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一、实验目的1. 了解肠道细菌的生理生化特性。
2. 掌握肠道细菌生化实验的基本原理和方法。
3. 通过实验，鉴别肠道细菌的种类。
二、实验原理肠道细菌生化实验是通过观察细菌对特定底物的代谢反应，如糖类、蛋白质、脂肪等的分解能力，以及产生某些特定代谢产物的能力，来鉴别细菌种类的一种方法。
实验中常用的生化反应包括糖发酵实验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。
三、实验材料1. 菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌等。
2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、吲哚试剂、甲基红试剂、V-P试剂等。
3. 仪器：酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管等。
四、实验方法1. 糖发酵实验：将待测菌接种于糖发酵培养基中，37℃恒温培养24小时，观察菌落周围是否出现红色圈，红色圈表示该菌能够发酵该糖类。
2. 吲哚试验：将待测菌接种于蛋白胨水培养基中，37℃恒温培养24小时，加入吲哚试剂，观察是否产生红色沉淀。
3. 甲基红试验：将待测菌接种于蛋白胨水培养基中，37℃恒温培养24小时，加入甲基红试剂，观察培养基颜色变化。
4. V-P试验：将待测菌接种于V-P试剂中，37℃恒温培养24小时，观察是否产生红色沉淀。
五、实验结果与分析1. 糖发酵实验：大肠杆菌发酵葡萄糖，产酸产气；产气肠杆菌发酵乳糖，产酸产气；普通变形杆菌发酵葡萄糖，产酸产气；枯草芽孢杆菌不发酵葡萄糖。
2. 吲哚试验：大肠杆菌产生吲哚，呈阳性；产气肠杆菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌不产生吲哚，呈阴性。
3. 甲基红试验：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性。
4. V-P试验：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性。
根据实验结果，可以初步判断待测菌为大肠杆菌。
六、实验结论通过肠道细菌生化实验，我们掌握了肠道细菌生化实验的基本原理和方法，成功鉴别了待测菌为大肠杆菌。
一、实验目的1. 掌握肠道杆菌的基本生物学特性。
2. 学习并实践肠道杆菌的分离、培养和鉴定方法。
3. 了解肠道杆菌与人类疾病的关系。
二、实验原理肠道杆菌是一类革兰氏阴性菌，广泛分布于人和动物的肠道中。
其中，部分肠道杆菌具有致病性，可引起人类和动物的各种疾病，如腹泻、尿路感染、败血症等。
本实验通过分离、培养和鉴定肠道杆菌，了解其生物学特性，并探讨其与人类疾病的关系。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：粪便标本、普通琼脂平板、伊红美蓝琼脂平板、麦康凯琼脂平板、双糖铁琼脂平板、生化试剂、血清等。
2. 实验仪器：高压灭菌锅、恒温培养箱、显微镜、接种环、酒精灯、无菌操作台等。
四、实验方法1. 标本采集与处理：取粪便标本，用无菌生理盐水稀释，制成均匀的悬液。
2. 分离培养：将稀释后的悬液接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 菌落观察与挑选：观察菌落特征，挑选典型的菌落进行进一步鉴定。
4. 生化鉴定：对挑选的菌落进行革兰氏染色、氧化酶试验、触酶试验、动力试验、发酵试验、尿素酶试验等生化试验。
5. 药敏试验：对分离得到的疑似致病菌进行药敏试验，了解其对抗生素的敏感性。
五、实验结果1. 菌落观察：麦康凯琼脂平板上出现红色菌落，伊红美蓝琼脂平板上出现黑色菌落。
