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微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌（Bt）的研究现状及应用作者：高成华来源：《农业工程技术·温室园艺》2015年第06期苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌，简称Bt。
苏云金杆菌的发现，为人们利用微生物消灭植物病虫害提供了美好的前景。
化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏，而害虫种群的抗药性也日益提高，因此生物杀虫剂因为其“绿色环保”的特点日益引起人们的广泛关注。
现在，人们已经用发酵罐大规模地生产苏云金杆菌并制成粉剂或可湿剂、液剂，应用于农业，对100多种害虫有不同的致病和毒杀作用。
苏云金芽孢杆菌是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。
本文简要介绍作为生物杀虫剂的Bt的发展历史、研究现状和应用情况。
研究历史[1]1901年，日本学者石渡繁胤（Ishiwata Shigetane）从虫尸体液中分离出苏云金杆菌猝倒变种（Bacillus.thuringiensis var.sott）成为苏云金杆菌研究的起点[2]。
1911年，Berliner发现一杆菌，并详细描述了该菌的形态和培养特征，定名为苏云金杆菌（Bacil-lus.thuringiensis），指明苏云金杆菌含伴孢晶体（Paraspora crystl）[3]。
1938年，苏云金杆菌商品化，用于防治地中海粉螟。
20世纪50年代许多国家进行了商业性生产。
1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关，并和Fitz-James于1955年证实，伴孢晶体是一种蛋白质。
1981年，Schnept和Whiteley首次将HD21菌株伴孢晶体的基因克隆到大肠杆菌中，并得到表达。
20世纪60年代用血清学技术进行Bt的鉴定和分类。
自二次世界大战后，苏云金芽孢杆菌被广泛使用，至今已有60多年[4]。
由于其推广力度以及人们的农药使用意识的传统观念限制，目前生物农药仅占全部农药市场份额很少一部分，从此可看出，苏云金芽孢杆菌杀虫剂任然具有较大的发展潜力。
苏云金芽孢杆菌存在的问题及发展方向与化学农药相比，苏云金杆菌制剂安全性强，但产品的稳定性差，残效期短，杀虫速度慢，而且受施用环境影响大。
苏云金杆菌制剂作为微生物农药，要取代化学农药，除了依*人们生态意识的提高，更要从技术上达到高效价、低成本、规模化，从选育菌种、降低培养基成本、提高发酵控制水平、减少后处理过程中毒效损失等各环节优化。
寻找新的高活性菌株近30年来人们已分离出大量苏云金杆菌的菌种。
现在大约已知有69个血清型，82个血清亚种。
大多数生产厂家主要使用血清III型、V型、VII型菌株,包括HD−1, Bt−K, 8010等。
针对苏云金杆菌菌种发酵效价低、杀虫谱窄、见效慢、菌种退化等问题，可以采用诱变的方法筛选高毒力的菌株，选择合适的诱变剂量，将化学诱变和物理诱变结合能显著提高突变率。
丁学知等将菌株7012C经紫外线和两次亚硝基胍的交替复合诱变，菌株的毒力与原始菌株相比提高了7.5倍。
目前许多科学家致力于采用遗传工程的办法，对原有的ICP基因重组改造，构建成杂种基因或工程菌，以提高杀虫效率，扩大杀虫谱，延长有效期或改进制剂效能。
除了广谱杀虫工程菌，提高杀虫活性的工程菌、延缓抗性的工程菌、延长持效期的工程菌等也已研制成功。
走复配农药增效之路农药合理复配，能克服单个农药制剂本身存在的不足，同时取长补短发挥各自所长。
进行农药复配使用，是一项行之有效的措施。
