高中生物实验:低温诱导染色体加倍

  • 格式:doc
  • 大小:25.50 KB
  • 文档页数:5

高中生物实验:低温诱导染色体加倍

方法步骤:

洋葱长出约1cm左右的不定根时,放入冰箱的低温室内(4℃),诱导培养36h。

剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm,放入卡诺氏液中浸泡0.5~1 h,以固定细胞的形态,然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。

制作装片:解离→漂洗→染色→制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样)

观察,比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.

讨论:秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍,这两种方法在原理上有什么相似之处?

脱色剂

“探究叶绿体在光照下合成淀粉实验”中,将处理过的天竺葵叶片放入盛有酒精的小烧杯里,隔水加热,使叶片褪色(破坏和溶解叶片中所含的色素).这样就可在滴加碘液后,避免对观察叶片颜色变化的干扰。

漂洗剂

酒精是良好的有机漂洗剂.“脂肪的鉴定实验”中,用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色后,可用体积分数为50%的酒精来冲洗浮色,以免干扰对细胞内脂肪颗粒的观察。 提取剂和层析剂

绿叶中色素的提取和分离实验”中,可以用纯酒精作为提取色素的试剂和层析剂.在“DNA的粗提取与鉴定实验”中,采用酒精沉淀法,利用DNA不溶于酒精,而蛋白质、脂肪及磷脂等能溶解其中,可以进一步提出含杂质较少的DNA丝状物。

固定剂

在“观察植物细胞有丝分裂实验”中,一般采用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按体积比1:1混合而成的药液作为解离试剂。

盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。

酒精的作用是固定蛋白质,使细胞的原生质凝固,不发生变化,固定细胞的分裂相,以尽可能保持原来的结构供观察。

酒精也可与其它试剂混合成复合固定剂,如“低温诱导染色体加倍”中的卡诺固定液就是由无水酒精3份:冰醋酸1份配制而成,适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等。

消毒剂

所有的70%的酒精都是消毒剂。70%~75%浓度杀菌作用最强,此浓度的酒精与细菌的渗透压近似,在细菌表面蛋白未变性前能不断地向菌体内部渗入,使细菌所有蛋白脱水、变性凝固,最终杀死细菌,以达到消毒杀菌的目的。浓度低于70%,则渗透性降低,达不到灭菌消毒目的。

燃烧剂酒精灯中的燃料

不同体积的酒精作用也不相同,下面是不同体积下酒精的作用以及作用原理。

作用:洗去浮色。

原理:苏丹Ⅲ是弱酸性染料,易溶于体积分数为50%酒精。

应用:脂肪的鉴定实验。在该实验中,用苏丹Ⅲ对花生子叶薄片染色后,在薄片上滴1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,可以洗去被染玻片标本上的苏丹Ⅲ染液浮色。

体积分数为95%的酒精

作用:解离;析出提取含杂质较少的DNA。

原理解离原理:用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精1∶1混合,能使组织中的细胞相互分离开来;

析出提取含杂质较少的DNA的原理:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精。

作用:消毒杀菌。

原理:体积分数为75%的酒精,能够顺利地渗入到细菌体内,吸收细菌蛋白的水分,使其脱水变性凝固而失去功能,以达到消毒杀菌的目的。

高于体积分数为75%浓度的酒精与细菌接触时,就可能使得菌体表面迅速凝固,形成一层薄膜,阻止了酒精继续向菌体内部渗透,待到适当时机,薄膜内的细胞可能将薄膜冲破而重新复活。

在此高浓度下,酒精迅速凝固蛋白质的作用往往随着其浓度升高而增强,因此,其消毒杀菌的效果也就越差。

若酒精的浓度低于75%,也因不能顺利地渗入到细菌体内而彻底杀死细菌。如果使用体积分数为75%的酒精,既能使组成细菌的蛋白质凝固,又不能形成薄膜,这样,酒精可继续向内部渗透,从而达到较好的消毒效果。

看看网友们都有什么想法

网友1

低温诱导实验中,对正常生长的植物进行了处理(放入4摄氏度冰箱冷藏36小时),取出后,为了保持冷冻时的状态,采用卡诺氏液固定。

而植物有丝分裂实验,植物一直没有改变环境,因此无需卡诺氏液处理。

网友2

不对啊。观察到的是一个静态过程吖

网友3

作用在细胞有丝分裂复制染色体后,影响纺锤体,不进行分裂吧

网友4

解离液中的盐酸和酒精分别是分解和溶解细胞间质的。可以用卡诺氏液进行固定,但没有必要。