免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果比较
目的：比较免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果。方法：选取笔者所在医院于2015年10月-2016年10月收治的52例肿瘤患者来进行研究。将收治的肿瘤患者随机分为观察组和对照组，每组26例。对照组采用常规技术来为肿瘤患者进行诊断，观察组则采用免疫组化技术进行诊断。对比两组患者的诊断阳性率、满意度及诊断相关评分。结果：观察组患者的诊断阳性率（92.31%）、满意度（96.15%）及诊断相关评分均优于对照组患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的效果更为显著，值得在临床中借鉴、推广及应用。
标签： 免疫组化技术； 常规技术； 肿瘤； 病理诊断； 效果
肿瘤在临床中属于较为常见的疾病之一，并且肿瘤的发病概率相对较高，近年来，该疾病发病概率有明显的提升。肿瘤患者发病后的临床症状并不显著，患者在确诊后，其发病阶段已经进入中、晚期，早已错过治疗的最佳时期。就目前而言，临床中对肿瘤的诊断方法并不理想，较为常用的诊断方法为磁共振成像以及CT诊断等，虽然常规的诊断方法确诊概率相对较高，但是常规方法发生误诊的概率也相对较高。近年来，临床中较常采用病理诊断的手段来为患者确诊，诊断的效果相对理想。而病理诊断中的不同技术得出的效果存在较大的争议。笔者所在医院本次主要对免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果进行比较，并且取得了良好的效果，详见下文。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取笔者所在医院于2015年10月-2016年10月收治的52例肿瘤患者进行研究，所有患者经CT诊断确诊存在肿瘤病灶。将收治的肿瘤患者随机分为观察组和对照组，每组26例。观察组中男15例，女11例，年龄24～36岁，平均（30.14±1.52）岁。对照组中男16例，女10例，年龄25～38岁，平均（30.87±1.70）岁。两组患者的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结
1、方法操作不难，最大的难处是出现异常结果时如何解决？这就需要掌握免疫组化实验原理，每一步知道为什么这样做，这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间，这三者一般是相互成反比的（相对），其中浓度是最重要的先决条件，温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说，可以有4度、室温、37度，我推荐4度最佳，反应最温和，背景较浅；而37度反应速度较快，时间较短；室温我不太提倡，除非你每次都把环境温度控制在一定的范围，否则，尽量选择前两者。
2、免疫组化最大的优势是定位和定性。相比于其他蛋白检测方法，免疫组化具有定性灵敏度高、定位较直接准确，是定位检测分析首选方法。尤其对于有些因子的转位研究十分有用。
3、免疫组化结果定量分析的前提是高质量的染色切片。免疫组化结果也能定量分析，但必须是背景染色浅而特异性染色较深的情况下，分析最为准确，这种原则可能也是我们日常审稿时判定研究结果的必备条件。
4、免疫组化实验一定要设置阳性对照和阴性对照。阳性对照一般是用肯定表达这种抗原的切片来做；阴性对照一般是用PBS或非一抗替代一抗来进行反应，其余步骤均一致。前者是排除方法和实验系统有无问题；后者是排除有无一抗外的非特异性染色。
5、免疫组化的应用广泛，是当前实验研究的最重要方法之一。如今发SCI论文时，明显感觉仅靠量化的数据来发文章很难，加一些形态学数据或图片，老外十分欢迎，可能是怕你学术造假吧。当然也不能做假阳性或假阴性结果。
6、免疫组化技术掌握与否的鉴定标准是同一切片或不同切片中不同抗原均从摸索浓度或条件而做出优良的染色切片。我在平时带教中就发现许多研究生把我已经摸索很成熟的反应条件、浓度、方法步骤，重复运用于同一性质的切片和同一种抗体，做出来后就觉得自己已经掌握了免疫组化方法，更换一种抗体后，居然连二抗的种属来源都拿错了。失败往往促进你去思考试验原理和过程，成功有时也加快你自傲。
第 1 页 共 4 页 免疫组化常见问题的处理
免疫组化常见问题的处理 当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。
