土壤 有机碳 方法学验证

土壤活性有机碳分组及测定方法每种指标的测定方法如下：一．易氧化有机质（LOM）：土壤与氧化剂作用后，易被氧化、不稳定的有机质称作LOM。

目前常用的氧化剂有两种：K2CrO7与KMnO4。

KMnO4氧化法:（此方法较为常用）称取过100目筛，约含15 mg碳的土壤样品（如：有机碳含量为15g/kg,则称取1g土壤样品）于50 mL塑料旋盖的离心管中；加入25mL，333mmol/L高锰酸钾溶液，振荡1h，然后在时速2000 rpm下离心5 min，将上清液用去离子水以1∶250稀释，在分光光度计565 nm下测定稀释样品的吸光率，由不加土壤的空白与土壤样品的吸光率之差，计算出高锰酸钾浓度的变化，并进而计算出氧化的碳量(氧化过程中1 mmolKMnO4-消耗0.75 mmol或9 mg碳)。

KMnO4氧化法：（此法是在测定全量有机质基础上降低某些反应条件，衍生出的测定方法）1、水合热法：称取磨细(过0.25 mm筛)风干土1.50 g,放入500 mL三角瓶中,准确加入0.5 mol/L K2CrO7水溶液10.0mL,轻轻转动,使土粒分散。

用量筒将20 mL浓H2SO4迅速直接注入土壤悬浊液,立即小心地转动三角瓶,使土壤与试剂充分混匀1 min。

把三角瓶放在石棉网上30 min,然后注入水约200 mL,加3~4滴邻菲锣啉指示剂,用0.25 mol/L FeSO4标准溶液滴定过量的K2CrO7。

2、0.1 mol/L K2CrO7—1∶3H2SO4130℃氧化法：在油浴温度为130~140℃时将0.5 g风干土与0.1 mol/L K2CrO7）—1∶3H2SO410.0 mL共煮5 min,冷却后加入30 mL水,用0.1 mol/L FeSO4标准溶液滴定过量的K2CrO7。

二．生物量有机质（MBOM）：生物量有机质是指能被土壤微生物分解利用的部分有机质。

即微生物量碳、微生物量氮。

氯仿熏蒸法测定：（此法较为简单，但氯仿为有毒物质，操作复杂）前处理步骤：将新鲜的土样品含水量调节至田间含水量的30％～50％，25℃下密封预培养7～10 d，以保持土壤均匀和所得结果的可比性。

土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法土壤是生态系统的重要组成部分，在土地利用和环境保护方面具有重要作用。

然而，土壤的质量受到许多因素的影响，其中包括有机碳的含量。

有机碳是土壤中的重要成分，对土壤的性质、可持续性和生产力有着深远的影响。

因此，测定土壤有机碳的含量是土壤评估的重要指标之一。

测定土壤有机碳的方法有很多，其中最常用的方法是重铬酸钾氧化-分光光度法。

该方法基于土壤中的有机碳在高温和酸性条件下被氧化为二氧化碳(CO2)，随后通过试剂中含有的铬酸钾(K2Cr2O7)和硫酸(H2SO4)将二氧化碳转化成水和钾离子(K+)，最后通过分光光度法测定钾离子的含量来反推土壤有机碳的含量。

在该方法的实验操作中，首先需要提取土壤中的有机碳。

一般情况下，实验采用冷水提取、热水提取或氧化铝溶液提取等方法。

提取后的土壤样品需要干燥、研磨和筛分，最后称取适量样品进行处理。

然后进行钾离子的分光光度法测定。

具体来说，是将样品溶于硫酸中加热至高温和高压，以便将样品中的碳氧化。

氧化完成后加入适量的铬酸钾试剂，此时有机碳会被转化为二氧化碳。

随后用钾离子的比色法来测定土壤中的有机碳含量。

通过重铬酸钾氧化-分光光度法测定土壤有机碳含量的结果准确性高、重复性好，可以测定不同土壤中的有机碳含量，对于评估土壤的质量、生产力和可持续性具有重要意义。

总结来看，有机碳的含量是影响土地质量的重要因素之一。

重铬酸钾氧化-分光光度法是测定土壤有机碳含量最常用的方法之一，具有测定准确、重复性好等优点。

因此，通过该方法测定土壤有机碳含量是评估土地质量、维护生态平衡以及推动农业可持续发展的有效途径。

hj 615-2011土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法1. 引言1.1 概述本文旨在介绍hj 615-2011土壤有机碳的测定方法：重铬酸钾氧化-分光光度法。

