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tgf-β1对体外血管外膜成纤维细胞的影响

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上海交通大学

硕士学位论文

TGF-β1对体外血管外膜成纤维细胞的影响

姓名：***

申请学位级别：硕士

专业：老年医学

指导教师：***

20090401上海交通大学医学院硕士论文

8缩略词

缩写 英语全称

中文全称

TGF-β1 Transforming growth factor-β1 转化生长因子β1

ECM

extracellular matrix 细胞外基质

MMP -9

Matrix metalloproteinase-9 基质金属蛋白酶-9

PPAR

Peroxisome

prolifterator-axtivated

receptor 过氧化物酶体增殖物激活型受

体

AF

adventitial fibroblast 外膜成纤维细胞

MF

myofibroblast 肌成纤维细胞

VSMC

Vascular Smooth Muscle Cell 血管平滑肌细胞

TZD

Thiazolidinediones 噻唑烷二酮类

IL

Interleukin 白细胞介素

TNF-α

Tumor Necrosis Factor α 肿瘤坏死因子-α

DMSO

Dimeththyl sulfoxide 二甲基亚砜

MTT

Methylthiazolyltetrazolium 四甲基偶氮唑盐

α-SM－

actin α- Smooth Muscle－actin 平滑肌α2肌动蛋白

AS

atherosclerosis 动脉粥样硬化

上海交通大学

学位论文原创性声明

本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，

独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本

论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本

文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。

本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。

学位论文作者签名：

日期： 年 月 日

上海交通大学

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本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，