2. 生化鉴定：革兰氏染色为阴性，氧化酶试验阴性，触酶试验阳性，动力试验阳性，发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖，不发酵蔗糖、乳糖，尿素酶试验阴性。
3. 药敏试验：对氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素等抗生素敏感。
六、实验结论根据实验结果，分离得到的菌落为革兰氏阴性菌，具有动力，发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖，不发酵蔗糖、乳糖，对氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素等抗生素敏感。
结合临床表现，推测该菌为肠道致病菌，可能引起人类腹泻等疾病。
七、实验讨论1. 肠道杆菌的分离与鉴定是诊断肠道感染的重要手段。
本实验通过分离、培养和鉴定肠道杆菌，掌握了其生物学特性，为临床诊断提供了依据。
一、实验目的1. 了解肠道细菌的种类及其生理生化特性。
2. 掌握肠道细菌检测的基本原理和方法。
3. 通过实验操作，学会使用微生物学实验技术检测肠道细菌。
二、实验原理肠道细菌是人体肠道中正常寄居的一类微生物，它们与人体健康密切相关。
检测肠道细菌的种类和数量，有助于了解肠道菌群的平衡状态，对于预防和治疗相关疾病具有重要意义。
本实验采用平板计数法检测肠道细菌。
该方法基于微生物在特定培养基上生长的规律，通过计算在一定时间内生长出的菌落数量，估算样品中微生物的数量。
三、实验材料与仪器材料：1. 肠道细菌样品2. LB培养基3. 琼脂4. 蒸馏水5. 酵母提取物6. NaCl7. pH计8. 移液管9. 培养皿10. 灭菌锅11. 恒温培养箱仪器：1. 电子天平2. 烧杯3. 试管4. 玻璃棒5. 紫外线灯四、实验步骤1. 样品处理：将肠道细菌样品用无菌生理盐水进行稀释，制备成不同浓度的样品。
2. 制备培养基：称取适量的LB培养基粉末，加入适量的蒸馏水，加热溶解，调节pH至7.2-7.6，冷却后加入琼脂，熔化后倒入培养皿中，待凝固。
3. 接种：用无菌移液管吸取一定量的样品，滴加到培养皿中，用无菌玻璃棒进行涂布。
4. 培养：将培养皿放入恒温培养箱中，培养24-48小时。
5. 计数：计算每个培养皿中生长出的菌落数量，根据稀释倍数和接种量，计算样品中细菌的数量。
五、实验结果与分析1. 菌落特征：通过观察培养皿中生长出的菌落，可以初步判断肠道细菌的种类。
例如，金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，表面光滑；大肠杆菌菌落呈无色，表面光滑。
2. 细菌数量：通过平板计数法，可以计算出样品中细菌的数量。
本实验中，样品中细菌的数量为10^8 CFU/mL。
六、实验结论本实验成功检测了肠道细菌的种类和数量，验证了平板计数法的有效性。
实验结果表明，肠道细菌的种类繁多，数量庞大，对人体健康具有重要意义。
七、实验讨论1. 本实验中，肠道细菌的种类较多，可能与样品来源、环境等因素有关。
一、实验背景肠道杆菌是一类广泛存在于人和动物肠道内的革兰氏阴性细菌，包括大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等。
这些细菌在人体肠道中发挥重要作用，维持肠道菌群的平衡。
然而，某些肠道杆菌也可能导致疾病，如肠道感染、腹泻等。
本实验旨在通过一系列实验操作，对肠道杆菌进行分离、鉴定和生化特性分析。
二、实验目的1. 掌握肠道杆菌的分离、纯化和培养方法。
2. 了解肠道杆菌的形态特征和生化特性。
3. 学会使用微生物学技术对肠道杆菌进行鉴定。
4. 分析肠道杆菌的致病性及其预防措施。
三、实验材料1. 实验菌株：大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等。
