常见寄生虫病实验室检查及诊断进展共61页
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第六章寄生虫病诊断寄生虫病应采取综合诊断,应根据临床症状、流行病学、病理变化、病原体检查等综合进行。
第一节病原学诊断方法病原体检查是寄生虫病最可靠的诊断方法,无论是粪便中的虫卵,还是组织内不同阶段的虫体,只要能够发现其一,便可确诊。
一、粪便虫卵检查法许多寄生虫,特别是寄生于消化道的虫体,其虫卵、卵囊或幼虫均可通过粪便排出体外,通过检查粪便,可以确定是否感染寄生虫或确定寄生虫的感染强度。
1.直接涂片法direct smear method直接涂片法是取50%甘油水溶液或普通水1~2滴滴于载玻片上,镊取黄豆大小的被检粪块与之混匀,剔除粗粪渣,抹薄涂匀,盖上盖玻片镜检。
本法最为简便,但检出率不高。
为提高阳性检出率,每个样本应检多片。
2.漂浮集卵法flotation method应用比重较虫卵大的漂浮液,使蠕虫卵、球虫卵囊等浮于液体表面,易于集中检查。
漂浮集卵法对某些线虫卵、绦虫卵和原虫卵囊有很好的检出效果。
缺点是高比重的漂浮液易使虫卵和卵囊变形,检查时必须迅速,也可在制片时补加一滴清水。
常用方法为饱和盐水漂浮法。
取5~10g粪便置于200ml烧杯中,先加入少量饱和盐水(1L水中加食盐400g),搅拌混合后再加入约20倍的漂浮液,用金属筛或纱布滤去粪渣,滤液静置30~60min,用直径0.5~1.0cm的金属圈蘸取表面液膜,抖落于载玻片上,加盖片后镜检。
常用的饱和液还有次亚硫酸钠饱和液、硫酸镁饱和液、硝酸钠饱和液、硝酸铵液、硝酸铅液等。
检查比重较大的虫卵,如棘头虫虫卵、猪肺丝虫虫卵及吸虫卵时,需用硫酸镁、硫代硫酸钠以及硫酸锌等饱和溶液。
3.沉淀集卵法sedimentation method用水处理粪便,经离心或自然沉淀,使虫卵沉淀集中,更易于检查。
自然沉淀集卵法是取粪便5~10g加水混合成悬浮液,经40~60孔/2.54cm2铜筛滤去大块物质,静置15min后倾去上清液,如此反复操作,直至上层液体透明为止,最后弃去上层液体,置沉淀物于载玻片上,镜检虫卵。
寄生虫病的实验室检查常见方法研究【摘要】在目前的临床环境中,针对寄生虫进行诊断的实验室检查方式,包括病原学检查、免疫学检查以及分子生物学检查而在急生虫病的诊断理综这些检查方式对于确诊患者的病情来说极为重要。
病原学检查方案在应用过程中直观且准确,但值得注意的是,这种诊断方式可能存在一定的局限性,随着近年来医疗技术的不断发展免疫学检查,以及分子生物学检查所具有的敏感性和特异性相对来说更高,并且这类检查方式具有良好的可重复性,对于临床开宅急生虫检查工作来说有十分积极的作用,本文中简单针对寄生虫病的实验室检测技术进行综合分析,旨在为我国现代化的寄生虫疾病的实验室检查提供帮助与参考。
【关键词】寄生虫;实验室检查;诊断分析;检查方法寄生虫在目前临床上进行检查时常用的检查方式包括病原学检查、免疫学检查以及分子生物学检查。
这种诊断方式对于寄生虫病的诊断来说有十分积极的作用,病原学检查所指的是医务人员通过采集患者血液以及组织和粪便等标本对其进行直接观察,或在处理以及染色后对患者的寄生虫感染状况进行评估,通过这种方式能够发现寄生虫虫体以及虫卵,并且也有一部分检查是通过对寄生虫进行体外培养或动物接种后在进行病原学检查,通过这种方式能够有助于明确患者的寄生虫感染状况。
但值得注意的是,由于寄生虫感染阶段的不同以及跻身部位的不同和标本采集的不同。
在外界综合因素的影响下都有可能导致患者的寄生虫感染,出现误诊或者漏诊的情况,在检查过程中整体来说耗时费力并且重复性不佳,需要由检查者进行完全主观的判断,这就导致其诊断准确度受到极大的影响,检查人员不仅需要具备丰富的寄生虫学知识和检测经验,同时还需要具备良好的免疫检查工作的综合素质。
免疫学检查以及分子生物学检查是寄生虫病实验室诊断中十分重要的一个组成部分,相较于传统的病原学检查来说,免疫学检查和分子生物学检查具有更高的敏感性和特异性在进行操作,是相对来说较为简便,并且有助于提高患者的诊断准确度,相关研究人员需要针对其中存在的问题进行综合化的分析,了解患者的病情,只有这样才能够使患者的治疗总有效率得到提升。
寄生虫感染的诊断1临床诊断:A病史、症状、体征 B物理诊断:X线、B超、CT、MRI 2实验室检查:A病原学方法:粪便检查;血液检查;排泄物分泌物检查;其他器官组织检查B免疫学方法 C分子生物学方法(一)粪便检查:直接涂片法;厚涂片法;浓集法;毛蚴孵化法;肛门拭子检查法;钩蚴培养法;虫卵计数法;定量透明法;带绦虫孕节检查法。
粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。
要取得准确的结果1)粪便必须新鲜,送检时间一般不宜超过24小时; 2)盛粪便的容器要干净,并防止污染与干燥; 3)粪便不可混杂尿液等,以免影响检查结果; 4)取材部位:尽可能取病变部位。
直接涂片法:用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便,适用范围广,但检出率相对较低。
一般要求连续作3次涂片,可提高检出率。
⑴蠕虫卵检查:方法:一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。
应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
⑵原虫检查:1)活滋养体检查:方法同查蠕虫卵。
注意事项。
2)包囊的碘液染色检查:方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。
若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,再盖上盖片。
涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。
3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存的含卵囊粪便都可用此法染色。
染色过程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法复染。
厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。
待粪膜稍干,即可镜检。
玻璃纸准备:将玻璃纸浸于甘油-孔雀绿溶液中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。
使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。
如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。
沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。
寄生虫感染的诊断1临床诊断:A病史、症状、体征 B物理诊断:X线、B超、CT、MRI 2实验室检查:A病原学方法:粪便检查;血液检查;排泄物分泌物检查;其他器官组织检查B免疫学方法 C分子生物学方法(一)粪便检查:直接涂片法;厚涂片法;浓集法;毛蚴孵化法;肛门拭子检查法;钩蚴培养法;虫卵计数法;定量透明法;带绦虫孕节检查法。
粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。
要取得准确的结果1)粪便必须新鲜,送检时间一般不宜超过24小时; 2)盛粪便的容器要干净,并防止污染与干燥; 3)粪便不可混杂尿液等,以免影响检查结果; 4)取材部位:尽可能取病变部位。
直接涂片法:用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便,适用范围广,但检出率相对较低。
一般要求连续作3次涂片,可提高检出率。
⑴蠕虫卵检查:方法:一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。
应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
⑵原虫检查:1)活滋养体检查:方法同查蠕虫卵。
注意事项。
2)包囊的碘液染色检查:方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。
若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,再盖上盖片。
涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。
3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存的含卵囊粪便都可用此法染色。
染色过程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法复染。
厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。
待粪膜稍干,即可镜检。
玻璃纸准备:将玻璃纸浸于甘油-孔雀绿溶液中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。
使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。
如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。
沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。
1临床诊断:A病史、症状、体征 B物理诊断:X线、B超、CT、MRI2实验室检查:A病原学方法:粪便检查;血液检查;排泄物分泌物检查;其他器官组织检查B免疫学方法 C分子生物学方法(一)粪便检查:直接涂片法;厚涂片法;浓集法;毛蚴孵化法;肛门拭子检查法;钩蚴培养法;虫卵计数法;定量透明法;带绦虫孕节检查法。
粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。
要取得准确的结果1)粪便必须新鲜,送检时间一般不宜超过24小时; 2)盛粪便的容器要干净,并防止污染与干燥;3)粪便不可混杂尿液等,以免影响检查结果; 4)取材部位:尽可能取病变部位。
直接涂片法:用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便,适用范围广,但检出率相对较低。
一般要求连续作3次涂片,可提高检出率。
⑴蠕虫卵检查:方法:一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。
应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
⑵原虫检查:1)活滋养体检查:方法同查蠕虫卵。
注意事项。
2)包囊的碘液染色检查:方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。
若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,再盖上盖片。
涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。
3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存的含卵囊粪便都可用此法染色。
染色过程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法复染。
厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。
待粪膜稍干,即可镜检。
玻璃纸准备:将玻璃纸浸于甘油-孔雀绿溶液中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。
使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。
如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。
沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。