下载文档原格式
基因工程原理练习题及其答案一、填空题1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。
3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。
4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。
5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。
6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。
9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。
10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。
11．EGTA是____________离子螯合剂。
12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。
13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。
基因工程练习题一、单项选择题1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④D.①②④3．有关基因工程的叙述正确的是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。
在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达6．不是基因工程方法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。
这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成β—球蛋白的DNAD.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。
一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G 和A之间，这是应用了酶的A．高效性 B.专一性 C．多样性D.催化活性受外界条件影响12．上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，转基因动物是指A.提供基因的动物B.基因组中增加外源基因的动物C.能产生白蛋白的动物D.能表达基因信息的动物13．作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B.具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C.具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合D.对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择14．下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是：A．①②B．①③ C．①④ D．②③15．下列平末端属于同一种限制酶切割而成的是A.①③B.①④C.②③D.②④16．下列有关基因工程的叙述中，不正确的是A.DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B.基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞进行替换D.蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料17．下列属于PCR技术的条件的是[来源:学科网]①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦DNA限制性内切酶A.①②③⑤B.①②③⑥C.①②③⑤⑦D.①②④⑤⑦18．下列有关PCR技术的叙述正确的是A.作为模板的DNA序列必须不断的加进每一次的扩增当中B.作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中C.反应需要的DNA聚合酶必须不断的加进反应当中D.反应需要的DNA连接酶必须不断的加进反应当中19．蛋白质工程中，直接需要进行操作的对象是A.氨基酸结构B.蛋白质的空间结构C.肽链结构D.基因结构20．有关基因与酶关系的叙述正确的是A.每个基因都控制合成一种酶B.酶的遗传信息编码在内含子的碱基序列中C.基因的转录、翻译都需要酶D.同一生物体不同细胞的基因和酶是相同的21．某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
高中生物《基因工程》练习题题号一二总分得分一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
下列有关基因工程的说法错误的是（）A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B. 任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限制酶的降解。
下列在动物体内发生的过程中，与上述细菌行为相似的是（）A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）A. B.C. D.6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
