试管苗的炼苗
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表220—03雄株试管生根苗移栽基质试验表120-03雄株试管生根苗敞瓶天数与移栽成活率移栽基质比例珍珠岩502010苗生长状况生长弱生长慢正常生长田园土5070草炭土503020基质情况特别松散,不利移栽松散,易缺水松紧较适度,移栽个别散碎软枣猕猴桃(Actinidia arguta (Sieb.et Zucc.)Planch.ex Miq.),属猕猴桃科(Actinidiaceae ),猕猴桃属(Actinidia ),落叶大藤本,具有很高的营养价值和药用价值。
种苗繁殖主要采用种子及扦插方式进行。
但种子繁殖的周期长,苗木的生长势参差不齐;使用枝条扦插受到母株数量及质量限制,繁殖系数较低,减慢了优异资源的驯化及推广工作。
应用植物组织培养方法具有生长周期短、繁殖系数高等优点,应用此项技术可以加快软枣猕猴桃优异资源的驯化及种苗繁殖速度。
其中试管苗炼苗技术是极其重要的过程。
可分为二部分,一是温室炼苗,二是大田炼苗。
本文是以延边大学农学院朴一龙教授提供的20-03软枣猕猴桃雄性株进行组织培养获得的试管苗进行炼苗试验结果的技术总结。
1温室炼苗1.1温室试管苗瓶中炼苗1.1.1温室炼苗准备:①整地、翻地:破碎土块清除碎石杂物,用500倍多菌灵土壤消毒,喷后覆盖48小时,去膜,平整土地。
②移栽炼苗材料:田园土、草炭土、珍珠岩、营养钵、晒水桶、剪刀、镊子、水盆、保温布、棚膜、遮阳网、支架,农药、化肥、操作台等,根据苗数量合理准备。
③设备:加温、降温、保温、放风、遮阳调试。
④最好专项专人。
⑤运输:冬季室外温度高时可及时运输试管苗。
1.1.2试管苗进入温室炼苗试管苗炼苗是苗从无菌状态过度到有菌状态,苗从瓶中气候过度到温室、大田气候,叶片恢复闭合功能的过程,整个过程需要逐步适应,温度、湿度、光照强度、通风强度,水、肥、病虫害等每个阶段需要精准控制,相差一步,都有很大损失。
①整个软枣猕猴桃试管苗温室炼苗区,棚膜上要覆盖65%遮阳网。
蝴蝶兰试管苗的栽培管理技术一、试管苗的练苗和出瓶种植 1.炼苗要提高蝴蝶兰试管苗成活率,首先试管苗必须强壮。
试管苗在出瓶前必须先进行炼苗,在苗有三片叶时,置于散射阳光处,均匀照射20天左右,使试管苗长得更健壮,出瓶后能更快地适应外界环境条件。
2.出瓶小苗出瓶时要特别小心,先往培养瓶里注少量水,再轻轻抖动瓶子,固体培养基抖松后,用长镊子把兰苗取出来,尽量减少伤害兰根与兰叶。
3.种植出瓶后的小苗阴干后用直径5厘米的白色透明、透气良好的小塑料盆种植,一个小塑料盆种1株。
基质******用水苔,下部垫少量小粒碎砖块,以便通水透气。
种植前,基质应先消毒,水苔不能太湿或太干,简单的方法可用手抓不出水为宜,种植时水苔不宜太紧,也不宜太松,因为太紧不利于兰根的通透,太松兰株固定不稳和水苔吸水太多,易引起烂根。
亦不能种得太深,以露出兰株茎基为宜。
4.换盆根据兰苗的生长情况,及时换盆,兰根布满花盆时可换盆,以利于植株的生长。
一般出瓶4—6个月后用直径为8厘米的白色透明塑料盆进行第一次换盆,10—12个月后再换盆1次,用直径为12厘米的白色透明塑料盆。
换盆时要剪除烂根、病残叶,如基质仍较好,可保留原来的基质,只在外围加一些基质,勿伤害兰根。
二、栽培管理 1.温度温度合适与否是蝴蝶兰生长良好的关键。
生长适温在18℃—28℃之间,绝对低温应不低于10℃,否则易受冻害而落叶,花苞变黄脱落,甚至整株腐烂而死亡。
大规模栽培蝴蝶兰必须有温室,才能安然过冬。
夏季温度超过30℃,蝴蝶兰会处于一种半休眠状态,此时若浇水过多会造成植株的根、茎、叶出现腐烂现象。
因此,在栽培蝴蝶兰的过程中,冬春季防寒,要有保温设施,如加盖薄膜,在兰棚内用加热器加温等,预防冻害;酷热的夏季要采取降温措施,如在花棚顶喷凉水,在花架下淋冰水等,并用风扇吹,达到降温的效果。
生长期的蝴蝶兰,日间温度应在25℃—28℃之间,而晚间******在18℃—25℃之间。
大樱桃组培苗炼苗技术摘要:根据大樱桃的生物学特性,通过多年大樱桃组培试管苗炼苗的试验,总结出了大樱桃组培试管苗炼苗前后的一系列管理技术。