二种杀虫剂混用时产生的毒效、防治范围，超过各自单独使用时的毒效和防治范围的总和，即１＋１>2。
农药复配有很多优点：１. 延缓和治理抗药性２. 拓宽农药防治谱３. 增效作用４. 降低使用时的毒性、药害或残留５. 节约药剂用量，降低防治成本６. 方便使用，省工省力省时武大绿洲的产品就是采用的这种方式，从大面积的田间试验表明，病毒杀虫剂和苏云金杆菌合理复配后，毒力、杀虫谱都大大提高，许多品种的杀虫剂杀虫效果已经超过了化学农药，而且用量更少，用药次数更少。
《微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌（Bt）的研究现状及应用》苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌，简称Bt。
苏云金杆菌的发现，为人们利用微生物消灭植物病虫害提供了美好的前景。
化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏，而害虫种群的抗药性也日益提高，因此生物杀虫剂因为其“绿色环保”的特点日益引起人们的广泛关注。
现在，人们已经用发酵罐大规模地生产苏云金杆菌并制成粉剂或可湿剂、液剂，应用于农业，对100多种害虫有不同的致病和毒杀作用。
苏云金芽孢杆菌是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。
本文简要介绍作为生物杀虫剂的Bt的发展历史、研究现状和应用情况。
研究历史[1]1901年，日本学者石渡繁胤（Ishiwata Shigetane）从虫尸体液中分离出苏云金杆菌猝倒变种（Bacillus.thuringiensis var.sott）成为苏云金杆菌研究的起点[2]。
1911年，Berliner发现一杆菌，并详细描述了该菌的形态和培养特征，定名为苏云金杆菌（Bacil-lus.thuringiensis），指明苏云金杆菌含伴孢晶体（Paraspora crystl）[3]。
1938年，苏云金杆菌商品化，用于防治地中海粉螟。
20世纪50年代许多国家进行了商业性生产。
1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关，并和Fitz-James于1955年证实，伴孢晶体是一种蛋白质。
1981年，Schnept和Whiteley首次将HD21菌株伴孢晶体的基因克隆到大肠杆菌中，并得到表达。
20世纪60年代用血清学技术进行Bt的鉴定和分类。
自二次世界大战后，苏云金芽孢杆菌被广泛使用，至今已有60多年[4]。
由于其推广力度以及人们的农药使用意识的传统观念限制，目前生物农药仅占全部农药市场份额很少一部分，从此可看出，苏云金芽孢杆菌杀虫剂任然具有较大的发展潜力。
简介Bt是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，为昆虫病原细菌，其菌体为短杆状、有鞭毛，一般单生或形成短链。
2024年苏云金杆菌市场分析现状1. 引言苏云金杆菌是一种重要的农业微生物制剂，具有很高的市场潜力。
本文将对苏云金杆菌市场的现状进行分析，包括市场规模、竞争格局、应用领域等方面，希望能够为相关企业提供有益的参考和指导。
2. 市场规模苏云金杆菌市场在过去几年内呈现出稳步增长的趋势。
根据市场研究数据显示，2019年全球苏云金杆菌市场规模达到X亿美元。
预计2025年，市场规模将增长至XX亿美元。
这一增长主要受到环保意识增强、农业可持续发展需求增加的推动。
3. 市场竞争格局目前，苏云金杆菌市场存在较为激烈的竞争。
主要竞争企业包括公司A、公司B和公司C等。
这些企业在生产技术、产品质量和市场拓展等方面具有一定的竞争优势。
4. 应用领域苏云金杆菌在农业领域具有广泛的应用。
主要应用于作物种子处理、有机肥料生产和农业废弃物处理等方面。
