胡萝卜素含量的测定

水果、蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定1 主题内容与适用范围本标准规定了水果、蔬菜汁中类胡萝卜素的分离提取方法及提取物中类胡萝卜素总量的测定方法。

本标准适用于水果、蔬菜汁中类胡萝卜素总量的测定。

2 原理果蔬滤液通过溶剂萃取,分离提取类胡萝卜素,在特定波长下用分光光度法测其吸光度。

该吸光度与类胡萝卜素含量成线性关系,通过换算即可得知类胡萝卜素之含量。

3 试剂和溶液本标准所用试剂除特殊规定外,均使用符合国家标准的分析纯试剂,均采用蒸馏水。

3.1 石英砂(Q/HG 22--467)；3.2 萃取剂,2/1(v/v)氯仿(GB 682)-甲醇(GB 683)混合。

4 仪器设备4.1 抽滤器；4.2 无灰分滤纸；4.3 分液漏斗：250mL；4.4 容量瓶,100mL；4.5 移液管,20mL；4.6 烧杯,50mL；4.7 分光光度计,使用的测量波长为440±10nm。

5 分析步骤注：由于类胡萝卜素本身性状的不稳定性,即见光易氧化分解,建议所有操作应避光进行。

5.1 试样的制备5.1.1 液体样品：混合均匀后取样。

5.1.2 固体样品：捣碎机捣碎后,纱布挤汁。

5.2 用移液管吸取20mL样液置50mL烧杯中。

5.3 过滤：在烧杯(5.2)中加入3g石英砂,摇动后用布氏漏斗过滤(布氏漏斗预先铺有无灰滤纸,纸上铺有2g石英砂),然后再用5mL水冲洗滤渣3次。

5.4 萃取：在250mL的分液漏斗中倒入滤液(5.3),再加入20mL萃取剂(3.2),振摇后静置,收集下部分有机相,再用20mL萃取剂提取两次,将三次萃取所得有机相合并,用萃取剂定容为100mL。

注：对果胶含量大的果蔬,萃取时,将三次合并的有机相重新倒回原分液漏斗,继续用20mL萃取洗涤一次,然后用萃取剂定容至100mL。

5.5 测定：在440±10nm波长下测定提取液的最大吸光度A。

6 结果的计算和表示类胡萝卜素总量用mg/L表示,按下式计算：类胡萝卜素(mg/L)＝A×20式中：A——测定的最大吸光度；20——换算系数。

一、实验目的1. 学习胡萝卜素的提取方法。

2. 掌握胡萝卜素含量的测定方法。

3. 了解胡萝卜的营养价值。

二、实验原理胡萝卜素是一种脂溶性色素，广泛存在于胡萝卜、菠菜、甘蓝等植物中。

胡萝卜素具有丰富的营养价值，对人体健康具有重要作用。

本实验采用有机溶剂提取胡萝卜素，并通过比色法测定胡萝卜素的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜胡萝卜、无水乙醇、蒸馏水、三氯甲烷、无水硫酸钠、硅胶、标准胡萝卜素溶液等。

2. 实验仪器：电子天平、离心机、分光光度计、研钵、烧杯、试管、漏斗、滤纸等。

四、实验步骤1. 胡萝卜素的提取（1）将新鲜胡萝卜洗净，去皮，切成小块，放入研钵中。

（2）加入适量无水乙醇，研磨成匀浆。

（3）将匀浆倒入漏斗中，用滤纸过滤，收集滤液。

（4）将滤液倒入烧杯中，加入适量无水硫酸钠，搅拌均匀，静置。

（5）待滤液分层后，取出上层清液，用分液漏斗分离。

（6）将分离出的上层清液倒入试管中，加入适量硅胶，搅拌均匀，静置。

（7）待硅胶沉淀后，取出上层清液，用分光光度计测定其吸光度。

2. 胡萝卜素含量的测定（1）将标准胡萝卜素溶液稀释成一系列浓度，分别测定其吸光度。

（2）以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

（3）根据实验测得的胡萝卜素吸光度，从标准曲线上查得胡萝卜素含量。

五、实验结果与分析1. 胡萝卜素的提取通过实验，成功提取了胡萝卜素，提取率为（此处填写提取率）。

2. 胡萝卜素含量的测定根据标准曲线，计算出实验样品中胡萝卜素的含量为（此处填写含量）mg/g。

六、实验结论1. 本实验成功提取了胡萝卜素，提取率为（此处填写提取率）。

2. 通过比色法测定，实验样品中胡萝卜素的含量为（此处填写含量）mg/g。

3. 胡萝卜中含有丰富的胡萝卜素，具有很高的营养价值。

七、实验讨论1. 实验过程中，提取胡萝卜素的关键步骤是研磨、过滤和分离。

在研磨过程中，要注意研磨时间不宜过长，以免胡萝卜素氧化降解。

2. 在分离过程中，要注意分液漏斗的使用，避免混合液分离不完全。

胡萝卜实验报告数据引言胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含维生素A、维生素C、纤维素等营养物质，并且具有抗氧化和免疫增强的功效。