结果表明,试管苗炼苗基质的选择、试管苗温室驯化生根壮苗与开瓶炼苗这3个阶段的工作非常重要。
基质选用细沙与蛭石6:4混合为宜,试管苗温室训化生根壮苗与开瓶炼苗时间以10~15d为宜,移入沙床后定期喷洒营养液和杀菌液,按照此方法进行试管苗炼苗可获得很高的成活率。
关键词:大樱桃;组培;炼苗;技术方法试管苗的炼苗移栽是组织培养过程中重要的环节,这个环节最需要的是操心和细心,即对大棚温湿度操心,对瓶苗移栽各管理环节的细心,若稍有疏忽,则会造成大批幼苗死亡,使整个组培工作前功尽弃,造成巨大的损失。
通过几年的实践,总结出了大樱桃试管苗炼苗的关键技术,从试管苗炼苗基质的选择、试管苗温室驯化生根壮苗与开瓶炼苗这3个阶段进行了详细介绍,为天水市优良大樱桃品种的工厂化生产提供了科学依据和技术支持。
1苗床及基质的选择1.1苗床的制作苗床在日光温室内要做成凹畦,长6m,宽2m,畦深15~20cm为宜,将畦整平拍实后,喷洒杀虫剂500倍液,在畦内将细砂、蛭石混匀后用木板刮平,并用800倍液多菌灵液将沙床洒透,在畦上搭建小拱棚,可用扁竹或圆竹搭建,高度保持在1.50m 左右,上遮盖遮阳网。
1.2栽种试管苗的基质栽种试管苗的基质要具备透气、保湿、容易灭菌处理、不利于杂菌滋生的特点,选用珍珠岩、炉渣、蛭石、锯末、草炭土等多种基质进行试验,结果表明,最适合大樱桃组培苗生长的基质为:细沙与蛭石6:4混合,细砂为颗粒为0.10~0.20mm 的面砂。
2试管苗的移栽方法2.1试管苗的驯化试管苗从培养架上长好后,将试管苗小心从培养架上取下,要轻取轻放,迅速转移到日光温室中,在日光温室中将瓶苗均匀地摆在地上,温度控制在15~25℃,光照强度为3 000Lx,每天中午在瓶苗周围喷洒多次雾水,达到保湿降温的效果,移到自然光下2~4d,让试管苗逐渐接受强光照射。
组培苗移栽前为什么要进行炼苗?机理为何?#fontzoom span *{font-size:16px} 组培苗虽然具有一定的光合能力,处于高湿、弱光、低CO2、恒温、异养条件下生长,其组织分化不完善,光合自养能力弱,适应性差,气孔多而且不易关闭、叶绿素少、根毛少,炼苗过程为逐步改变其生长条件逐步促使其组织发育完全,以适应外界环境生活:叶绿素增多,改善气孔的调节功能使蒸腾下降,根毛发育完善等,提高其对环境的适应能力。
详见:试管苗移栽易于死亡的理论基础离体繁殖的试管苗的能否大量应用于生产,特别是木本植物、名贵花卉能不能取得好的效益,取决于最后一关,即试管苗能否有高的移栽成活率。
试管苗移栽过程复杂,在未掌握其有关理论和技术时,若盲目移栽,势必造成高的死亡率,而导致前功尽弃。
因此掌握有关理论和技术十分重要大力提高移栽成活率,建立高而稳定的移栽工序和方法是十分重要的。
(一)试管苗移栽后易于死亡的原因试管苗一般在高湿、弱光、恒温下异养培养,出瓶后若不湿极易失水而萎蔫死亡。
从形态解剖和生理功能两方面分析其原因如下:1、形态解剖方面(1)根①无根一些植物,特别是木本植物,试管繁殖中能不断生长、增殖,但不生根而无法移栽。
王际轩等(1989)和薛光荣等(1989)报道苹果部分品种茎尖再生植株和花药诱导的单倍体植株不生根或生根率极低,无法移栽而采用嫁接法解决。
牡丹试管繁殖也因生根问题未解决而不能用于生产。
②根与输导系统不相通Mccowm(1978)报道桦木从愈伤组织诱导的根,不与分化芽的输导系统相通。
李曙轩等发现花椰菜等芸苔属蔬菜第一次培养可诱导成苗,但培养的苗,根系是从愈伤组织上产生的,与茎叶维管束不相通,需将芽切下转移到生根培养基上再长根,才与茎的维管束相通,移栽才能成活。
Donnelly等(1985)观察花椰菜植株,发现根与新枝连接处发育不完善,导致根枝之间水分运输效率低。
林静芳(1985)在杨树上,陈正华在橡胶上,Red(1982)在杜鹃上均发现此现象。
(完整版)组培苗的炼苗方法试管苗的炼苗和移栽一、目的要求熟练掌握组培苗移栽驯化技术。
二、用品1、材料:生根组培苗;2、器具用品:镊子;水盆;蛭石、珍珠岩、草木灰;育苗盘;喷雾器;竹签等。