对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗.二抗.三抗及底物等。
② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。
③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，这一点是非常重要的。比如，如果一抗是兔来源的抗体，二抗一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM（不是IgG）二抗。
④ 检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液。
⑤ 检查抗体的有效期和保存条件，尤其是标记了酶或荧光素的抗体，现在大多数试剂公司的抗体均要求在4~8℃条件下保存，应避免反复冻融，试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室，以免降低抗体的效价。
⑥ 检查标本的储存条件，最好用已知阳性的标本来同时做阳性对照。
⑦ 检查色原/底物溶液，最简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中，如果底物发生预期的颜色第 2 页 共 4 页 变化，则可排除底物的因素。需要注意的是，有些底物在制成工作液后应在一定时间内用完，否则会失效。
⑧ 检查冲洗液是否和反应试剂匹配，溶液的pH值很重要，与过氧化物酶底物匹配的溶液中不应含有叠氮钠。
⑨ 检查复染剂和封片剂是否和所使用的色原匹配。
弱阳性 如果阴性对照没有染色而阳性对照标本弱阳性，除了考虑上述因素外，还应考虑： ① 标本的固定方式，不当的固定方式或固定时温度过高，都会影响到所检测的抗原的数量和质量。
② 不适当的抗原修复方式，由于石蜡切片在制作的过程中固定剂对抗原的封闭作用，必须用抗原热修复或酶消化或两种同时使用的抗原双暴露法，至于使用哪一种方法，应参照生产厂家的说明，同时结合标本的具体情况而定。
③ 抗体的稀释度是否过高或者孵育的温度/时间是否正确。一般试剂生产厂家都会对试剂给出一定的使用范围，但是由于使用者的标本来自各种组织，处理过程也不尽相同，所以应参照使用范围，对所使用的一抗进行梯度测试，找出最佳的使用浓度。
免疫组织化学技术常见问题分析及改进措施
目的：分析免疫组织化学技术中常见问题，并提出相应改进措施。方法：以2010年1月-2012年12月笔者所在科收治的80例患者病史资料为依据，根据切片方法不同分为A、B两组，比较两组切片质量及常见问题。结果：本次研究的患者中A组有15例切片出现质量问题。改进操作后的患者切片即B组均清晰地观察到阳性细胞。结论：免疫组织化学技术环节多、问题多，应提出有针对性地改进措施，不断完善。
标签： 免疫组织； 化学技术； 改进措施
要进行免疫组织化学检测，必须首先有良好的免疫组化学切片。这一制作过程相对复杂，有许多环节，故而容易出现问题，而每一个环节出错都将影响最终结果。所以相关医务技术人员应具备扎实的技术功底，把好每一关，最终得出准确的检测结果。笔者结合自身工作经验，对常见问题的改进做出分析，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
分析笔者所在科2010年1月-2012年12月对80例患者进行病理分析的诊断结果数据，患者中有15例需要鉴别低分化癌与肉瘤，20例需要鉴别转移癌的性质，13例需要分析肿瘤细胞来源以及其分化程度，10例要检测患者组织耐药基因，12例为检测肿瘤组织分化活性，10例是肿瘤患者治疗后的回访检测。根据切片方法不同分为A、B两组。经过对患者组织切片的临床观察，A组鉴别低分化癌与肉瘤的患者中有4例确诊为低分化癌，之后接受化疗，2例为肉瘤的患者则采取手术切除治疗；11例患者已经发生淋巴及血液转移；肿瘤细胞来源及分化程度分析的患者中有6例是由癌细胞转移发病，2例为原发癌，均为高分化癌；5例经过治疗后的患者MDR1耐药基因表达明显升高；检测肿瘤组织分化活性的6例患者中有4例为G1，分化活性较低，2例G2，即中分化；回访检测的患者中3例复发，2例目前无变异。B组6例确诊为低分化癌，3例为肉瘤；9例患者已经发生淋巴及血液转移；3例是由癌细胞转移发病，2例为原发癌；5例治疗后的患者耐药基因表达升高；3例分化活性较低，3例中分化；回访检测中3例复发，2例无变异。
