两种不同猪瘟疫苗的免疫效果比较分析
- 格式:doc
- 大小:217.00 KB
- 文档页数:5
两种猪瘟疫苗抗原检测方法对比分析一、实时荧光定量PCR将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。
可以实时定量检测目标的基因拷贝数。
优势方便,快捷,灵敏,非常微量的样品,在几个小时内就可以出结果。
劣势1、无法区别活的病毒和死亡的病毒,检测的结果只是病毒的基因拷贝数,跟活病毒数量无关。
针对这个问题,可以进行一个小实验。
疫苗企业、猪场、检测单位如果有兴趣均可以试试。
方法很简单,选择同一批次的三瓶疫苗,选择其中一瓶疫苗,加入适量甲醛灭活,然后与不灭活的剩余两瓶疫苗同时使用荧光定量PCR方法检测,看其检测结果。
2、无法鉴别出BVDV和猪瘟病毒的基因容易出现假阳性。
3、受操作影响较大,定量数据有一定偏差。
4、检测出的基因拷贝数跟在猪体上的免疫效果没有直接相关性。
5、没有标准可以参考,各自为战。
用处使用实时荧光定量PCR方法只能大致定量疫苗中的病毒基因数量,无法确定猪瘟疫苗中的活病毒的抗原含量,只可以在同等条件下大致评估疫苗中的基因含量高低,检测出的基因拷贝数量跟疫苗中的活病毒数量和免疫效果完全没有相关性。
目前,实时荧光定量PCR均是各个检测机构的自建方法,检测流程、引物与耗材等均按照自己的标准进行,没有国家标准可以参考,而且进行操作的实验室环境控制参差不齐。
因此,同一个样品,可能各个试验室检测的结果会有明显偏差。
二、兔体感染量(RID)检测按照疫苗瓶签注明的头份,使用生理盐水按照内控标准进行稀释,然后接种家兔,上下午各测体温一次,48小时后每隔6小时测定体温一次,当兔子出现典型的定型热反应时,疫苗判断合格。
实验研究 2019年10月下不同猪瘟疫苗对仔猪免疫效果对比试验石少悦(天津威特生物医药有限责任公司,天津 300301)摘 要:目的:总结不同猪瘟疫苗对仔猪免疫效果对比结论。
方法:在2019年1月到3月开展本次研究,采用基础免疫比较好的某两种场作为案例进行研究。
总共选取40头保育仔猪,检测所用的母源抗体合格后在30天日龄时开展研究。
本次研究中所使用的疫苗均属于规模猪场使用量最大的疫苗,最终选取脾淋苗与细胞苗。
在日龄30d时进行首次免疫,在首次免疫后28d时进行二次免疫。
总结不同时间两组仔猪的免疫效果。
结果:首次免疫后两组仔猪均未达到免疫标准,数据差异不适用统计学标准(P>0.05);2次免疫后两组仔猪的免疫指标相对于2次免疫前均有明显数据优势,对比结果适用统计学标准(P<0.05),但组间对比结果不适用统计学标准(P>0.05)。
结论:不同猪瘟疫苗对仔猪免疫效果对比差异不突出,首次免疫均无法达到免疫效果,2次加强免疫效果突出,可以更好的强化机体抗体,可用于紧急免疫接种,值得推广。
关键词:猪瘟疫苗;仔猪;免疫效果;效果对比猪瘟主要是因为猪瘟病毒所导致的一种高度接触性、出血性以及致死性的传染病,在具体的疾病表现方面是以小点状的出血、脾脏边缘性坏死、急性的发热、细小血管病变等为主。
因为生猪属于我国重要的养殖品种,猪瘟的发生对于养猪业的影响非常显著,对于猪瘟的干预措施主要是以预防为主[1]。
对此,为了更好的提高对猪瘟的预防水平,本文以研究方式探讨不同猪瘟疫苗对仔猪免疫效果对比,具体研究方法、结果如下。
1 资料和方法1.1 一般资料在2019年1月到3月开展本次研究,采用基础免疫比较好的某两种场作为案例进行研究。
总共选取40头保育仔猪,检测所用的母源抗体合格后在30天日龄时开展研究,试验所用的自主品种均属于杜×长×大商品猪。
1.2 方法本次研究中所使用的疫苗均属于规模猪场使用量最大的疫苗,最终选取脾淋苗与细胞苗。
10.目前市场上有细胞苗,组织苗,脾淋苗等不同类型的猪瘟苗,什么情况下用哪种比较适合,各有什么优缺点?①猪瘟犊牛睾丸细胞疫苗:优点是生产成本低,适合工厂化生产,安全性好,不易发生过敏反应等。
缺点是疫苗稳定性差,毒效价低,易感染牛腹泻病毒;一般用于仔猪超前免疫与首次免疫。
4天产生免力,保护期为1年。
②猪瘟脾淋疫苗:优点是免疫效果好,质量易控制,免疫保护期较长。
缺点是生产成本高,产量较低,生产用家兔供应较困难,个别的注射后发生过敏反应等。
一般用于猪瘟的加强免疫(2免)和紧急预防接种。
4天产生免疫力,保护期为18个月。
③猪瘟乳兔弱毒疫苗:其优缺点介于细胞苗与脾淋苗之间,大、中、小猪都可使用,安全、免疫效果良好。
中国畜牧兽医学会动物传染病学分会万遂如脾淋苗,也属于组织苗,是用成年兔的免疫器官做成的,效果好。
缺点是成本较高,应激反应比较大。
一般不用于超前免疫,现在很多专家建议这个疫苗一般用在种猪免疫,因为成年猪的应激反应要小一些。
乳兔苗,制作成本相对脾淋苗要低一些,效果不如脾淋苗好。
细胞苗,一般采用犊牛睾丸细胞,属于基因工程苗,可以大批量生产,成本低。
效果具有争议性,有些专家认为细胞苗的效果不错,有些专家认为细胞苗的效果没有前面两种好,尤其是高热病发生以后。
现在也有一些生物制品厂家,为了降低成本,通常在脾淋苗中添加细胞苗,而细胞苗最大的问题是,在生产过程中,可能会受到牛流行性腹泻病毒的污染,这个病毒也会引起猪发病。
关于这三种疫苗的使用,我觉得在刚刚结束的中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会上,有一个专家的提议很不错。
他的观点是一个猪场采购一批猪瘟疫苗,然后对这批疫苗进行牛流行性腹泻病毒的检测,同一批次的检测结果应该是一样的。
如果没有检测牛流行性腹泻病毒出来说明这批疫苗是安全的,可以使用;如果检测出来,说明这批疫苗是不合格的。
这个方法值得一试。
河南省粮油进出口集团公司代广军按照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》(2001年版)收录的资料,我国的猪瘟疫苗分为猪瘟活疫苗(I)和猪瘟活疫苗(II)。