土壤有机碳是土壤中最重要的有机组分之一，对于了解土壤质量、农作物生长状况以及环境变化具有重要意义。

因此，准确测定土壤中的有机碳含量对于研究土壤生态系统的健康与稳定至关重要。

1.2 研究背景随着全球环境变化和人类活动的日益增加，土壤有机碳含量及其变化对于监测和评估农田资源的可持续利用和管理至关重要。

然而，传统的测定方法存在复杂、耗时且不灵敏等问题。

因此，开发一种简单、高效且精确测定土壤有机碳含量的新方法具有现实意义。

1.3 目的与意义本文主要目的是通过研究hj 615-2011标准所推荐的重铬酸钾氧化-分光光度法，探索其在测定土壤有机碳方面的可行性和准确性。

通过对一系列土壤样品进行测定，并与其他常用方法进行比较分析，以验证该方法的准确性和可靠性。

本文的意义在于提供给科研工作者和实践者一个简单、高效且精确的土壤有机碳测定方法，有助于更好地了解土壤质量及其环境响应，为农业生产和环境保护提供科学依据。

同时，本研究还能够拓展该方法的应用范围，并为相关领域的研究提供新思路。

（注意：全文内容仅作参考，请根据具体实验结果和数据进行修改补充）2. 原理及方法：2.1 重铬酸钾氧化法原理：重铬酸钾氧化法是一种常用的测定土壤有机碳的方法。

其基本原理是通过将土壤样品中的有机碳在高温下与重铬酸钾反应，使有机物被氧化为二氧化碳。

在这个过程中，还需要加入硫酸作为媒介和硼砂作为指示剂。

重铬酸钾会被还原为Cr3+离子，并伴随着颜色的变化，由橙红色转变为绿色。

颜色的深浅可以通过分光光度法来测定，从而得出土壤样品中有机碳的含量。

2.2 分光光度法介绍：分光光度法是一种常用的分析方法，利用物质对特定波长的吸收或透射来测定其浓度。

对于重铬酸钾氧化-分光光度法来说，我们需要选择合适的检测波长，以实现最佳的灵敏度和准确性。

土壤全碳测定实验报告实验目的：本实验旨在通过测定土壤全碳含量，了解土壤中有机质的含量以及土壤的肥力状况，并对土壤质量进行评估。

实验原理：土壤全碳测定是通过定量测定土壤中有机碳的含量来评估土壤质量和肥力状况的常用方法之一。

有机碳是土壤中有机质的主要组成部分，其含量高低直接影响土壤的物理、化学和生物学性质。

本实验采用酸化铜氧化法测定土壤全碳含量。

酸化铜氧化法是一种常用的有机碳测定方法，原理上是将有机碳氧化为CO2，风化铜被还原为铜。

其中，土壤样品经过预处理后，添加硫酸铜溶液和液体硝酸，然后加热反应，使有机碳氧化生成CO2，并被稀硝酸捕集，通过测定捕集的CO2的体积可计算出土壤中有机碳的含量。

实验材料和仪器设备：- 土壤样品- 化学草酸- 硫酸铜溶液- 液体硝酸- 高压消解管- 电磁加热板- 试管- 酸碱滴定装置实验步骤：1. 准备土壤样品，将土壤样品收集并去除杂质，取所需重量的土壤样品放入高压消解管中；2. 加入适量的化学草酸，使土壤样品与草酸的比例为10：1，用搅拌棒充分混合；3. 加入适量的硫酸铜溶液和液体硝酸，使样品完全酸化；4. 将高压消解管放入电磁加热板上，加热至样品完全分解，产生CO2气体；5. 用试管将产生的CO2气体捕集起来，并用酸碱滴定装置测定CO2气体体积；6. 根据CO2气体的体积，计算出土壤中有机碳的含量。

