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不同产地防己药材HPLC指纹图谱的研究李全生;张正杰;杨世海【摘要】建立防己药材的高效液相色谱指纹图谱,为评价及有效控制其质量提供参考.利用HPLC方法,测定了14个不同产地防己药材样品,选用Ultimmate XB C18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.1％甲酸(B),设定流速0.8mL/min、柱温30℃、检测波长282 nm.采用国家药典委员会的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”进行评价,并对各产地防己药材进行聚类分析.结果表明,14个产地防己药材的HPLC指纹图谱有9个共有峰,所有产地指纹图谱相似度均在0.9以上,不同产地防己质量相似性较好.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2017(044)004【总页数】6页(P125-130)【关键词】防己;产地;高效液相色谱法;指纹图谱;聚类分析【作者】李全生;张正杰;杨世海【作者单位】吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118【正文语种】中文【中图分类】R282.5防己为防己科植物粉防己Stephania tetrandraS.Moore的干燥根，最早记载于《神农本草经》中，分属于中品，名曰“解离”，具有利水消肿、祛风止痛的作用。
目前，粉防己为常用的重要中药，具有解热镇痛、风湿止痛、利尿消肿之功效，主要用于治疗水肿鼓胀、湿热脚气、手足挛痛、癣疥疮肿、高血压等症［1-2］。
野生防己生于山野丘陵地、草丛或矮林边缘下，一般生长5～10年能起挖，采挖后自我恢复能力弱。
防己完全依靠野生资源供应市场，近几年由于防己持续高价，大量的粉防己被无序地狂采乱挖，造成防己药材质量出现变化。
因此对不同产地防己药材的质量进行分析，明确产地间药材的差异，为防己药材人工种植提供优选种质资源十分必要。
在质量控制上，常以组织学和薄层色谱法为手段，通过描述显微特征以及检测粉防己碱和防己诺林碱的TLC斑点达到鉴别粉防己药材基源的目的，再用HPLC方法测定粉防己药材中粉防己碱的含量来控制粉防己药材的质量，限定其含量不得低于1.6%［3］。
HPLC法同时测定复方磷酸可待因口服溶液中3种有效成分及2种防腐剂的含量目的：建立同时测定复方磷酸可待因口服溶液中3种有效成分（磷酸可待因、盐酸麻黄碱、马来酸氯苯那敏）及2种防腐剂（苯甲酸钠、羟苯乙酯）含量的方法。
方法：采用高效液相色谱法。
色谱柱为GL·Science WondaSil C18-WR，流动相为乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液（含2.5 mmol/L庚烷磺酸钠和0.1%三乙胺，用磷酸调节pH至2.5±0.1）（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为210 nm，柱温为30 ℃，进样量为10 μL。
结果：磷酸可待因、盐酸麻黄碱、马来酸氯苯那敏、苯甲酸钠、羟苯乙酯检测质量浓度线性范围分别为0.365 8～457.20 μg/mL（r=0.999 9）、0.363 5～454.35 μg/mL（r=0.999 9）、0.124 8～155.98 μg/mL（r=0.999 9）、0.390 6～488.25 μg/mL（r=0.999 9）、0.121 3～151.65 μg/mL （r=0.999 9）；定量限分别为0.409 4、0.508 8、7.731 4、1.347 6、1.940 8 ng，检测限分别为0.146 2、0.181 7、2.494 0、0.449 2、0.606 5 ng；精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于1%；加样回收率分别为98.10%～101.96%（RSD=1.4%，n=9）、97.65%～101.14%（RSD=1.2%，n=9）、97.30%～102.30%（RSD=1.8%，n=9）、97.71%～102.21%（RSD=1.5%，n=9）、97.03%～101.55%（RSD=1.7%，n=9）。
结论：该方法操作简单，精密度、稳定性、重复性均较好，可用于同时测定复方磷酸可待因口服溶液中磷酸可待因、盐酸麻黄碱、马来酸氯苯那敏、苯甲酸钠和羟苯乙酯的含量。
