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低温诱导染色体数目加倍的实验流程

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低温诱导染色体数目加倍的实验流程

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低温诱导染色体数目加倍的实验流程详解

在生物学研究中，染色体数目加倍是一种常见的遗传操作，常用于植物育种和细胞遗传学研究。其中，低温诱导染色体加倍是一种常用的方法。以下是该实验的基本流程：

一、实验材料准备 1. 选择合适的生物材料：一般选择处于分裂中期的细胞，如植物的根尖或茎尖。

2. 材料预处理：将生物材料在适宜的条件下培养至适当生长阶段。

二、低温处理

1. 冷却设备准备：使用冰箱或冰浴等设备，设定温度通常在0-4℃之间，这个温度可以诱导细胞进入有丝分裂纺锤体形成期（Metaphase）而不能正常分裂。

2. 低温诱导：将预处理的生物材料放入冷却设备中，保持低温状态一段时间，如12-48小时。时间的长短会根据物种和细胞类型的不同而有所差异。

三、解冻与恢复

1. 低温处理后，将生物材料迅速移出冰箱，放置在室温下，让其自然解冻。

2. 在适宜的环境中让细胞恢复正常生长，这个过程称为恢复期，一般需要几小时到几天。

四、固定与染色

1. 恢复期结束后，用固定液（如甲醇：醋酸=3:1）对材料进行固定，以保持细胞形态。

2. 使用染色剂如碘化丙啶（PI）或醋酸洋红对染色体进行染色，使其在显微镜下可见。

五、显微观察与分析

1. 利用光学显微镜或荧光显微镜观察细胞中的染色体数目。

2. 对比处理前后的染色体数目，如果发现细胞内的染色体数目翻倍，说明低温诱导成功。

以上就是低温诱导染色体数目加倍的基本实验流程，但实际操作中还需要根据具体实验条件和目标进行调整。此外，由于低温诱导可能对细胞产生一定损伤，因此在实验设计时需谨慎考虑并优化处理条件。

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低温诱导植物染色体数目变化与有丝分裂同步观察的实验改进

低温诱导植物染色体数目变化与有丝分裂同步观察的实验改进

龙源期刊网

低温诱导植物染色体数目变化与有丝分裂同步观察的实验改进

作者：李东媛

来源：《新课程·上旬》2013年第10期

摘 要：探讨低温诱导植物染色体数目变化与有丝分裂同步操作对比观察的实验改进方法。

关键词：有丝分裂；低温诱导；植物染色体；同步观察

“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目变化”，是人教版高中生物必修1和2的实验内容。两个实验采用的材料用具和方法步骤基本相同，将两个实验合并操作同步观察，两种装片，一目了然。实验操作过程如下：

一、实验材料的处理

1.洋葱幼根的培养

剥去老皮，稍去老根，置于玻璃槽内，注水以浸没根基部为宜。25℃左右下约4～5天根基部即长出大量2～3 cm长的幼根，提供有丝分裂和低温诱导。

2.低温处理

在实验前1天，待幼根长出2～3 cm左右时，将实验所需材料移入4 ℃冰箱中，继续诱导培养24～36 h。

3.苯酚品红的改良

母液A：取3 g碱性品红，溶解在100 mL的70%乙醇中。母液B：取母液A 10 mL，加入90 mL的5%苯酚溶液。取B液45 mL，加入6 mL冰醋酸和6 mL的37%甲醛，此为苯酚品红染色液。改良苯酚品红：取10 mL苯酚品红染液，加入90 mL的45%冰醋酸和1.8 g山梨醇即可。 龙源期刊网

二、方法步骤

三、实验操作注意事项

1.采用“统一时间”“同步操作”的原则；

2.有丝分裂和低温诱导间组进行，按表操作，上课时，在第一时间剪取根尖解离；

3.在等待的时间里，做实验设计方面的探究；

4.采用“镊子背敲打法”制片，两组间对比观察。

将观察根尖分生组织细胞有丝分裂和低温诱导植物染色体数目变化，按照探究性实验教学模式进行实验设计，经过学生分组实验的实践检验，极大地提高了实验教学效果，展示了探究性实验的魅力。用“镊子背敲打法”制片，显微观察效果的确很好。

高中生物必修2实验：低温诱导染色体加倍

高中生物必修2实验：低温诱导染色体加倍

1 / 1 实验十三 低温诱导染色体加倍P88

1、原理：用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。

2、方法步骤：

(1)洋葱长出约1cm左右的不定根时，放入冰箱的低温室内(4℃)，诱导培养36h。

(2)剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5~1 h，以固定细胞的形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。

(3)制作装片：解离→漂洗→染色→制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样)

(4)观察，比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.

3、讨论：秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍，这两种方法在原理上有什么相似之处?

高中生物必修2实验：低温诱导染色体加倍新选.

高中生物必修2实验：低温诱导染色体加倍新选.

1 / 1word. 实验十三 低温诱导染色体加倍P88

1、原理：用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。

2、方法步骤：

(1)洋葱长出约1cm左右的不定根时，放入冰箱的低温室内(4℃)，诱导培养36h。

(2)剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5~1 h，以固定细胞的形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。

(3)制作装片：解离→漂洗→染色→制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样)

(4)观察，比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.

3、讨论：秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍，这两种方法在原理上有什么相似之处?

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低温诱导植物染色体数目的变化实验

低温诱导植物染色体数目的变化实验

课时课题：第5章 第二节 染色体变异（第二课时：低温诱导植物染色体数目的变化）

课型：实验课

教

学

目

标 知识目标 1、理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用原理；

2、学习低温诱导植物染色体数目变化的方法。

能力目标 1、通过实验，提高学生的动手操作能力和合作探究能力；

2、通过使用显微镜，提高学生的观察能力和绘图能力。

情感态度和

价值观目标 1、通过实验，养成与他人合作、共享并能够欣赏别人的观点和创意的习惯；

2、培养学生敢于质疑、勇于实践以及严谨求实的科学态度。

重 点 低温诱导植物细胞染色体数目变化的实验过程。

难 点 低温诱导植物细胞染色体数目变化的实验过程。

知 识 点 1、实验原理；2、所用材料的作用。

考 试 点 1、实验原理；2、实验过程。

能 力 点 动手操作能力、合作探究能力、观察能力和绘图能力。

自主探究点 低温诱导植物细胞染色体数目变化

易错易混点 卡诺氏液、改良苯酚品红染液、盐酸、酒精等材料的作用。

训 练 点 实验过程及材料的作用。

拓 展 点 低温对不同实验材料的染色体数目变化的影响相同吗？

课 型

实验课 材料用 具 葱或大蒜，培养皿，滤纸，纱布，烧杯，镊子，剪刀，显微镜，载玻片，盖玻片，卡诺氏液，改良苯酚品红染液，体积分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精

教 学 模 式 “合作探究”教学模式

教 学 流 程

教学

环节 教师活动 学生活动(预设) 设计意图

复习导 入

复习提问：

1、 单倍体育种和多倍体育种的方法？

2、 秋水仙素的作用原理是什么？

组织语：在单倍体育种和多倍体育种过程中，都用到了秋水仙素，它能诱导染色体加倍，除了秋水仙素能诱导染色体加倍以外，还有什么因素能诱导染色体数目变化吗？

课件提供材料：

据调查，在帕米尔高原上的高山植物，65%的是多倍体，请同学们推测帕米尔高原上多倍体产生的原因是什么？