实验结果和数据处理：根据测定所得的CO2气体体积，通过计算公式可以得到土壤中有机碳的含量。

将得到的数据整理并进行统计分析，比较不同样品之间的有机碳含量差异。

根据有机碳含量的高低，可以评估土壤质量和肥力状况。

实验结论：通过本实验测定土壤全碳含量，可以评估土壤质量和肥力状况。

有机碳含量高的土壤通常具有较好的肥力和较高的土壤质量；而有机碳含量低的土壤则相对瘠薄。

因此，合理调控土壤有机质含量，对于提高土壤肥力和改善土壤质量具有重要意义。

实验六 土壤中有机碳的测定：TOC仪测定法一、实验目的和要求1. 掌握利用TOC分析仪测定土壤有机碳的方法2. 了解土壤有机碳在环境科学研究的意义二、实验原理广泛分布于地球表面的陆地和水体中的土壤和沉积物中的有机碳包含多种物质，从简单的糖类，到复杂的大分子蛋白质、脂肪和有机酸等。

土壤有机碳在土壤中含量并不高，一般在5%以下。

土壤中有机碳还是土壤形成的主要标志。

土壤有机碳的复杂组成使其具有许多特性，例如，它与重金属离子和水氧化物相结合，既而形成水溶性和不溶性复合体；可以与粘土矿物和颗粒物相结合；吸附各种污染物；吸收和释放植物营养元素；保持土壤水分等。

因此，土壤有机碳对土壤的性质以及各种污染物在土壤中的歉意和转化有很大的影响是环境分析测定的基本项目之一。

此外，在全球气候变化的研究中，碳循环处于一个极其重要的核心地位，而土壤有机碳是全球碳循环的重要组成部分，对于大气二氧化碳的固定或释放有重要影响。

在环境演化研究中，土壤中的有机碳含量是重要的气候替代指标。

因此，准确测定土壤中总有机碳含量具有重要意义。

土壤有机碳的测定过程包括样品氧化合检测两部分。

样品氧化可有干法氧化合湿法氧化，本实验采用干法氧化，即燃烧法。

干烧法是将土壤样品置于炉中通过高温燃烧，使其中的有机碳氧化成CO2，然后通过滴定法、重量法、热量法、分光光度法和气相色谱技术测定CO2量，并最终计算出TOC的含量。

有机质燃烧不充分时可能产生一定量的CO，为将其完全转化成CO2，经常需要借助一些过渡金属，如Pt、Cu、Ir、Ni等的氧化物进行催化氧化。

当燃烧温度过高时，诸如碳酸盐类矿物会发生分解释放出CO2，因此，在测定前，通常需要去除土壤样品中的所有碳酸盐矿物。

三、仪器、试剂和材料1. 仪器及设备TOC仪、天平、分析筛（100目）、烘箱、样品舟（陶瓷舟）2. 主要试剂盐酸溶液（1 M）量取85ml浓盐酸，边搅动边缓慢倒入500ml水中，用水稀释至1000ml，混匀。

土壤全碳的测定方法
《土壤全碳的测定方法》
土壤中的有机碳是土壤生态系统的重要组成部分，对于了解土壤的碳循环、评估土壤质量以及推动可持续农业发展具有重要意义。

因此，准确测定土壤中的全碳含量成为土壤科学研究中的一项基础工作。

本文将介绍几种常见的土壤全碳测定方法。

一、干燥燃烧法
该方法是将土壤样品在低温下逐渐干燥，然后通过高温燃烧将有机碳转化为CO2，并使用气体分析仪测定CO2的含量。

该方法操作简单、准确度较高，适用于大量样品快速测定，但需要使用高温炉和气体分析仪。

二、酸碱滴定法
该方法是将土壤样品与酸溶液反应，使有机碳转化为CO2，然后使用酸碱滴定进行测定。

该方法操作简单、成本较低，适用于大规模土壤样品的测定。

但由于酸、碱和滴定剂的浓度和体积的精确控制比较困难，测定结果可能存在一定的误差。

三、连续燃烧法
该方法是将土壤样品连续燃烧，在高温下将有机碳转化为CO2，并通过红外光谱仪或红外探测器进行测定。

该方法测定简便、准确度高，并且对样品处理过程中的氧化物含量不敏感，适用于大规模样品的测定。

四、质谱法
该方法是利用质谱仪对土壤样品进行直接测定，通过质谱仪的碳同位素比值进行判断。

该方法准确度高，但设备价格较高，操作复杂，适用于专业实验室。

以上是几种常见的土壤全碳测定方法，每种方法都有其适用的场景和优缺点。

在实际应用中，可以根据实验目的、样品数量和实验条件等因素进行选择。

同时，为了减少测定误差，还需在每个步骤中严格控制实验条件和质量控制，以确保得到准确可靠的土壤全碳含量数据。

方法验证报告项目名称：土壤有机碳的测定方法名称：《土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法》HJ615-2011报告编写人：参加人员：审核人员：报告日期：1实验室基本情况1.1人员情况实验室检测人员已通过标准《土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法》HJ615-2011的培训，熟知标准内容、检测方法及样品数据采集和处理等,考核合格，得到公司技术负责人授权上岗。