2. 培养基：营养肉汤、麦康凯琼脂、SS琼脂、伊红美蓝琼脂等。
3. 试剂：革兰氏染色液、生化试剂、抗生素等。
4. 仪器：高压灭菌锅、培养箱、显微镜、移液器、接种环等。
四、实验方法1. 菌株分离与纯化（1）取适量粪便样品，加入生理盐水稀释，涂布于麦康凯琼脂平板上。
（2）将平板置于37℃培养箱中培养18-24小时，观察菌落生长情况。
（3）挑取典型菌落，接种于营养肉汤中，37℃培养过夜。
（4）将过夜培养物涂布于SS琼脂平板上，37℃培养18-24小时，观察菌落生长情况。
2. 形态观察与革兰氏染色（1）挑取单菌落，涂布于载玻片上。
（2）滴加革兰氏染色液，染色3-5分钟。
（3）水洗，滴加碘液，染色1分钟。
（4）水洗，滴加酒精脱色，染色30秒。
（5）水洗，自然干燥后观察。
3. 生化特性分析（1）根据菌落特征，挑取疑似菌株，接种于各种生化反应管中。
（2）37℃培养18-24小时，观察结果。
4. 致病性分析（1）挑取疑似致病菌株，接种于小鼠体内，观察小鼠的反应。
（2）分析菌株的致病性。
五、实验结果1. 菌株分离与纯化成功分离出大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等菌株。
2. 形态观察与革兰氏染色大肠杆菌为革兰氏阴性短杆菌，呈双链排列；沙门氏菌为革兰氏阴性短杆菌，呈单个或成对排列；志贺氏菌为革兰氏阴性短杆菌，呈单个排列。
肠道细菌的实验报告引言肠道细菌是人体消化道中存在的微生物，对人体健康和免疫功能具有重要作用。
本实验旨在通过培养和研究肠道细菌，了解其特性和影响因素，为进一步研究肠道健康提供科学依据。
实验方法实验材料1. 肠道细菌样本（人体粪便样本）2. 营养琼脂培养基3. 石蜡瓶4. 培养皿5. 无菌试管、噻唑蓝试剂6. 实验室标准设备和仪器实验步骤1. 用无菌试管采集肠道细菌样本，并在无菌条件下将其转移到石蜡瓶中。
2. 在培养皿中加入营养琼脂培养基，石蜡瓶中的肠道细菌样本均匀涂抹在培养皿上。
3. 将培养皿置于恒温培养箱中，以37摄氏度培养24小时。
4. 观察培养皿中的细菌生长情况，并记录结果。
实验结果经过24小时培养，我们观察到培养皿中出现了多种不同形态和颜色的细菌。
其中，主要观察到以下几种常见肠道细菌：1. 大肠杆菌（Escherichia coli）：呈现圆形、鲜亮的橙红色菌落。
2. 肠球菌（Enterococcus faecalis）：呈现小形或中形、呈黄色或乳白色菌落。
3. 梭状芽胞杆菌（Clostridium difficile）：呈现长条形的白色菌落。
4. 腺病毒（Adenovirus）：呈现透明的圆形菌落。
讨论与分析肠道细菌是人体肠道内的共生微生物，在人体的消化和免疫功能中起着重要作用。
此次实验观察到的肠道细菌具有多样性，这与人体消化道中存在的多种微生物种类相符。
其中，大肠杆菌和肠球菌是人体肠道中最常见的细菌，其在人体内的生存和繁殖与人体健康密切相关。
肠道细菌的种类和数量对人体健康有重要影响。
正常肠道菌群的稳定和平衡与人体的免疫功能、营养代谢和防病能力密切相关。
一些研究发现，肠道细菌的失调可能与多种疾病的发生和发展有关，如肠道炎症、肠道肿瘤和肠易激综合征等。
结论通过这次实验，我们成功培养出了肠道细菌样本，并观察到了不同菌种的生长情况。
肠道细菌的多样性和数量对人体健康具有重要影响，进一步研究肠道菌群的组成和功能，有助于理解人体免疫和消化系统的运作机制，为肠道健康的保护和促进提供科学依据。
一、实验目的1. 了解肠道细菌的基本特征及其在人体健康中的作用。
2. 掌握肠道细菌分离、培养和鉴定的基本方法。
3. 学会使用微生物学实验技能，提高实验操作能力。
二、实验原理肠道细菌是一类广泛存在于人体肠道内的微生物，它们在维持人体健康、促进营养吸收、抑制有害菌生长等方面具有重要作用。