第5卷第1期2021年3月现㊀代㊀牧㊀业MODERN ANIMAL HUSBANDRYVol.5㊀No.1Mar.2021收稿日期:2020-11-27作者简介:张㊀召(1984 ),男,湖北浠水人,硕士,兽医师㊂共同第一作者:马红伟(1982 ),男,湖北武汉人,硕士,兽医师㊂猪瘟活疫苗㊁猪圆环病毒2型基因工程疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗三种疫苗联合免疫效果的评估张㊀召1,马红伟2,魏㊀烨1,李均平1,阮坤祥2,王世旗2(1.浠水长流牧业有限公司,湖北浠水438200;2.洛阳普莱柯生物工程股份有限公司,河南洛阳471000)摘要:试验旨在评估猪瘟活疫苗㊁猪圆环病毒2型基因工程疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗三种疫苗联合免疫的效果㊂试验选取7日龄健康仔猪500头,分为A 组(联合免疫组)和B 组(单苗免疫组)㊂A 组在21日龄,每头仔猪免疫1mL 猪圆环病毒2型基因工程疫苗㊁2mL 猪肺炎支原体灭活疫苗和1头份猪瘟活疫苗,在55日龄每头仔猪免疫1头份猪瘟活疫苗㊂B 组猪按照试验猪场现有的程序免疫㊂在三种疫苗联合免疫后的第四周㊁第八周采血,检测血清中猪瘟病毒抗体和猪圆环病毒2型抗体㊂联合免疫组猪圆环病毒抗体和猪瘟抗体的水平与单苗免疫组相当㊂结果表明,猪瘟活疫苗㊁猪圆环病毒2型基因工程疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗三种疫苗,可以联合一起,同时免疫㊂关键词:猪瘟活疫苗;猪圆环病毒2型基因工程疫苗;猪肺炎支原体灭活疫苗;联合免疫中图分类号:S851㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀文章编号:2096-2975(2021)01-0040-04Evaluation of the combined immunization effect of three vaccines :live classical swine fever vaccine ,genetic engineering vaccine of porcine circovirus type 2and inactivated Mycoplasma hyopneumoniae vaccineZHANG Zhao 1,MA Hongwei 2,WEI Ye 1,LI Junping 1,RUAN Kunxiang 2,WANG Shiqi 2(1.Xishui Changliu Animal Husbandry Co.,Ltd.,Xishui Hubei 438200;2.Luoyang Pleco Bioengineering Co.,Ltd.,Luoyang Henan 471000)Abstract :The purpose of this experiment was to evaluate the combined immunization effect of three vaccines:live classical swine fever vaccine,genetic engineering vaccine of porcine circovirus type 2and inactivated Mycoplasma hyopneumoniae vaccine.500healthy piglets aged 7days were selected and divided into group A (combined vaccine group)and group B (single vaccine immunization group).At 21days of age,each pig in group A was immunized with 1mL genetic engineering vaccine of porcine circovirus type 2,2mL inactivated Mycoplasma hyopneumoniae vaccine and one portion of live classical swine fever vaccine,and at the age of 55days,each pig was immunized with one portion of live classical swine fever vaccine.The pigs in group B were immunized according to the existing procedures in the experiment pig farm.Blood samples were collected at the fourth and eighth weeks after the piglets were immunized with the three vaccines,and the antibody levels of classical swine fever virus and circovirus type 2in serum were detected.The levels of antibodies against porcine circovirus and classical swine fever in the combined vaccine group were similar to those in the single vaccine group.The above results showed that the three vaccines could be combined and immunized at the same time.Key words :live classical swine fever vaccine;genetic engineering vaccine of porcine circovirus type 2;inactivated Mycoplasma hyopneumoniae vaccine;combined immunization㊀㊀猪支原体肺炎是猪肺炎支原体引起的接触性传染病,猪肺炎支原体聚集并粘连在支气管㊁细支气管以及气管上皮细胞上,损伤猪的呼吸道,最终引起猪支原体肺炎[1,2]㊂临床主要表现为猪的咳嗽和气喘,病变部位基本集中在肺脏心叶㊁尖叶㊁中间叶和膈叶前缘,呈肉样实变㊂猪圆环病毒病是由致病性猪圆环病毒引起的接触性传染病㊂猪圆环病毒主要侵害猪的免疫系统,破坏淋巴细胞的正常结构,抑制淋巴细胞的功能,最终造成机体免疫抑制和抗病力下降,导致病毒性及细菌性疾病的继发感染[3]㊂猪圆环病毒病临床以母猪繁殖障碍㊁仔猪抖抖病㊁仔猪断奶后多系统衰竭综合征和皮炎肾病综合征等为特征㊂猪圆环病毒和猪肺炎支原体是公认的猪呼吸道传染病的原发性病原[4]㊂猪瘟是由猪瘟病毒引起的以高热稽留及弥散性出血为特征的烈性传染病,最终导致发病猪大量死亡,对养猪业危害非常严重[5]㊂疫苗免疫是控制上述三种传染病的有效手段㊂自2019年以来,开始推行猪圆环病毒2型疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗的联合免疫,一针多防,给养殖户带来便利㊂后非瘟时代,广大从业者对更简便有效疫苗联合免疫方式的呼声越来越高㊂猪瘟活疫苗㊁猪肺炎支原体疫苗和猪圆环病毒2型疫苗,这三种疫苗能不能联合免疫?