其中，作物种子处理是最主要的应用领域，占据苏云金杆菌市场的较大比例。
5. 市场机会与挑战苏云金杆菌市场在未来依然存在着巨大的机会和挑战。
机会方面，随着人们对环保和可持续农业的关注度增加，苏云金杆菌市场需求将进一步扩大。
此外，农业行业对苏云金杆菌的需求也将推动市场的增长。
然而，市场也面临着一些挑战，如技术创新、市场准入门槛等。
只有不断提高产品质量、降低成本，并与企业的研发实力和市场开拓能力相结合，才能在竞争激烈的市场中取得优势。
6. 发展趋势未来，苏云金杆菌市场的发展将呈现以下几个趋势： - 技术创新将成为市场发展的重要推动力。
通过研发先进的生产技术，提高产品质量和效率，是企业获取竞争优势的重要途径。
- 农业可持续发展需求的增加将推动市场的扩大。
同时，苏云金杆菌在抗病虫害、增强作物抗逆性等方面的应用也将得到进一步开发和推广。
- 全球市场的分化趋势明显。
不同地区的农业发展水平和需求差别较大，因此企业需要针对不同市场开展差异化的产品和市场策略。
7. 结论综上所述，苏云金杆菌市场具有很高的发展潜力。
苏云金芽胞杆菌杀虫方面的研究及运用进展摘要：人类对苏云金芽胞杆菌（Bt）的研究至今已有100多年的历史，因其具有特殊的生理特性，在微生物防治害虫方面具有重要的作用。
利用微生物能直接杀死害虫却又不伤害控制害虫的天敌，最重要的是它不污染环境，害虫也更难以产生抗药性，还能通过遗传操纵改造某些性状，以便对其更好的利用。
同时，随着转基因技术的兴起和发展，Bt成为转基因过程中的重要材料，在应用实践中起着巨大的作用，如今成功的转Bt产物已有：转Bt抗虫棉花、转Bt玉米以及备受争议的转基因水稻等等。
本文主要叙述Bt的某些重要特征和当前的研究进展，旨在达到一种科普宣传让人们更加了解有关转Bt产物方面的知识。
关键词：苏云金芽孢杆菌、微生物防治、转基因、农业生产应用苏云金芽胞杆菌( Bacillus thuringiensis，简称Bt )是一种杆状、革兰氏染色阳性反应、能形成内生芽胞的细菌，广泛存在于各种生态环境中。
其营养体具有周生鞭毛或无鞭毛。
在其芽胞期能形成对特定昆虫具有毒性的由杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins, ICPs)组成的伴胞晶体，此特点成为苏云金芽胞杆菌区别于分泌肠毒素的蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus)和引起炭疽病的炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)的主要特征(喻子牛等，1990)。
由于其独特的杀虫特性，自从1901年日本学者Ishiwata首次分离到苏云金芽胞杆菌以来，苏云金芽胞杆菌得到了广泛的关注和研究，在世界范围内已分离得到超过40000个菌株，对其生物活性谱的了解得到了极大的扩展，由最初对鳞翅目的毒性，逐渐发现对双翅目、鞘翅目、膜翅目、同翅目等昆虫纲10个目500多种昆虫以及原生动物、线形动物门、扁形动物门中某些有害种类也有特异的生物活性(Schnepf等，1998)。
1.苏云金芽孢杆菌的毒素毒素是苏云金杆菌杀虫的核心，主要有三种：伴孢晶体（杀虫晶体蛋白，Insecticidal Crystal Proteins，ICPs）即σ-内毒素，苏云金素即β-外毒素，芽孢。
2023年苏云金杆菌行业市场研究报告苏云金杆菌是一种重要的微生物资源，具有广泛的应用领域和市场前景。
本篇研究报告将从市场规模、竞争格局、发展趋势等方面对苏云金杆菌行业市场进行分析。
一、市场规模苏云金杆菌作为一种新兴的微生物资源，其应用领域非常广泛。
在农业领域，苏云金杆菌可用于土壤修复、生物灭虫剂、植物生长调节剂等方面，具有替代传统化学肥料和农药的潜力。
在医药领域，苏云金杆菌可应用于制药、抗生素等领域，具有重要的医药价值。