表1参加验证人员情况登记表姓名性别年龄职务或职称所学专业从事相关分析工作年限1.2检测仪器/设备情况表2主要仪器基本情况设备编号设备名称规格型号计量/检定状态有效期紫外可见分光光度计电子天平恒温加热器低速离心机1.3检测用试剂情况表3主要试剂及溶剂基本情况试剂名称生产厂家级别规格备注重铬酸钾硫酸葡萄糖硫酸汞1.4环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在标准要求范围内，满足检测环境条件。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。

2实验室检测技术能力2.1方法原理在加热的条件下，土壤样品中有机碳被过量的重铬酸钾-硫酸溶液氧化，重铬酸钾中的六价铬（Gr6+）被还原为三价铬（Gr3+），其含量与样品中有机碳的含量成正比，于585nm波长处测定吸光度，根据三价铬（Gr3+）的含量计算有机碳含量。

2.2标准曲线的绘制分别量取0.00、0.50、1.00、2.00、4.00和6.00mL葡萄糖标准溶液于100mL 具塞消解玻璃管中，其对应有机碳含量分别为0.00、2.00、4.00、8.00、16.0和24.0mg。

分别加入0.1g硫酸汞和5.00mL重铬酸钾溶液，摇匀。

在缓慢加入7.5mL 硫酸，轻轻摇匀。

开启恒温加热器，设置温度为135℃。

当温度升至接近100℃时，将上述具塞消解玻璃管放入恒温加热器的加热孔中，以仪器温度显示135℃时开始计时，加热30min。

然后关掉恒温加热器开关，取出具塞消解玻璃管水浴冷却至室温。

1 方法依据本方法依据HJ 615-2011 土壤 有机碳的测定 重铬酸钾氧化-分光光度法 2 仪器和设备紫外-可见分光光度计 3 分析步骤详见HJ 615-2011土壤 有机碳的测定 8测定步骤 4 试验结果报告4.1 校准曲线及线性范围按分析步骤3 校准曲线的绘制操作，数据见表1。

表1 校准曲线数据浓度(mg)0.002.00 4.00 8.00 16.0 24.0 吸光度（A ） 0.0000.0510.1020.1940.3830.570回归方程: y =0.0237x+0.0038 r=0.9999 4.2 方法检出限在10个空白样品中分别加入4倍检出限浓度的标准物质，进行测定，按照HJ 168-2010规定MDL=S t n ⨯-)99.0,1(进行计算，结果见表2。

表2 方法检出限测定结果（N=10）由W =m计算得出方法检出限，为0.06%。

其中：W — 有机碳含量，%；C — 校准曲线上查得待测样品溶液中有机碳的含量，单位mg ；m — 烘干试样质量， m=0.5g 。

4.3 精密度实验取高低2个浓度水平的样品，按照步骤3，分别做6次平行实验，计算出有机碳平均值，相对标准偏差，及最大相差和最大相对偏差，结果见表3。

表3 精密度测试数据4.4准确度对有证标准物质GBW07454（GSS-25）和GBW07457（GSS-28）进行6次平行实验，计算结果平均值，最大相对误差，相对标准偏差，检测结果见表4。

表4 准确度测试数据5结论5.1检出限实验室检出限为0.06%（以0.5g烘干土样计），标准中要求，当样品量为0.5g 时，方法的检出限为0.06%（以干重计）。

5.2精密度对高低两个浓度的样品进行测试，测得样品1平均值为0.75%，相对标准偏差为3%，最大相差为0.06%；测得样品2平均值为5.20%，相对标准偏差为2%，最大相对偏差2%；标准中要求当有机碳含量≤1.00%，两个测定结果之差应在±0.10%之内；当有机碳含量＞1.00%，两个测定结果的相对偏差≤10.0%。

1—3 土壤/植物有机碳的测定(重铬酸钾容量法)100目过筛1.原理：在加热的条件下，用过量的重铬酸钾—硫酸(K2Cr2O7－H2SO4)溶液，来氧化土壤有机质中的碳，Cr2O-27等被还原成Cr+3，剩余的重铬酸钾(K2Cr2O7)用硫酸亚铁(FeSO4)标准溶液滴定，根据消耗的重铬酸钾量计算出有机碳量，再乘以常数1.724，即为土壤有机质量。

