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基因工程.(·山东聊城一模)屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法而获得诺贝尔奖。
寄生于人体细胞内的疟原虫是疟疾的病原体。
科学家通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，偶然发现一株高产高效植株，进行基因测序发现该植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。
()如果用高产青蒿关键酶基因的反转录产生的片段与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群叫做青蒿的；获得的与青蒿细胞中该基因碱基序列(填“相同”或“不同”)。
在提取时需要向提取液中添加酶抑制剂，其目的是。
()将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体，图、中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
请回答：用图中的质粒和外源构建重组质粒时不能使用Ⅰ切割，原因是。
构建重组质粒时，在其目的基因前需要添加特定的启动子，启动子的作用是。
()基因表达载体导入组织细胞后，要通过植物组织培养技术培育出青蒿幼苗，该技术的关键步骤是。
鉴定该基因工程是否成功还要进行实验，但是不能直接在培养基上培养疟原虫观察，其原因是。
答案()文库(或部分基因文库) 不同防止的降解()Ⅰ会破坏质粒的抗性基因及外源中的目的基因聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录出()脱分化和再分化接种疟原虫营寄生生活解析()用高产青蒿关键酶基因的反转录产生的片段与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群叫做青蒿的文库或部分基因文库。
由关键酶基因转录形成的没有与关键酶基因的非编码区和内含子对应的片段，所以获得的与青蒿细胞中该基因碱基序列不同。
为防止的降解，在提取时，需要向提取液中添加酶抑制剂。
()题图显示，质粒的抗生素抗性基因和目的基因中均存在Ⅰ的识别位点。
若使用Ⅰ切割质粒和外源，则会破坏质粒的抗性基因及外源中的目的基因，因此构建重组质粒时不能使用Ⅰ切割。
启动子是聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录出。
()植物组织培养技术的关键步骤是脱分化和再分化。
鉴定该基因工程是否成功还要进行接种实验，但是不能直接在培养基上培养疟原虫观察，其原因是疟原虫营寄生生活。
2021年高考生物一轮总复习专题4 生物技术的安全性和伦理问题生态工程课时作业新人教版选修3一、选择题(每小题5分，共60分)1．有人认为转基因生物有可能成为“入侵的外来物种”，威胁生态系统中其他生物的生存。
其依据是( )A．转入的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌杂交，形成新的病原体B．转基因植物的抗除草剂基因，有可能通过花粉传播而进入杂草中，使杂草成为超级杂草C．科学家赋予了转基因生物某些特殊性状，增强了它们在该地区生存条件下的竞争能力D．转基因植物花粉传播的距离有限，只能在种植区以内繁殖解析：外来物种入侵一般是由于该生物在适宜的环境和缺乏天敌的情况下能够大量繁殖，并且对当地的生物多样性产生了影响。
转基因生物往往是改良的品种，因而具有较强的适应能力，很可能使当地生物受到影响。
答案：C2．关于设计试管婴儿的问题，下列哪项不合乎道德规范( )A．利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞救治病人B．利用设计试管婴儿技术设计畸形胎儿，以供展览C．利用试管婴儿的脐带血D．设计试管婴儿，不一定非考虑他的性别解析：设计试管婴儿不同于为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿。
试管婴儿的设计一般是为了救治病人需要试管婴儿的骨髓、干细胞、脐带血等，这样的设计都符合伦理道德，而那些为达到不正当目的而设计试管婴儿的做法都违背伦理道德。
答案：B3．2004年7月9日，法国议会投票通过了生物伦理法案，该法案从立法上禁止在法国进行生殖克隆和治疗克隆。
新法案明文禁止从事治疗性的克隆研究的原因是( ) A．治疗性克隆带来严重后果B．治疗性克隆的研究必然会过渡到生殖性克隆C．治疗性克隆严重有违生物伦理D．治疗性克隆就是生殖性克隆解析：随着生物技术特别是克隆技术的飞速发展，全世界越来越关注克隆技术的走向以及由此引发的关于克隆技术与人类伦理道德和社会学之间的关系问题，各国政府也纷纷出台相应的法律法规。
目前，美国、德国等很多国家在法律上禁止各种形式的克隆人胚胎研究。
2021高考生物一轮复习（人教版）必修三课时作业4课时作业31免疫调节时间：25分钟满分：100分一、选择题(每小题5分，共60分)1.对抗体的产生、特性和功能的描述是错误的。
抗毒素是抗体B。
抗体可以被蛋白酶C分解。
淋巴细胞可以产生抗体d．抗体在某些特殊情况下会对自身成分起免疫反应分析：抗体由浆细胞产生，其他淋巴细胞不能产生抗体。
回答：C2．细胞免疫主要是由t细胞实现的，当t细胞受抗原刺激变成效应t细胞后，以下哪项不属于它的作用()a、通过与靶细胞直接接触，靶细胞被裂解并杀死。
B.效应T细胞可以产生淋巴因子c．效应t细胞和b细胞协同作用来消灭靶细胞中的抗原d、效应T细胞将抗原呈递给B细胞，B细胞破坏靶细胞解析：体液免疫中，t细胞将抗原呈递给b细胞，使b细胞增殖、分化。