联合免疫的时间如何安排?这三种疫苗联合免疫的效果如何?这些问题亟待解决㊂本试验先将猪圆环病毒2型基因工程疫苗(水佐剂)和猪肺炎支原体灭活疫苗(水佐剂)混合,然后用二者的混合液稀释猪瘟活疫苗,注射健康仔猪,比较联合免疫方式与常规免疫方式的免疫效果,为三种疫苗免疫程序的优化提供实践依据㊂1㊀材料与方法1.1㊀疫苗疫苗由洛阳普莱柯生物工程股份有限公司提供,疫苗名称㊁批号㊁剂量及数量如表1所示㊂委托第三方专业检测机构对疫苗进行检测,并出具检测报告㊂1.2㊀试验设计1.2.1㊀试验分组试验在湖北金旭农发集团浠水长流分公司进表1㊀疫苗名称㊁批号㊁剂量及数量名称批号剂量/(头份/瓶)数量/瓶圆柯欣(猪圆环病毒2型基因工程疫苗)38CW119070012030柯喘宁(猪肺炎支原体灭活疫苗)41TZ19070022030稳柯健(猪瘟活疫苗)12CW19070182030行㊂试验选取7日龄健康仔猪500头,分为A组和B组(表2)㊂试验开始前将试验猪标记组别,并称重㊁采血㊁观察是否有异常情况,做好相关记录㊂A 组:联合免疫组(圆柯欣+柯喘宁+稳柯健三苗联合免疫);B组:单苗免疫组(圆柯欣㊁柯喘宁㊁稳柯健单苗免疫)㊂饲养管理按试验猪场日常管理程序进行㊂表2㊀试验仔猪头数和平均体质量组别仔猪数/头平均体质量/kgA组326 2.65ʃ0.23B组182 2.62ʃ0.25 1.2.2㊀疫苗接种试验从仔猪7日龄开始,到仔猪72日龄结束,试验日期为2019年10月7日-2019年12月12日㊂疫苗具体接种方案如表3所示㊂A组(联合免疫组)仔猪21日龄首免,免疫剂量:每头仔猪1mL圆柯欣㊁2mL柯喘宁和1头份稳柯健,圆柯欣与柯喘宁按照1ʒ2比例混合后,稀释稳柯健;55日龄二免,稳柯健1头份/头㊂B组(单苗免疫组)仔猪免疫按照试验猪场现有的免疫程序进行㊂所有仔猪均在出生当天,伪狂犬病活疫苗滴鼻并注射保健针,在35日龄注射伪狂犬病活疫苗1.5头份/头,断奶仔猪使用 化药+中药 进行保健,连续使用10天㊂表3㊀疫苗接种方案组别A组B组7日龄柯喘宁2mL 14日龄圆柯欣1mL 21日龄1mL圆柯欣+2mL柯喘宁+稳柯健1头份稳柯健1头份55日龄稳柯健1头份稳柯健1头份㊀注:疫苗接种剂量均为每头仔猪接种剂量1.2.3㊀样品采集与指标分析观察记录仔猪21日龄免疫后两天及育肥至中期的表现㊂观察统计试验猪在整个试验期的免疫应激(呕吐㊁发烧㊁死亡㊁精神沉郁㊁不食)情况㊁死淘率㊁日增重㊁均匀度等㊂在21日龄免疫前㊁21日龄免疫后(A组:三种疫苗联合免疫;B组:各疫苗单苗免疫)的第四周㊁第八周采血,A组每次采样17份, B组每次采样10份,检测血清中的猪瘟病毒抗体和猪圆环病毒2型抗体㊂血清抗体的检测采用ELISA法㊂2㊀结果2.1㊀仔猪生产性能㊁免疫应激㊁免疫后健康状况和死亡情况仔猪21日龄免疫后两天及育肥至中期的表现如表4所示㊂联合免疫组个别仔猪免疫后采食量稍有下降,但两组仔猪免疫后两天的采食量无显著差异(数据未列出)㊂两组仔猪免疫后两天的精神状态良好,体温正常㊂两组均没有出现猪只的死亡㊂联合免疫组和单苗免疫组仔猪在育肥至中期期间,无咳嗽㊁气喘等情况,采食情况正常㊂仔猪在整个试验期的死淘㊁应激及生长情况如表5所示㊂联合免疫组仔猪的总应激次数为8次,单苗免疫组总应激次数为13次,单苗免疫组猪应激比例高于联合免疫组㊂应激仔猪均没有出现严重的免疫副反应㊂联合免疫组仔猪整个试验期间的平均日增重为348g,单苗免疫组仔猪整个试验期间的平均日增重为334g,联合免疫组猪只每天多增加14g㊂表4㊀仔猪21日龄免疫后两天及育肥至中期的表现组别仔猪21日龄免疫后两天采食情况精神状态体温异常育肥至中期咳嗽㊁气喘等情况采食情况A组个别稍有下降良好无无正常B组正常良好无无正常表5㊀仔猪在整个试验期的死淘㊁应激及生长情况组别试验开始猪数/头试验结束猪数/头死淘率/%应激次数/次试验结束平均体质量/kg平均日增重/gA组326319 2.15825.65348 B组182175 3.851324.703342.2㊀单苗免疫猪和联合免疫组的猪瘟抗体变化情况21日龄免疫前㊁21日龄免疫后的第四周及第八周,仔猪血清猪瘟抗体水平如图1所示㊂从图1可以看出,单苗免疫组和联合免疫组的猪瘟抗体水平,在21日龄免疫前㊁21日龄免疫后的第四周及第八周三个时间点,均无显著差异㊂2.3㊀单苗免疫组和联合免疫组的圆环抗体变化情况21日龄免疫前㊁21日龄免疫后的第四周及第八周,仔猪血清圆环抗体水平如图2所示㊂从图2可以看出,单苗免疫组和联合免疫组的圆环抗体水平,在21日龄免疫前㊁21日龄免疫后的第四周及第八周三个时间点,均无显著差异㊂图1㊀不同免疫方式猪瘟抗体变化情况图2㊀不同免疫方式圆环抗体变化情况3㊀讨论在本试验中,猪瘟活疫苗㊁圆环病毒2型基因工程疫苗㊁猪肺炎支原体灭活疫苗三种疫苗同时免疫,相互之间不干扰,联合免疫比单苗免疫表现出更好的生长性能,表明联合免疫安全有效㊂张敬峰等[6]的研究表明,在圆环病毒阳性猪场,免疫圆环病毒疫苗能够显著增强猪瘟疫苗的免疫效果㊂朱子健等[7]发现,用圆环病毒灭活疫苗稀释猪瘟活疫苗,进行免疫,可产生针对两种病原的免疫抗体,且两种抗体间互不影响㊂王科文等[8]发现,用猪肺炎支原体疫苗与猪圆环病毒2型疫苗联合免疫猪只,免疫效果与两种疫苗单独免疫的效果是一样的㊂朱巧艳等[9]发现,用圆环病毒-支原体二联苗稀释猪瘟活疫苗,进行一次性注射免疫,各疫苗的免疫效力均不受影响㊂上述研究表明,圆环病毒疫苗㊁支原体疫苗㊁猪瘟活疫苗两两组合或三种组合,进行联合免疫,对各种疫苗的免疫效果没有不良影响㊂本试验发现,在后续育肥过程中,两组猪的发病率㊁饲料消耗情况没有明显的区别,印证了猪瘟疫苗㊁圆环病毒疫苗㊁支原体疫苗三种疫苗联合免疫,相互之间不干扰,进一步表明圆柯欣㊁柯喘宁㊁稳柯健三种疫苗可以联合一起,同时免疫㊂在非洲猪瘟流行的环境下,应尽量减少猪只与外界的接触㊂在不影响抗体水平的情况下,圆柯欣㊁柯喘宁㊁稳柯健联合免疫可以减少破皮行为,减少交叉感染的风险,减少猪的应激,同时提高劳动效率㊂参考文献:[1]Jeffrey J Z.