其反应式为：重铬酸钾—硫酸溶液与有机质作用：2K2Cr2O7+3C+8H2SO4=2K2SO4+2Cr2(SO4)3+3CO2↑+8H2O硫酸亚铁滴定剩余重铬酸钾的反应：K2Cr2O7+6FeSO4＋7H2SO4=K2SO4＋Cr2(SO4)3+3Fe2(SO4)3+7H2O2 试剂2.1重铬酸钾标准溶液：0.8000mol/L，称取经150℃烘干2h的39.2248g重铬酸钾（K2Cr2O7），精确至0.0001g，加400mL水，加热溶解，冷却后，加水稀释至1000mL。

2.20.2mol/L FeSO4标准溶液。

准确称取分析纯硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)56g或硫酸亚铁铵［Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O］80g，溶解于蒸馏水中，加浓硫酸(H2SO4)5ml，然后加水稀释至1L，此溶液的标准浓度，可以用0.0167mol/L重铬酸钾(K2Cr2O7)标准溶液标定。

标定：吸取10.00mL重铬酸钾标准溶液置于250mL锥形瓶中，加入40mL水和10mL 硫酸，再加3滴~4滴邻菲啰啉指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定至溶液由橙黄色经蓝绿色至棕红色为终点。

同时做空白试验。

硫酸亚铁铵标准溶液浓度按下式计算：式中：C——硫酸亚铁铵标准溶液浓度，mol/L；C1——重铬酸钾标准溶液浓度，mol/L；V1——重铬酸钾标准溶液体积，mL；V2——硫酸亚铁铵标准溶液用量，mL；V0——空白试验消耗硫酸亚铁铵标准溶液体积，mL。

2.3邻菲啰啉指示剂：称取 1.485g 邻菲啰啉（C12H8N2·H2O）和0.695g 硫酸亚铁（FeSO4·7H2O），溶于100mL水中，形成的红棕色络合物贮于棕色瓶中。

***检测有限公司方法验证报告方法名称：《土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法》HJ 615-2011编写：年月日审核：年月日批准：年月日一、目的对实验室选用的《土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法》HJ 615-2011方法进行验证，以证实实验室能够正确运用这些方法，并能证实该方法适用于预期的用途，在误差的允许范围之内，可在本实验室内运行。

二、适用范围和原理本标准适用于风干土壤中有机碳的测定。

本标准不适用于氯离子含量大于2.0×104mg/kg 的盐渍化土壤或盐碱化土壤的测定。

在加热条件下，土壤样品中的有机碳被过量重铬酸钾-硫酸溶液氧化，重铬酸钾中的六价铬被还原为三价铬，其含量与样品中有机碳的含量成正比，于585nm 波长处测定吸光度，根据三价铬的含量计算有机碳含量。

三、检测设施与环境条件实验室环境条件要求：表1经验证，实验室环境条件，满足要求。

四、仪器及化学试剂表1五、人员能力5.1该项目人员配备情况该项目目前配备2名专业技术人员，并通过考核：表 3 参加验证人员情况登记表5.2 人员培训及考核情况人员已经通过培训并考核合格，详见人员档案。

六、实验步骤6.1准确称取0.50g试样，小心加入到100ml具塞消解玻璃管中，避免沾壁。

加入0.1g硫酸汞和5.00ml重铬酸钾溶液，摇匀。

再缓慢加入7.5ml硫酸，轻轻摇匀。

开启恒温加热器，设置温度为135℃。

当温度升至接近100℃时，将上述具塞消解玻璃管开塞放入恒温加热器的加热孔中，以仪器温度显示135℃时开始计时，加热30min。

然后关掉恒温加热器开关，取出具塞消解玻璃管水浴冷却至室温。

向每个具塞消解玻璃管中缓慢加入50ml水，继续冷却至室温。

再用水定容至100ml刻线，加塞摇匀。

将定容后试液静置1h，取80ml上清液至离心管中以2000r/min离心分离10min，再静置至澄清，最后取上清液于波长585nm处，用10mm比色皿，以水为参比，测其吸光度。