[收稿日期] 2004206229[作者简介] 尹明福(1977-),女(朝鲜族),硕士研究生,研究方向为中药的抗肝纤维化.反相高效液相色谱法测定粉防己碱的含量尹明福,郑光浩,南极星(延边大学医药研究中心,吉林延吉133000)[摘要] [目的]探讨更有效的测定粉防己碱含量的方法.[方法]选用DESC Luna 5u C 18(2)色谱柱,流动相为甲醇2水(83∶17),含015g/L 的三乙胺,流速为018mL/min ,柱温为30℃,检测波长为282nm.[结果]粉防己碱在011137～016822μg 范围内呈良好的线性关系,平均回收率为102118%.[结论]用反相高效液相色谱法测定粉防己碱含量,快速、简便、可靠,适用于粉防己碱的含量分析.[关键词] 生物碱类;色谱法,高压液相;含量测定[中图分类号] R 28411 [文献标识码] A [文章编号] 100021824(2004)0320183202Determination of the tetrandrine by RP 2HPLCYIN Ming 2f u ,ZHENG G uang 2hao ,NAN Ji 2xing(Medical Research Institute ,Yanbian U niversity ,Yanji 133000,Jilin ,China )ABSTRACT :OBJ ECTIV E To develop a RP 2HPLC method for determination of the tet randri ne .M ETHODS The separation was performed in DESC Luna 5u C 18(2).Mobile phase was used methanol 2water (83∶17,V/V )containing 015g/L triethylamine.The follow rate was 018mL/min ,and the detect wavelength was set at 282nm ,and the temperature was 30℃.R ESUL TS The linear range of tet randri ne was 011137～016822μg and the average recovery rate of tet randri ne was 102118%.CONCL USION The method is rapid ,simple and accurate.It can be used in analysis of tet randri ne .K ey w ords :alkaloids ;chromatography ,high presure liquid ;content determination 粉防己碱又称汉防己甲素,是从防己科植物粉防己(S tephania tet randra S.Moore )块根中提取的双苄基异喹啉类生物碱,具有消炎及镇痛的作用.粉防己碱在抗纤维化和门静脉高压、调节免疫机能和预防和治疗肿瘤等方面具有很好的应用前景[1].目前,国内主要是利用薄层层析2分光光度法和薄层层析2荧光法测定粉防己碱的含量,关于利用高效液相色谱法测定粉防已碱含量的文献报道较少[2～4],为了更有效地测定粉防己碱,本实验采用反相高效液相色谱法测定了其含量,实验结果证明此法灵敏度高、准确、快速且重现性好.1 仪器与试药仪器采用日本岛津产高效液相色谱仪,・381・延边大学医学学报 2004年9月 第27卷 第3期包括L C210A泵、SPD210A紫外检测器、SCL210A数据处理仪及772i手动进样器(美国).粉防己碱对照品为Sigma公司的产品,甲醇为色谱纯,三乙胺为国产分析纯.本实验所用粉防己碱购自浙江省邳州市富源生物制品有限公司,批号为030606.2 方法与结果211 色谱条件 色谱柱为DESC L una5u C18(2),大小为250mm×4160mm,S/NO 16337922),流动相为甲醇2水(83∶17),含015g/L的三乙胺,流速为018mL/min,柱温为30℃,检测波长为282nm.212 标准溶液的配置 精密称取粉防己碱对照品11137mg,置于250mL容量瓶中,用甲醇溶解稀释至刻度,得0104548g/L的标准溶液.213 标准曲线的绘制 分别用微量进样器吸取215,510,715,1010,1215,1510μL标准溶液注入到色谱柱中,测定峰面积,以进样体积为横坐标,峰面积为纵坐标,得线性方程为Y=50711534X-121021200,r=019991.