此外，苏云金杆菌在环保、食品、饲料等领域也有一定的应用价值。
根据初步数据估计，苏云金杆菌行业市场规模约为XX亿元。
二、竞争格局苏云金杆菌行业目前处于初级阶段，市场竞争相对较弱。
由于苏云金杆菌的研发成本较高，技术门槛较高，现有企业数量有限。
目前市场上主要的竞争企业有A公司、B 公司、C公司等。
这些企业在技术研发、产品质量、市场拓展等方面都有一定的优势。
与此同时，也有一些新兴企业涌现，加入到苏云金杆菌行业中，增加了市场竞争的压力。
三、发展趋势1. 技术进步：随着生物技术的迅猛发展，苏云金杆菌的技术研发也在不断进步。
新的研发技术和方法的应用，将进一步提高苏云金杆菌的产量和品质，推动行业的发展。
2. 环保意识的提升：随着环保意识的提高，人们对环境友好型产品的需求也在增加。
苏云金杆菌作为一种可替代化学肥料和农药的产品，其环保性将成为市场竞争的优势，市场需求将进一步增加。
3. 政策支持：国家在推动农业可持续发展和环保产业发展方面，也给予了一定的政策支持。
相关政策的推动将为苏云金杆菌行业提供更好的发展机遇和市场环境。
4. 国际合作：苏云金杆菌作为一种具有重要应用价值的微生物资源，国际市场的开拓和合作也将是行业未来发展的重要方向。
与国外企业的合作，可以加强技术交流和产品推广，提高企业的竞争力。
总结：苏云金杆菌行业作为一种新兴的微生物资源行业，市场规模较小但具有较大的发展潜力。
行业竞争相对较弱，但随着技术进步和环保意识的提高，市场竞争将逐渐加剧。
到２００５年使生物农药使用量占到农药总量的３０％，２０１５年占到５０％。
目前，我国农药耗用量每年达１５０万吨以上，按此比例计算，２００５年需生物农药４５万吨，２０１５年达７５万吨。
而目前我国生物农药仅８０００吨，在农药总量中不到１％。
由此可见，生物农药具有很好的发展前景。
苏云金杆菌作为应用最广泛的生物农药，其发展潜力是可以预测的。
２苏云金杆菌的产生背景及发展１９叭年，德国南部一个叫苏云金的小城镇上，一家面粉加工厂发生了一件怪事，一种叫地中海粉螟的仓库害虫，平时粉蛾飞舞，幼虫在面粉中爬来爬去，这一天，有人发现那些小爬虫突然卷曲死ｌ二。
这件事弓ｆ起了生物学家贝尔内里的注意，经过无数次努力，贝尔内里从虫ｔｒ＿｜中分离出来这利，杆状细菌。
４年以后．克林诺发现．在细菌的芽孢形成不久，还会形成一些正方形或菱形的晶体，可惜这个发现来被重视。
１９５３年，汉纳证明了这种晶体是有赤的噩白晶体，粉螟幼虫自然死【＝＝的原因不吉臼明了。
这种细菌以发现的地方命名，叫嚣云金杆菌。
经过几十年的势力。
科学家们用实验证明苏云金杆菌可以防治鳞翅曰、膜翅日、直翅目、鞘翅目等１３０多种害虫。
３苏云金杆菌的杀虫机理苏云金杆菌杀虫作用的主要成分是孢子形成过程中产生的伴孢晶体（ＩｃＰｓ），它足单基因表达的产物”。
伴孢晶体经敏感昆虫口服后，在中肠碱性环境中，被降梓为活性的多肽片断（ＩｃＰ的毒性片断包含三个不同的结构域。
一般认为结构Ｉ参与孔道的形成．结构域ＩＩ决定毒素与受体的特异性结合。
结构域ＩＩＩ主要调节毒素的活性）”’，再与巾肠受体蛋白（陷锄）结合，形成细胞膜通道，破坏渗透膜，引起细胞溶解，展终导致虫体死亡。
ＩｃＰ的杀虫作用表现出种属专一性，然而，ＩｃＰ对敏感昆虫的特异性和毒力，除决定于菌株本身外，还决定于昆虫肠液对伴孢晶体的溶解和激活方式，幼虫中肠上皮细胞毒蛋白专一性受体的存在以及昆虫对ＢＴ的抗性“３。
目前，全世界拱分离到５００００株苏云金杆菌，分为６２种血清型和矩种。
这些血清型和亚种分别具有不同的杀虫基因，加上每一种苏云金芽孢杆菌可同时含有多种杀虫基因，从而使苏云金芽孢杆菌的杀虫活性具有多样性５’。
４苏云金杆菌的综合利用４１ＢＴ对防治小地老虎小地老虎（ＡｇｒｏｔｉｓｙｐｓｉｌｏｎＲｏｔｔｅｍｂｅｒｇ）属鳞翅目夜蛾科，是一种迁飞性重要农业害虫。
近年来，国内外许多学者对小地老虎的生物防治进行了广泛的研究。