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保密□，在 年解密后适用本授权书。

本学位论文属于

不保密□。

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学位论文作者签名： 指导教师签名：

日期： 年 月 日 日期： 年 月 日

上海交通大学医学院硕士论文

1TGF-β1对体外血管外膜成纤维细胞的影响

摘 要

研究背景：

转化生长因子β1（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）

是一种高度多效、多功能性的生长与分化因子。当血管损伤后，局部产

生的细胞因子引起炎症反应是血管再狭窄的主要原因。其中，TGF-β1

在局部水平上调刺激血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cell，

VSMC）增殖和迁移、促进动脉外膜细胞的表型改变、增殖和迁移以及局

部细胞外基质（extracellular matrix，ECM）蛋白的产生和沉积，从而

促进血管再狭窄。ECM是组成间质、上皮和血管中基质的不溶性结构成

分，是细胞存在和相互联系的环境和媒介。基质金属蛋白酶MMP-9（matrix

metalloproteinase，MMP-9）是降解ECM成份中的大分子蛋白的关键酶。

实验表明，病理情况下潜在型MMP-9被激活，其表达上调，在动脉粥样

硬化斑块的形成、发展及破裂中发挥重要作用。过氧化物酶体增殖物激

活型受体（peroxisome prolifterator-axtivated receptor，PPAR）是

一类配体依赖的转录因子，可通过与靶基因的反应元件结合直接控制多

种基因。已发现PPARγ对VSMC的增殖、迁移有抑制作用，有许多有益

心血管的作用。近年的研究表明血管外膜也参与心血管病的发生。本研上海交通大学医学院硕士论文

2究通过体外实验，研究TGF-β1在血管外膜成纤维细胞（adventitial

fibroblasts，AFs）中的作用，及其对MMP-9的影响。PPARγ对TGF-β1

诱导的血管外膜成纤维细胞及MMP-9中的影响。

目的：

本研究观察TGF-β1在体外对AFs中表型、增殖、迁移、及MMP-9

的影响，分析其可能的机制。此外，用PPARγ激动剂罗格列酮对TGF-β1

诱导的AFs进行干预，观察其对TGF-β1诱导结果的影响，从而探求新

的抑制血管再狭窄方法。

方法：

体外培养SD（Sprague Dawley）大鼠胸主动脉AFs，应用免疫组化

法、western blot法测细胞表型改变、MTT法测细胞增殖、Transwell

Chamber法测细胞迁移、real-time PCR、Western blot方法检测基因、

蛋白的表达及酶的活性。

结果：

1. TGF-β1可呈剂量和时间依赖性促进AFs平滑肌α2肌动蛋白

（α-SM-actin）的表达，使其向肌成纤维细胞（myofibroblast, MF）

表型转变，继而增加I型胶原的合成，与对照组相比有显著意义，

（P<0.05）。

2. TGF-β1可呈剂量依赖性促进AFs的增殖和迁移，TGF-β1可剂量和

时间依赖性增加MMP-9 mRNA表达，增加MMP-9的活性，与对照组相上海交通大学医学院硕士论文

3比有显著意义，（P<0.05）。

3. PPAR-γ罗格列酮可呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导AFs的表型转变、

I型胶原的合成，以及增殖和迁移，与对照组相比有显著意义

（P<0.05）。

4. PPAR-γ罗格列酮可呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导产生MMP-9活性，

抑制MMP-9 mRNA，与对照组相比有显著意义，（P<0.05）。

结论：

TGF-β1在体外可促进AFs中表型改变、增殖、迁移及MMP-9的表

达。TGF-β1在体外可促进AFs增殖、迁移可能与其增加MMP-9表达有

关。此外，用PPARγ激动剂罗格列酮对TGF-β1诱导的AFs表型改变、

增殖、迁移及MMP-9的表达均有抑制作用，可能与其依赖于PPARγ的方

式降低TGF-β1诱导MMP-9水平有关，可逆转AFs参与的血管再狭窄。

关键词：TGF-β1，外膜成纤维细胞，基质金属蛋白酶，PPARγ激动剂，

SD大鼠

上海交通大学医学院硕士论文

4EFFECT OF TGF-β1 ON ADVENTITIAL FIBROBLAST

IN VITRO

ABSTRACT

Background: Transforming growth factor-β1(TGF-β1) is a

highly multi-effective and functional growth- and duplicate

factor, regulates many physiological and pathological processes.

Regional inflammation caused by cytokine could be a main reason

of vascular restenosis in case of vascular injury. TGF-β1 in the

local level can stimulate the proliferation and migration of

vascular smooth muscle cells(VSMC), and promote the phenotypic

transition and migration of adventitial cells, as well as

production and deposition of local extracellular matrix

protein(ECM), thus promoting vascular restenosis. ECM is either

insoluble structural components of mesenchymal, epithelial and

vascular matrix or the environment and the medium for cells living 上海交通大学医学院硕士论文

5and communication. Matrix metalloproteinase(MMP-9) is the key

enzyme in the degradation of ECM protein macromolecules. The

experimental results shows that activated pro. MMP-9 and its

expression play an important role in atherosclerotic plaque

formation, development and disruption. Peroxisome

prolifterator-activated receptors（PPARs）are members of the

nuclear receptor superfamily of ligand-activated transcription

factors. PPARs regulate transcription of target genes by binding

to PPAR response elements of regulatory promoter regions of target

genes. PPARγ inhibit VSMC proliferation and migration and are

cardiovasculo-protective. Currently, accumulative data suggest

that vascular adventitia play important roles in cardiovascular

diseases.

Objective: The present study aims for observation of the

effect of TGF-β1 on cell phenotypic transition, proliferation and

migration of aortic AFs in vitro, and explores the possible

mechanism of these effects. Additionally, observe effect of

peroxisome proliferators-activated receptor γ agonist (PPAR γ)