下列相关叙述正确的是（）A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A. 若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B. 若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C. 若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D. 若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是A. 甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B. 若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C. 乙中的酶切位点在A与G之间D. 目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
大学基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶属于哪一类酶？A. 核酸酶B. 蛋白酶C. 脂肪酶D. 淀粉酶答案：A2. 以下哪个不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的克隆B. 目的基因的表达C. 目的基因的检测D. 目的基因的复制答案：D3. 基因工程中常用的运载体有哪些？A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 所有以上答案：D二、填空题1. 基因工程中常用的_________技术可以用于目的基因的检测。
答案：PCR2. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
答案：转化3. 在基因工程中，_________是将目的基因插入到运载体中形成重组DNA分子的过程。
答案：克隆三、简答题1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断和疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的克隆过程。
答案：目的基因的克隆过程包括提取目的基因、构建基因文库、筛选含有目的基因的克隆、目的基因的扩增和纯化等步骤。
四、论述题1. 论述基因工程技术在农业中的应用及其可能带来的问题。
答案：基因工程技术在农业中的应用包括改良作物品质、提高作物产量、增强作物抗病虫害能力等。
可能带来的问题包括生态平衡的破坏、基因污染、食品安全问题等。
2. 分析基因工程中目的基因表达调控的重要性及其策略。
答案：目的基因表达调控在基因工程中至关重要，它决定了基因工程产品的功能和产量。
调控策略包括启动子的选择、增强子的应用、转录后调控等。
高考生物《基因工程》真题练习含答案1．[2024·山东卷]关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是()A．整个提取过程中可以不使用离心机B．研磨液在4 ℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变D．仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰答案：A解析：研磨后，可以将研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液，可以不使用离心机，A正确，B错误。
鉴定过程中的沸水浴加热可使DNA双螺旋结构发生改变，C错误。
该实验中，为排除二苯胺加热后可能变蓝对实验结果造成干扰，可设置加二苯胺不加DNA的对照组，D错误。
2．[2023·新课标卷]某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接答案：C解析：只用一种限制酶切割质粒和目的基因，会使质粒和目的基因发生自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，A错误；用酶1切割目的基因，产生的是黏性末端，用酶3切割质粒，产生的是平末端，无法连接，B错误；质粒和目的基因都用酶1和酶2切割后，可使用T4 DNA连接酶连接，使目的基因定向插到质粒中，C正确；酶2和酶4切割后产生的黏性末端相同，易导致目的基因和质粒自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，并且用酶4切割会破坏标记基因，D错误。
3.[2023·浙江6月]某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。
生物选修基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中，常用的运载体不包括以下哪一项？A. 质粒B. 噬菌体C. 病毒D. 染色体答案：D2. 基因枪法是一种用于将外源基因导入植物细胞的方法，它主要利用了什么原理？A. 电穿孔B. 显微注射C. 基因重组D. 粒子轰击答案：D3. 在基因工程中，PCR技术的主要作用是什么？A. 基因测序B. 基因克隆C. 基因扩增D. 基因编辑答案：C二、填空题4. 基因工程中，常用的限制性内切酶能够识别特定的_______序列，并在这些序列的特定位置切割DNA分子。