细胞免疫中，t细胞不会将抗原呈递给b细胞。
细胞免疫中，依靠的是t细胞消灭靶细胞。
回答：D3．(2021黑龙江四校一模联考)下列关于人体对甲型h1n1流感病毒免疫过程的说法，不正确的是()a、甲型流感病毒可在人体内引起特异性免疫反应。
B.效应T细胞可以分裂并杀死被病毒入侵的宿主细胞。
C.针对甲型流感病毒，除了淋巴细胞，吞噬细胞也需要参与。
D.注射用甲型流感疫苗属于免疫学中的抗体，可以对抗病毒解析：注射的甲流疫苗在免疫学上属于抗原，刺激机体产生能对抗该病毒的抗体。
答案：d4.以下是HIV引起艾滋病的过程，显示了免疫力和HIV在体内的发生。
此外，临床上，在初期和潜伏期没有疾病。
如何在潜伏期进行采样和检测，以判断患者是否已感染（）a．采取口腔黏液直接测定hiv的存在b．采取口腔黏液直接测定hiv抗体的存在c、血液直接检测HIV D.血液直接检测HIV抗体解析：从曲线上可以看出初期与潜伏期虽然没有病症出现，但潜伏期体内免疫反应强烈，因此可通过测定hiv抗体的存在来判断是否已被感染。
回答：D5．(2021浙江温州一模)病毒疫苗和抗血清在现代免疫学预防、治疗中有重要作用。
高考生物一轮复习第一讲基因工程课时跟踪检测新人教版选修3(限时：20分钟满分：60分)一、选择题(每小题6分，共30分)1．在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具酶。
下列有关限制性核酸内切酶的叙述错误的是( )A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B．限制性核酸内切酶的活性受温度和pH等因素的影响C．限制性核酸内切酶可以从某些原核生物中提取D．限制性核酸内切酶也可以识别和切割RNA解析：限制性核酸内切酶只能识别并且切割特定的DNA序列。
酶容易受到温度和pH等环境因素的影响。
限制性核酸内切酶可以在原核生物中提取。
答案：D2．上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。
他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍，标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。
以下与此有关的叙述中，正确的是( )A．所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因B．可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养形成转基因牛C．人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有人白蛋白基因D．运用基因工程技术让牛合成人白蛋白，该技术将导致定向变异解析：“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白质。
动物细胞的全能性较难实现，用牛的卵细胞不能培养形成转基因牛。
转基因牛的细胞中都含有人白蛋白基因，人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中表达。
答案：D3．(2011·宣武模拟)以下有关蛋白质工程的叙述，不．正确的是( )A．蛋白质工程发展的基础是基因工程B．蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程C．T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现D．蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质解析：蛋白质工程既能改造现有的蛋白质，也能制造新的蛋白质。
2021年高考生物一轮总复习专题1 基因工程课时提升作业新人教版选修3一、选择题(包括10个小题,每个小题5分,共50分)1.(xx·皖南模拟)下列关于基因工程的叙述,错误的是( )A.重组质粒的形成是在生物体外完成的B.基因工程培育抗虫棉的原理是基因突变C.反转录法合成的目的基因不具有与RNA聚合酶结合的位点D.基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中2.(xx·南京模拟)镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变,检测这种碱基序列改变必须使用的酶是( )A.解旋酶B.DNA连接酶C.限制性核酸内切酶D.RNA聚合酶3.(xx·宿州模拟)PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,其基本原理和过程与细胞内DNA的复制类似。
下列关于两者共同点的叙述,两项都不正确的是( )①边解旋边复制②遵循碱基互补配对原则③需要引物④过程可分为变性、复性、延伸等步骤A.①②B.②③C.③④D.①④4.(xx·池州模拟)MstⅡ是一种限制性核酸内切酶,它总是在CCTGAGG的碱基序列中切断DNA。
下图显示用MstⅡ处理后的突变型β血红蛋白基因片段。
镰刀型细胞贫血症的根本原因是β血红蛋白基因发生突变,使某一处CCTGAGG突变为CCTGTGG。
下列有关叙述错误的是( )A.利用MstⅡ酶进行基因诊断,该过程是在细胞外进行的B.将MstⅡ酶用于基因诊断,若产生4个DNA片段,则β血红蛋白基因是正常的C.在起初的正常β血红蛋白基因中有4个CCTGAGG序列D.镰刀型细胞贫血症患者的成熟红细胞中没有MstⅡ酶的识别序列5.(xx·黄山模拟)下面是四种不同质粒的示意图,其中ori为复制必需的序列,amp R为氨苄青霉素抗性基因,tet R为四环素抗性基因,箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。