on AFs induced by TGF-β1 in vitro, in order to explore new methods

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TGF—β1表达对成纤维细胞胶原分泌影响的实验研究

TGF—β1表达对成纤维细胞胶原分泌影响的实验研究

现代泌尿外科杂志　２０１２年９月第１７卷第５期　４３５　・论　ＴＧＦ—ｐ１　文章编号：１００９～８２９１（２０１２）０５—０４３５—０４　表达对成纤维细胞胶原分泌影响的实验研究　李　超，徐月敏，刘章顺　（上海交通大学附属第六人民医院泌尿外科，上海　２０Ｏ２３３）　ＳｉＲＮＡ・＿ｉｎｄｕｃｅｄ　ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ－ｉｌｌ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｌ・－　ｌａｇｅｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　Ｉ．Ｉ　Ｃｈａｏ，ＸＵ　Ｙｕｅ—ｍｉｎ，Ｌ１Ｕ　Ｚｈａｎｇ—ｓｈｕｎ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｕｒｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ　Ｓｉｘｔｈ　Ｐｅｏｐｌｅ’Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｊｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００２３３，Ｃｈｉｎａ）　ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｍａｌｌ　ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ　ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ　ｐｌａｓｍｉｄｓ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ＴＯＦ．　９１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ—ｐ１，ＴＯＦ—ｐ１）ｏｎ　ｔｈｅ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｔｙｐｅ　Ｉ　ｃｏｌｌａｇｅｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ　ｓｉＲＮＡ　ｅｘ—　ｐｒｅｓｓｉｎｇ　ｐｌａｓｍｉｄｓ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ＴＧＦ－９１　ｗｅｒｅ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｏｆ　ｒａｂｂｉｔ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｓｉＲＮＡ　ｗａｓ　ｓｃｒｅｅｎｅｄ　ｏｕｔ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ＲＴ－ＰＣＲ　ａｎｄ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｏｆ　ｒａｂｂｉｔ　ａｇａｉｎ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｔｙｐｅ　Ｉ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｉｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ＥＬＩＳＡ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｓｉＴＧＦ．９１　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉ．　ｍｅｎｔａｌ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ．Ｔｈｅ　ｔｙｐｅ　Ｉ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅ　ｉｎ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ　ｃｅｌｌｓ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉ—　ｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　ＴＧＦ一９１　ｓｉＲＮＡ　ｃａｎ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ。９１　ａｎｄ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｙｐｅ　Ｉ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ｔｈｅ　ｄｏｗｎ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｔｙｐｅ　Ｉ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｂｙ　ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ　ｓｉＲＮＡ　ｉｎ—　ｔｅｒｆｅｒｉｎｇ　ＴＧＦ一口１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ａ　ｔｈｅｏｒｙ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｆｏｒ　ｕｒｅｔｈｒａｌ　ｓｃａｒ．　ＫＥＹ　ＷｏＲＤＳ：ｓｉＲＮＡ　ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ；ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ；Ｉ　ｃｏｌｌａｇｅｎ；ＴＧＦ．８１　摘要：目的　通过ｓｉＲＮＡ干扰成纤维细胞中ＴＧＦ－６１（ＴＧＦ一６１）的表达，探讨其对成纤维细胞合成Ｉ型胶原蛋白的影响。方法　将ｓｉＲＮＡ转染兔成纤维细胞，通过ＲＴ－ＰＣＲ，检测ｓｉＲＮＡ对兔ＴＧＦ－６１表达的干扰效果，并选筛选出有干扰效果的ｓｉＲＮＡ。把　筛选出的有最佳干扰效率的ｓｉＲＮＡ，重新转染兔成纤细胞，分别取成纤维细胞培养液行ＥＬＩＳＡ检测，观察细胞培养液中合成Ｉ　型胶原蛋白变化情况。结果和对照组相比，ｓｉＴＧＦ一６１对成纤维细胞有明显的干扰效果；ｓｉＴＧＦ－６１转染成纤维细胞后，转染组　细胞分泌Ｉ型胶原浓度曲线明显低于空白细胞组，胶原蛋白合成明显降低。结论ｓｉＲＮＡ可通过干扰ＴＧＦ　Ｂ１的表达抑制成纤　维细胞Ｉ型胶原蛋白的分泌，从而抑制瘢痕生成。为临床上尿道瘢痕的基因治疗提供了理论依据。　关键词：ｓｉＲＮＡ干扰；成纤维细胞；Ｉ型胶原蛋白；转化生长因子一Ｂ１　中图分类号：Ｒ６９　文献标志码：Ａ　复杂性长段尿道狭窄，其治疗一直是泌尿外科最　棘手的难题之一。在前期研究中，我们尝试单纯选用　口腔黏膜细胞接种于膀胱黏膜下脱细胞基质，构建简　单的组织工程口腔黏膜用于尿道黏膜重建ｌ】　］。短期　内观察，修复效果良好。但同时也发现在植人口腔黏　膜的下层组织，胶原纤维明显较正常尿道黏膜下层组　织为多，而且排列比较紊乱，故其长期效果，尚需进一　步考证。如果在应用组织工程技术修复尿道同时，能　够有效控制黏膜下层胶原的过度产生，抑制尿道瘢痕　的形成，则可彻底解决尿道修复中的两个关键问题：　材源不足和瘢痕生成，使尿道重建的技术获得重大　突破。　收稿日期：２０１２－０４—０４　修回日期：２０１２－０６　０９　基金项目：国家自然科学基金（Ｎｏ：３０９０１５０３）　作者简介：李超（１９７９一），男（汉族），博士，主治医师．研究方向：组织工　程重建尿道．Ｅ—ｍａｒｌ：ｃｈａｏｌｉ１９７９＠１２６．ＣＯ１２１　尿道瘢痕的形成是创面修复过度的一种不良临　床表现，现己证实，在已知的细胞因子中，转化生长因　子一８ｌ（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ一８１，ＴＧＦ－￣Ｉ）被公　认为是最重要的促瘢痕形成因子口　］。本研究将体外　构建的ＴＧＦ－Ｉ￣Ｉ　ｓｉＲＮＡ表达载体转染导人兔成纤维　细胞后，观察对ＴＧＦ—Ｊ３１表达及Ｉ型胶原蛋白分泌的　影响，旨在为组织工程联合ＲＮＡ干扰技术治疗复杂　性尿道狭窄提供理论依据。　１材料与方法　１．１材料与试剂新西兰大白兔，雄性，体质量０．３　～Ｏ．５　ｋｇ；Ｈ—ＤＭＥＭ＋１０　ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ　ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎｅ　公司）；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ—Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ（中国医药集团上海试　剂公司）；Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ　５４１８台式离心机；ＢｉｏＰｈｏｔｏｍｅ—　ｔｅｒ　ｐｌｕｓ紫外分光光度计；ＣＦＸ　ＱＰＣＲ仪；ＥＷ一６０００　ｈｔｔｐｔｆ｝　．ｚｇｍｎｗｋ．ｃｏｒｎ