土壤有机碳含量测定方法
土壤有机碳含量测定方法主要有以下三种：
1. 测定CO2法：将土样中有机碳高温氧化后，测定释放出的CO2的量。

2. 湿烧法：土壤样品中的有机质(碳)与铬酸、磷酸溶液在160℃下进行消煮，氧化有机碳所产生的二氧化碳，被连接在烧瓶上的截流装置中的氢氧化钾所吸收，形成的碳酸盐用氯化钡溶液沉淀之，过量的标准氢氧化钾，以酚酞为指示剂，用标准酸回滴，即可从消耗的标准氢氧化钾量求出土壤有机碳含量。

3. 高温灼烧法：风干土壤样品在燃烧炉中加热至900℃以上,样品中有机碳
被氧化为二氧化碳，产生的二氧化碳用过量的氢氧化钡溶液吸收生成碳酸钡沉淀，反应后剩余的氢氧化钡用草酸标准溶液滴定，由空白滴定和样品滴定消耗的草酸标准溶液的体积差计算二氧化碳产生,根据二氧化碳产生量计算
土壤中的有机碳含量。

以上信息仅供参考，具体方法需要根据实际情况选择。

土壤活性有机碳分组及测定方法土壤活性有机碳（SOC）是指土壤中与活性微生物密切相关的有机碳部分，对于评估土壤肥力和健康状况具有重要意义。

根据其活性程度和组成特点，SOC可以分为三个主要组分：可溶性有机碳（SOC-s）、酸解有机碳（SOC-a）和微生物量有机碳（MBC）。

本文将介绍各组分的测定方法以及常用的土壤活性有机碳分组方法。

一、可溶性有机碳（SOC-s）的测定方法可溶性有机碳是指土壤中以溶解态存在的有机碳物质，通常包括有机酸、糖类和氨基酸等。

测定SOC-s的方法主要有以下几种：1.高温燃烧法：将土壤样品在高温下燃烧，燃烧前后样品中的有机碳含量差即为SOC-s。

2.淋洗法：用适量的纯水或稀酸溶液淋洗土壤样品，经过滤、干燥和称重后，计算含量差得到SOC-s。

3.筛选法：利用氨基酸和糖类等可溶性有机物的筛选特性，通过酸水解得到SOC-s。

二、酸解有机碳（SOC-a）的测定方法酸解有机碳是指土壤中通过酸水解方法释放的有机碳，主要包括复合酸解有机碳和可氧化有机碳。

酸解有机碳的测定方法主要有以下几种：1.硫酸热酸解法：将土壤样品与浓硫酸进行加热酸解，然后用稀碱溶液滴定浸提液中的酸，计算酸解有机碳含量。

2.高温燃烧法：将酸解后的土壤样品在高温下燃烧，测定燃烧前后的有机碳含量差值得到SOC-a。

3.辅助酸解法：在硫酸酸解过程中添加助解剂（如氧化剂、还原剂）以增加酸解的效果，进一步提高SOC-a的测定效果。

三、微生物量有机碳（MBC）的测定方法微生物量有机碳是指土壤微生物体内所含的有机碳。

常用的MBC测定方法主要有以下几种：1.直接抑制法：利用苯酚酚灭菌土进行微生物活性抑制，对比土壤样品和抑制土壤样品中有机碳的含量差，计算MBC。

2.溶菌酶法：将土壤样品与溶菌酶溶解后，利用色谱法或荧光法测定溶解液中的有机碳含量，计算MBC。

3.氧耗测定法：在一定条件下，测定土壤样品中微生物对有机物氧化的耗氧量，通过计算耗氧量得到MBC。

土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法
土壤有机碳测定(Determination of Soil Organic Carbon，SOC)是了解和研究土壤的一个重要指标，它具有土壤供应植被营养元素的重要作用，也影响土壤的可湿性和防止土壤侵蚀的作用。

重铬酸钾氧化-分光光度法(potassium dichromate oxidation-spectrophotometric method，PDO-SPM)是目前测定土壤有机碳的最常用的方法之一。

1、基本原理
重铬酸钾氧化-分光光度法是通过有机质在硫酸和重铬酸钾溶液中氧化而发生淡紫色铬褐色沉淀，然后通过分光光度法测定使用该淡紫色铬褐色沉淀的吸光度。

根据标准曲线法计算得到的结果表明，土壤有机碳的含量大小。

2、样品的处理
获取土壤样品，将土壤样品经过研磨，洗涤，用0.25mm孔径的筛子筛分，这种孔径土壤粒度上，然后加入大豆油酰胺，+ K2Cr2O7-H2SO4-HCl 混合溶液，将混合溶液加入土壤样品中后，充分搅拌，使有机物完全溶解，形成褐色混合液，过滤，再将滤液放入100mL烧瓶容量，在室温下搅拌加热蒸发至祀，使沉淀物形成淡紫色。