若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞,应选用的质粒是( )6.(xx·安庆模拟)下图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程,下列相关分析中正确的是( )A.获得该mRNA的最佳材料是受精卵B.构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌C.完成过程①②必不可少的酶分别是反转录酶、DNA聚合酶D.探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌,获得未被感染的细菌7.(xx·徐州模拟)盐害是全球水稻减产的重要原因之一,中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌中的质粒将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻,获得了一批耐盐转基因植株。
选修3现代生物科技专题课时作业43DNA重组技术的基本工具基因工程的基本操作程序时间：25分钟满分：100分一、选择题(每小题5分，共60分)1．下列关于基因工程的叙述，正确的是()A．基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B．细菌质粒是基因工程常用的运载体C．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制性内切酶处理运载体DNAD．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体解析：本题考查了基因工程的操作工具。
基因工程是按照人们的愿望，把一种生物的基因复制出来，加以修饰改造，然后导入另一种生物的细胞里定向地改造生物的遗传性状。
在实际操作中一定用同一种限制性核酸内切酶来处理含目的基因的DNA和运载体DNA，使它们产生相同的黏性末端；不仅仅只有受精卵可以作为受体细胞，其他的体细胞也可充当受体细胞；目的基因是符合人们需要的基因，基因工程经常以抗生素的抗性基因为标记基因。
答案：B2．在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是()A．限制酶和DNA连接酶B．限制酶和水解酶C．限制酶和运载体D．DNA连接酶和运载体解析：基因工程中的操作工具有3种，即“分子手术刀”、“分子缝合针”、“分子运输车”。
在基因工程操作过程中，利用限制性核酸内切酶将DNA分子切开获取目的基因，同时用同一种限制性核酸内切酶将运载体切开，获得和目的基因相同的黏性末端；再用DNA 连接酶将目的基因和运载体连接起来。
综合所给选项可知，A项正确。
答案：A3．下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是()A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B．限制性核酸内切酶的活性受温度的影响C．限制性核酸内切酶能识别和切割RNAD．限制性内切酶可从原核生物中提取解析：本题考查基因工程的操作工具——限制性核酸内切酶的作用和来源。
限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离纯化，是能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且在特定的切点将磷酸二酯键断开；酶的活性是受温度、酸碱度等的影响。
[课时活页作业](限时30分钟满分100分)一、选择题(每小题5分，共40分)1．下列关于基因工程的叙述，错误的是 ( )A．重组质粒的形成是在生物体外完成的B．基因工程培育抗虫棉的原理是基因突变C．反转录法合成的目的基因不具有与RNA聚合酶结合的位点D．基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中解析：基因工程的原理是基因重组。
答案：B2．应用转基因技术可生产人类所需要的转基因产品，如利用大肠杆菌生产人胰岛素。
下列选项中能说明人胰岛素基因完成了在受体细胞中表达的是 ( ) A．在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因B．在大肠杆菌中检测到人胰岛素基因转录出的mRNAC．在含有四环素的培养基中培养出大肠杆菌D．在大肠杆菌的代谢产物中提取到人胰岛素解析：基因表达的标志是合成了相应的蛋白质或表现出相应的性状，故能说明人胰岛素基因完成了在受体细胞中表达的是在大肠杆菌的代谢产物中提取到人胰岛素。
答案：D3．(2012·南京联考)某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在，下列说法正确的是 ( ) A．基因a只有导入到马铃薯受精卵中才能表达B．目的基因来自细菌，可以不需要载体直接导入受体细胞C．基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径D．目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞并表达解析：培育转基因植株可以以体细胞或受精卵作为受体细胞；目的基因必须借助载体才能导入受体细胞；目的基因导入成功后，不抑制细胞原有的代谢途径。
答案：D4．某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只是其热稳定性较差，进入人体后容易失效。
