IL-1β促肝星状细胞增殖与JNK_AP-1信号转导通路的关系

JNK信号转导通路在去甲斑蝥素诱导肝癌细胞凋亡中的作用的开题报告一、研究背景和意义肝癌是一种高度恶性的癌症，具有高度的侵袭性和转移性。

传统的治疗方法包括手术切除、放疗和化疗等，但由于肝癌细胞对这些治疗方法的抵抗性增强，因此寻找新的治疗方法变得尤为重要。

近年来，植物生物碱去甲斑蝥素被发现具有一定的抗肿瘤作用。

研究表明，去甲斑蝥素能够诱导肝癌细胞凋亡，但其作用机制尚不完全清楚。

JNK信号转导通路是一种重要的蛋白激酶信号通路，已经被证明在许多细胞中都具有重要的生物学功能。

然而，在肝癌细胞中，JNK信号转导通路的具体作用机制尚未被彻底研究。

因此，本研究旨在探索JNK信号转导通路在去甲斑蝥素诱导肝癌细胞凋亡中的作用，为新型肝癌治疗方法的发展提供理论依据和实验基础。

二、研究内容和方案本研究将使用人类肝癌细胞系HepG2作为研究对象，分别在去甲斑蝥素处理前后分别检测JNK信号通路相关的蛋白质表达量和JNK激活水平，探究JNK信号通路在去甲斑蝥素诱导HepG2细胞凋亡过程中的作用机制。

具体实验方案如下：1. 组织培养和细胞处理人类肝癌细胞系HepG2将在无血清培养条件下培养，并于24小时后使用不同浓度的去甲斑蝥素诱导细胞凋亡。

同时，为了进一步确定JNK 信号通路在去甲斑蝥素诱导HepG2细胞凋亡中的作用，将用JNK通路的抑制剂SP600125处理细胞，作为JNK信号通路的阻遏组，以进行比较分析。

2. 检测蛋白质表达和JNK激活水平使用Western blot法检测去甲斑蝥素处理前后JNK信号通路相关的蛋白质表达如JNK、p-JNK、Bcl-2、Bax等的变化情况。

同时使用荧光染料标记的JNK活性检测试剂盒检测JNK激活水平。

3. 细胞凋亡检测使用Annexin V-FITC/PI双染色法测定HepG2细胞凋亡率，并使用光学显微镜和透射电子显微镜观察细胞形态变化和细胞亚细胞结构的变异。

三、研究预期成果本研究将通过探究JNK信号转导通路在去甲斑蝥素诱导肝癌细胞凋亡中的作用机制，为探索新型肝癌治疗方法提供理论依据。

大黄酸药理作用的新进展郑舟琴【期刊名称】《《重庆医学》》【年(卷),期】2019(048)022【总页数】5页(P3897-3901)【关键词】大黄酸; 药理作用; 进展【作者】郑舟琴【作者单位】南方医科大学南京临床医学院/东部战区总医院内分泌科南京210002【正文语种】中文【中图分类】R961.1大黄酸是一种广泛存在于中草药如大黄、决明子、何首乌、芦荟等中的亲脂性蒽醌类化合物，在中国作为药物使用已超过1 000年。

人们一直都在积极探索其与人类健康相关的药理作用，然而，因其溶解性差、生物利用度低，很大程度上限制了它的临床用途。

随着近几年药物提取、分离技术的提高，大黄酸及其衍生物在临床上已经得到了广泛应用。

本文总结了近几年国内外对大黄酸药理作用的大量研究，对大黄酸的药理特性进行了详细阐述，进一步支持大黄酸在临床上的潜在用途。

1 抗炎作用近来有研究表明大黄酸(5、20 μmol/L)可减少白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α等促炎细胞因子的生成，同时抑制核因子(NF)-κB和核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎症因子途径，显著减少免疫细胞迁移而发挥强大的抗炎作用[1-2]。

此外，大黄酸可显著逆转炎症中活化转录因子6(ATF6)、p66Shc及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基p22PHOX和GP91PHOX表达上调，抑制基质金属蛋白酶(MMP)-2及磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B(pAKT/Akt)比值增加而减轻炎性反应[3]。

内皮细胞黏附分子(ECAM)与炎症诱导的血管并发症密切相关。

研究发现大黄酸可通过减少ECAMs的转录和表达降低炎症引起的血管并发症[4]。

此外，大黄酸衍生物-赖氨大黄酸可显著减少炎性因子的产生并阻断TNF-α/NF-κB信号通路，从而抑制肾脏炎症进展[5]。

研究显示大黄酸能显著降低骨关节炎患者软骨细胞IL-1受体水平，从而有效地抑制软骨细胞中IL-1β的合成及这种细胞因子对软骨的破坏作用[6]。

JNK信号转导通路在黄芩苷诱导肝癌细胞凋亡中的作用周曙;蔡涛;覃兴贵;赵蕾蕾;薛李【期刊名称】《解放军医药杂志》【年(卷),期】2015(027)004【摘要】目的探讨黄芩苷对人肝癌Hep G2细胞生长的抑制作用及其对c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路的影响。