有关ＢＴ的研究表明：苏云金杆菌的许多业种对小地老虎都有一定的致死毒性。
ＢＴ对小地老虎皿致死效应主要表现为，幼虫和蛹发育延迟、成虫产卵期延长，寿命减短、产卵期下降、成虫及蛹变形等。
从总体上看，ＢＴ对夜蛾科害虫防治效果不理想，但我们可以充分利用ＢＴ的亚致死效应，采用ＢＴ与低剂量农药的组合来达到防治目的。
ＡＬ—ｚｕｂａｌｉ—ＡＮ０利用ＢＴ与农药的协调增效作用，使用低剂量的Ｂａｃｔｏｓ∞ｉｎｅ筇云金业种．分别与几种农药结合来防治小地老虎，取得了令人满意的结果”１。
４２ＢＴ防治仓贮害虫的问题亟待解决。
５．１抗性问题５．１．１抗性问题早在５０年代苏云金芽孢制剂就开始使用，人们亦曾对苏云金芽孢杆菌杀虫剂是否会像化学农药一样产生抗药性提出问题””。
在８０年代以前由于一直都没有检测到昆虫的ＢＴ抗性，因而认为昆虫的抗性问题也是一个遥远的问题。
然而，自１９８３年开始报道以来，抗性问题不断在实验室和田问得到证实…’。
现在，在实验室内己能比较容易的筛选出许多抗性品系（ｓＴｏＮＥＥＴＡＬ，１９８９）。
近几年在大田分离得到了对苏云金制剂的敏感性下降了几十到几百的目标害虫抗性品系（ＦＥＲＲＥＥＴＡＬ．，１９９１；ＭＯＲＩｓＨＩＴＡＥＴＡＬ，１９９２）。
在我国的许多地方也已经发现大田小菜蛾对ＢＴ制剂的抗性成倍增加（戴承铺等，１９９４）。
５．１．２解决途径①不同ＢＴⅡ种的轮换、混合使用由于苏云金芽孢杆菌心业种不断筛选，不同亚种问的基因结构、活性谱不同，因此，不同业种的轮换、混合使用足阻Ｉｆ：和延缓抗性产生的有效途径。
但是另一方面，有交互抗性的菌株问混合１ｉ能有效阻止其抗性形成，延缓作用也不大。
（ＭｃＧａｎｇｈｅｙ等，１９９２）②多毒蛋白基因ＢＴ菌株的开发通过将不同ＩｃＰｓ基因转移到合适的受菌体巾实现优化组合，１ｉ仅可以扩大杀虫活性谱．而且可能增加表达量和延长持效期“”。
＠ＢＴ杀虫剂与少量戒药混合使用由于苏云金芽孢杆菌与化学农药没有交互作用，所以苏云金芽孢杆菌与低剂量的农药混合使用．既能提高杀虫效果．又能降低两者对害虫的选择压力，从而延缓抗性的形成和发展”…。
④改变施用剂量降低毒琢白使用剂量，一是可咀减少每年害虫的代数，延缓抗性进化速度：二是可使天敌免受重创而保持相对活跃。
⑤ＢＴ植物种植区设立防护带目前．新基因植物多是结构表达单一的毒蛋白基因，极易导致和加速抗性的产生。
在转ＢＴ植物大田设立非抗虫植物取．为昆虫提供避难所，使敏感昆虫较易存活下来，相对增加群体中敏感昆虫的比例．从而可减缓昆虫抗性形成速度。
５．２持效性问题目前．我国生产的ＢＴ制剂主要用于防治敏感性鳞翅目害虫，不仅品种单一．防止范围窄，而且在防治方法上类似于化学防治的短期防治，难以发挥微生物杀虫剂的持续控制效果““。
国际上生产的三大类ＢＴ商品制剂也主要用于防治地上害虫．与国内生产的ＢＴ制剂存在类似的问题。
这些都是由于阳光中紫外线能使ＩｃＰ和芽孢失活而丧失杀虫效果““。
纵观ＢＴ的选育、开发史，很太一部分ＢＴ菌株都是来源于土壤，因此，其芽孢可在土壤中艮期存活，且ＩＣＰ避免了紫外线的照射．可＆期保持其杀虫效力的特性。
而到今天为止，国际上还没有专门用于防治地下害虫的商品化ＢＴ杀虫剂问世。
因此，开发用于防治地下害虫的ＢＴ杀虫剂对从事ＢＴ研究的科学工作这是一个严峻的挑战。
这无疑也将推动ＢＴ杀虫剂产业的发展。
笙！塑堡区墅篓！蒸主垒蜒堕盟型里堡墨苎：墼壁垒鲤壅堡盟：鲢：６结论苏云金杆菌对１５０多种农业害虫都有防效。
它作为生物农药的重头戏，发展是必然的。
对于苏云金杆菌存在的问题。
塌主要的就是抗性问题和持效性问题。
只要克服了这两个问题，苏云金杆菌的发展与普及将毫无疑问。
这对于我们来说，是一个严峻的挑战，也是２ｌ世纪发展的需要。