猪病学(第10版)[M].赵德明,张仲秋,沈建忠,译.北京:中国农业大学出版社,2008. [2]赵光绪.畜禽疾病诊断指南[M].北京:中国农业出版社,2010.[3]魏恒.猪圆环病毒病的病原特点及防控措施[J].陕西农业科学,2020,66(8):94-96.[4]夏春香,肖啸,李志敏.猪圆环病毒病研究进展[J].动物医学进展,2005,26(1):35-38.[5]韩玉莹,李永锋,谢利豹,等.猪瘟兔化弱毒疫苗(C株): 10年回眸[J].中国预防兽医学报,2019,41(6): 654-658.[6]张敬峰,赵永前,孙华伟,等.猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗免疫效果的影响[J].山东农业科学,2015,47 (8):86-88.[7]朱子健,唐志芬,杨金雨,等.猪瘟兔化弱毒疫苗与猪圆环病毒2型灭活疫苗同时接种的免疫效果评价[J].中国预防兽医学报,2017,39(2):148-151.[8]王科文,农华杰,刘广振,等.猪肺炎支原体和圆环病毒2型疫苗的联合免疫[J].养猪,2013(3):89-92. [9]朱巧艳,张国良,翟路峰,等.猪圆环病毒2型㊁猪肺炎支原体二联灭活疫苗与猪瘟活疫苗联合免疫效果评价[J].中国预防兽医学报,2020,42(9):938-943.(责任编辑:刘永祥)。
不同猪瘟免疫效果对比试验目的:了解不同厂家商品苗和政府苗在商品猪上的免疫效果,以期为有效指导猪瘟防控和疫苗厂家的选择提供科学依据。
一、材料和方法1、疫苗猪瘟厂家:金宇、广东永顺、普莱柯、乾元浩商品苗政府苗2、试验动物五栋4周保育猪,按照常规饲养管理,其他免疫程序不变。
3、分组与疫苗接种方案:五栋猪群随机分成5组,试验1组金宇,试验2组普莱柯,试验3组广东永顺,试验4组乾元浩,对照组首免广东永顺猪瘟疫苗,二免政府苗。
实施免疫前1天对试验猪每组抽查10头并进行血样采集开展猪瘟抗体调查,4周、9周对各试验组的猪只进行猪瘟的免疫,于耳后颈部肌肉注射,猪瘟商品苗1头份/头,政府苗3头份/头。
样品采集与检测分别于首免、二免接种前1天、二免后一个月进行血液样品的采集,每次每组随机采集10 头份,每份血样冷藏保存及时送至化验室,分离血清后猪瘟试剂盒检测猪瘟抗体。
二、数据分析表一、猪瘟抗体水平组别首免前二免前二免后一个月样本数阳性率阻断率离散度样本数阳性率阻断率离散度样本数阳性率阻断率离散度金宇10 30% 40% 57% 9 100% 52% 17% 10 60% 52% 41% 普莱柯10 40% 35% 53% 20 60% 47% 36% 9 100% 78% 18% 广东永顺10 30% 30% 48% 9 44% 42% 19% 6 100% 75% 22% 乾元浩10 60% 47% 49% 11 45% 41% 18% 6 100% 75% 14% 对照组10 40% 33% 64% 10 40% 41% 23% 10 80% 60% 27%从表一可知,首免后金宇组猪瘟抗体水平最好,且离散度最小,但二免后一个月与其他组别相比阳性率、阻断率最低,离散度最大。
表二、猪瘟阻断率(spss软件分析结果)组别免疫前二免前二免后一个月金宇40.30±7.32 51.67±2.90 51.60±6.70b 普莱柯34.50±5.81 47.20±3.84 78.22±4.72a广东永顺30.40±4.66 41.89±2.71 75.17±6.72a 乾元浩47.30±7.27 41.00±2.18 74.50±4.26a 对照组36.44±6.11 41.40±3.01 59.60±5.24ab由表二可知,试验组与对照组相比,首免前仔猪猪瘟抗体差异不显著,证明试验成立;二免前,各试验组与对照组相比,差异也不显著,但金宇试验组与其他组别相比,猪瘟阻断率最高;二免后一个月,金宇组与其他三个试验组差别显著,但与对照组差别不显著。
猪瘟不同疫苗免疫效果对比实验810000摘要:本试验以30日龄仔猪为试验对象,研究不同疫苗对仔猪的免疫效果。
试验选择99头体重接近、健康状态良好的30日龄左右未免疫仔猪,随机分为3组,每组33头,分为试验1组、试验2组,试验3组,每组分别免疫不同厂家生产的猪瘟疫苗,分别于免疫前于当天、首免14d、首免21d、首免28d、二免后21d、二免后45d进行采血,利用IDDEX试剂盒进行猪瘟抗体检测。
试验结果显示,首免14天三种疫苗免疫的抗体阳性率分别为70.0%、73.6%、72.9%差异不显著(P>0.05);首免21天、首免28天和二免45天,试验2组的抗体阳性率和试验1组、试验3组比差异显著(P<0.05),二免21天试验2组、试验3组的抗体阳性率和试验1组对比差异显著,说明免疫B种疫苗的仔猪抗体阳性率明显高于免疫A种和C种的疫苗,而且试验2组的仔猪抗体离散度比较集中,充分说明了B种疫苗的免疫效果优于A和B疫苗。
关键词:猪瘟;疫苗;免疫效果;仔猪猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是严重危害全球养猪业的重要传染病之一,是我国中长期动物疫病控制规划中计划要消灭的重大动物疫病之一[1]。
猪瘟是由黄病毒科、瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种热性、急性、高度接触性传染病[2]。
自20世纪50年代以来,我国对猪瘟实施了全面的免疫计划,从而有效控制该病的大规模爆发流行,在今后疫苗免疫仍然是猪瘟防控的主要策略[3]。
在高密度免疫下,我国的猪瘟发生与流行虽然有逐步减少,但疫苗免疫失败的现象仍时有发生。
所以猪场择合适的猪瘟疫苗进行免疫保护并定期对猪瘟疫苗效果检测评估十分重要,本文选用3个不同厂家生产猪瘟疫苗进行试验,旨在评估哪个厂家的疫苗免疫效果最好,能达到最好的免疫保护效果,为猪场合理地选用猪瘟疫苗进行疫苗免疫提供了科学、合理试验方法。
1材料与方法1.1材料1.1.1试验猪选用某规模化养殖场99头体重接近、健康状态良好的30日龄左右未免疫仔猪,试验猪品种均为杜x长x大商品猪。
·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要:为探寻一种更加合理高效的猪支原体肺炎(MPS )免疫方式,本研究使用MPS 弱毒疫苗进行基础免疫后14 d 再使用灭活疫苗进行加强免疫,通过人工感染猪肺炎支原体来评价其免疫效果。