本实验通过分离、培养和鉴定肠道细菌，了解其种类和数量，为后续研究肠道细菌与人体健康的关系提供基础数据。
三、实验材料1. 实验仪器：恒温培养箱、高压灭菌锅、无菌操作台、接种环、移液枪、试管、试管架、培养皿、酒精灯等。
2. 实验试剂：肠道细菌分离培养基、营养肉汤、生理盐水、乳酸菌鉴定试剂、革兰氏染色试剂等。
3. 实验样品：人体粪便样本。
四、实验方法1. 样本处理：将粪便样本用生理盐水稀释，制成10^-1、10^-2、10^-3、10^-4四个浓度的稀释液。
2. 分离培养：将稀释液分别接种于肠道细菌分离培养基，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 菌落计数：选取生长良好的菌落，进行革兰氏染色，观察细菌形态，并用计数板计数。
4. 鉴定：根据革兰氏染色结果和菌落形态特征，对分离得到的细菌进行初步鉴定。
五、实验结果1. 菌落计数：在10^-2、10^-3、10^-4浓度稀释液中发现菌落生长，菌落数量分别为3.2×10^8、2.5×10^7、1.8×10^6。
2. 革兰氏染色结果：革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
3. 鉴定结果：根据菌落形态特征和革兰氏染色结果，初步鉴定分离得到的细菌为乳酸菌、大肠杆菌和双歧杆菌。
六、实验讨论1. 肠道细菌在人体健康中具有重要作用，如维持肠道菌群平衡、促进营养吸收、抑制有害菌生长等。
2. 本实验通过分离、培养和鉴定肠道细菌，初步了解了肠道细菌的种类和数量。
3. 在实验过程中，应注意无菌操作，避免污染。
4. 本实验结果可作为后续研究肠道细菌与人体健康关系的参考数据。
肠道致病菌检验鉴定相关体会分析作者：骆金莲来源：《健康导报·医药版》2014年第02期[摘要]目的：找到临床肠道致病菌检验鉴定方面存在的问题，确保医院正确输出肠道致病菌检验鉴定结果，提高肠道致病菌检验质量。
方法：根据自身检验工作经验及广泛调查临床肠道致病菌检验中存在的常见问题，并针对问题根源提出正确的处理方案及建议。
结果与结论：临床肠道致病茵检验与鉴定中存在的问题严重影响肠道致病菌感染的检验质量，必须提高日常检验质量水平才能符合临床要求。
[关键词] 肠道致病菌；检验鉴定；检验质量目前，最常用的肠道致病菌检测鉴定的方法主要有三种：传统的分离培养鉴定、酶联免疫吸附法（ELISA）和聚合酶链式反应（PCR）。
传统的分离培养鉴定法是首先将细菌分离培养后通过菌落计数和菌落形态、染色特征、生化反应等方法对细菌进行鉴定，该方法是细菌鉴定的金标准方法，但是其耗时费力。
ELISA 方法是基于抗原抗体反应的免疫学检测，与传统的分离培养鉴定方法相比较，缩短了检测时间，但是仍然需要细菌培养这一步，至少需要 24-48 小时才能得出准确的结果，且该方法灵敏度较低难以满足低浓度细菌的检测。
PCR 技术与上述两种方法相比较，具有显著的优点是较高的灵敏度，但是 PCR 对检验鉴定操作者的要求较高。
下面就肠道致病菌检测鉴定方面常见问题进行分析并提出几点建议：1.各种检验鉴定方法中的常见问题：在临床对肠道致病菌的检验中，经常出现假阴性或假阳性的结果。
传统培养法中病原微生物检测主要依据形态特征和生理性状，需要进行细菌分离，培养及一系列生化反应，耗时长，操作烦琐，对检验人员素质要求较高，检验人员经常不太重视常规标本的处理，在检验器材的灭菌不到位或检验人员操作不当容易造成杂菌污染，由于菌株不纯，其在鉴定过程中同时表现出两种以上细菌的生化特征，造成结果复杂和不可重复性。
另外，肠道致病菌鉴定中，我们最常采用的方法是生化检测数值鉴定，而生化指标经常会受到许多偶然因素的干扰而对结果造成影响。
实验时间：2023年10月15日实验地点：XX医学院微生物实验室实验人员：李同学、张同学、王同学实验目的：通过实验观察和分析肠道感染细菌的生长特性，鉴定主要致病菌，并了解其生物学特性。