现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物消化不良，最佳方案是 ( ) A．替换此酶中的少数氨基酸，以改善其功能B．将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶C．重新设计与创造一种蛋白酶D．减少此酶在片剂中的含量解析：蛋白质的结构包括一级结构和空间结构，一级结构是指组成蛋白质的氨基酸的种类、数量、排列顺序，蛋白质的功能是由一级结构和空间结构共同决定的，特别是空间结构与蛋白质的功能关系更密切。
2021-4-29 20XX年复习资料教学复习资料班级：科目：第35讲基因工程1.(2019·湖北七市教科研协作体一模)基因工程是从分子水平对基因进行操作，从而实现人们定向改造生物，得到人们所需要的生物性状或生物产品的技术。
目的基因的获取是基因工程的第一步，常见的方法是构建基因组文库。
请分析并回答下列问题：(1)构建基因组文库的一般步骤：①提取某种生物体内的____________________________，用适当的限制酶处理，得到一定范围大小的DNA片段；②DNA片段分别与载体结合，得到重组载体；③将重组载体导入________的群体中储存，基因组文库构建完成。
(2)与基因组文库相比，cDNA文库的基因数相对要少。
其原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(3)载体在与DNA片段结合前，需要使用同种的限制酶处理。
其目的是________________________________________________________________________。
(4)受体菌被导入重组DNA分子之前，常用________处理，提高导入的成功率。
答案(1)全部DNA或全部基因受体菌(2)cDNA文库只能收集到某生物发育到某时期已发生转录的基因，而基因组文库能收集到该生物的全部基因(3)获得与DNA片段相同的黏性末端(4)Ca2＋2．下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列问题。
(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，那么在①过程中，应用限制酶________切割质粒，用限制酶________切割抗虫基因。
2021年高考生物一轮复习课时跟踪检测（三十五）基因工程新人教版选修3一、选择题1．(xx·重庆高考)下面为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述，正确的是( )A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异2．下列有关基因工程的说法正确的是( )A．如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同B．一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止密码子和标记基因C．目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化D．将目的基因导入植物细胞和动物细胞的常用方法是显微注射法3．下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(箭头表示切点，切出的断面为黏性末端)。
相关叙述错误的是( )限制酶1：——↓GATC——限制酶2：——CCGC↓GG——限制酶3：——G↓GATCC——A．不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的专一性B．限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对C．限制酶1和酶3剪出的黏性末端相同D．能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶24．科学家采用基因工程技术将矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因a转移到玫瑰中，以培育蓝玫瑰，下列操作正确的是( )A．利用DNA分子杂交技术从矮牵牛的基因文库中获取基因aB．用氯化钙溶液处理玫瑰叶肉细胞，使其处于感受态C．用含四环素的培养基筛选转基因玫瑰细胞D．将基因a导入玫瑰细胞液泡中，防止其经花粉进入野生玫瑰5．草甘膦是一种可以杀灭多种植物(包括农作物)的除草剂。
草甘膦杀死植物的原理在于能够破坏植物叶绿体或质体中的EPSPS合成酶。
通过转基因的方法，让农作物产生更多的EPSPS酶，就能抵抗草甘膦，从而让农作物不被草甘膦杀死。
2021高三统考人教生物一轮（经典版）课时作业：选修3第10单元第36讲细胞工程含解析课时作业1.（2019·广东深圳高中模拟）利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,技术人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程如下图。
据图回答下列问题:（1）该过程用到的细胞工程技术有________________和________________。
（2）过程①所需的酶是________________，过程②PEG的作用是________________，经过②操作后,需筛选出融合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________________.原生质体经过细胞壁再生,进而分裂和脱分化形成________.(4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的________；将杂种植株栽培在含有________的环境中,可筛选出具有高抗性的杂种植株。