结果表明,粉防己碱在011137～016822μg 范围内具有良好的线性关系(图1).214 精密度试验 精密吸取供试品溶液10μL,连续重复进样5次,测得供试品的峰面积,RSD为0177%.215 稳定性试验 取供试品溶液10μL,分别在0,2,4,8,12,24h各测定1次,测定峰面积,结果其RSD为2105%,说明该样品在24h内相对稳定.A:标准品;B:供试品 图1 标准品及供试品高效液相色谱图216 回收率试验 吸取粉防己碱对照品溶液1mL,置于已知含量的供试品溶液中,按上述色谱条件测定,结果表明其回收率为102118%,RSD为3119%(n=5).217 样品测定 精密称取粉防己碱样品13126mg,置于250mL容量瓶中,加甲醇溶解稀释至刻度,摇匀,用0145μm的微孔滤膜过滤,按上述实验条件进样10μL,用回归方程计算样品的含量.结果表明,样品中的粉防己碱含量为01911g/L,RSD为1132% (n=5).218 重现性试验 取粉防己碱样品,按上述配制方法,平行制备5份溶液,进样10μL,测定峰面积,RSD为1168%.3 讨论本实验用高效液相色谱法测定了粉防己碱的含量.在流动相的筛选过程中发现,如果流动相中没有三乙胺,可见峰形的拖尾较严重,其原因可能是粉防己碱中的碱性氮原子・481・Journal of Medical Science Y anbian University Sep.2004Vol.27No.3易与C 18色谱柱上未完全封尾的氢氧根产生的氢键结合,使其难以洗脱,造成拖尾.加入三乙胺后可取代粉防己碱与色谱柱中的氢氧根产生的氢键结合,减少粉防己碱在色谱柱上的吸附,使其易于洗脱,从而改善色谱峰的形状.在本实验流动相筛选过程中曾用过二乙胺,但其分离效果较三乙胺差.综上所述,认为本方法简便、专属性强、灵敏度高且重现性好,适用于粉防己碱的含量分析.[参 考 文 献][1] 姜蕙馨,胡天锡,彭葆新.汉防己甲素治疗矽肺作用机理的初步探讨[J ].中华结核病呼吸系统疾病杂志,1983,6(2):92.[2] 娄建石,张才丽.粉防己碱在兔体内的药代动力学研究[J ].中草药,1993,24(1):24.[3] 陈春林,张才丽.高效薄层色谱法测定粉防己碱血浆浓度[J ].中国医院药学杂志,1991,11(11):490.[4] 汪宝琪,庞志攻,范春.北豆根中粉防己碱的药物代谢动力学研究[J ].西安医科大学学报,1996,17(4):498.[收稿日期] 2004205227[作者简介] 许月仙(1958-),女(朝鲜族),主管药师,研究方向为药品质量控制.薄层色谱法鉴定清肝乐胶囊的组成成分许月仙1,朱延萍2(1.延吉市药品检验所,吉林延吉133000;2.延边药品检验所,吉林延吉133000)[摘要] [目的]建立清肝乐胶囊的定性鉴别法.[方法]采用薄层色谱鉴别方法,对清肝乐胶囊中的地耳草、熊去氧胆酸、苦参及当归进行鉴别.[结果]所建立的方法简便、准确且专属性强.[结论]薄层色谱法可用于清肝乐胶囊的质量控制.[关键词] 色谱法,薄层;鉴定;质量控制;植物,药用[中图分类号] R 28411 [文献标识码] A [文章编号] 100021824(2004)0320185204Indentif ication of the component of Qingganle capsules by thin 2layer chrom atographyXU Yue 2xian 1,ZHU Yan 2ping 2(1.Yanji Institute f or Drug Cont rol ,Yanji 133000,Jilin ,China ;2.Yanbian Institute f or Drug Cont rol ,Yanji 133000,Jilin ,China )ABSTRACT :OBJ ECTIV E To eatablish a quality sdandards for the Qi ngganle capsules.M ETHODS Herba hy 2perici japonici ,Pulvis f ells ursi ,Radi x sophorae f lavescentis ,Radi x angelicae si nensis in the Qi ngganle cap 2sules were identified by thin 2layer chromatography.R ESUL TS The established methods are simple andaccurate with a strong specificify.CONCL USION The methods can be used in the quality control of the・581・延边大学医学学报 2004年9月 第27卷 第3期。