一、实验材料与仪器材料：1. 标本：疑似肠道感染患者粪便样本2. 培养基：麦康凯琼脂、SS琼脂、血琼脂、营养肉汤3. 试剂：革兰氏染色液、氧化酶试剂、靛基质试剂、甲基红试剂、V-P试剂4. 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、显微镜、无菌操作台等二、实验方法1. 样本采集：采集疑似肠道感染患者的粪便样本，并进行无菌处理。
2. 初步分离：将处理后的样本接种于麦康凯琼脂、SS琼脂、血琼脂平板，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 纯化：对初步分离出的疑似致病菌进行纯化，选择单菌落进行培养。
4. 形态学观察：在显微镜下观察细菌的形态和排列方式。
5. 革兰氏染色：对纯化后的细菌进行革兰氏染色，观察细菌的革兰氏分类。
6. 生化试验：进行氧化酶试验、靛基质试验、甲基红试验、V-P试验等，进一步鉴定细菌。
7. 致病性试验：对疑似致病菌进行动物感染试验，观察其致病性。
三、实验结果1. 初步分离：在麦康凯琼脂、SS琼脂、血琼脂平板上均分离出疑似致病菌。
2. 纯化：经过纯化后，得到纯培养的疑似致病菌。
3. 形态学观察：在显微镜下观察到细菌呈杆状，排列呈链状。
4. 革兰氏染色：革兰氏染色结果显示，细菌为革兰氏阴性菌。
5. 生化试验：- 氧化酶试验：阳性- 靛基质试验：阳性- 甲基红试验：阳性- V-P试验：阴性6. 致病性试验：动物感染试验结果显示，疑似致病菌具有致病性。
四、讨论与分析1. 通过实验观察和分析，初步鉴定出疑似致病菌为肠道感染细菌，可能为大肠埃希菌、沙门氏菌等。
2. 革兰氏染色和生化试验结果进一步证实了细菌的革兰氏分类和生物学特性。
3. 致病性试验结果显示，疑似致病菌具有致病性，可能引起肠道感染。
五、结论本次实验通过对疑似肠道感染细菌的分离、鉴定和致病性试验，初步鉴定出疑似致病菌为肠道感染细菌，为临床诊断和治疗提供了依据。
肠道杆菌实验论文班级：检验一班实验日期：2013-09-24~30 实验组：第二组指导老师：综合实验报告专业班级：医学检验时间：2013年 9月 24日～9月30日实验名称肠道杆菌指导教师熊亚南一、预习报告1. 实验目的1.1掌握肠道条件致病菌与肠道致病菌的菌落特点。
1.2掌握肠道杆菌的主要生化反应。
1.3掌握肠道杆菌的分离鉴定方法。
1.4掌握粪便标本细菌学检测流程2. 实验基本原理肠道杆菌的细菌为革兰氏阴性菌，大多数有鞭毛，能运动。
少数无鞭毛不能运动，不产生芽孢，需氧或兼性厌氧，在普通培养基上，一般都生长良好，均能发酵葡萄糖产酸或产气，触酶试验阳性，氧化酶试验阴性，还原硝酸盐。
这类细菌是人类和动物肠道中的细菌，有的引起腹泻、肠炎、肠热症和痢疾等。
有的为条件致病菌，有时也可引起身体各个部位的感染。
3. 实验流程图高压灭菌锅试管锥形瓶接种环酒精灯无菌玻片显微镜、载玻片镊子二、实验报告1.材料与方法1.1材料2号菌液双糖铁培养基CB培养基SS培养基基础培养基青霉素庆大霉素氯霉素复方新诺明志贺氏诊断血清沙门氏诊断血清无菌生理盐水、结晶紫染液、卢戈碘液、95%乙醇溶液、稀释石碳酸复红染液、无水乙醇、松柏油1.2方法1.2.1标本分离将菌种用平板划线法，分别接种于CB和SB培养基中，37℃温室培养24小时，进行菌落分离。
操做人：1.2.2 鉴别实验1.2.2.1 双糖铁实验用接种针以无菌操作技术挑取可疑菌落，立即垂直插入培养基中心至接近管底处，再循原路退出到斜面上；接种针自斜面最低处向上划一直线（要求通过试管培养基的中心点），然后再从斜面低处向上轻轻来回作蜿蜒划线；接种完毕，盖好试管塞。
贴上标签纸。
37℃培养18~24小时，取出观察结果并分析，观察结果。
1.2.2.2 Gram stain实验1.2.2.2.1 涂片于洁净无油的载玻片上,加无菌生理盐水一滴,按无菌操作法用接种环取待检标本少许，研入无菌盐水中，使成一个均匀、极薄菌膜，直径在1cm 左右。