同时将这种免疫程序在规模化猪场进行应用,通过计算一定时期内的日增重来评价其免疫效果。
结果显示:联合免疫在保证黏膜免疫效果的同时并未降低体液免疫水平;更为重要的是,联合免疫不但具备较高攻毒保护率,而且在攻毒后剖杀时其肺泡灌洗液中抗原含量远低于其他免疫方式。
以上结果表明,联合免疫可以产生较好的免疫协同作用,从而提高了机体的综合免疫保护能力。
田间试验结果发现:联合免疫组猪群从21日龄至80日龄平均增重27.31 kg ,比活疫苗免疫组猪群多增重3.02 kg ,比灭活疫苗免疫组猪群多增重3.73 kg ;其平均日增重可达0.46 kg/d 。
本研究为防治猪支原体肺炎提供了新的思路。
关键词:猪支原体肺炎活疫苗和灭活疫苗;初免-加强免疫策略;攻毒保护;日增重中图分类号:S858.28文献标志码:A文章编号:1674-6422(2023)04-0089-07Evaluation of the Combined Vaccination Strategy of Attenuated and InactivatedVaccines against Mycoplasma hyopneumoniae Infection收稿日期:2021-03-01基金项目:江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(20)1006)作者简介:郝飞,男,博士,助理研究员,主要从事动物支原体感染与黏膜免疫防控技术研究;白昀,男,硕士,副研究员,主要从事动物支原体感染与黏膜免疫防控技术研究通信作者:冯志新,E-mail:***************猪支原体肺炎活疫苗与灭活疫苗联合免疫效果评价郝 飞1,2,白 昀1,2,袁 厅1,2,张 磊1,2,刘蓓蓓1,2,谢 星1,2,韦艳娜1,2,甘 源1,2,熊祺琰1,2,邵国青1,2,冯志新1,2(1. 江苏省农业科学院兽医研究所 农业农村部兽用生物制品工程重点实验室,南京210014;2. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心,泰州 225300)2023,31(4):89-95Abstract: In order to explore a more reasonable and effi cient immunoprotection method for Mycoplasmal pneumonia of swine (MPS), a combined vaccination strategy was developed in the present study. Piglets were primed with the attenuated Mycoplasma hyopneumoniae (Mhp) vaccine and then boosted with the inactivated vaccine 14 days later. The vaccinated piglets were challenged with the virulent strain to evaluate the effi cacy of this combined vaccination method. At the same time, this immunization procedure was applied on the large-scale pig farms, and the effi cacy was evaluated by comparing the daily weight gain of piglets at different stages. The experiment result shows that the combined vaccination with the attenuated vaccine and inactivated vaccine did not reduce the humoral immunity level while ensuring the mucosal immunity effect. More importantly, the combined vaccination not only provided better protection but also reduced the Mhp antigen level in bronchoalveolar lavage fluid. These results indicated that the combination of Mhp attenuated vaccine with inactivated vaccine had good immune synergism and enhanced host immunoprotection. The fi eld experiment showed that the averageHAO Fei 1,2, BAI Yun 1,2, YUAN Ting 1,2, ZHANG Lei 1,2, LIU Beibei 1,2, XIE Xing 1,2, WEI Yanna 1,2,GAN Yuan 1,2, XIONG Qiyan 1,2, SHAO Guoqing 1,2, FENG Zhixin 1,2(1. Key Laboratory for Veterinary Bio-Product Engineering, Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Institute of Veterinary Medicine, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China; 2. GuoTai (Taizhou) Center of Technology Innovation for VeterinaryBiologicals, Taizhou 225300, China)· 90 ·中国动物传染病学报2023年8月猪支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine, MPS)又称猪气喘病或猪喘气病,是一种由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae, Mhp)感染引起的以咳嗽、气喘、腹式呼吸和生长速度缓慢为主要特征的慢性呼吸道传染病。