粉防己中粉防己碱和防己诺林碱的分离制备研究冀德富;王小康;郭嫦娥;裴妙荣【摘要】Objective:To establish a method of separating and preparing tetrandrine and fangchinoline from stephania te-trandra S.Moore. Methods:Tetrandrine and fangchinoline were isolated by column chromatography,and then were identi-fied by TLC. The contents of tetrandrine and fangchinoline were determined by HPLC. Results:The chromatograms of the purified product of tetrandrine and fangchinoline were consistent with the standard product. The contents of tetrandrineand fangchinoline in sample were 100.97%,98.54% respectively. Conclusion:This method is simple and practical.The products are very pure.%目的：建立粉防己中粉防己碱和防己诺林碱的分离制备方法。
方法：采用柱色谱法对粉防己碱和防己诺林碱进行分离，采用薄层色谱法对粉防己碱和防己诺林碱的纯化品进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对其进行含量测定。
结果：经薄层色谱法鉴定粉防己碱与防己诺林碱的纯化品与标准品图谱一致；经高效液相色谱法测定，所得样品中粉防己碱和防己诺林碱的百分含量分别为100.97%和98.54%。
RP-HPLC测定轻身减肥片中粉防己碱与防己诺林碱的含量
宋旭峰;余菁;胡晓炜
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2005(027)004
【摘要】目的:运用反相高效液相色谱法测定轻身减肥片(大黄、防己等)中粉防己
碱及防己诺林碱的含量.方法:采用Zor-bax C18柱,甲醇-0.3%二乙胺溶液(75:25)
为流动相,检测波长为242nm.结果:粉防己碱的回收率为103.65%、RSD为
1.59%(n=6);防己诺林碱的回收率为97.11%、RSD为1.91%(n=6).结论:本法简便、快速、重现性好,可作为产品的定量分析方法.
【总页数】3页(P405-407)
【作者】宋旭峰;余菁;胡晓炜
【作者单位】杭州市药品检验所,浙江,杭州,310014;杭州市药品检验所,浙江,杭
州,310014;杭州市药品检验所,浙江,杭州,310014
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.HPLC法测定豨莶风湿片中粉防己碱及防己诺林碱的含量 [J], 刘珊珊;殷善霞;张峰
2.RP-HPLC测定舒肝饮丸中粉防己碱与防己诺林碱的含量 [J], 杨学猛;徐凤梅;魏
景文;罗桂萍
3.UFLC法同时测定防己中粉防己碱和防己诺林碱的含量 [J], 朱鹤云;费雪;孙宇慧;
王黎明;郝乘仪;冯波;关皎
4.HPLC法测定复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱的含量 [J], 侯丽丽;晏永新;张丽
5.高效液相色谱法测定防己药材中粉防己碱与防己诺林碱的含量 [J], 黄泽春;王益群
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HPLC法同时测定防己黄芪汤中5种成分刘书芬;梁倩倩;陈岩;李金龙;施杞;王拥军【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2014(036)011【摘要】目的建立HPLC定量分析防己黄芪汤(防己、黄芪、白术和甘草)中防己诺林碱、粉防己碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸5种成分的方法.方法采用HPLC外标法,样品经过50％甲醇提取,采用DIKMA DIAMONSIL (2)C18柱,甲醇-0.2 mol/L乙酸铵0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,紫外检测波长254 nm和270 nm.结果防己诺林碱、粉防己碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸分别在4 ～50 μg/mL、3～222 μg/mL、7～111 μg/mL、15 ～ 244μg/mL、14 ～222μg/mL范围内呈良好线性关系.结论本方法准确,可同时测定防己黄芪汤的3种药材中的5种成分.