3、计算结果
在实验室中，将5mL祀液取来，放在室温，并迅速放入600nm有效波长分光光度仪中进行测定。

将测定结果通过脉冲网络公式进行计算，通过计算得出总有机碳浓度。

最后，把这些数据保存，允许得出总有机碳的值。

综上，重铬酸钾氧化-分光光度法是测定土壤有机碳的一种方法，首先要处理样品，然后用重铬酸钾氧化-分光光度法进行测定，最后把这些数据保存下来，就可以得出总有机碳的值。

此法很容易操作，试验结果准确，广泛用于土壤有机碳的测定，建议广泛应用。

测定土壤有机碳含量的方法
测定土壤有机碳含量的方法有两类：
- 一类是将土样中有机碳高温氧化后测定释放出的二氧化碳的量，此类方法所得的结果中也包括了土壤中以碳酸盐形式存在的无机碳和以高度缩合的、几乎为元素态的碳。

- 另一类是用氧化剂在一定温度下氧化有机碳后测定消耗氧化剂的量，再换算为有机碳的量。

其中经典测定方法有干烧法（高温电炉灼烧）或湿烧法（重铬酸钾氧化）。

干烧法和湿烧法测定CO₂的方法均能使土壤有机碳全部分解，不受还原物质的影响，可获得准确的结果，但需要一些特殊的仪器设备，而且很费时间，所以一般实验室都不用此法。

测定土壤有机碳含量时，需要根据实际情况选择合适的方法和仪器，并严格按照操作步骤进行，以获得准确的结果。

土壤活性有机碳的测定（高锰酸钾氧化法）土壤样品经粘磨过0.5mm筛，根据土壤全有机碳含量，计算含有15mg碳的土壤样品量作为待测样品的称样重，然后将样品转移至50ml带盖的塑料离心管中，以不加土样作为空白。

向离心管中加入25ml浓度为333mmol/L的高锰酸钾溶液，在25℃左右，将离心管振荡（常规震荡即可）1小时，然后在转速2000rpm 下离心5分钟，将上清液用去离子水以1：250倍稀释，吸取1ml上清液转移至250ml容量瓶中，加去离子水至250ml即可。

稀释样品用分光光度计在565纳米处测定吸光值。

配制不同浓度梯度的高锰酸钾的标准溶液，同样于分光光度计上测定吸光值，建立高锰酸钾的浓度和吸光值的线性直线方程，将稀释好的待测样品的吸光值代入方程得到氧化有机碳后剩余高锰酸钾的浓度，同样得到空白的高锰酸钾浓度，前后二者之差即为氧化活性有机碳后高锰酸钾溶液的浓度变化值，根据假设，氧化过程中高锰酸钾浓度变化1mmol/L消耗0.75mM或9mg碳。

其中能被333mmol/L高锰酸钾氧化的碳是活性有机碳，不能被氧化的碳上非活性有机碳。

高锰酸钾标准曲线配制：首先配制0（去离子水）、15、30、60、100、150、300mmol/L的高锰酸钾标准梯度溶液，从每个浓度的标准溶液中吸取1ml标准溶液转移至250ml容量瓶中定容（既稀释250倍），这样能够就得到浓度梯度为0、0.06、0.12、0.24、0.4、0.6、1.0、1.2mmol/L的标准高锰酸钾梯度溶液，然后同样用分光光度计在565纳米处测定吸光值，绘制高锰酸钾的浓度与吸光值间的标准曲线。