三、方法与步骤(一)练苗将生根的组培苗从培养室取出,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。
然后打开瓶口,再放置3~7天。
(二)基质灭菌将蛭石、珍珠岩和草木灰分别用聚丙烯塑料袋装好,在高压灭菌锅中灭菌20分钟,或者采用高温干热灭菌法灭菌,灭菌后冷却备用。
(三)育苗盘准备取干净的育苗盘,将蛭石和珍珠岩按1:1混合,然后倒入育苗盘中,用木板刮平。
将育苗盘放入1-2cm深的水槽中,使水分浸透基质,然后取出备用。
(四)试管苗脱瓶用镊子将试管苗轻轻取出,放入清水盆中,小心洗去根部琼脂,然后涝出,放入干净的小盆中。
(五)移栽用竹签在基质上打孔,将小苗栽入育苗穴盘中,轻轻覆盖、压实。
待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。
最后将育苗盘摆入到驯化室中,正常管理。
四、作业记录试管苗移栽驯化步骤,统计移栽成活率。
解释:1、闭瓶强光练苗。
当生根后或根系得到基本发育后,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。
2、开瓶强光练苗。
将培养容器的盖子或塞打开,在自然光下进行开瓶练苗3~7天,正午强光或南方光照较强地区要注意采取措施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。
如果在开盖容器中培养不超过1周,一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。
开瓶炼苗可以分阶段进行,即首先松盖(或塞)一两天,然后部分开盖一两天,最后完全揭去盖。
这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。
培养容器的开口大小也影响开盖的速度,开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。
3、试管苗的移栽。
试管苗移栽是组织培养过程的重要环节,这个工作环节做不好,就会造成前功尽弃。
试管苗从琼脂培养基中移出时要用长镊子小心取出,彻底清洗干净根部。
组培苗的炼苗方法 Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】试管苗的炼苗和移栽一、目的要求熟练掌握组培苗移栽驯化技术。
二、用品1、材料:生根组培苗;2、器具用品:镊子;水盆;蛭石、珍珠岩、草木灰;育苗盘;喷雾器;竹签等。
三、方法与步骤(一)练苗将生根的组培苗从培养室取出,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。
然后打开瓶口,再放置3~7天。
(二)基质灭菌将蛭石、珍珠岩和草木灰分别用聚丙烯塑料袋装好,在高压灭菌锅中灭菌20分钟,或者采用高温干热灭菌法灭菌,灭菌后冷却备用。
(三)育苗盘准备取干净的育苗盘,将蛭石和珍珠岩按1:1混合,然后倒入育苗盘中,用木板刮平。
将育苗盘放入1-2cm深的水槽中,使水分浸透基质,然后取出备用。
(四)试管苗脱瓶用镊子将试管苗轻轻取出,放入清水盆中,小心洗去根部琼脂,然后涝出,放入干净的小盆中。
(五)移栽用竹签在基质上打孔,将小苗栽入育苗穴盘中,轻轻覆盖、压实。
待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。
最后将育苗盘摆入到驯化室中,正常管理。
四、作业记录试管苗移栽驯化步骤,统计移栽成活率。
解释:1、闭瓶强光练苗。
当生根后或根系得到基本发育后,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。
2、开瓶强光练苗。
将培养容器的盖子或塞打开,在自然光下进行开瓶练苗3~7天,正午强光或南方光照较强地区要注意采取措施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。
如果在开盖容器中培养不超过1周,一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。