不同厂家猪瘟疫苗免疫效果比对试验李安鹏;赵力;张智鹏【摘要】为准确掌握汉中市规模猪场使用量最大的两种猪瘟疫苗在实际应用中的免疫效果,在规模猪场选择4窝体质健康、体重接近的仔猪,随机分成4组,每组10头,分别接种猪瘟脾淋苗和细胞苗,采用IHA 方法检测免疫接种前后抗体效价.结果显示,用标准剂量免疫后,2种疫苗都不能对猪群产生保护作用,用2头份剂量在仔猪30日龄首免,首免后28 d加强免疫,2种疫苗都能对猪群产生很好的保护作用,能满足预防猪瘟疫病的需要,同时猪瘟脾淋苗免疫后刺激机体产生抗体的速度快,可用于紧急免疫接种.广大养殖户可以根据实际情况,科学合理选择使用猪瘟疫苗.%To accurately grasp the immune effects of two kinds of classical swine fever vaccine that were most used in large-scale pig farms in practice,we chose 4 healthy litters of piglets with similar weight.Then,the piglets,divided into 4 groups randomly,10 pigs in each group,were inoculated with the spleen-lymphocyte vaccine and cell vaccine respectively.Before and after immunization,the indirect hemagglutination test (IHA) method was used to detect the antibody titer.The results showed that afterimmunization,neither vaccine had protective effects on swine with standard dose.However,two vaccines both had good protective effects on swine when the first immunization of each piglet was on 30 day-age with 2 doses and a booster was on 28 d after first immunization,which can satisfy the prevention of classical swine fever.In addition, the spleenvaccine,stimulating organism to produce antibodies quickly,can be usedfor emergency vaccination.The farmers can choose classical swine fever vaccine scientifically and reasonably according to the actual situation.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2017(038)001【总页数】4页(P132-135)【关键词】猪瘟;疫苗;免疫效果【作者】李安鹏;赵力;张智鹏【作者单位】汉中市动物卫生监督所,陕西汉中 723000;汉中市动物疾病预防控制中心,陕西汉中 723000;汉中市动物疾病预防控制中心,陕西汉中 723000;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌 712100【正文语种】中文【中图分类】S852.5猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种高度接触性、出血性和致死性传染病,主要以急性发病、高稽留热、细小血管壁变性、全身性小点状出血及脾脏边缘梗死为特征[1]。
2个厂家不同剂量猪瘟疫苗临床免疫效果比较李满;刘鑫宇;李守菊;柳迦鹏;胡胜云;周双海【摘要】[目的]比较2个厂家不同剂量猪瘟疫苗的临床免疫效果.[方法]将60头断奶空怀母猪随机平均分为2组,一组接种较高剂量猪瘟疫苗E(E组),另一组接种较低剂量猪瘟疫苗A(A组);当母猪产仔后,所产仔猪在20d与60 d时分别接种1次;采集不同阶段的母猪、仔猪与生长猪的血清,用阻断ELISA方法检测猪瘟病毒抗体.[结果]在断奶空怀母猪阶段,两组之间无差异.在其他阶段,E组猪瘟病毒抗体阻断率一直高于A组,各个阶段均达到显著(P<0.05)水平;除35 d与56 d仔猪外,E组猪瘟病毒抗体阻断率变异系数都小于A组;E组猪瘟病毒抗体阳性率都高于A组,其中在35 d仔猪达到显著水平.抗体检测结果显示,E组猪瘟免疫抗体数据优于A组,表明猪瘟疫苗E的临床免疫效果优于疫苗A.[结论]较高剂量猪瘟疫苗的临床免疫效果好于较低剂量疫苗,为剂量存在差异的不同厂家猪瘟疫苗的临床选用提供了试验依据.%[Objective] The objective of this study is to compare the clinical immune effects of the classical swine fever (CSF)vaccine with different dose from two manufacturers.[Methods]Sixty non-pregnant sows after weaning were divided randomly into 2 groups average,each was immunized with the CSF vaccine E with relatively high dose (group E) or the CSF vaccine A with relatively low dose (group A).After the parturition of sows,their offspring were immunized with the related CSF vaccine at 20 and 60 days of age,respectively.The sera of sows,piglets and growing pigs at different time point were collected,and the antibody against CSF virus (CSFV) in sera was determined with blocking ELISA respectively.