答案（1)植物体细胞杂交植物组织培养(2)纤维素酶和果胶酶促进原生质体的融合(3)保持原生质体完整性愈伤组织(4）形态和数目黑腐病菌解析（1)图中先去掉两种植物细胞的细胞壁，然后诱导融合获得杂种细胞，再通过植物组织培养获得杂种植株,该过程是植物体细胞杂交.(2)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，可采用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁；聚乙二醇(PEG）的作用是促进原生质体融合。
（3)去掉细胞壁后获得的原生质体需要放在适宜浓度的甘露醇溶液中，保持原生质体完整性，避免失水或吸水造成细胞损伤；在植物组织培养中，细胞经过脱分化形成愈伤组织。
姓名，年级：时间：选修3 现代生物科技专题第十单元现代生物科技专题第35讲基因工程[考纲明细] 1。
基因工程的诞生(Ⅰ） 2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ） 3.基因工程的应用（Ⅱ） 4.蛋白质工程(Ⅰ) 5.实验：DNA的粗提取与鉴定知识自主梳理一基因工程的概念及基本工具1．基因工程概念基因工程的别名基因拼接技术或错误!DNA重组技术操作环境生物体外操作对象错误!基因操作原理错误!基因重组操作水平错误!DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达目的创造出更符合人们需要的错误!生物类型和生物产品优点克服远缘杂交不亲和障碍，错误!定向改造生物的遗传性状（1)限制性核酸内切酶（简称：错误!限制酶）①本质：蛋白质。
②来源：主要是从错误!原核生物中分离纯化出来的.③作用：识别双链DNA分子的某种特定的错误!核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的错误!磷酸二酯键断开。
④结果：产生错误!黏性末端或错误!平末端。
例：如下图所示，Eco RⅠ限制酶识别的碱基序列是错误!-GAATTC—，切割位点在错误!G和A之间；SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是错误!—CCCGGG—，切割位点在错误!C和G之间;说明限制酶具有错误!特异性。
限制酶为何不切割自身DNA?提示限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别一种特定的碱基序列，并在特定的位点上进行切割。
限制酶不切割自身DNA的原因是自身DNA中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰.(2）DNA连接酶①作用:将限制酶切割下来的DNA片段错误!拼接成新的DNA分子。
②类型常用类型E·coli DNA连接酶T4DNA连接酶来源21大肠杆菌T4噬菌体功能只“缝合”错误!黏性末端“缝合”错误!黏性末端和平末端结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的错误!磷酸二酯键③DNA连接酶和限制酶的关系（3)载体①载体的作用：携带外源DNA片段进入受体细胞.②常用载体:错误!质粒。
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课时考点训练1．（2013年高考安徽卷)下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。
下列叙述正确的是( )A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目B．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置2．（2012年高考新课标全国卷)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。
课后作业1．如图表示蝴蝶兰芽尖通过无菌操作，接入试管后，在必然条件下形成试管苗的培育进程。
请回答：(1)组织培育利用的原理是________________。
要求无菌操作的目的是_____________________________________________________________________。
(2)A→B进程代表________。
在愈伤组织形成进程中必需从培育基中取得水、________和________等营养物质，现在它的新陈代谢类型是________。
(3)再分化时，除必要的营养供给和激素调剂外，还必需给光照，缘故是__________________________。
(4)要增进芽尖组织细胞割裂和生长，培育基中应有生长素和________两类植物激素。
答案(1)植物细胞的全能性避免杂菌与培育物竞争营养及产生有毒代谢产物阻碍培育物生长(2)脱分化无机盐小分子有机物异养需氧型(3)叶绿素的形成需要光照(4)细胞割裂素解析(1)植物组织培育的原理是植物细胞的全能性；培育进程中必需无菌操作，目的是避免杂菌与培育物竞争营养及产生有毒代谢产物阻碍培育物生长。
(2)图中A→B表示脱分化进程；愈伤组织细胞没有叶绿体，不能进行光合作用，其代谢类型是异养需氧型，必需从培育基中取得水、无机盐和小分子有机物等营养物质。
(3)B→C表示再分化进程，该进程中叶绿素的合成需要光照。
(4)培育基中必需加入细胞割裂素和生长素两种植物激素，以增进芽尖组织细胞割裂和生长。