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防止地Ｆ害虫的苏云金芽孢杆茼新制荆的开发和利用．喻子牛主编：微生物农药及其产业化．北京：科学出版社．２０【】ｏ：１０５～１０７［１８］崔云龙等．紫外线使苏云盘杆菌伴孢品体失活机理的研究，微生物通报．１９９３．２１（｛）：】９３～１９４苏云金杆菌的利用现状、发展及问题探讨作者：徐庆贤， 张无敌， 尹芳， 宋洪川作者单位：云南师范大学省农村能源工程重点实验室,昆明,650092刊名：农业与技术英文刊名：AGRICULTURE & TECHNOLOGY年，卷(期)：2003，23(5)被引用次数：3次1.查看详情 19992.夏立秋苏云金杆菌4.0718质粒上杀虫晶体蛋白质基因的PCR分析[期刊论文]-生物技术通报 2002(02)3.夏立秋苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白毒性片断的结构域在毒杀昆虫中的作用[期刊论文]-生物工程进展2002(01)4.农广昆虫对BT晶体杀虫作用的影响[期刊论文]-中国生物防治 1998(01)5.张松鹏经高浓度味精废水驯化的BT菌株伴孢晶体特性及气活性成分研究[期刊论文]-生物技术通报 2002(02)6.李芳BT对小地老虎呼吸作用的影响[期刊论文]-昆虫天敌 2002(01)7.张宏宇苏云金芽孢杆菌防治仓贮害虫 1995(04)8.戴美学苏云金杆菌SD-5菌剂防治大豆银纹夜蛾的研究 1996(02)9.张光美苏云金杆菌对小菜蛾取食量、生长发育和取食的影响[期刊论文]-中国生物防治 1998(02)10.张光美.刘树生苏云金杆菌小菜蛾卵的生物活性 1997(02)11.黎起秦芽孢杆菌对水稻纹枯病的防治效果[期刊论文]-中国生物防治 2000(04)12.刘梅苏云金芽孢杆菌防治鞘翅目害虫的研究进展[期刊论文]-中国生物防治 1998(01)13.农广.庞义昆虫对BT晶体蛋白杀虫剂作用的影响[期刊论文]-中国生物防治 1998(02)14.王成球苏云金杆菌HD-1制剂对小菜蛾的抗性筛选及抗性特征[期刊论文]- 1999(01)15.李林.喻子牛苏云金芽孢杆菌CRY3Aa基因在不同受体菌种的转化与表达 200016.张宏宇苏云金芽孢杆菌防治仓贮害虫 1995(04)17.冯书亮防止地下害虫的苏云金芽孢杆菌新制剂的开发和利用 200018.崔云龙紫外线使苏云金杆菌伴孢晶体失活机理的研究 1993(04)1.期刊论文徐健.刘琴.殷向东.祝树德.XU Jian.LIU Qin.YIN Xiang-dong.ZHU Shu-de重组苏云金杆菌ICP基因工程菌研究进展-华东昆虫学报2006,15(1)综述了苏云金杆菌ICP基因及重组ICP工程菌的研究进展,描述了工程菌构建的主要方法,以及目前构建获得的各类ICP工程菌的特点,讨论了ICP工程菌的应用前景和发展方向.2.学位论文谭乐苏云金杆菌cry1Ab16基因的克隆和表达2002分子伴侣P21zb能激发苏云金杆菌（Bacillusthuringiensis,简称Bt）晶体缺陷型菌株4Q7的沉默杀虫晶体蛋白（InsecticidalCrystalProtein,简称ICP）基因表达,形成130kDa的大菱形晶体.该研究通过对已知cry1类基因以及已发表的cry1Ab16序列进行分析,分别设计了两对引物PP2和P1-Ab,首次从苏云金杆菌以色列亚种（subsp.israelensis）晶体缺陷型菌析4Q7中扩增到cry1Ab16的全长基因,并克隆到pGEM-TEasy载体上.经SDS-PAGE和Western-blot检测,发现转化菌株M15（pQCT）能正确表达cry1Ab16蛋白,其分子量约为130kDa,但此蛋白不稳定,会降解成67kDa的蛋白.对表达的cry1Ab16蛋白进行涂布法生物测定,对三龄小菜蛾（Plutellaxylostella）的LC<,50>为258.3μg/ml对其他夜蛾科害虫的生长发育也有明显的抑制作用.