为了研究胡萝卜中维生素含量与颜色的关系，我们进行了一项实验。

本报告旨在介绍实验的设计和结果分析，以及对实验结果的讨论。

实验设计我们从市场上购买了不同颜色的胡萝卜，包括红色、橙色和黄色三种。

为了保证实验的准确性和可比性，我们选择了相同规格和品种的胡萝卜，将它们均分为若干组，每组含有相同数量的胡萝卜。

在实验中，我们选取了三个不同的处理组：对照组、煮熟组和蒸煮组。

对照组的胡萝卜没有进行任何处理，只是晾晒后保存。

煮熟组的胡萝卜用开水煮熟后晾晒保存，而蒸煮组的胡萝卜则是用蒸锅蒸煮后晾晒保存。

实验步骤1. 将胡萝卜按照颜色分类切割成相同大小的块状。

2. 将每组胡萝卜放置于通风良好的地方晾晒48小时。

3. 称量每组胡萝卜的质量，并记录下来。

4. 使用高效液相色谱仪测定每组胡萝卜中维生素A和维生素C的含量。

5. 对照组的维生素含量作为基准，计算煮熟组和蒸煮组的维生素损失率。

实验结果通过高效液相色谱仪的测定，我们得到了不同处理组中胡萝卜维生素含量的数据。

胡萝卜颜色对照组(mg/100g) 煮熟组(mg/100g) 蒸煮组(mg/100g)红色 2.1 1.7 1.9橙色 1.8 1.4 1.6黄色 1.5 1.2 1.4根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 经过煮熟和蒸煮处理后，胡萝卜中的维生素A和维生素C的含量都有所下降。

相较于对照组，煮熟组和蒸煮组的胡萝卜中维生素的损失率略高一些。

2. 在三种颜色的胡萝卜中，红色胡萝卜的维生素含量最高，黄色胡萝卜的维生素含量最低。

这可能与胡萝卜颜色中的类胡萝卜素含量有关。

结论与讨论综合实验结果，我们可以得出如下结论：1. 胡萝卜中的维生素含量受到处理方法的影响，煮熟和蒸煮处理会导致维生素的损失。

2. 在胡萝卜的颜色方面，红色胡萝卜相较于橙色和黄色胡萝卜，含有更多的维生素。

食物中胡萝卜素的测定方法Method for determination of carotene in foods1 主题内容与适用范围本标准规定了食物中胡萝卜素的测定方法——纸层析法。

本标准适用于植物性食物和含有植物性食物的混合食物中胡萝卜素的测定，其最小检出限为0.11μg。

2 原理以丙酮和石油醚提取食物中的胡萝卜素及其他植物色素，以石油醚为展开剂进行纸层析，胡萝卜素极性最小，移动速度最快，从而与其他色纱分离；剪下含胡萝卜素的区带，洗脱后于450nm波长下定量测定。

3 试剂3.1 石油醚（沸程30～60℃）：同时是展开剂。

3.2 丙酮：分析纯。

3.3 丙酮-石油醚混合液：3：7（V/V）。

3.4 无水硫酸钠：分析纯。

3.5 5%硫酸钠溶液。

3.6 1：1氢氧化钾溶液：取50g氢氧化钾溶于50mL水。

3.7 无水乙醇：需经脱醛处理。

3.8 β-胡萝卜素标准溶液：取5mgβ-胡萝卜素标准品，溶于10mL三氯甲烷中，浓度约为500μg/mL，准确测其浓度。

取标准溶液10.0μL，加正己烷3.00mL，混匀，测吸光值，比色杯厚度1cm，以正己烷为空白，入射光波长450nm，平行测定三份，取均值。

计算公式： (1)式中：X1——胡萝卜素标准溶液浓度，mg/mL；A——吸光值；E——β-胡萝卜素在正己烷溶液中，入射光波长450nm，比色杯厚度为1cm，溶液浓度为1ppm的吸光系数，为0.2638；——将ppm,换算成mg/mL;——测定过程中稀释倍数的换算。

3.9 β-胡萝卜素标准使用液：将已标定的标准液用石油醚准确稀释后，每毫升溶液相当50μg，避光保存于冰箱中。

4 仪器和设备4.1 实验室常用设备。

4.2 玻璃层析缸。

4.3 分光光度计。

4.4旋转蒸发器：具150mL球形瓶。

4.5 恒温水浴锅。

4.6 皂化回馏装置。

4.7 点样器或微量注射器。

4.8 新华滤纸：定性，快速或中速，101号。

5 样品的采集和处理5.1 粮食：样品用水洗三次，置60℃烤箱中烤干，磨粉，储于塑料瓶内，放一小包樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。

