讨 论:
mber-Beer定律的适用条件(前提): ➢ 入射光为单色光 ➢ 溶液是均匀,无散射溶液 2.该定律适用于固体、液体和气体样品 3.在同一波长下,各组分吸光度具有加和性,如果
溶液中同时存在两种或两种以上的吸光性物质 ,则测得的该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性 物质吸光度的总和,即:
(
A/min=[(A2-A1 )-(空白)]/(t2-t1)
吸 例:某病人的尿液AMY检测结果为0U/L
各检测参数间存在大小、比例、逻辑关系
光 例:某病人在测定心肌酶谱时,其CK:246U/L、CK-MB:286U/L,标本无溶血等因素影响,其结果中CK-MB﹥CK
吸光系数法又称绝对法,是直接利用朗伯-比尔定律的数学表达式A=Kbc进行计算的定量分析方法。
机械化的仪器设备模仿
度 一点终点法——在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时,选择一个时间点测定吸光度值。
) 样本空白 标准曲线法——最经典方法
K值的大小取决于吸光物质的性质、入射光波长、溶液温度和溶剂性质等,与溶液浓度大小和液层厚度无关。
配置标准溶液系列 → 分别测定 A → 得C~A曲线
检验人员要增强对报告审核的责任心
双波长法
双波长测定优点 :
①消除噪音干扰 ②减少杂散光影响 ③减少样品本身光吸收的干扰
固定时间法
指在时间-吸光度曲 线上选择两个测光 点,这两点既非反 应初始吸光度亦非 终点吸光度,利用 这两点吸光度差值 计算结果。 如:苦味酸法测肌酐
(
吸 光 度 )
●
·
A
2
●
A
1
T
计算公式:
C=(A2-A1)*K
酶促反应曲线
连续监测法