另外,还对分子伴侣P21zb对Bt以色列亚种Bti/4Q7中晶体蛋白的形成及产量的影响等作用作了初步研究.3.期刊论文沈丽丽.雷萍.杨水云.张彦.陈曦.赵文明.张金松.周令一株高毒苏云金杆菌的晶体蛋白组成及RAPD分析-西北农业学报2003,12(4)筛选得到一株对摇蚊幼虫高毒的苏云金芽孢杆菌以色列亚种菌株(命名为SZ6),利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和RAPD技术分析了其晶体蛋白和总DNA组成,结果表明:在晶体蛋白提纯中,固体培养基培养的菌株晶体蛋白比液体摇瓶培养的更易用双液相法提纯;晶体蛋白亚基在分子量上和标准菌株的晶体蛋白没有显著差异,都含有4条多肽(分子量分别为135、128、72和27 KD),但RAPD分析结果显示,该毒株在DNA组成上,于多个位点处存在与标准菌株不同的结构.4.期刊论文张春艳.胡胜标.单世平.夏立秋.ZHANG Chun-yan.HU Sheng-biao.SHAN Shi-ping.XIA Li-qiu定点突变技术研究苏云金杆菌Cry1类晶体蛋白结构与功能的进展-生命科学研究2007,11(2)近年来利用定点突变技术研究苏云金杆菌(Bacillus thuringiesis,Bt)杀虫晶体蛋白(Insecticidal crystal proteins,ICP)作用机制已取得良好进展.杀虫晶体蛋白不同结构域上氨基酸残基的突变将影响其稳定性,与受体的结合,不可逆的昆虫中肠膜插入及离子通道活性的强弱等.突变研究表明,结构域Ⅰ参与不可逆结合及插入昆虫中肠膜过程;结构域Ⅱ参与受体结合,包括初始结合与不可逆结合;结构域Ⅲ在杀虫特异性和维持三维结构的稳定性方面起重要作用,同时,可能参与离子通道的形成,受体结合和插入昆虫中肠膜过程.利用各种定点突变技术对各位点进行突变可以研究单一位点的功能,到目前为止,已有很多关于这方面的研究,并且筛选到了毒力提高的工程菌株.5.期刊论文汤慕瑾.余健秀.李建华.庞义利用突变技术研究苏云金杆菌杀虫晶体蛋白的进展-生物工程进展2001,21(4)本文综述了近年来利用突变技术研究苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白(Insecticidal crystal proteins,ICP)杀虫作用机制所取得的进展.其中结构域工参与不可逆结合及影响离子通道的形成;结构域Ⅱ参与与受体的结合,包括可逆结合和不可逆结合;结构域Ⅲ保持三维结构稳定,同时可能参与结合受体的过程,插膜以及离子通道调节.利用突变技术改变Bt杀虫晶体蛋白一级结构是Bt改良的一条诱人途径.6.学位论文余健秀利用转座子构建杀虫Bt工程菌1996苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种昆虫病原菌,它对昆虫的毒性主要靠菌体产生的各种杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins,ICPs),这些ICP具有杀虫的专一性,研究已证明大多数ICP的编码基因位于菌体内的大质粒上.通过质粒转移或ICP的共表达构建苏云金杆菌重组菌株,以期扩大Bt杀虫谱和增强毒力,常因质粒的不稳定性和质粒间的排斥性而受到一定限制.该研究首次成功地利用枯草杆菌(Bacillus subtilis)的转座子衍生载体pTV1TS(含Tn917)将克隆的目标ICP基因整合进苏云金杆菌染色体上,转座频率达5.9×10<'-5>.将来源于B.t.morrisoni(PG14)亚种的、对双翅目昆虫有毒效的杀虫晶体蛋白基因cryIVD和广谱溶细胞且对蚊子等昆虫有毒效的蛋白基因cytA分别克隆到pTV1TS上,用高压电激法转入对鳞翅目昆虫有毒效的B.t.kurstaki HD-1菌株,分别筛选到在染色体基因组上整合进这两个基因的突变株HD-Tn-T26和HD-Tn-T45,整合基因均能在这两株工程菌中获得表达并形成正常的伴孢晶体.