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MS培养基的配制

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MS培养基的配制 1、配制几种母液（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。分别称取

名称重量名称重量NH4NO3165gKH2PO417gKNO3190gCaCl2·2H2O44gMgSO4·7H2O37g各自配成1L的母液。各自倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称重量名称重量KI0.083gNa2MoO4·2H2O0.025g

H3BO3 0.62g CuSO4·5H2O0.0025gMnSO4·H2O 1.69gCoCl2·6H2O0.0025gZnSO4·7H2O0.86g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。注：CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。分别称取CuSO4·5H2O 0.05g，CoCl2·6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。（3）配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称重量名称重量肌醇10g盐酸硫胺素（VB1）0.01g烟酸0.05g甘氨酸0.2g盐酸吡哆醇（VB6） 0.05g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。（4）配制MS铁盐母液 一般配制成100倍MS铁盐母液。依次称取EDTA二钠 3.73g，FeSO4·7H2O 2.78g（注：溶好一个后，再加下一个）配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。 （5）激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。

2、配制培养基以配置1L MS培养基为例，按顺序进行如下操作：（1（先在烧杯中放入一些蒸馏水。

（2（分别取上面八种母液10ml倒入。

（3（一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶解。

（4（加蒸馏水用量筒定溶至1L。

（5（按设计好的方案添加各种激素，由于激素的用量很小，而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取，减少误差。

（6（用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8。（有条件的话使用酸度计，比较精确） 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。1当量NaOH配制：称取NaOH 4g 配成100ml溶液。（7（称取5g左右琼脂粉（质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。

（8（稍微冷却后，分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。

（9（放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。

（10（灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。 江泰投资管理 http://www.jiangtaitz.com JeJ6O31c6e2S

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ms培养基

ms培养基

MS培养基的配制

6-BA(0.25mg/ml):称取0.05g6-BA,用少量0.1mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要加热，最后定容到200ml。配制培养基时，每升用10ml。

NAA(0.12mg/ml):称取0.024gNAA,用少量无水乙醇预溶，可加热，最后定容到200ml。配制培养基时，每升用1ml。 分子量 使用浓度（mg/l） 母液配制(g) 培养基的配置(1L)

大量元素（20倍）1L

硝酸钾KNO3 101.21 1900 38

50ml 硝酸铵NH4NO3 80.04 1650 33

磷酸二氢钾KH2PO4 136.09 170 3.4

硫酸镁MgSO4.7H2O 246.47 370 7.4

氯化钙CaCl2.2H2O 147.02 440 8.8

微量元素（200倍）1L

碘化钾 KI 166.01 0.83 0.166

5ml 硼酸 H3BO3 61.83 6.2 1.24

硫酸锰MnSO4.7H2O 223.01 22.3 4.46

硫酸锌ZnSO4.7H2O 287.54 8.6 1.72

钼酸钠Na2MoO4.2H2O 241.95 0.25 0.05

硫酸铜CuSO4.5H2O 249.68 0.025 0.005

氯化钴CoCl2.6H2O 237.93 0.025 0.005

铁盐（200倍）

乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA 372.25 37.25 7.45 5ml

硫酸亚铁FeSO4.7H2O 278.03 27.85 5.57

有机成分（100倍）

肌醇 100 10

10ml 甘氨酸 2 0.2

盐酸硫胺素VB1 0.1 0.01

盐酸吡哆醇 VB6 0.5 0.05

烟酸VB5或VPP 0.5 0.05

其他

蔗糖 342.31 30g/L

琼脂 agar (卡拉胶) 7g/L

MS培养基配方

MS培养基配方

1

MS 培养基配方

1、配置MS母液

母液配置 ：加热都是用温水浴加热，全部都要避光保存，用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可

表2.1 大量元素母液

药品 20x g/L 500ml（20 x）

KNO3 38g 19g

NH4NO3 33 g 16.5g

MgSO4•7H2O 7.4 g 3.7g

CaCl2 6.644g 3.322g

KH2PO4 3.4g 1.7g

溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解

CaCL2.2H2O 4.4g/L

表2.2 微量元素母液

药品 100x g/L 500ml（100x g/L）

KI

H3BO3

MnSO4.4H2O

ZnSO4.7H2O

Na2MoO4.2H2O

GuSO4.5H2O

CoCl2.6H2O 0.083g

0.62

22.3 g

0.86 g

0.025 g

0.0025 g

0.0025 g 0.0415 g

0.31 g

1.115 g

0.43 g

0.0125 g

0.00125 g

0.00125 g

溶于100ml蒸馏水,定容至500ml

表2.3 有机母液

药品 100x 1L 500ml(100x)

肌醇 10g 5g 2

烟酸 0.05g 0.025g

VB6 0.05g 0.025g

VB1 0.1g 0.05g

甘氨酸 0.2g 0.1g

MS培养基及配制注意事项

MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制

注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制

按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，母液

成 分

规定量 浓缩

倍数

称取量（mg） 母液

体积（ml） 配制1升培养基吸取量定容 编号 种类

1 大量元素 KNO3 1900 10 19000

1000

100 NH4NO3 1650 10 16500

MgSO4·7H2O 370 10 3700

KH2PO4 170 10 1700

2 CaCl2·2H2O 440 10 4400 1000 100

3

微量元素 MnSO4·4H2O 22.3 100 2230

1000

10 ZnSO4·7H2O 8.6 100 860

H3BO3 6.2 100 620

KI 0.83 100 83

Na2MoO4·7H2O 0.25 100 25

CuSO4.5H2O4 0.025 100 2.5

CoCL2.6H2O 0.025 100 2.5

4 铁盐 Na2-EDTA 37.3 100 3730 1000 10

FeSO4.4H2O 27.8 100 2780

5

有机物 甘氨酸 2.0 100 100

500

10 盐酸吡哆醇 0.5 100 25

盐酸硫铵素 0.1 100 5

烟酸 0.5 100 25

6 肌酸 100 100 5000 500 10 定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

组织培养实验MS培养基及配制注意事项

组织培养实验MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制

注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制

按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，母液

成 分 1倍培养基用量 浓缩

倍数 称取量（mg） 母 液

体积（ml） 配制1升培养基吸取量（ml） 编号 种类

1 大量元素 KNO3 1900 10 19000

1000 100 NH4NO3 1650 10 16500

MgSO4·7H2O 370 10 3700

KH2PO4 170 10 1700

2 CaCl2·2H2O 440 10 4400 1000 100

3 微量元素 MnSO4·4H2O 22.3 100 2230

1000 10 ZnSO4·7H2O 8.6 100 860

H3BO3 6.2 100 620

KI 0.83 1000 830

1000 1 Na2MoO4·7H2O 0.25 1000 250

CuSO4.5H2O 0.025 1000 25

CoCL2.6H2O 0.025 1000 25

4 铁盐 Na2-EDTA 37.3 100 3730 1000 10 FeSO4.4H2O 27.8 100 2780

5 有机物 甘氨酸 2.0 50 100

500 10 盐酸吡哆醇（VB6） 0.5 50 25

盐酸硫铵素（VB1） 0.1 50 5