2．(2018·吉林实验中学一模)科学家利用番茄(2N)和马铃薯(4N)利用如图技术取得“番茄—马铃薯”植株，请回答以下问题：(1)取得a、b所选用的酶为______________，c和d的名称依次是__________、________。
(2)图示技术名称是__________________；由d培育成植株的进程运用的技术手腕是________________，其依据的原理是____________________。
2021高三统考人教生物一轮（经典版）课时作业：选修3第10单元第35讲基因工程含解析课时作业1.（2019·湖北七市教科研协作体一模）基因工程是从分子水平对基因进行操作，从而实现人们定向改造生物，得到人们所需要的生物性状或生物产品的技术。
目的基因的获取是基因工程的第一步,常见的方法是构建基因组文库。
请分析并回答下列问题：（1)构建基因组文库的一般步骤:①提取某种生物体内的____________________________，用适当的限制酶处理，得到一定范围大小的DNA片段；②DNA片段分别与载体结合,得到重组载体；③将重组载体导入________的群体中储存，基因组文库构建完成。
（2）与基因组文库相比，cDNA文库的基因数相对要少。
其原因是________________________________________________________ _____________________________________________________________________ ___________________.(3）载体在与DNA片段结合前，需要使用同种的限制酶处理。
其目的是________________________________________________________ ________________。
（4）受体菌被导入重组DNA分子之前,常用________处理，提高导入的成功率。
答案(1）全部DNA或全部基因受体菌（2）cDNA文库只能收集到某生物发育到某时期已发生转录的基因，而基因组文库能收集到该生物的全部基因（3）获得与DNA片段相同的黏性末端（4）Ca2＋2．下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列问题。
（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC-,那么在①过程中，应用限制酶________切割质粒,用限制酶________切割抗虫基因。
①过程在________（填“体内”或“体外”)进行。
（2）通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有________的培养基上，若大肠杆菌能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。
然后将能够在含有四环素的培养基上生长的大肠杆菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，如果大肠杆菌不能生长说明________________________________.（3）重组质粒导入大肠杆菌的目的是________________________________________________________ ________________。
（4）⑤过程所用技术称为________，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有________________________________________________________ ________________。
答案（1)ⅡⅠ(Ⅰ和Ⅱ）体外(2)四环素导入大肠杆菌的是重组质粒（3)大量复制目的基因(抗虫基因）（4）植物组织培养发育成完整个体的全部遗传物质解析（1)由图中目的基因片段两端的碱基序列可知，限制酶Ⅰ可以切割目的基因两端，限制酶Ⅱ能切割右端,故用酶Ⅰ(Ⅰ和Ⅱ）切割可以获得目的基因，质粒上的两个酶切位点,分别在两个抗性基因上，用酶Ⅰ切割,两个抗性基因全被破坏，用酶Ⅱ切割可保留一个四环素抗性基因。
(2）根据重组质粒与普通质粒上抗性基因的种类可知,如果成功导入质粒,则大肠杆菌可以在含四环素的培养基上生长，在含氨苄青霉素的培养基上不能生长,据此可筛选含有重组质粒的大肠杆菌。
（4)⑤是将携带抗虫基因的根细胞培养成植株的过程，该过程为植物组织培养,该技术的理论基础是植物细胞具有全能性，其根本原因是植物细胞具有发育成完整个体的全部遗传物质。
3．(2018·广东佛山二模）油菜籽中蛋白质和油脂的相对含量与酶1和酶2对共同底物丙酮酸的竞争有关。
酶1促进蛋白质的合成，酶2促进油脂的合成.通过生物工程技术对油菜进行改造，以得到含有基因A的油菜,流程图如下.请据图作答：(1）上述改造过程中运用的生物工程技术是____________________。
（2)通过__________、__________或人工化学合成等方法，都可获取目的基因A。
过程①中的处理方法为__________。
(3）过程④中要防止杂菌污染的原因是________________________________________。
通过过程④得到的油菜植株中，所有细胞________（填“一定”“不一定”或“一定不”）含有基因A。
（4)已知转录时基因A的模板链与酶1基因的模板链互补。
相对普通油菜，含基因A的油菜籽粒油脂含量显著提高,请分析其机理：________________________________________________________ ________________。