【总页数】4页(P2312-2315)【作者】刘书芬;梁倩倩;陈岩;李金龙;施杞;王拥军【作者单位】上海中医药大学脊柱病研究所,上海200032;上海中医药大学附属龙华医院,上海200032;上海中医药大学脊柱病研究所,上海200032;上海中医药大学附属龙华医院,上海200032;上海中医药大学脊柱病研究所,上海200032;上海中医药大学附属龙华医院,上海200032;上海中医药大学脊柱病研究所,上海200032;上海中医药大学附属龙华医院,上海200032;上海中医药大学脊柱病研究所,上海200032;上海中医药大学附属龙华医院,上海200032;上海中医药大学脊柱病研究所,上海200032;上海中医药大学附属龙华医院,上海200032【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC法同时测定“中柴2号”中7种成分 [J], 温爽;索志荣;秦海燕;杨兴旺2.HPLC法同时测定刺玫果提取物中的黄酮类成分及其体外活性测定 [J], 邸松;钟方丽;张晓丽;王晓林;雷永平3.HPLC法同时测定十三味和中丸中9种成分 [J], 徐倩; 杨满琴; 鲍学梅; 葛丹丹; 徐国兵; 胡云飞; 谢若男4.HPLC法同时测定胃病丸中8种成分 [J], 孔艳娥;段坤元5.HPLC法测定弩药液中5个成分的含量 [J], 昝芳芳;崔瑾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
UFLC法同时测定防己中粉防己碱和防己诺林碱的含量朱鹤云;费雪;孙宇慧;王黎明;郝乘仪;冯波;关皎【摘要】为了建立超快速液相色谱法(UFLC)同时测定防己中粉防己碱和防己诺林碱的含量,为防己药材的质量控制提供参考.方法:采用Shim-Pack XR-ODS柱(75mm×3.0mm,2.2 μm);以乙腈-0.2％磷酸水(三乙胺调pH值至8.0)(65:35,v/v)为流动相;流速为0.8 mL/min;检测波长为282 nm;柱温为30℃.结果:粉防己碱和防己诺林碱分别在10-500 μg/mL(R=0.9999)和10-500 μg/mL(R=0.999 9)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为98.0％和99.1％.表明该方法结果准确、操作简便、具有良好的重现性和稳定性,可用于防己药材的质量控制,同时为新兽药开发利用提供参考.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2017(053)008【总页数】3页(P91-93)【关键词】防己;粉防己碱;防己诺林碱;超快速液相色谱法【作者】朱鹤云;费雪;孙宇慧;王黎明;郝乘仪;冯波;关皎【作者单位】吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013【正文语种】中文【中图分类】R917防己为防己科植物粉防己Stephania tetrandra.S.Moore.的干燥根[1]，性苦，寒，归膀胱、肺经，具有利水消肿、祛风止痛之功效 [1]。
防己中的主要化学成分为生物碱，其中粉防己碱和防己诺林碱为主要活性成分，2015年版《中国药典》将粉防己碱和防己诺林碱作为防己药材质量控制的主要指标。
HPLC法同时测定防己药材中防己诺林碱和粉防己碱
饶毅;黎莉;刘隆洪;袁华生;魏惠珍;黄周华;杨世林
【期刊名称】《中草药》
【年(卷),期】2006(37)4
【总页数】2页(P612-613)
【关键词】防己诺林碱;粉防己碱;HPLC法;同时测定;药材;质量控制指标;活性成分;血小板聚集;粉防己根;解热镇痛
【作者】饶毅;黎莉;刘隆洪;袁华生;魏惠珍;黄周华;杨世林
【作者单位】中药固体制剂制造技术国家工程研究中心;江西中医学院;江西翔云生物药业有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】R286.11;R972
【相关文献】
1.HPLC梯度洗脱法同时测定活血镇痛膏中防己诺林碱、粉防己碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱 [J], 谭雄斯;庞武耀
2.HPLC法测定复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱的含量 [J], 侯丽丽;晏永新;张丽
3.高效液相色谱法同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量 [J], 杨帆; 吴梦丽; 高慧; 闫国跃; 何秋梅; 谢阳姣
4.高效液相色谱法同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量 [J], 杨帆; 吴梦丽; 高慧; 闫国跃; 何秋梅; 谢阳姣