方法 50、100、150μg/ml的黄芩苷分别与人肝癌Hep G2细胞共同培养24、48和72 h,MTT测定细胞生长抑制率;采用Western blotting方法检测黄芩苷处理72 h后Hep G2细胞JNK和p-JNK的表达变化并观察JNK抑制剂对细胞凋亡的影响。

结果黄芩苷对人肝癌Hep G2细胞增殖抑制作用呈时间依赖性,黄芩苷浓度低于100μg/ml其对细胞的抑制作用随浓度升高而增强,超过100μg/ml其对细胞的抑制作用不再增强。

在黄芩苷处理后Hep G2细胞pJNK蛋白表达上调,使用JNK抑制剂后,能阻断JNK蛋白的磷酸化,并且降低黄芩苷诱导细胞凋亡的能力。

结论黄芩苷通过激活JNK信号通路诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡。

【总页数】4页(P20-23)【作者】周曙;蔡涛;覃兴贵;赵蕾蕾;薛李【作者单位】解放军82医院药械科,江苏淮安223001【正文语种】中文【中图分类】R329.25【相关文献】1.JNK信号转导通路在NGF抗6-OHDA诱导PC12细胞凋亡中的作用 [J], 汪军兵;胡景鑫2.Aβ1-40诱导的神经干细胞凋亡中钾通道和JNK信号转导通路的作用 [J], 田嘉莹;田国忠;熊庆华;李梅秀;盛宝英3.JNK 信号转导通路在黄芩苷诱导肝癌细胞凋亡中的作用 [J], 周曙;蔡涛;覃兴贵;赵蕾蕾;薛李4.JNK/SAPK信号转导系统在三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡中的作用 [J], 李航宇;钟鑫平;隋春阳;孔凡民;董明;张浩;刘金钢5.丹参酮ⅡA对人胰腺癌细胞凋亡的诱导作用及其对SAPK/JNK信号转导通路的影响 [J], 王炎;李琦;范忠泽;王忆勤;邱艳艳;靳宝辉;陈星竹;殷佩浩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

丹参素对IL-1 β刺激的大鼠肝星状细胞JNK、NF-κB信号通道的影响吴宗辉;戴立里;余斌斌;李冬【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2009(029)005【摘要】目的观察丹参素对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)氨基末端蛋白激酶(JNK)以及NF-κBP65表达的影响,探讨其抗肝纤维化作用的机制.方法分离大鼠原代HSC,MTT法检测丹参素对细胞的生长抑制,免疫细胞化学法观察Ⅲ型胶原合成,ELISA法观察Ⅲ型胶原分泌.AO/EB荧光染色观察HSC凋亡形态学变化,Annexin-V-FITC/PI联合流式细胞仪检测HSC的凋亡率,Western blotting观察丹参素对IL-1β刺激的HSCs内P-IκBα、NF-κBP65和JNK蛋白的表达.结果和结论丹参素可抑制活化的HSC增殖,降低胶原合成和分泌,促进HSC凋亡,并抑制IL-1β刺激的HSC中JNK的磷酸化及NF-κBp65的表达.【总页数】5页(P914-917,921)【作者】吴宗辉;戴立里;余斌斌;李冬【作者单位】西南大学医院,重庆,400715;重庆医科大学附属第二医院消化科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院消化科,重庆400010;重庆医科大学附属第二医院消化科,重庆400010【正文语种】中文【中图分类】R329.2【相关文献】1.鳖甲煎丸对大鼠肝星状细胞中NF-κB信号通路的影响 [J], 陈冠新;文彬;孙海涛;孙嘉玲;徐薇;安海燕;贺松其2.葛根素对大鼠肝星状细胞生长及NF-κb p65和TGF-β1表达的影响 [J], 雷凯雄;周清平;唐武成;杨莉3.JNK信号通路对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖的影响 [J], 钟显飞;蒋明德;马洪德;曾维政;李小安4.JNK信号通路对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖的影响 [J], 钟显飞;蒋明德;马洪德;曾维政;李小安5.丹参素对转化生长因子β1刺激肝星状细胞信号传导的影响 [J], 郑磊;戴立里因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK信号转导的影
响的开题报告
研究背景：
肝星状细胞是肝脏内的重要细胞类型，具有免疫调节和炎症反应调节的功能。

IL-1β是一种典型的炎症因子，能够激活JNK信号通路，引发细胞炎症反应。

丹参素是从丹参中提取出的一种化合物，具有抗炎、抗氧化等多种生物活性，已被广泛应用于肝病、心脑血管疾病等领域。

本研究旨在探究丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK信号转导的影响。

研究内容：
选取健康的大鼠肝星状细胞，以IL-1β刺激细胞后，用Western blot法检测JNK 信号通路相关蛋白的表达水平，包括p-JNK、JNK、c-Jun、c-Fos等。