答案（1)基因工程、植物组织培养（2)从基因文库中获取利用PCR技术扩增Ca2＋处理法(3）杂菌会竞争培养基中的营养物质，还可能产生有毒有害物质不一定（4)基因A转录的mRNA与酶1基因转录的mRNA互补,阻碍了酶1基因的mRNA翻译，降低了酶1含量，酶2对丙酮酸的竞争增强，促进了油脂合成解析（1)分析图可知，把外源基因A导入了油菜细胞，用到了基因工程技术。
要把油菜的下胚轴细胞培养成油菜植株，还需要植物组织培养技术。
(2)基因工程技术首先要获取目的基因，目前最常用的方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，也可以用化学方法直接人工合成。
将基因导入微生物细胞时，需要用Ca2＋处理法，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态.（3）过程④是愈伤组织再分化形成植物体的过程，在此过程中，需要防止杂菌污染，否则杂菌会竞争培养基中的营养物质，还可能产生有毒有害物质，导致油菜幼苗的生长发育受到影响。
将目的基因导入受体细胞时，含有质粒和重组质粒的农杆菌都可以在选择培养基中生存，并且不是所有的植物细胞都能成功导入农杆菌，因此所有细胞不一定含有基因A。
（4）已知转录时基因A的模板链与酶1基因的模板链互补，所以基因A转录的mRNA与酶1基因转录的mRNA互补，二者相互结合阻碍了酶1基因的mRNA翻译，降低了酶1含量，酶2对丙酮酸的竞争增强，促进了油脂合成，因此相对普通油菜，含基因A的油菜籽粒油脂含量显著提高。
4．PCR技术是分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图所示），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。
（1)PCR的全称是________，94 ℃高温使DNA双链打开，这一步是打开________键,称为________。
而这一过程在细胞内是通过________酶实现的.(2）当温度降低时,引物与模板________端结合，在________的作用下，DNA单链沿模板延伸，此过程中原料是________，遵循的原则是________。
(3)PCR技术的必要条件除模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即液体环境、适宜的________和________，前者由PCR仪自动调控，后者则靠________来维持.（4)DNA的复制需要引物，其主要原因是__________________。
引物的实质是________，若将1个DNA分子拷贝10次，则需要在缓冲溶液中至少加入________个引物.答案（1)多聚酶链式反应氢变性解旋（2)3′热稳定DNA聚合酶dNTP碱基互补配对原则（3)温度pH缓冲液（4）DNA的复制不能从头开始，DNA聚合酶只能从引物的3′端延伸DNA链单链RNA或者单链DNA分子211－2解析打开DNA双链需破坏碱基对间的氢键；引物的游离端为5′端，即合成DNA时从新链的5′→3′端延伸，故引物需与模板的3′端结合；PCR所用液体环境需保障适宜的温度和pH，其pH可借助缓冲液维持；DNA复制不能从头开始,DNA聚合酶只能从引物的3′端延伸DNA链，故必须提供引物。
引物的实质是单链RNA或者单链DNA分子。
在DNA分子扩增时，需要2种引物，由于新合成的链都需要引物作为复制的起点，故所需的引物数目等于新合成的DNA链的数目，即2×210－2＝211－2.5．(2019·河南濮阳模拟）中国科研人员首次将与Fib－H基因类似的人工丝蛋白基因,导入到被敲除Fib－H基因的蚕卵体内，意味着对蚕卵的基因改造获得成功.当它们长大后，吐出的丝中就含有人工合成丝蛋白。
通过这种技术还可以让家蚕在吐丝的同时，按照实际需要吐出其他蛋白。
含有人工合成丝蛋白的蚕茧，能发出绿色荧光，比正常的蚕茧更加轻薄。
请回答下列问题：（1)获得人工合成蚕蛋白是通过________工程，对________进行改造，最终合成人工丝蛋白,以满足人类生产和生活的需求。
与基因工程相比较，蛋白质工程产物具备的特点是______________________。
基因敲除是一种特殊的基因重组技术，即将外源目的基因导入细胞从而干扰该细胞内某一基因的功能。
将目的基因导入家蚕卵细胞的方法是________，此处蚕卵是指蚕的________。
(2)将人工丝蛋白基因导入蚕卵体内之前，需要进行的核心步骤是____________，其目的是使该基因在蚕卵中__________________，并且可以遗传给下一代，同时，使其能够表达和发挥作用.(3)绿色荧光蛋白基因可以作为________,用于鉴别和筛选蚕卵中是否含有人工丝蛋白基因.答案(1)蛋白质蚕丝蛋白基因可以生产自然界不存在的蛋白质显微注射法受精卵(2）构建基因表达载体稳定存在（3）标记基因解析(1)蛋白质工程的概念：“指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求”。
将目的基因导入动物细胞常用的方法——显微注射法，受体细胞为受精卵。
6．科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。
如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点.请分析回答下列问题：（1)抗盐基因一般是与调节________相关的基因.(2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是________________________________。
图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用______________________酶对外源DNA、质粒进行切割。