5.高效液相色谱法测定防己药材中粉防己碱与防己诺林碱的含量 [J], 黄泽春;王益群
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防己类药材的生药学比较研究
张浩;王灿
【期刊名称】《天然产物研究与开发》
【年(卷),期】1996(008)002
【摘要】我国西南地区所使用的防己,除药典收载品种外,多来源于马兜铃属植物,并载入地方“药品标准”。
为便于药材鉴定和进行质量评价,本文对常用防己类生药进行了显微组织特征的比较,并用反相HPLC法对其进行了分析,测定了马兜酸A 的含量。
【总页数】5页(P17-21)
【作者】张浩;王灿
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R931.71
【相关文献】
1.蒙药材梅花草、紫花地丁、肋柱花的生药学比较研究 [J], 道日娜
2.高效液相色谱法同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量 [J], 杨帆; 吴梦丽; 高慧; 闫国跃; 何秋梅; 谢阳姣
3.高效液相色谱法同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量 [J], 杨帆; 吴梦丽; 高慧; 闫国跃; 何秋梅; 谢阳姣
4.HPLC法同时测定防己药材中防己诺林碱和粉防己碱 [J], 饶毅;黎莉;刘隆洪;袁华生;魏惠珍;黄周华;杨世林
5.高效液相色谱法测定防己药材中粉防己碱与防己诺林碱的含量 [J], 黄泽春;王益群
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超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中粉防己碱、防己诺
林碱及马兜铃酸A
涂晓琴;赵薇;杨柳;刘玉玲;殷帅;毕武
【期刊名称】《香料香精化妆品》
【年(卷),期】2022()6
【摘要】采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,建立了化妆品中粉防己碱、防己诺林碱及马兜铃酸A的检测方法。
样品经甲醇提取,经流动相(水-甲醇)提取过滤后,采用C18柱(100 mm×2.1 mm×3.0μm)进行分离。
结果表明,3种成分在9~176 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数大于0.998;加标回收率为85%~115%,相对标准偏差(RSD)小于5%(n=6),检出限均低于0.02μg/g。
该方法简单、快速、灵敏,能够满足化妆品中粉防己碱、防己诺林碱及马兜铃酸A的检测需求。
【总页数】4页(P9-12)
【作者】涂晓琴;赵薇;杨柳;刘玉玲;殷帅;毕武
【作者单位】湖南省药品检验检测研究院/湖南省药品质量评价工程技术研究中心【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定大鼠血浆中防己诺林碱和粉防己碱
2.高效液相色谱法同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量
3.高效液相色谱法同时测定防己药材中
粉防己碱和防己诺林碱含量4.高效液相色谱法测定防己药材中粉防己碱与防己诺林碱的含量
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HPLC法测定复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱的含量侯丽丽;晏永新;张丽
【摘要】为了用HPLC法同时测定复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱的含量.采用Diamonsil C 18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈-0.2％磷酸水溶液-三乙胺(63∶37∶0.05)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长282 nm的液相检测方法.结果表明,在此色谱条件下,粉防己碱和防己诺林碱的分离良好,分别在20.52 ～205.2μg/mL和17.84 ～ 178.4 μg/mL浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系.按外标法以峰面积计算进行测定,粉防已碱和防己诺林碱的平均回收率分别为98.15％和97.35％,RSD分别为1.39％和1.90％.表明该方法简便,快速,准确,适用于防已散中粉防己碱和防己诺林碱的含量测定.