[Results]The results showed that there was no difference between the two groups at the phaseof the non-pregnant sows after weaning.At the other experiment period,the antibody blocking rate of CSFV in group E were all higher than those in group A,and the differences were all significant (P<0.05);the coefficient of variation of the antibody blocking rate of CSFV in group E was all less than that in group A except the piglets aged 35 and 56 days.The positive rates of CSFV antibody in group E were all higher than those in group A,and the difference was significant (P<0.05) at the piglets aged 35 days.The results indicated that the antibody data of CSF vaccine in group E were better than those in group A,which revealed that the clinical immune effects of the CSF vaccine E was better than the vaccineA.[Conclusion]The clinical immune effect of the CSF vaccine with relatively higher dose was better than that with relatively lows,which provided an experimental base for the clinical use of the CSF vaccine with dose difference from different manufacturers.【期刊名称】《北京农学院学报》【年(卷),期】2018(033)001【总页数】5页(P69-73)【关键词】猪瘟疫苗;厂家;疫苗剂量;猪瘟病毒抗体;免疫效果【作者】李满;刘鑫宇;李守菊;柳迦鹏;胡胜云;周双海【作者单位】北京农学院动物科学技术学院,北京102206;大兴区动物疫病预防控制中心,北京102400;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;大兴区动物疫病预防控制中心,北京102400;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206【正文语种】中文【中图分类】S852猪瘟是由猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)引起的一种严重危害养猪业的动物疫病,疫苗接种是预防猪瘟的有效措施[1,2]。
两种不同猪瘟疫苗的免疫效果比较分析
作者:梁亮
来源:《湖北畜牧兽医》2017年第01期
摘要:试验随机选取24头30日龄(体重范围为7.5~9.0 kg)健康仔猪,16头健康后备母猪。
24头小猪随机分成两组,每组12头;16头母猪随机分成两组,每组8头;各分为试验1组和试验2组。
其中仔猪和母猪的试验1组接种猪瘟疫苗A,试验2组接种猪瘟疫苗B。
疫苗在0 d进行首免,30 d进行二免。
每头接种2 mL。
仔猪试验1组和试验2组在首免后第15、30、60天各采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。
母猪试验1组和试验2组在首免后第30、60天分别采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。
结果表明,不管仔猪还是母猪,接种的两种猪瘟疫苗A和B的免疫效果差异不显著(P>0.05),且从总体上来看,两种猪瘟疫苗免疫60 d后都能使仔猪和后备母猪获得良好的保护力。
关键词:猪瘟疫苗;抗体阻断率;免疫效果
中图分类号:S858.28 文献标识码:A 文章编号:1007-273X(2017)01-0011-02
猪瘟(HC)俗称“烂肠瘟”,是由猪瘟病毒(HCV)引起的一种急性、热性、高度接触性的病毒性传染病,是威胁养猪业的主要传染病。
其特征是发病急,高热稽留,小血管壁变性,全身泛发性小点状出血及脾梗死。
该病在自然条件下只感染猪,不同年龄、性别、品种的猪和野猪都易感,一年四季均可发生。
由于猪瘟病毒的高致病力和高致死率,给养殖业造成了巨大的损失。
猪感染高致病力毒株后在潜伏期就可以造成传染,经历急性猪瘟或亚急性猪瘟的猪在出现症状前大量排毒,但耐过后的猪只体内有明显的猪瘟抗体,且不再排毒。
感染温和性毒株的猪呈慢性感染,在病死前会长期或间歇性地排毒。
怀孕母猪可以通过胎盘感染胎儿导致流产、木乃伊胎或产出弱胎、畸形胎等。
先天性感染低毒力病毒的结果是产出持续性感染的仔猪,仔猪出现免疫耐受,不表现任何症状而向外排毒。
在预防过程中,疫苗的效价高低是免疫成败的关键。
低效价的疫苗免疫后猪体产生的抗体不足以抵抗野毒的侵袭,接种猪虽不发病,但终生带毒、排毒,这给净化猪群造成极大障碍。
因此许多猪场在实际防疫工作中都采用加大免疫剂量来解决这一不足,但疫苗种类的选择也与猪瘟免疫效果密切相关[1-6]。
本试验采用两种猪瘟疫苗分别对仔猪和母猪进行免疫,并使用猪瘟病毒抗体检测试剂盒来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体对病毒的阻断率,通过试验结果分析哪种疫苗免疫效果更佳,以便为今后猪瘟疫苗的选择提供参考。
猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒是用来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体的检测试剂盒。
该试剂盒是用猪瘟病毒抗原包被的微量反应板,利用阻断ELISA原理来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体。
如果被检样品中存在猪瘟病毒抗体,它们就会阻断辣根过氧化物标记的抗
猪瘟病毒的单克隆抗体。
单克隆抗体与猪瘟病毒抗原的结合可以通过辣根过氧化物酶与底物的显色程度进行判定,即用酶标仪在单波长450 nm或双波长650 nm测定该反应体系的吸光度。
当被检样品中含有猪瘟病毒抗体(阳性结果)时,显色就会变浅,当被检样品中不含有抗猪瘟病毒抗体(阴性结果)时,显色就会变深。
样本的阻断率可以通过450 nm波长样本吸光度与阴性对照吸光度的比值来确定。
1 材料与方法
1.1 试验动物
福州长乐罗丰猪场随机选取24头30日龄(体重范围为7.5~9.0 kg)的健康仔猪及16头健康后备母猪。
1.2 血清采集
仔猪用前腔静脉采血法、母猪用耳静脉采血方法,析出血清,在4 ℃下保存。
1.3 主要试剂
猪瘟病毒抗原包被的ELISA反应板、阳性对照血清、阴性对照血清、辣根过氧化物标记的抗猪瘟病毒的酶标抗体、样品稀释液(洗涤液10X、TMB底物、终止液)。
1.4 器材
微量移液器,10~1 000 μL的精密或多道微量移液器,一次性移液器吸头,量筒(500 mL,配制洗涤液用),96孔酶标仪,纯化水(去离子水或双蒸水),滴加和吸去洗涤液的设备,可以盛装液体和消毒液的容器,湿盒或密封反应板用的封条,涡旋混合装置,离心管或微量试管。
1.5 试验方法
仔猪和后备母猪的试验1组均接种猪瘟疫苗A,试验2组均接种猪瘟疫苗B。
疫苗在0 d 进行首免,30 d进行二免。
每头接种2 mL。
仔猪试验1组和试验2组在首免后第15、30、60天分别采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。
母猪试验1组和试验2组在首免后第30、60天采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。
检测用的猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒的使用和操作均严格按照说明书进行。
1.6 统计方法
试验数据采用SPSS统计分析软件作统计分析,结果以“平均数±标准差”表示。
2 结果与分析
由表1和表2可知,无论是仔猪还是后备母猪,试验1组(猪瘟疫苗A)的免疫效果均略高于试验2组(猪瘟疫苗B)。
注射猪瘟疫苗A的仔猪的被检样本猪瘟抗体阻断率从43.0%上升至72.8%,而后备母猪被检样本猪瘟抗体阻断率从74.8%上升至76.5%;注射猪瘟疫苗B的仔猪的被检样本猪瘟抗体阻断率从46.7%上升至76.1%,而后备母猪被检样本猪瘟抗体阻断率从78.4%上升至81.3%。
统计分析表明,不管仔猪还是母猪,接种的两种猪瘟疫苗A和B的免疫效果差异不显著(P>0.05),且从总体上来看两种猪瘟疫苗免疫60 d后都能使仔猪和母猪获得良好的保护力。
3 小结与讨论
在本试验中,注射猪瘟疫苗A的仔猪的被检样本猪瘟抗体阻断率从43.0%上升至72.8%,而后备母猪被检样本猪瘟抗体阻断率从74.8%上升至76.5%;注射猪瘟疫苗B的仔猪的被检样本猪瘟抗体阻断率从46.7%上升至76.1%,而后备母猪被检样本猪瘟抗体阻断率从78.4%上升至81.3%,表明疫苗A或B对母猪的免疫效果的提高并不显著,分析其原因可能有以下几点。
(1)疫苗的质量方面。
在实际应用中,疫苗从药厂冷库发出直至注射到猪体内,要经过一个运输转运过程。
由于中间环节多、情况复杂、温度变化无常、疫苗时融时冻,其质量无法保障。
要提高实际应用中疫苗的质量,必须加强运输系统的冷藏设施建设,从药厂到县级站用冷藏车运输;从县级到基层保证配备冷藏保温箱,加强对生物药品的管理,没有冷藏设施的一律不准经营疫苗,避免疫苗出厂后时冻时融的状况出现。
同时在县级动物防检机构内要设立疫(菌)苗检测室,定期检测或对每批疫苗进行效价测定,以确定免疫注射的剂量。
(2)母猪的体质方面。
后备母猪的免疫机制较仔猪更加完善和健全,对抗不同程度的猪瘟病毒的抵抗力更强。
试验所用的猪瘟疫苗A和B有可能对弱体质的仔猪有较强的免疫效果。
(3)操作规程的规范问题。
在实际注射操作中,要特别注意部位、针头、剂量和消毒等四个问题。
①注射部位。
在防疫注射中,防疫人员一般仅注意猪体部位,但更重要的是解剖部位,要把疫苗注射到肌间。
因此要把握好注射角度和深度,针头应与猪体成60°为宜,深度应根据猪体大小和肥瘦程度而定,要以达到肌肉深部为佳。
②针头的问题。
不仅要重视一猪一针,也要重视针头长度和粗细,要因猪而异。
③注射剂量。
一般在注射器上固定,注射时剂量一定要足。
④消毒。
注射部位消毒宜用2.0%~3.0%的碘酊,4.0%以上碘酊容易使疫苗失去活性。
针头要做到一猪一针一消毒[7-9]。
参考文献:
[1] 蒋冬福,施万球,韦家槐,等.兔脾淋组织液对猪瘟疫苗的免疫增强试验[J]中国兽医杂志,2001,37(7):10-11.
[2] 吕仁洪,滕远.猪瘟免疫效果不佳的原因探讨[J]养猪业,2005(3):37-38.
[3] 王琴,宁宜宝.猪瘟免疫失败主要原因的解析[J]中国兽医杂志,2005(6):61-62.
[4] 王红宁,刘世贵,吴琦.规模化猪场猪瘟仿制中应注意的问题[J]中国兽医杂志,1999,25(12):20-21.
[5] 韩雪清,刘湘涛,赵启祖.猪瘟病毒及其猪瘟疫苗研究进展[J].动物医学进展,2000,21(2):1-7.
[6] 李连任.当前我国猪瘟免疫失败的原因及对策[J].当代畜牧,2005(2):14-16.
[7] 汪令波.提高猪瘟疫苗免疫效果的措施[J].现代农业科技,2006(8):14.
[8] 范玉芳.甘肃省酒泉市规模猪场猪瘟疫苗免疫抗体检测及效果分析[J].中国动物检疫,2007,24(8):38.
[9] 韩红秀,宁国,张志宏.浅谈猪瘟免疫失败的原因与对策[J].猪与禽,2007,27(4):68.。