TGF-β1对UVA照射皮肤成纤维细胞HSP70表达的影响

TGF-β1对UVA照射皮肤成纤维细胞HSP70表达的影响

１３２４　中国美容医学２００８年９月第ｌ７卷第９期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｅｓｔｈｅｔｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｓｅｐ．２００８．Ｖｏ１．１７．Ｎｏ．９　

效的光保护作用。　

黑素细胞黑素合成主要受三种黑素合成关键酶共同作用　和影响，既往的研究证实　紫外线辐射以独特的方式影响黑素　

细胞的黑素合成功能，其对ＴＹＲ、ＴＲＰ１的蛋白表达无影响，但可　

降低ＴＲＰ２的蛋白合成，Ａｂｄｅｌ—Ｍａｌｅｋ等　认为ＴＲＰ２主要参与　

了褐黑素的生物合成，ＴＲＰ２蛋白合成减少可降低褐黑素的合　

成，增加优黑素的比例，以便更好的防护紫外线引起的光损伤。　

我们的研究进一步证实紫外线辐射后黑素细胞ＴＲＰ２的表达有　

所降低，而ＴＹＲ、ＴＲＰ１的表达表达与空白对照组无明显差异；添　加≥５０　ｇ／ｍｌ　０ＰＣ可明显减少黑素细胞内ＴＹＲ、ＴＲＰ１的蛋白表　

达，修复紫外线辐射后下降的ＴＲＰ２的蛋白含量。上述结果提示　

我们ＯＰＣ可能具有直接抑制黑素细胞内黑素合成关键酶的作　

用，其通过调节三种黑素合成关键酶的表达来进一步影响细胞　

生成黑素的类型和数量，从而发挥其良好的美白和光防护作　用。　综上所述，我们认为ＯＰＣ具有明显的黑素细胞光保护作　

用，其可能通过三种途径（抑制黑素合成关键酶表达、调节紫外　

线辐射直接引起的黑素细胞增殖和功能异常、抑制紫外线辐射　

诱导的黑素细胞内ＲＯＳ的产生）共同作用来完成其有效的美白　

和光保护效应。此外，ＯＰＣ是否具有调节黑素小体转运的作用？　ＯＰＣ是否同时也影响了紫外线照射后角质形成细胞生成ＮＯ？这　

些问题均有待于今后的实验来进一步证实。　

［参考文献］　［１］马慧军，訾绍霞　雯，等．原花青素（ＯＰＣ）抑制紫外线辐射后表皮黑素　细胞黑素合成的实验研究明．中国美容医学，２００８，１　７（６）：８５２—８５４．　［２］Ｙａｍａｋｏｓｈｉ　Ｊ，Ｏｔｓｕｋａ　Ｆ＇Ｓａｎｏ　ｅｔ　ａ１．Ｌｉ【ｇｈｔｅｎｉｎｇ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ—Ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇｕｉｎｅａ　Ｐｉｇ　Ｓｋｉｎ　ｂｙ　Ｏｒａｌ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆａ　Ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ・Ｒｉｃｈ　Ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　Ｇｒａｐｅ　Ｓｅｅｄｓ　