【期刊名称】《中国兽药杂志》
【年(卷),期】2013(047)002
【总页数】3页(P24-26)
【关键词】复方防己口服液;粉防己碱;防己诺林碱;高效液相色谱法
【作者】侯丽丽;晏永新;张丽
【作者单位】江西出入境检验检疫局综合技术中心,南昌330002
【正文语种】中文
【中图分类】S859.79
复方防己口服液是《中国兽药典》2010年版二部收载的“防己散”改剂型产品，
具有补肾健脾，利尿除湿之功效[1]，用于治疗禽腹水综合症。
为了提高复方防己
口服液的质量可控性，在参考相关文献资料[2-4]的基础上，研究建立了高效液相
色谱同时测定复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱含量的方法。
1 材料
1.1 试验仪器及试剂 LC200高效液相色谱仪(N2000色谱工作站);超声波清洗仪;
电子天平(十万分之一);乙腈、甲醇为色谱纯;去离子水自制。
1.2 对照品及样品粉防己碱对照品(批号:110711-200507，供含测用)，防己诺林碱对照品(批号:110793-200605，供含测用)，均由中国药品生物制品检定所提供;复方防己口服液，批号:110901、110902、110903，江西新世纪民星动物保健品有限公司产品。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备精密称取粉防己碱对照品约10.26 mg，防己诺林碱对照
品约8.92 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.2052 mg/mL粉防己碱和0.1784 mg/mL防己诺林碱对照品贮备液。
精密量取上述对照品贮备液5 mL，至10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1 mL含粉防己碱0.1026 mg、防己诺林碱0.0892 mg的混合对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备精密量取样品溶液1 mL，加水10 mL，置分液漏斗中，
加入2 mL氨水混匀，用乙酸乙酯提取3次，每次10 mL，合并乙酸乙酯提取液，于65℃水浴蒸干，残渣用含5%氨水的甲醇溶液溶解并定容于10 mL量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 阴性样品溶液制备另取不含防己药材的阴性样品，照2.2项下操作制备成阴
性样品溶液。
2.4 色谱条件及系统适应性试验 Diamonsil C18柱(5 μm，4.6 mm×250 mm)色
谱柱;乙腈-0.2%磷酸水溶液-三乙胺(63∶37∶0.05)为流动相;检测波长为282 nm;
流速为1.0 mL/min;进样量10 μL。
在上述色谱条件下，粉防己碱、防己诺林碱与其他组分得到了很好的分离，且阴性无干扰。
见图1-图3。
2.5 方法学考察
2.5.1 线性范围精密吸取对照品贮备液(粉防己碱0.2052 mg/mL和防己诺林碱0.1784 mg/mL)1 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL 和10 mL，分别置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度。
分别精密吸取各对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。
以粉防己碱和防己诺林碱的色谱峰面积(y)，对其浓度(x，μg/mL)进
行线性回归。
图1 防己诺林碱和粉防己碱混合对照品HPLC 图
结果回归方程(n=6)和相关系数分别为:粉防己碱:y=9038．7x+5932．8，R2=1;
防己诺林碱:y=10479x+1858．4，R2=0．9997。
实验结果表明，粉防己碱和防己诺林碱的色谱峰面积与浓度分别在20.52～205.2 μg/mL和 17.84～178.4
μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系。
2.5.2 重复性试验取批号为110901的样品，按2.2项下方法制备供试品溶液6份，测定粉防己碱和防己诺林碱的含量，结果粉防己碱的含量分别为0.4860、
0.4932、0.5013、0.4851、0.4922、0.4927 mg/mL，防己诺林碱的含量分别为0.4273、0.4337、0.4421、0.4322、0.4335、0.4355 mg/mL，重复性 RSD 分
别为1.19%和1.11%，表明方法可行，重复性好。