以肠道致病菌检测为基础的微生物学综合性实验探索[摘要] 目的:开展微生物学实验教学改革，探讨微生物学实验教学中开设综合性实验的必要性、实施过程及效果评价。
方法：选择生物技术专业2010级本科生作为研究对象，设计肠道致病菌检测的综合性实验，参考中国疾病预防控制中心（cdc）应对突发公共卫生事件微生物检验程序，实施教学改革，由学生自主设计、动手操作、分组讨论并提交实验报告。
结果：通过开设综合性实验，学生巩固了课堂理论知识，掌握了实验操作的基本技能，增强了生物安全意识，并熟悉了肠道致病菌检测的方法和流程。
结论：综合性实验的开设有助于提高学生分析问题、解决问题的能力，对于学生素质的全面提高起到了促进作用。
[关键词] 微生物学实验教学肠道致病菌综合性实验
前言
实验教学在医学教育中占有重要地位，对培养医学生理论联系实际、动手能力、分析解决问题能力、科学思维方法以及严谨的科学精神均具有重要意义，对实现素质教育和创新人才培养目标也有着不可替代的作用[1]。
综合性实验是实验教学创新的一个重要改革, 它是一种需要学生自拟实验方案、查阅参考资料以及提出设计思路和实验步骤, 并在获得的现象或数据的基础上自己概括出实验结论的类科研实验[2]。
微生物学是生物技术专业的一门重要基础课程，实验教学是微生物学教学中的重要组成部分。
改革实验教
学、增加综合性实验、培养学生的科研思维和创新能力是微生物学教学改革的重要课题。
本文以“肠道致病菌检测”这一综合性实验为例，探讨了在生物技术专业微生物学实验教学中开设综合性实验的尝试及效果。
1.微生物学综合性实验开设的必要性
医学是实践性很强的学科，人们对于生命现象和疾病发生机制的研究都是通过实验研究来证明，直至今日，实验仍然是医学研究的基本方法。
因此，在医学教育中，实验教学占有重要的比重，部分学科实验教学比重达到了一半以上。
实验教学效果的高低直接影响到学生对课堂理论知识的理解程度。
在通常经典的教学模式中，实验教学大多数是验证性试验，各个实验项目之间相互独立，缺乏必要的逻辑联系，虽然在一定程度上可以增强学生对课本理论知识的理解，但是实验过程自主性差，不利于学生创新思维的培养和对学科的整体把握。
综合性实验是用3个或者更多的知识点来完成实验过程的教学方式，是比较新颖的教学类型，通过对系统设计的几个实验结果进行综合分析，在较广泛知识理论体系的指导下，得出较全面的结论。
与经典的实验教学方法比较，更能提高学生自主学习的能力，锻炼学生的创新思维，也符合以人为本的教育理念。
综合性实验是目前高等院校实验教学模式改革的一个重要方向，有助于加强学生创新能力的培养。
据国内报道，综合性实验能明显提高学生灵活运用所学知识的能力、在整体思维模式的引导下更容易激发学生发挥主动思考、积极探索的精神，较好的提高学生
的综合分析问题的能力，增强学生的综合素质，取得较好的教学效果[3,4]。
另有同行对微生物学及其它基础课程的综合性实验设置进行过研究，结论是对学生的整体思维能力、实验操作能力、分析问题能力的提高都大有益处[5,6]。
他们所取得的经验，对于其它院校进一步深化实验教学改革也有良好的借鉴作用。
2.实验设计思路
传统的微生物学实验教学中，教师在实验课前就将实验所需仪器、试剂等实验物品准备好，课堂上学生只是按照老师设定的程式来进行模拟和验证。
这种教学方法影响了学生学习主动性的发挥和独立思维能力的培养，其结果是学生尽管在课堂上也进行了相关实验，但是对实验过程无法形成整体的把握，如实验设计、实验标本的采集、实验结果的分析等等，也不会运用所学知识来解决临床和科研中遇到的实际问题，更谈不上创新能力的培养。
我们所开设的肠道致病菌检测不同于以往的验证性试验，其设计思路简述如下：基本过程分为三个阶段，第一阶段由任课教师提出几个开放性的问题，包括肠道致病菌检测时标本该如何采集，有哪些注意事项，怎样选择致病菌检测，哪些实验可以检测致病菌，如何鉴别致病菌与非致病菌等等。
