨汁、橙汁等果汁,用移液器分别移取2mL于试管中,加水定容至10mL。
2. 混合试剂:取2mL本尼迪克特试剂于试管中,加入2mL样品溶液,摇匀。
3. 加热反应:将混合后的试管放入水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。
4. 冷却:取出试管,待溶液冷却至室温。
5. 观察结果:观察试管中溶液的颜色变化,记录沉淀颜色的深浅。
五、实验结果与分析1. 实验结果:| 样品 | 沉淀颜色 || ---------- | -------- || 苹果汁 | 深红色 || 梨汁 | 橙红色 || 橙汁 | 浅红色 |2. 实验分析:通过观察沉淀颜色的深浅,可以判断样品中还原糖的含量。
颜色越深,说明还原糖含量越高。
实验结果显示,苹果汁中的还原糖含量最高,梨汁次之,橙汁最低。
六、实验讨论1. 实验误差:实验过程中可能存在误差,如操作不当、试剂浓度不准确等。
为减小误差,应严格按照实验步骤操作,确保试剂浓度准确。
食品中还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握食品中还原糖含量的测定方法,了解还原糖在食品中的重要性,并通过实际操作提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,在碱性条件下,能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀。
斐林试剂由甲液(硫酸铜溶液)和乙液(氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液)组成,使用时将甲液和乙液等量混合。
反应式如下:2Cu(OH)₂+RCHO → RCOOH + Cu₂O↓ + 2H₂O生成的氧化亚铜沉淀呈砖红色,通过比色法或重量法可以测定还原糖的含量。
三、实验材料与仪器(一)实验材料1、葡萄糖标准溶液:准确称取 1000g 经过 98 100℃干燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后定容至 1000mL,浓度为 1mg/mL。
2、待测食品样品:苹果汁、橙汁、蜂蜜等。
(二)实验仪器1、电子天平:精度为 0001g。
2、容量瓶:100mL、500mL。
3、移液管:1mL、5mL、10mL。
4、锥形瓶:250mL。
5、电炉。
6、石棉网。
7、酸式滴定管:50mL。
8、比色皿。
9、分光光度计。
四、实验步骤(一)样品处理1、液体样品(如苹果汁、橙汁):准确吸取 1000mL 样品于100mL 容量瓶中,加 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
2、粘稠液体样品(如蜂蜜):称取 500 1000g 样品于 100mL 容量瓶中,加水约 50mL 溶解,慢慢加入 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
(二)斐林试剂的标定1、准确吸取 500mL 葡萄糖标准溶液于 250mL 锥形瓶中,加入25mL 水和 5mL 斐林试剂甲液、5mL 斐林试剂乙液,摇匀,在电炉上加热至沸腾,保持沸腾 2 分钟,趁热用 01%葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失,记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
还原糖测定实验六饮料中国还原糖含量的测定—直接滴定法(GB/T5009.7—2003第一法)教学目的要求:基本知识点1、掌握直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。
2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
重点:1、熟练称量、定容、滴定等基本操技术2、直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。
难点:直接滴定测定还原糖的原理和控制要点课时教学方案:复习与提问:1、检查实验准备情况,(1)实验内容;(2)实验仪器与试剂有哪些?(3)直接滴定测定还原糖的步骤。
2、直接滴定测定还原糖的注意事项和控制要点【引入新课】一、目的要求1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点;2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理试样经除去蛋白质后,在加热条件下,以次甲基蓝作指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液),还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。
以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色,表示终点到达。
根据试样溶液消耗体积,计算还原糖量。
反应方程式如下:CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4COONa COONa︱∣CHOH CHO╲∣+Cu(OH)2= ∣Cu +2H2OCHOH CHO╱∣∣COOK COOKCOONa COONa∣CHO ∣CHOHCHO╲∣CHOH ∣2∣Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣+ (CHOH)4+Cu2O↓CHO╱∣CHOH ∣∣CH2HO ∣CH2OHCOOK COOK亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型(蓝色) (无色)三、实验试剂(GB/T5009.7-2003食品中还原糖的测定)1、盐酸。
2、碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜( CuSO4?5H2O) 及0.05g次甲基蓝,溶入水中并稀释至1000mL。