答案：核苷酸5. 基因工程中，将目的基因插入到运载体中后，需要通过_______技术将重组DNA导入宿主细胞。
答案：转化三、简答题6. 请简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断等。
例如，利用基因工程技术生产胰岛素、干扰素等生物药物；通过基因编辑技术治疗遗传性疾病；利用基因芯片技术进行疾病相关的基因检测。
四、论述题7. 论述基因工程在农业中的应用及其潜在的伦理问题。
答案：基因工程在农业中的应用主要包括转基因作物的培育、抗病抗虫作物的开发、作物品质改良等。
例如，通过基因工程培育出抗虫害的棉花、抗旱的玉米等。
然而，基因工程也引发了一些伦理问题，如转基因作物对环境的影响、对生物多样性的潜在威胁、以及公众对食品安全的担忧等。
结束语：通过本试题，我们对基因工程的基本概念、技术方法及其在不同领域的应用有了更深入的了解。
同时，我们也认识到了基因工程在实际应用中可能遇到的伦理和环境问题，这需要我们在进行基因工程研究和应用时，更加谨慎和负责任。
大学基因工程题库及答案基因工程是一种利用分子生物学技术对生物体的基因进行操作和改造的科学。
以下是一些大学基因工程的题目和答案示例：1. 题目：简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：(1) 目的基因的获取；(2) 载体的选择与构建；(3) 目的基因与载体的连接；(4) 转化受体细胞；(5) 筛选含有重组DNA的细胞；(6) 目的基因的表达与检测。
2. 题目：什么是基因克隆？请说明其在基因工程中的重要性。
答案：基因克隆是指将特定的DNA片段插入到载体中，然后在宿主细胞内进行复制和表达的过程。
基因克隆在基因工程中的重要性体现在：(1) 允许科学家研究和分析特定基因的功能；(2) 可用于生产药物和疫苗等生物制品；(3) 有助于理解基因表达的调控机制。
3. 题目：PCR技术在基因工程中的应用是什么？答案：聚合酶链式反应（PCR）技术在基因工程中的应用主要包括：(1) 快速扩增目的基因，为基因克隆和表达提供足够的DNA模板；(2) 用于基因突变的检测和分析；(3) 制备单链DNA模板，用于DNA测序；(4) 用于基因表达分析，如定量PCR。
4. 题目：转基因生物的安全性问题主要包括哪些方面？答案：转基因生物的安全性问题主要包括：(1) 环境安全性，即转基因生物可能对生态系统产生的影响；(2) 食品安全性，即转基因食品对人体健康的潜在影响；(3) 生物安全性，即转基因生物可能对非目标生物产生的影响。
5. 题目：基因编辑技术CRISPR-Cas9的原理是什么？答案：CRISPR-Cas9基因编辑技术的原理是利用一种来自细菌的RNA导向的核酸酶系统。
该系统由两部分组成：(1) 一段小RNA （sgRNA），它能够特异性地识别目标DNA序列；(2) Cas9蛋白，一种核酸酶，能够在sgRNA的引导下精确地切割目标DNA。
通过这种机制，科学家可以在特定的基因位点进行切割，实现基因的敲除、插入或替换。
6. 题目：基因治疗的基本原理是什么？答案：基因治疗的基本原理是将正常或修正后的基因导入到患者的细胞中，以补偿或修复缺陷基因的功能。
高考生物基因工程试题及答案一、选择题1. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A. 基因工程中目的基因的获取是基因工程的核心步骤B. 基因工程中限制酶只能从原核生物中分离得到C. 基因工程中运载体必须具备限制酶的切割位点D. 基因工程中目的基因的检测与鉴定是基因工程的最后步骤答案：A2. 基因工程中常用的运载体是（）A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 以上都是答案：D3. 基因工程中，将目的基因导入植物细胞最常用的方法是（）A. 农杆菌转化法B. 基因枪法C. 脂质体法D. 电穿孔法答案：A4. 基因工程中，用于检测目的基因是否导入受体细胞的方法是（）A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 核酸探针技术D. 以上都是答案：D5. 基因工程中，用于检测目的基因是否转录出了mRNA的方法是（）A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 核酸探针技术D. 以上都是答案：C二、填空题1. 基因工程的基本操作步骤包括____、____、____和____。
答案：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2. 限制酶具有特异性，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定位点上切割磷酸二酯键，具有这种特性的核苷酸序列被称为____。
答案：限制酶的识别序列。
3. 在基因工程中，常用的运载体有____、____和____等。
答案：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
4. 基因工程中，将目的基因导入动物细胞最常用的方法是____。
答案：显微注射技术。
5. 基因工程中，用于检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是____。
答案：抗原-抗体杂交技术。
三、简答题1. 简述基因工程的原理。
答案：基因工程的原理是基因重组，即按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。
2. 简述基因工程在农业上的应用。
