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第三章免疫球蛋白分子—抗体第一节抗体的发展及其特征一、抗体的发现血清中存在一种能特异性中和外毒素的组分称为抗毒素，使细菌发生特异性凝集的组分称之为凝集素。
其后将其称为抗体（antibody，Ab），将能刺激机体产生抗体的物质称为抗原（antigen）。
二、抗体的理化性质40年代初期Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔，证实了抗体活性与血清丙种球蛋白组分相关。
图1. 兔血清电泳分离图2.不同类免疫球蛋白的电泳分离离心常数7Sγ(16, IgG) ; 19S,β2(β2M,90,IgM); β2A(IgA)三、抗体的生物学活性1．抗体与抗原的特异性结合。
2．抗体与补体的结合。
3．抗体的调理作用。
第二节免疫球蛋白的分子结构与功能一、免疫球蛋白的基本结构Porter对血清IgG抗体的研究证明，Ig分子基本结构是由四个肽链组成的，二条较小的轻链和二条较的重链，轻链与重链是由二硫键连接形成，分为氨基端（N端），羧基端（C端）。
（一）轻链和重链1．轻链（light chain，L链）214氨基酸残基组成，通常不含碳水化合物，分子量为24KD，有两个由链内二硫键组成的环肽，可分为：Kappa（κ）与lambda（λ）2个亚型。
2．重链（heavy chain，H链）450-550氨基酸残基组成，分子量55或75KD，含糖数量不同，4-5个链内二硫键，可分为5类，μ、γ、α、δ、ε链，不同的H链与L链（κ或λ）组成完整的Ig分子。
分别称为：IgM，IgG，IgA，IgD和IgE。
（二）可变区和恒定区1．可变区（Variable region，V区）L链N端1/2处（V L）108-111个氨基酸残基，H链N端1/5-1/4处（V H）118个氨基酸残基，V区有一个肽环65-75个氨基酸残基。
高变区（hypervariable region, HVR）可变区骨架区（framework region, FR）V L的HVR在24-34，50-56，89-97氨基酸位置。
第3章免疫原和抗血清的制备免疫原是指能够引起机体免疫反应并激发产生特异性抗体的物质。
抗血清是指动物或人体经过免疫后所产生的含有抗体的血清。
免疫原和抗血清的制备是研究免疫学和生物制剂开发的重要环节。
本文将探讨免疫原和抗血清制备的一般原则和步骤。
1.免疫原的选择选择合适的免疫原对于制备高效的抗血清至关重要。
一般来说，免疫原应具备以下特点：(1)纯度：免疫原应具有尽可能高的纯度，以避免其他成分对免疫反应的干扰。
(2)特异性：免疫原应具有与所需抗体特异性结合的能力，以激发特异性抗体的产生。
(3)免疫原性：免疫原应具有足够的免疫原性，即能够引起机体的免疫反应。
(4)安全性：免疫原应具备足够的安全性，避免潜在风险。
根据不同的应用需求，免疫原可以是多种类型的物质，如蛋白质、多肽、核酸和糖类等。
选择合适的免疫原需要根据研究目的和预期应用来确定。
2.免疫原的制备免疫原的制备通常分为化学合成和生物提取两种方式。
(1)化学合成：对于小分子的免疫原，可以通过化学合成的方法合成。
例如，对于多肽免疫原，可以设计并合成相应的多肽序列。
化学合成的优势在于可以精确控制免疫原的结构和纯度。
(2)生物提取：对于大分子的免疫原，如蛋白质和核酸，通常采用生物提取的方法。
蛋白质可以通过基因工程技术在大肠杆菌等表达系统中表达并纯化得到。
核酸可以通过DNA重组技术合成。
3.免疫反应的诱导免疫反应的诱导是指向机体注射免疫原以激发免疫反应。
免疫反应的诱导通常包括以下步骤：(1)免疫原的给药：将免疫原通过注射、给药或吸入等方式引入机体内。
(2)辅助剂的使用：为了增强免疫反应效果，通常会添加辅助剂。
辅助剂可改变免疫原的物理性质和免疫反应的过程。
(3)免疫程序的设计：根据需求设计免疫程序，包括免疫原的剂量、注射间隔和免疫次数等。
抗血清的制备是通过免疫动物或人体以获得抗体，从而制备含有抗体的血清。
一般来说，抗血清的制备包括以下步骤：(1)免疫动物的选择：选择合适的免疫动物，如小鼠、兔子或猴子等。
第二章、抗原填空：1. 抗原特异性的物质基础是（抗原决定簇），亦称表位。
2. 位于抗原表面的AD能直接被相应的淋巴细胞所识别，称（功能）性决定簇，存在抗原分子内部的AD无激发免疫应答的功能，称（隐蔽）决定簇。
3.从化学组成来看，凡含有（芳香族）氨基酸的蛋白质，其免疫原性较强。
4.机体对正常的自身组织和体液成分处于（免疫耐受）状态，当自身耐受被打破，可引起自身（免疫应答）。