miR-200c对TGF-β1刺激后人瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成的影响

miR-200c对TGF-β1刺激后人瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成的影响

miR-200c对TGF-β1刺激后人瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成的影响

目的：观察转染miR-200c mimics 对人瘢痕疙瘩成纤维细胞（HKFs）胶原蛋白分泌的影响。方法：将miR-200c mimics用oligofectami脂质体转染人瘢痕疙瘩成纤维细胞后，3H-脯氨酸掺入法测加入 50μg／L剂量的转化生长因子(TGF-β1) 刺激前后胶原蛋白水平的变化。结果：转染miR-200c mimics后，胶原蛋白分泌水平降为正常皮肤成纤维细胞表达水平；经TGF-β1刺激后，其蛋白水平仍无明显变化。结论：miR-200c可明显抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原蛋白分泌，推测其机制是通过抑制TGF-β1生物学作用。

Abstract: Objective To investigate the effect of miR-200c mimics on collagen

secretion in human keloid fibroblasts(HKFs). Methods miR-200c mimics were

transfected by oligofectami package. The collagen level was measured by 3H-proline

incorporation method before and after HKFs were stimulated by transforming growth

factor betal (TGF-β1) of the dosage of 50μg/L. Results The collagen level was

decreased to the normal skin fibroblasts level and had no obvious change even after

stimulated by TGF-β1. Conclusion miR-200c can inhibit the expression of collagen in

机械压力对人牙周膜成纤维细胞TGF-β1蛋白表达的影响

机械压力对人牙周膜成纤维细胞TGF-β1蛋白表达的影响

口腔颌面修复学杂志２００７年４月第８卷第２期　ｃＨｌＮＥｓＥ．｝Ｄｌｌ褂峨ｌ　ＯＦ秘哟　件旧ＤＯｈｎ１Ｃ８＾Ｐ辩鹱－２００７￣ＯＬ８ＮＯ２　

机械压力对人牙周膜成纤维细胞ＴＧＦ－１３１蛋白表达的影响术　

汤楚华施生根牛忠英党平　・论著・　

【摘要】目的：探明机械压力与人牙周膜成纤维细胞转化生长因子ｐｌ（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ　ｂｅｔａ—ｌ，　ＴＧＦ－１３１）蛋白表达的关系。方法：本实验采用细胞加载装置，对人牙周膜成纤维细胞施加ＯｋＰａ　２５０ｋＰａ、　

５００ｋＰａ、１０００ｋＰａ的压力，通过酶联免疫吸附实验，分别检测细胞受力后６ｈ、１２ｈ、ｌ８ｈ、２４ｈ时ＴＧＦ－１３ｌ的含　

量。结果：加载２５０ｋＰａ组、５００ｋＰａ组在细胞受力后各个时段ＴＧＦ－１３ｌ含量没有变化；１０００ｋＰａ组在细胞受力　

后的第ｌ２ｈ，ＴＧＦ－１３ｌ含量显著降低。结论：人牙周膜成纤维细胞合成ＴＧＦ－１３ｌ受到机械压力的调控；在一定　

载荷作用下，ＴＧＦ－１３１的含量随着压力的增大而有所降低。　

关键词：机械压力；牙周膜；成纤维细胞；人牙周膜成纤维细胞；转化生长因子Ｂｌ　

［中国图书分类号］Ｒ７８３　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００９—３７６１（２００７）０２—００８７—０３　

Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ—ｐ１　ｆｒｏｍ　ｈｕｍａｎ　ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ　ｌｉｇａｍｅｎｔ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　

ＴＡＮＧ　Ｃｈｕ—ｈｕａ．ＳＨ１　Ｓｈｅｎｇ—ｇｅｎ．Ｎ１Ｕ　Ｚｈｏｎｇ—ｙｉｎｇ，ＤＡＮＧ　Ｐｉｎｇ．｛Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＳｔａｍａｔａｌｏｇｙ，３０６　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　ＰＬＡ．　Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００１０１，ＣｈｉｎａＪ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ　１　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ　ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ－１３　１