最新基因工程作业题及答案基因工程作业题及答案第二章1. 名词解释：核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶、核酸外切酶、末端脱氧核苷酸转移酶答：核酸内切酶：是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶。
核酸内切限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。
同裂酶：识别位点的序列相同的限制性内切酶。
同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端。
核酸外切酶：是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶。
末端脱氧核苷酸转移酶：可以不需要模板，在单链DNA或突出的双链DNA3’-OH端随机添加dNTPs的酶2. 限制性内切核酸酶的命名原则是什么？答：限制性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的，即：属名+种名+株名+序号；首字母：取属名的第一个字母，且斜体大写；第二字母：取种名的第一个字母，斜体小写；第三字母：(1)取种名的第二个字母，斜体小写；(2)若种名有词头，且已命名过限制酶，则取词头后的第一字母代替。
第四字母：若有株名，株名则作为第四字母，是否大小写，根据原来的情况而定，但用正体。
顺序号：若在同一菌株中分离了几种限制酶，则按先后顺序冠以I、Ⅱ、Ⅲ、…等，用正体。
3．部分酶切可采取的措施有哪些？答：1）缩短保温时间2）降低反应温度3）减少酶的用量4. 在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么?答：回文序列是：5'-CATATG-3，5．什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响?答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。
条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星活性。
概括起来，诱发星活性的因素有如下几种：(1)高甘油含量(>5％, v／v)；(2)限制性内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)；(3)低离子强度(<25 mmol／L)；(4)高pH(8．0以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等；(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。
第三章1．如何将野生型的λ噬菌体改造成为一个理想的载体?答：①删除λ噬菌体的非必需区，留出插入空间；并在余下的非必须区内制造限制酶切点②引进某些突变表型，作为选择标记③突变某些基因，使它成为安全载体④删除λDNA必须区段上常用的限制酶切点2．什么是蓝白斑筛选法?答：这种方法是根据α互补的原理来筛选重组体。
主要是在载体的非必要区插入一个带有大肠杆菌β—半乳糖苷酶的α基因片段（LacZ’），携带有lac基因片段的载体转入LacZ’－的宿主菌后，在IPTG（异丙基硫代-β-D半乳糖）诱导下，载体表达的β—半乳糖苷酶的α肽段和宿主菌表达的β—半乳糖苷酶的β肽段互补，形成有活性的β—半乳糖苷酶，该酶可以分解无色的5—溴—4—氯—3—引哚—β—D—半乳糖苷(X-gal)得到蓝色的5—溴—4—氯—靛蓝，因此在含有X-gal平板上形成浅蓝色的菌斑。
外源基因插人LacZ’(或LacZ’基因部分被取代)后，重组的克隆将丧失分解X-gal的能力，在含有X-gal的平板上形成白色的菌斑，非重组的克隆则为蓝色菌斑。
3． M13系列载体具有哪些优缺点?答：（1）有MCS，便于克隆不同的酶切片段（2） Xgal显色反应，可供直接选择（3）可以克隆双链DNA分子中的每一条链4．辅助噬菌体DNA和相应的噬菌粒是如何协同工作的?答：虽然噬菌粒载体携带有M13的IG区，能够合成单链DNA，但是它没有M13的功能基因，没有M13基因2的产物存在，所以不能合成单链DNA。
而辅助噬菌体具有M13的所有功能基因，但是IG区是缺陷的，辅助噬菌体本身的DNA不能进行单链复制，于是就可以为噬菌粒提供基因2产物和包装蛋白。
5．某一质粒载体具有Tetr和Kanr的表型，在Kan抗性基因内有一Bgl I的切点。
现用Bgl I切割该载体进行基因克隆，问：(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?答：(1)加四环素；(2)Tet r Kan s和Tet r Kan r；(3)重新点种在含Tet、Kan和只加T et的平板上，选择只在Tet平板上生长的菌落，即为所需的重组体。
第四章1. 目的基因的获取方法有哪些？各有什么优缺点？答：1）鸟枪法克隆：优点是可以随机克隆供体细胞的全基因组DNA片段；缺点是①工作量较大，需要了解目的基因的背景知识，②不能获得最小长度的目的基因，③不能除去真核生物目的基因的内含子结构2）cDNA法：优点是①能获得最小长度的目的基因②能除去真核生物目的基因的内含子结构；缺点是①仅限于克隆mRNA分子具有polyA结构的蛋白质编码基因②mRNA分离纯化困难3）PCR法：优点是高效快速的体外合成目的基因；缺点是已知待扩增目的基因或DNA片段两侧的序列4）化学合成法：优点是适于合成引物、接头等多种DNA短片段；缺点是必须已知基因的DNA序列，直接合成较大的基因成本较高2. 什么是基因组文库(genomic library)?构建基因组文库，涉及哪些基本过程?它同遗传学上的基因库有什么不同?答：基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。