注意标准曲线配制过程中尽量避光，以防高锰酸钾氧化消耗，可以将容量瓶套上信封袋以避光，还有容量瓶等一定要清洗干净，以防高锰酸钾氧化杂质而消耗，影响测定结果。

活性有机碳(mg/g) ＝高锰酸钾浓度变化值×25×250×9称样重×1000。

实验十四土壤有机碳的测定一、实验目的通过实验，要求学生掌握土壤有机碳测定的基本原理和方法。

二、实验意义土壤有机碳（SOC）是评价土壤质量的重要指标，尽管一般只占土壤质量的1～10%，但它却有十分重要的农业生产价值和环境价值。

SOC在调节土壤养分、改善土壤结构及减少环境负面影响方面具有非常重要的作用。

因此，为了保证农业持续发展，维持和提高有机碳的数量和质量是十分必要的。

三、测定原理在一定温度加热条件下，用一定浓度的K2Cr2O7-H2SO4溶液，氧化土壤有机C反应如下：2Cr2O72- + 3C + 16H+ = 4Cr3+ + 3CO2 + 8H2O反应剩余的Cr2O72-，以邻菲罗啉为指示剂，用Fe2+ 标准溶液滴定：Cr2O72- + 6 Fe2+ + 14 H+ = 2 Cr3+ + 6 Fe3+ + 7 H2O由氧化有机C的Cr2O72- 净消耗量计算土壤中有机碳含量，再换算为有机质的量。

由于此法对有机质氧化还不够完全，所以测得的有机质需乘以一个氧化校正系数，方能与经典的重量法的结果一致。

氧化校正系数因测定时氧化剂的浓度，消煮的温度与时间、催化剂的存在与否以及样品中有机质的含量不同而有变化。

常用的外热源法（用油浴、石蜡浴或磷酸浴加热），测得的结果与重量法（干烧法）对比，只能氧化90%左右的有机质，因此测得的结果应乘以氧化校正系数1.1。

土壤中如有Cl- 和Fe2+ 存在，在测定时也能被K2Cr2O7-H2SO4溶液氧化而导致结果偏高，须设法消除其干扰。

在滴定过程中指示剂的变色过程如下：开始时溶液以重铬酸钾的橙色为主，此时指示剂在氧化条件下，呈淡蓝色被重铬酸钾的橙色掩盖，滴定时溶液逐渐呈绿色（Cr3+）近终点时变为灰绿色。

当Fe2+ 溶液过量半滴时，溶液则变为棕红色，表示颜色已到终点。

四、实验设备电子天平；调温电热板；磨口三角瓶（150 mL）；磨口简易空气冷凝管（直径0.9 cm，长19 cm）；定时钟；滴定管（25.00 mL）；小型日光滴定台。

土壤有机碳及碳组份测定标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]①土壤有机碳测定风干土过0.25 mm土壤筛，用重铬酸钾－外加热法测定有机碳含量。

②土壤重组和轻组分离取100 g(干土重)土，分成3等分，分别放入密度为1.70gcm-3的重液中(ZnI2和KI混合溶液，用KOH溶液调至中性)，用手摇动震荡5min，再用超声波400Jml-1震荡3min，离心机离心，虹吸法取上清液，过滤，重复操作3次。

所得样品用100mL0.01molL-1CaCl2溶液洗涤，再用200mL蒸馏水反复冲洗，得到轻组。

剩余部分为重组，用100ml0.01molL-1CaCl2溶液洗涤，再用200mL蒸馏水反复冲洗。

样品回收率均在95%以上。

将得到的组分分出一份，过0.25 mm 土壤筛，用重铬酸钾-外加热法测定有机碳含量。

③土壤水溶性有机碳测定20g(干土重)新鲜土放入盛有60mL蒸馏水的三角瓶中，常温下震荡浸提30min，用高速离心机离心，上清液过0.45μm滤膜，用岛津TOC-V CPH仪测定浸提液有机碳浓度，得到水溶性有机碳。

为了避免浓度的差异对特定波长吸收值的影响，先把所有样品的水溶性有机碳的浓度稀释到10mg/L，再用岛津UV-2550测定250(A250)、280(A280)、和365nm(A365)处吸收值，并计算A250/A365比值。

④热水浸提碳的测定10 g(干土重)新鲜土放入盛有100mL蒸馏水的三角瓶中，先震荡10min，80℃浸提16h，再震荡10min，离心后，上清液用0.45μm滤膜过滤，用TOC-VCPH仪测定浸提液碳浓度，得到热水浸提碳。

⑤土壤微生物量碳测定土壤微生物量碳(MBC)采用氯仿熏蒸-K2SO4浸提法，熏蒸和未熏蒸的样品分别用0.5 MK2SO4浸提30min，用岛津TOC-V CPH仪测定浸提液碳浓度。

然后，用以下公式计算获得微生物量碳：MBC=Ec/0.38(1-1)式中MBC为微生物量碳，Ec为熏蒸和未熏蒸样品浸提液测定的有机碳差值。