本科生毕业论文（设计）鉴定表题目胡萝卜营养成分分析测定姓名王晴晴学号200912401009 院系生命科学学院专业生物工程指导教师蒋娟职称讲师年月日曲阜师范大学杏坛学院教务处制目录摘要 (1)关键词 (1)Abstract (1)Key words (1)引言 (2)1材料与方法 (2)1．1实验材料 (2)1．2实验器材与试剂 (2)1．3实验方法 (3)1．3．1可滴定酸酸度测定 (3)1．3．2可溶性固形物测定 (3)1．3．3可溶性蛋白质含量的测定 (3)1．3．4 总糖含量的测定 (4)1．3．5 胡萝卜素含量的测定 (5)2结果与分析 (5)2．1可滴定酸和可溶性固形物测定与分析 (5)2．2可溶性蛋白质含量测定与分析 (6)2．2．1 可溶性蛋白质含量测定 (6)2．2．2 可溶性蛋白质含量分析 (7)2．3总糖含量测定与分析 (7)2．3．1 总糖含量测定 (7)2．3．2 总糖含量分析 (8)2．4胡萝卜素含量测定与分析 (8)2．4．1 胡萝卜素含量测定 (8)2．4．2 胡萝卜素含量分析 (8)2．5胡萝卜各段营养成分分析 (8)3讨论 (9)3．1胡萝卜营养成分分析的结果 (9)3．2胡萝卜营养成分分析的意义 (9)致谢 (11)参考文献 (12)胡萝卜营养成分分析测定生物工程专业学生王晴晴指导教师蒋娟摘要：以胡萝卜为主要原料，对可滴定酸、可溶性固形物、可溶性蛋白质、总糖和胡萝卜素等营养成分含量进行分段测定。

结果：三部分营养成分含量相差不大，整体来看pH值为6.26，可溶性固形物为10.3%，可溶性蛋白质含量为0.18g/100g，总糖含量为6.82g/100g，胡萝卜素含量为3.8mg/100g。

关键词：胡萝卜营养成分分析Analysis and Determination of Nutritional Components inDaucus CarrotStudent majoring in bioengineering Wang QingqingTutor Jiang JuanAbstract：To determine and evaluate titratable acidity, soluble solids, soluble protein, total sugar and carotene of daucus carrot. Results:the contents of titratable acidity and soluble solids in the carrot were 6.26,10.3% respectively. The amounts of soluble protein and total sugar in 100g fresh weight of carrots were 0.18g,6.82g respectively. In addition, the amounts of carotene in 100g fresh weight of carrots were 3.8mg.Key words: daucus carota nutrients analysis引言胡萝卜(Daucus carota L. var. sativa DC.) 原产于亚洲西南部、中亚西亚地区，元末传入我国，故称胡萝卜，又名甘荀、金笋、丁香萝卜，为伞形科胡萝卜属两年生草本植物，我国各地均有种植，素有“小人参”的美誉，是一种富含蛋白质、糖类、维生素和胡萝卜素等营养成分的蔬菜。

胡萝卜素的柱层析法测定Determination of carotene by column chromatography摘要：胡萝卜素存在于辣椒、胡萝卜、菠菜等绿色植物中，由于各种胡萝卜素的化学结构不同，它们被氧化铝吸附的强度以及有机溶剂中溶解度都不相同，同植物其他色素比较，胡萝卜素的吸附最差，故最先被洗脱下来。

层析法是近代生物学中应用较为广泛的物理化学分析方法之一，为了胡萝卜素分离试验的结果较好，生物化学课中也开设了柱层析法分离胡萝卜素的试验。

关键词：胡萝卜素菠菜柱层析法胡萝卜素存在于辣椒和胡萝卜等黄绿色植物中，因其在动物体内可转变成维生素A，故称为维生素A原。

胡萝卜素可用酒精、石油醚和丙酮等有机溶剂从食物中提取出来，且能被氧化铝（Al2O3）所吸附，先用高温处理氧化铝以除去水分，提高氧化铝的吸附力。

由于胡萝卜素与其它植物色素的化学结构不同，它们被氧化铝吸附的强度以及在有机溶剂中的溶解度都不相同，故将提取液利用氧化铝层析，再用石油醚等冲洗层析柱，即可分离成不同的色带。

同植物其它色素比较，胡萝卜素吸附最差，跑在最前面，故最先被洗脱下来.层析法（Chromatography）是近代生物化学中应用较为广泛的物理化学分析方法之一。

1906年俄国植物学家米哈伊尔·茨维特将此法用于植物色素的分离，故又称色层分析法，最初命名采用Chromatography这一词来描述这一技术（源于希腊文Chromatos，颜色）[1]。

该法是利用混合物中各组分分子结构互不相同，理化性质（溶解度、吸附力、分子大小形状及分子极性等）各异，因而在支持物（吸附剂）上分布于不同的区带，以达到分离的目的。

层析法一般利用两个相，一个称固定相，一个称流动相。

目前常用的层析法根据分离原理不同而分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶层析和亲和层析法等。

其中吸附层析法又可根据操作形式的不同分为柱层析法和薄板层析法等。

[2]柱层析法是用一根玻璃柱（1cm×16cm）内装吸附剂粉末（MgO、Al2O3、硅胶等），在柱顶部加入要分离的样品溶液，再加入一定的有机溶剂（流动相）以洗脱样品中各组分，由于吸附剂对各组分的吸附力不同及各组分在洗脱剂中的溶解度不同，因而在洗脱过程中各组分随洗脱剂向下流动时，层析柱中连续不断地产生吸附、溶解（解吸附），再吸附、再解吸附的现象。