一般以改造的噬菌体DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：(1)高分子量染色体DNA的制备；(2)体外重组连接；(3)包装蛋白的制备；(4)重组体的体外包装；(5)将重组DNA导人寄主细胞；(6)筛选。
基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。
基因库(gene pool)是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。
在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC 文库、BAC文库等。
3. 什么是cDNA文库(complementDNAlibrary)?同基因组文库有何差别?答：同mRNA互补的DNA称为cDNA。
cDNA文库是以某一生物的总mRNA 为模板，在无细胞系统中，在反转录酶的作用下，首先合成一互补的DNA, 即第一链，破坏RNA模板后，再以第一链为模板合成第二链，得到的双链DNA称为cDNA。
选用适合的载体，将合成的cDNA重组导人寄主细胞，经筛选得到韵cDNA克隆群称为cDNA 文库。
由于cDNA技术合成的是不含内含子的功能基因，因此是克隆真核生物基因的一种通用方法。
由于细胞内的基因在表达的时间上并非是统一的，具有发育的阶段性和时间性．有些则需要特殊的环境条件。
所以，cDNA文库是不可能构建得十分全，也就是说任何一个cDNA文库都不可能包含某—生物全部编码基因。
第五章1. 你在做Southern印迹分析，为了节省时间，你电泳后直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上，然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。
错在哪里?答：错在电泳后直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上，而没有先将凝胶中的DNA变性成为单链，从而导致目标DNA未能与探针杂交；另外如果你的杂交探针是双链的，在加人杂交混合物之前忘记将探针变性也可能得到空白的放射自显影结果。
2．什么是Western印迹?它与Southern印迹有什么不同?答：Western印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上，然后用特异性的抗体进行检测。
它与Southern的不同在于探针的性质不同，在Western印迹中使用的探针是抗体(蛋白质)，而Southern印迹中使用的探针是核酸（DNA或RNA）。
3. 蓝白斑筛选法为什么也会有假阳性?答：β—半乳糖苷酶的N末端是非必需的，，可以进行修饰，并不影响酶的活性或α肽的互补性。
如果插入的外源DNA引起α肽的可读框的改变，或者插入片段在正确的可读框中含有终止密码的话，就会形成白色噬菌斑。
如果插入DNA的碱基数正好是3的倍数，且不含有终止密码的话，仍然会形成蓝色噬菌斑。
这种插入物的长度可达几百个碱基对。
4. 重组体克隆的筛选和鉴定方法有哪些？答：1）载体表型选择法2）根据插入基因的表型选择3）DNA电泳检测法4）核酸杂交检测法5）免疫化学检测法6）转译筛选法第六章1．如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆菌中进行表达? 简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。
答：要使动物中编码激素的基因在大肠杆菌中表达，通常遇到的问题有：(1)细菌的RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子。
(2)大多数真核基因有内含子，这些内含子在转录后从前体mRNA 中被切除而形成成熟mRNA。
细菌细胞没有这样的机制来去除内含子。
(3)有些真核生物的蛋白质是通过前体分于加工而来的，例如胰岛素就是通过加工去除前体分子内部的33个氨基酸残基而来，剩下的两段肽链分别形成胰岛素的α、β链。
(4)产生的真核生物的蛋白质产物可以被细菌的蛋白酶所识别和降解。
针对上述可能出现的问题，建议在克隆的过程中采取以下措施：①应将激素的编码序列置于含有核糖体结合位点和起始密码子ATG的细菌强启动子的附近(含有这种序列的载体称表达载体)。
②可以以激素的mRNA为模板用反转录酶合成激素的基因。
这种DNA不含内含子可插入到载体中进行克隆。
此外，如果蛋白质序列短则可通过化学合成得到该基因。
合成的基因应含起始密码ATG、通过该激素蛋白的氨基酸序列推测而来的编码序列，以及1—2个终止密码：ATG——————编码序列————————TGA TAG现在，这个合成基因可被插入载体中。
③有时加工过程可以在离体条件下进行。
如果加工有困难，可以用合成基因，从而免除加工过程。
④选用合适的突变型宿主从而防止蛋白酶水解。
如果用酵母作为宿主上述许多问题都可以较容易地解决，尤其是现在有既能在大肠杆菌中又能在酵母中复制的穿梭质粒载体。
说明：1)ATG,TAG和TGA是对应mRNA中的转录起始信号AUG和终止信号UAG,UGA的DNA序列。
2)克隆生长素释放抑制因子基因时采用化学合成基因的方法。
生长索释放抑制因子是一种由下丘脑分泌的激素，长14个氨基酸残基，因此人工合成的基因，包括在宿主菌中表达所需的转录的起始和终止信号，仅51bp长。