生物测定结果显示,表达的CryIVD和CytA晶体蛋白有很高的杀虫活性,对库蚊二龄幼虫的LC<,50>分别为83ng/ml和64ng/ml,同时CytA晶体蛋白对培养的昆虫细胞有较强的溶解作用.该文还着重讨论了ICP之间的协同作用,以及如何解决昆虫对Bt产生抗性的问题.该研究结果为创造新型基因工程苏云金杆菌杀虫剂提供了新的重要途径.7.期刊论文范贤林.孟香清.芮昌辉.Fan Xianlin.Meng Xiangqing.Rui Changhui抗Bt杀虫蛋白棉铃虫种群的相对适合度-农药学学报2000,2(3)在室内条件下,比较了对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫蛋白(ICP)有20倍抗性的棉铃虫(Helicoverpa armigera Hübner)种群(R种群)与同源对照种群(S种群)之间的相对适合度.结果表明,与S种群相比,R种群的产卵量、卵孵化率和化蛹率明显降低,幼虫历期和蛹历期明显延长,R种群相对于S种群的适合度为0.65.杂交F1代RS种群相对于S种群的适合度为1.6,显示出杂交优势.正反交F1代种群对Bt ICP敏感性的差异不显著,表明棉铃虫对Bt ICP的抗性遗传不存在性连锁,为常染色体遗传.8.期刊论文彭可凡苏云金杆菌遗传工程杀虫剂-生物学通报2001,36(2)苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)是一种对昆虫有致病作用的细菌.其杀虫活性物质主要是杀虫晶体蛋白质(Insecticide crystal protein,ICP).由于该杀虫剂对人、畜无害,无致癌和致畸作用,是一种有着广泛应用前景的微生物杀虫剂.9.学位论文余健秀苏云金杆菌新基因、表达载体及高效杀虫工程菌的研究2000近几十年来,苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)作为一种主要的生物杀虫剂,已广泛应用于害虫的防治,并取得了显著的经济效益、社会效益和生态效益.但Bt作为生物杀虫剂仍存在若干不足之处,例如:①对昆虫高毒力的Bt菌株不多;②现有Bt株系的杀虫谱比较窄等.此外,有些昆虫对常用Bt制剂已产生了抗性.为此,有必要继续大力开发新的Bt资源,并对现有Bt株系进行遗传改良.该论文围绕这一主题开展了如下研究.1、ICP基因的鉴定与克隆.2、苏云金杆菌分子伴侣基因及其功能的研究.3、苏云金杆菌表达载体的构建.4、高效杀虫Bt工程菌的构建.10.期刊论文范贤林.芮昌辉.孟香清.梁桂梅.李永平一种监测棉铃虫对Bt杀虫晶体蛋白抗性的技术-植物保护学报2002,29(3)研究了以诊断试剂盒监测棉铃虫对苏云金杆菌(Bt)杀虫晶体蛋白(ICP)抗性的技术.将1日龄幼虫在含诊断剂量的饲料中(每毫升饲料含Bt ICP0.01mg)取食7天,以生长至3龄以上的个体作为抗性个体的判断指标;筛选出人工饲料中防腐剂剂量的最佳值为每350毫升饲料中含丙酸2.5ml.经对多个棉铃虫不同抗性种群的验证试验,证明诊断试剂盒检测抗性个体频率较为精确且应用简便.1.杨玉焕.王志英.闫洪波.孙中武.姜扬应用双水相萃取技术分离纯化苏云金杆菌库斯塔克亚种和苏云金亚种的β-外毒素[期刊论文]-东北林业大学学报 2009(3)2.孙锋.林毅.张宽朝B.t.蛋白的纯化与鉴定[期刊论文]-农药 2006(12)3.韩新才提高苏云金杆菌防治效果技术的研究[期刊论文]-安徽农业科学 2006(8)本文链接：/Periodical_nyyjs200305015.aspx授权使用：吉林大学农学部(jldxnxb)，授权号：63adbe86-b94a-4dbc-a3c5-9de50100a998下载时间：2010年9月2日。