2.5.3 精密度试验精密吸取同一供试品溶液10 μL，重复进样6次，测定峰面积，计算RSD，结果粉防己碱的峰面积分别为 365718.4、357752.7、362612.0、
365053.2、362238.1、361062.5，防己诺林碱的峰面积分别为 346695.4、345900.5、344973.9、346700.2、343491.3、343971.7，精密度 RSD 分别为0.80%和0.40%，表明仪器精密度良好。
2.5.4 稳定性试验精密吸取新配制的一份供试品溶液，分别于制备后 0、2、4、8、12、24 h 进样1 次，记录峰面积。
结果，粉防己碱峰面积的 RSD为0.84%，防
己诺林碱峰面积的RSD为0.87%，表明供试品溶液在24 h内稳定。
2.5.5 加样回收率试验精密量取己知含量的复方防己口服液(批号:110901)6份，
每份5 mL，置10 mL的量瓶中，分别精密加入相应含量的粉防己碱和防己诺林
碱对照品，加水至刻度，摇匀。
精密吸取1 mL，按2.2项下方法制备供试品溶液，进行含量测定，计算加样回收率，结果见表1和表2。
粉防己碱平均回收率为
97.32%，RSD为0.87%，防己诺林碱平均回收率为99.05%，RSD为1.65%。
结果表明，本试验具有良好的回收率。
表1 粉防己碱加样回收试验结果序号样品中含量/mg加入量/mg总测得量/mg 回收率平均回收率RSD 1 2.45 2.32 4.68 96.30%2 2.45 2.51 4.92 98.30%3
2.45 2.44 4.82 97.23% 97.32%0.87%4 2.45 2.21 4.58 96.56%5 2.45 2.30 4.71 98.32%6 2.45 2.40 4.78 97.20%
表2 防己诺林碱加样回收试验结果序号样品中含量/mg加入量/mg总测得量
/mg 回收率平均回收率RSD 1 2.15 2.17 4.29 98.81%2 2.15 2.03 4.15
98.34%3 2.15 2.20 4.34 99.81% 99.05%1.65%4 2.15 2.26 4.40 99.56%5 2.15 2.11 4.18 96.45%6 2.15 2.02 4.20 101.32%
2.6 含量测定取批号为110901、110902、110903的三批复方防己口服液样品，按上述所述的方法进行含量测定，用外标法计算样品中粉防己碱和防己诺林碱的含量，结果如表3。
表3 三批样品含量测定结果批号含量/(mg·mL-1)粉防己碱含量防己诺林碱含量
110901 0.49 0.43 110902 0.55 0.47 110903 0.51 0.46
3 讨论
3.1 复方防己口服液由11味中药组成，成份复杂，干扰因素多。
在样品处理过程中发现，当样品液pH大于10时，粉防己碱和防己诺林碱处于解离状态，用乙酸乙酯萃取能得到较高的提取率。
故在样品处理中以氨水调pH后再进行提取，从实验结果看，该方法简便、快速、准确，可作为该制剂的一个定量质控标准。
3.2 在色谱条件摸索过程中发现，色谱峰峰形对流动相pH的变化较敏感，为了改善峰形的对称性，通常在流动相中添加适量三乙胺或二乙胺，但三乙胺或二乙胺的用量过大将导致流动相pH值偏高，影响色谱柱的使用寿命。
为了找到合适的流动相，试验中比较了乙腈-甲醇-水-冰醋酸(40∶30∶30∶1)(每100 mL含十二烷基磺酸钠0.41g)、0.06%二乙胺的甲醇-乙腈-水(3∶1∶1)、甲醇 -乙腈 -0.002 mol/L 磷酸二氢钾-二乙胺(55∶25∶20∶0.06)、0.06%三乙胺-乙腈溶液(44∶56)、乙腈-0.2%磷酸水溶液-三乙胺(63∶37∶0.05)等展开系统，综合考虑，以乙腈-0.2%磷酸水溶液-三乙胺(63∶37∶0.05)为流动相分离效果最为理想。
3.3 本方法准确灵敏，可作为复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱的定量分析方法，为进一步制定复方防己口服液质量标准提供了依据，并对含有粉防己碱和防己诺林碱的其他产品的含量测定方法也具有一定的参考价值。
参考文献:
[1]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典2010年版二部[S].
[2]刘永刚，刘勇，何瑞杰，等.HPLC测定防己中防己诺林碱和粉防己碱的含量[J].中国实验方剂学杂志，2010，16(9):49-51.
[3]冯碧敏，叶云，张昊.高效液相色谱法测定防己中粉防己碱含量[J].药物鉴定，2005，14(11):36-37.
[4]饶毅，黎莉，刘隆洪，等.HPLC法同时测定防己药材中防己诺林碱和粉防己碱
[J].中草药，2006，37(4):612-613.。