3、碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
实验六检测生物组织中还原糖的实验
一、教学目标
1、初步学会生物组织中还原糖的鉴定方法,领悟并能描述该实验的实验原理。
2、比较不同实验材料所做的实验结果,探索该实验的理想实验材料。
3、培养学生的动手操作能力,培养学生树立实事求是、认真严肃的的科学态度。
二、学情分析
学生在《第一节 - 细胞中的元素和化合物》的学习中,学生对糖的概念有了明确的认识,对于生物组织中哪些含糖类型,怎么鉴别还原糖还不清楚。
通过本节实验教学让学生对颜色反应这一类验证实验有一个总体把握,再则让学生体会出生物学上一些典型的实验现象是要选择实验材料是关键,以及实验中要注意每一步实验方法。
三、实验原理
生物组织中普遍存在的还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。
它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基),因此叫做还原糖。
蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基,因此叫做非还原性糖,不具有还原性。
本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否,而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。
Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu
2
O沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
其反应式如下:
2NaOH+CuSO
4 Na
2
SO
4
+Cu(OH)
2
(淡蓝色沉淀)
-CHO+2Cu(OH)
2-COOH+Cu
2
O(砖红色沉淀)+2H
2
O
用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化过程为浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
本实验能利用还原糖能与斐林试剂发生颜色反应的特性,通过一系列实验检测生物组织中是否含有还原糖。
四、实验教学流程
1.讲述原理并演示实验同时,逐项讲解完成还原糖的鉴定。
实验课上,将本实验的正确结果分别展示在讲台上,并作扼要的介绍,以便使学生将自己的实验结果与教师的演示实验作比较。
2.布置探究任务并分组,学生每三人合作分工完成探究实验。
在鉴定前,留一部分样液,以便与鉴定后的样液作对比,增强说服力。
3.实验讨论分析。
4.扩展知识讲述还原糖的另一检验方法,展示实验结果。
五、实验器材
(一)材料:苹果、梨、黄瓜、番茄、韭菜、橘子
(二)试剂:斐林试剂(现配现用,甲液:0.1 g/mL的NaOH溶液、乙液:
溶液)
0.05g/mL的CuSO
4
(三)器具:烧杯,酒精灯,试管,显微镜,刀片,载玻片,盖玻片,研钵、石棉网、石英砂、纱布、试管夹玻璃漏斗。
六、实验步骤
(一)教师讲解实验,使学生明确实验方法、实验要求、实验注意事项
1、实验步骤
(1)向试管中加入2mL待测组织液。
(2)向试管中注入1mL斐林试剂。
(3)将试管放入盛有50~65℃温水中加热2分钟。
2、实验要求:根据教师提供的材料,让学生用不同的实验材料分别进行实验,分析实验现象,比较实验结果,探索该实验的理想材料。
3、注意事项
(1)材料处理,苹果和梨洗净去皮研磨充分,菜叶洗净、剪碎。
(2)斐林试剂不稳定,即需现配现用(甲液乙液等量混合)。
(3)对试管中溶液进行加热时,试管底部不能触及烧杯底部,试管口不能朝向实验者以免沸腾的液体冲出烫伤。
(二)学生自主探究实验(教师巡视指导)
1.每组学生选择几种实验材料进行实验
2.按照实验方法制备生物组织样液
(1)取植物组织,洗净、去皮,切成小块
(2)取5g放入研钵中,加入少许石英砂研磨,再加5mL水,继续研磨
(3)将组织研磨液进行过滤
3.斐林试剂与还原糖反应
(1)取几只洁净试管,并标号
(2)先取一支试管,向试管中加入2mL待测组织液。
(另留一份组织样液与另一试管中
(3)向试管中注入1mL斐林试剂。
振荡试管,使溶液混合均匀,观察此时溶液的颜色变化
(4)将试管放入盛有50~65℃温水中加热2分钟。
观察颜色的变化
(5)按照以上实验方法检验另外几种材料
(三)实验结果分析
比较不同实验材料进行实验所得的实验结果,以及不同小组间的实验结果,让学生分析讨论,得出结论。
(四)教师引导学生思考
1.你认为该实验成功的关键是什么
提示:实验材料的选择。
一般考虑以下几点:①材料的易得性。
从植物中获得还原糖的实验材料是比较容易得的,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织,而且组织的颜色较浅,或近于白色,如苹果、白萝卜等。
②材料的可取性。
富含还原糖植物材料很多,但并不是每一种材料是可取的。
如该实验最好不要用双子叶植物和韭菜、鸢尾等单子叶植物。
③材料的处理。
苹果要洗净、去皮,保证磨得比较充分。
2.在鉴定还原糖时,为什么用苹果和梨的果实做实验材料比用植物的叶子做实验材料效果好得多
提示:因为双子叶植物的叶子光合作用的主要产物是淀粉,而淀粉不具备还原性,因此不能用作实验材料。
韭菜、鸢尾等一些单子叶植物的叶子中虽然含有大量的还原糖,但是因叶子中叶绿素的颜色较深,对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用,会导致实验现象的不明显,所以不宜做实验材料。
(五)实验扩展
给学生介绍还原糖的另一检验方法:银镜反应(以葡萄糖为例)
原理:葡萄糖中含有醛基,因此它具有还原性,是一种还原糖。
葡萄糖能与吐伦试剂(硝酸银加过量的氨水生成的银氨溶液)发生银镜反应,即葡萄糖可以将银离子还原为金属银。
这是检验葡萄糖的常用方法。
七、预测结果
1.苹果、梨、黄瓜有砖红色沉淀生成,而番茄、韭菜、橘子没有
或现象不明显。
2.苹果的砖红色沉淀现象在本组实验中最明显。
3.韭菜颜色呈原来的绿色,但在加热后也有砖红色沉淀生成,量较少。