开瓶炼苗可以分阶段进行,即首先松盖(或塞)一两天,然后部分开盖一两天,最后完全揭去盖。
这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。
培养容器的开口大小也影响开盖的速度,开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。
3、试管苗的移栽。
试管苗移栽是组织培养过程的重要环节,这个工作环节做不好,就会造成前功尽弃。
炼苗
1、试管苗的生长环境
试管苗和一般的田间幼苗不同,试管苗长期生长在培养容器中,与外界环境隔离,形成了一个恒温、高温、高湿、弱光、无菌的独特生态环境。
恒温:在试管苗整个生长过程中,常采用恒温培养,即使某一阶段稍有变动,温差也是极小的。
而外界环境中的温度由太阳辐射的日辐射量决定,处于不断变化之中,温差较大。
高湿:组织培养中培养容器内的水分移动有两条途径,一是试管苗吸收的水分,从叶面气孔蒸腾;二是培养基向外蒸发,而后又凝结进入培养基的水分。
循环的结果会使培养容器内相对湿度接近于100%,远远大于培养容器外的空气湿度。
弱光:组织培养中采取人工补光,其光照强度远不及太阳光,组培苗生长较弱,移栽后经受不了太阳光的直接照射。
无菌:试管苗所在环境是无菌的。
不仅培养基无菌,而且试管苗也无菌。
在移栽过程中试管苗要经历由无菌向有菌的转换。
2、试管苗的特点
试管苗的根系不发达:有些不容易生根的植物有时只能形成1~2条根,而且经常没有侧根和根毛,例如:牡丹、杏、梨、苹果等往往不能形成完整的根系。
有些愈伤组织上产生的根没有和维管束相连接,这种根基本上没有吸收和运输水分和无机盐的能力。
试管苗叶片幼嫩,叶片表面角质层或蜡质层不发达,因此水分蒸发快,很容易失水萎蔫。
一般的叶片正面有角质层或蜡质层,背面多有茸毛,叶背面气孔有很多茸毛可以保护气孔,减少水分蒸发。
而试管苗表皮基本没有茸毛,所以水分蒸发量大。
试管苗的细胞排列疏松,细胞间隙大,容易失水。
试管苗的机械组织发育较差,茎杆嫩而不坚挺,在缺水时易萎蔫和倒伏。
3、试管苗的炼苗
因为试管苗在培养瓶中与温室的条件差别很大,主要是培养瓶中的温度稳定、湿度高、光照较弱等。
为了使试管苗适应移栽后的环境并进行自养,必须要有一个逐步锻炼和适应的过程,这个过程叫驯化或炼苗。
炼苗的目的在于提高试管苗对外界环境条件的适应性、提高其光合作用的能力、促使试管苗健壮、最终达到提高试管苗移栽成活率的目的。
试管苗从试管内移到试管外,由异养变为自养,由无菌变为有菌,由恒温、高湿、弱光向自然变温、低湿、强光过渡,变化十分剧烈。
驯化应从温度、湿度、光照及有无菌等环境要素进行,驯化开始数天内,应和培养时的环境条件相似,驯化后期,则要与移栽的条件相似,从而达到逐步适应的目的。
常规的炼苗程序:1、闭瓶强光炼苗:当生根后或根系得到基本发育后(生
根培养7~15天),将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶炼苗7~20天左右,遮阴度为50%~70%。
2、开瓶强光炼苗:将培养容器的盖子打开,在自然光下进行开瓶炼苗3~7天,正午强光或南方光照较强的地区应该注意要采取遮阴措施,如用遮阴蓬或温室避免灼伤小苗。
如果在培养容器中开盖培养不够1周,一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。
开瓶炼苗可以分阶段进行,即首先开盖
一两天,然后部分开盖一两天,然后完全揭去盖。
这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。
培养容器的开口大小也影响开盖的速度,开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。
炼苗的方法一般都是靠一些经验,需要经过不断的摸索积累经验。
一般的方法就是将培养试管苗的容器带封口材料移到温室,开始保持与培养室比较接近的环境条件,适当遮光,提高湿度,以后逐渐去掉培养瓶的盖子,使瓶子中光照条件接近生长环境,然后松开并去除封口材料,使试管苗逐步适应环境条件。
驯化成功的标准是试管苗茎叶颜色加深。