每位学生根据老师提出的问题查阅相关资料，设计相关实验方案。
然后，进行小组讨论，以ppt形式汇报自己的实验方案（包括实验设计的理论依据、实验目的、实验方法、可能遇到的问题及解决办法、预实验结果等内容，并绘制技术路线图）。
之后，师生共同讨论分析，对实验方案进行改进和
修正。
第二阶段，部分学生利用课余时间，进行预实验，以进一步完善实验方案。
第三阶段，在预实验的基础上，确定一条成熟的技术路线，课堂组织全体同学操作。
3.基本实验流程
选取新鲜粪便标本，首先进行分离培养，然后通过生化实验和血清学实验做初步鉴定和进一步鉴定。
3.1 实验材料的准备
组织学生配制30%甘油缓冲盐水；蛋白胨水；葡萄糖蛋白胨水；制备枸橼酸盐培养基、伊红美蓝（emb）培养基、ss培养基、双糖铁培养基、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌诊断血清。
3.2 实验方法
3.2.1 标本采集
采取标本时应注意根据病情和病程选择标本，尽量在未使用抗生素之前，选取粪便脓血或黏液部分。
取材后应立即送检。
如不能及时送检，可将标本保存于30%甘油缓冲盐水中。
3.2.2 分离培养
用接种环挑取少量粪便标本，以分段划线法接种于ss平板或emb 平板，置37℃培养18~24小时，观察平板上的菌落，依据其大小、透明度和颜色等特点，初步识别可疑致病菌菌落和非致病菌菌落。
3.2.3 初步鉴定
将可疑菌落接种于双糖铁培养基中，经37℃培养18~24小时，观察培养基变化。
此方法可以用于鉴别大肠埃希菌、志贺菌和沙门
菌。
通过imvic实验来鉴别大肠埃希菌和产气杆菌。
3.2.4 明确鉴定
利用伤寒沙门菌、痢疾志贺菌诊断血清，采用玻片凝集法明确诊断粪便中致病菌类型。
留取可疑标本，以便将来通过分子生物学方法进行亚型诊断。
4.实验效果评价
课后通过调查问卷的信息反馈表明，本项综合性实验有效调动了学生学习微生物学的积极性和主动性。
通过查阅相关文献，小组自由讨论，制定技术路线，形成实验设计报告，然后预实验，最后根据预实验结果在全班范围内实施教学，这一系列较为完整的过程不但能够促进学生更好的掌握课本所学习的微生物学知识，而且可以培养他们自主学习的能力，培育创新思维和初步的科研能力，同时还锻炼了他们的动手能力和表达能力，学生们普遍感觉受益匪浅。
5.讨论
高科技时代需要大批具有创新能力的高级人才，这就要求我们的高等教育必须从应试教育向素质教育转变。
高等院校培养的人才不仅要有扎实、系统的理论知识，更要具备较强的动手能力和一定的创新能力，因此，必须对传统的教学方法进行必要的改革。
腹泻是临床中经常遇到的症状之一，肠道致病菌感染是常见原因之一。
本实验项目的选取具有一定的代表意义和实际意义，对于学生将来解决工作中遇到的难题有良好的借鉴作用。
并且问题的设
计涉及了微生物学中无菌操作、标本采集、生化实验等等多方面的知识，涵盖面广，可以提高学生综合运用知识的能力。
我们认为最后选定的实验方案有以下三大优点：①对实验仪器和操作技术无过高的要求，可行性强，易于实施；②实验结果稳定，重复性好；③综合性强，能学到多项实验技术。
因此适于在生物技术专业微生物学实验教学中实施。
以上是我们在新增设计综合性实验中的一些方法与体会。
实践证明，设计综合性实验的开展，不仅能够调动学生的学习热情，训练学生的实验操作技能，加深学生对理论知识的理解和掌握，同时本实验更锻炼了学生的动手能力、创新意识、科研能力：整个过程需要学生不断查阅资料，大大提高了学生学习的积极性和主动性，锻炼了学生的动手能力; 在实验过程中,学生们不时遇到问题，解决问题，挖掘了学生们的创新意识；在问题的解决时学生们不仅学会正确的选择方法，又学会了严谨治学的态度；学生亲身感受到从理论到实际应用的全过程，学生们深深的感受到科研就在身边，激发了学生科研兴趣，提高了创新意识。
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