5造血干细胞移植要求捐献者和接受移植者进行（HLA/人类白细胞抗原）配型。
判断：1.免疫原性是指抗原分子与免疫应答产物发生特异性结合的物质。
（错误）A.免疫原性是指抗原分子能够刺激机体产生免疫应答的性质。
B.抗原性又称免疫反应性，是指抗原分子与免疫应答产物发生特异性结合的性质。
2.半抗原无免疫原性，只有抗原性的物质。
（正确）3.载体赋予半抗原以免疫原性的蛋白质。
（正确）4.特异性是免疫原性的核心。
(异物性是免疫原性的核心）。
5.半抗原决定簇又称T细胞决定簇。
（错误）A.半抗原决定簇又称B细胞决定簇；B.载体决定簇又称T细胞决定簇。
6.亲缘关系很近的生物之间存在的共同抗原称为异嗜性抗原。
（错误）A.亲缘关系很近的生物之间存在的共同抗原称为类属抗原。
B.无种属关系的生物之间存在的共同抗原称为异嗜性抗原。
7.在一定范围内，分子量越大，免疫原性越强。
（正确）8. TD－Ag在刺激B细胞产生抗体时不需要T细胞辅助，由多个重复B表位组成。
（错误）A.TD-Ag指在抗原提呈细胞参与及T细胞辅助下，才能刺激B细胞产生抗体的抗原性物质。
由B表位和T表位组成。
B.TI-Ag在刺激B细胞产生抗体时不需要T细胞辅助，由多个重复B表位组成。
9. 费式佐剂主要用于动物实验，不适宜于人类使用，而且动物多次注射后也常会发生佐剂病。
（正确）选择：1.以下免疫原进入的途径中，所引起的免疫应答水平依次降低的是：（C ）（A）皮下、皮内、肌肉、静脉、腹腔、呼吸道、口服（B）皮内、皮下、肌肉、腹腔、静脉、呼吸道、口服（C）皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、呼吸道、口服（D）皮内、皮下、静脉、肌肉、腹腔、呼吸道、口服2.以下关于佐剂的作用机制叙述不正确的是（A ）（A）同抗原一起或预先注射到机体内能增强抗原免疫反应性（B）改变抗原物理性状，增加抗原在体内停留时间（C）刺激抗原提呈细胞，增加对抗原的处理和提呈能力（D）刺激淋巴细胞增殖分化，增强和扩大免疫应答的能力3.佐剂的条件：作为一种良好的佐剂，所具备的条件中下列叙述错误的是（B）A 增加抗原的表面积，并改变抗原的活性基团构型，从而增强抗原的免疫原型B 佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留时间，加快抗原的提呈速度，使抗原尽快分节（减低抗原的分解速度，是抗原缓慢释放至淋巴系统中），持续刺激机体产生高效价的抗体C 佐剂可以直接或间接激活免疫性细胞并使之增生，从而增强了体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能D 良好的佐剂应具有无毒性或副作用低的特点。
实验部分（10分）1、计算胸腺指数、脾指数公式：单位mg/10 g胸腺指数=胸腺重量/（小鼠体重×10）脾脏指数=脾脏重量/（小鼠体重×10）2、（1）白细胞（WBC）计数公式：X/4×10 ×20 ×106/L=白细胞/LX：为4个大方格内白细胞总数。
÷4：为每大方格（即0.1ul）内白细胞平均数。
×10：1个大方格的容积为0.1ul，换算成1ul。
×20：血液的稀释倍数。
×106：将ul换算成L（2）计数方法：自小鼠尾静脉采血0.02mL将其插入稀释液底部，轻轻将血放出，混匀。
用微量吸管或玻璃棒取混匀的细胞悬液1滴，充入计数池与盖片的缝隙中，静置2-3min，使白细胞下沉。
在显微镜下用低倍镜（10×）计数四角4个大方格的白细胞总数。
注意事项：①在大方格内压线细胞应按“数上不数下，数左不数右”的原则计数。
②稀释液要过滤，小试管、计数板须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。
③冲池前要摇匀，要注意，冲池时不可气泡，否则应重新冲池。
（3）血液稀释液用的是3%稀乙酸3、腹腔巨噬细胞试验（1）实验原理：巨噬细胞是机体非特异性免疫功能的重要组成部分，可非特异吞噬较大的颗位性异物如鸡红细胞、白色念珠菌等，称为大吞噬现象。
将鸡红细胞注入小鼠腹腔中，巨噬细胞由于具有趋化性，便向鸡红细胞处聚集，将之内吞入胞质，形成吞噬泡，然后在胞内与溶酶体融合，将鸡红细胞消化分解一段时间后取巨噬细胞，利用巨噬细胞贴壁的特性观察吞噬现象，作为判定其吞噬活性的指标。
(2)染料及染色方法：Giemsa（姬姆萨应用液）染色5min后再用蒸馏水漂洗晾干（3）淀粉肉汤的作用：诱导腹腔内产生较多的巨噬细胞4、肝脏DNA提取实验，（1）研磨抽提各步所用试剂：研磨肝脏先用冰冷的生理盐水水洗3次再置于加入2ml匀浆液的研钵中，研磨至无明显组织块存在。