同时，用MTT 法检测丹参素在不同浓度下的细胞毒性。

在此基础上，选取不同浓度的丹参素预处理细胞，观察其对JNK信号传导的影响。

最后，利用药理学方法对丹参素的作用机制进行探讨。

预期结果：
预计通过本次实验可以得出以下结论：在IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞中，丹参素可以抑制JNK信号通路的激活，减轻炎症反应的发生。

此外，我们还将研究丹参素对其他信号通路的影响，以更全面地探究丹参素的作用机制。

本研究有望为丹参素的临床应用提供理论基础和科学依据，为临床肝病的治疗提供新思路和新方法。

复方中药益肝康抑制肝星状细胞增殖的作用机制张亚平;姚希贤;刘晓玲;赵霞【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2006(14)13【摘要】目的:探讨活血化瘀复方中药益肝康抑制大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的作用机制.方法:采用IL-1β激活HSC,应用Westernblot检测JNK的活化程度;应用活细胞计数试剂盒-CCK-8检测HSC增殖并观察JNK特异性阻断剂SP600125对IL-1β促HSC增殖的影响.应用凝胶电泳移动抑制法测定AP-1的活性.结果:IL-1β有明显促大鼠HSC增殖作用,IL-1β作用培养的HSC24h后,吸光值明显高于对照组(1.573±0.026vs1.339±0.073,P=0.000);经JNK特异性阻滞剂SP600125预处理后,IL-1β促HSC增殖作用受到抑制,SP600125浓度为10,20及40μmol/L时,吸光值分别为1.427±0.113,0.772±0.093,0.675±0.074,与对照组(1.560±0.110)相比其增殖反应均明显降低(P=0.03;P=0.000;P=0.000);IL-1β可激活大鼠HSCsJNK 信号蛋白,并呈现出一定的时相变化.IL-1β作用HSCs后0,5,15,30,60及120min,JNK活性分别为0.982±0.299,1.501±0.720,2.133±0.882,3.360±0.452,2.181±0.789,1.385±0.3 68.与0(未加IL-1β)相比,15min,30min及60min均有显著差异(P=0.002,P=0.000,P=0.001).益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCsJNK活性(1.610±0.242vs3.360±0.452,P=0.000);益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCsAP-1活性,经益肝康预处理HSCs1h后,AP-1活性明显受到抑制(342.43±85.77vs597.70±83.96,P=0.005).结论:IL-1β可刺激HSC增殖,细胞内JNK信号转导通路参与了IL-1β促HSC增殖作用;益肝康可通过阻滞JNK/AP-1通路,抑制HSC增殖.【总页数】5页(P1272-1276)【关键词】益肝康;JNK/AP-1信号转导通路;白细胞介素-1β;肝星状细胞;增殖【作者】张亚平;姚希贤;刘晓玲;赵霞【作者单位】河北医科大学第二医院消化内科;沧州市中西医结合医院内科【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R289【相关文献】1.益肝康抑制肝星状细胞Ⅰ型胶原合成的作用机制 [J], 姚希贤;张亚平;赵霞2.荔枝核总黄酮抑制人肝星状细胞增殖作用机制的研究 [J], 李彩;林丽馨;肖绪华;刘燕秀;成秋宸;董勇;覃桂金;霍群;卢青3.益肝康药物血清对肝星状细胞丝裂原活化蛋白激酶通路的抑制作用 [J], 王军民;钟燕;徐超;姚希贤4.益肝康及其拆方对肝星状细胞活化增殖及胶原代谢影响的研究 [J], 房澍名;姚冬梅;王军民;姚金峰;姚希贤5.益肝康药物血清对大鼠肝星状细胞胞浆游离钙效应的抑制作用 [J], 王天轶;王军民;王如美;柳继兴;姚希贤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

JNK信号通路在白介素-1β介导人胚肺成纤维细胞活化中的作用张慧;林蓓蓓;张维溪;林立;李昌崇【摘要】目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号转导通路在白细胞介素-1β(IL-1β)介导的人胚肺成纤维细胞(FB)活化中的作用.方法体外培养人胚肺FB,用IL-1β、JNK抑制剂(SP600125)作用于细胞,采用免疫蛋白印迹法(Westernblot)检测细胞JNK/SAPK磷酸化水平和α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达,RT-PCR方法检测纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、纤维连接蛋白(FN)、神经生长因子(NGF)和α-SMA mRNA的相对表达量,ELISA法检测培养上清液中NGF及白细胞介素-6(IL-6)水平.结果在IL-1β刺激下,人胚肺FB中α-SMA及磷酸化JNK蛋白表达显著高于对照组,同时PAI-1、FN、NGF和α-SMA mRNA的表达及培养上清液中NGF、IL-6水平均明显高于对照组(P ＜0.05);SP600125显著抑制IL-1β诱导的上述指标表达增加(P＜0.05).结论 IL-1β促进人胚肺FB活化及细胞外基质聚集,JNK信号转导通路参与这一过程.%Objective To explore the role of c-Jun N-terminal kinase (JNK) signal pathway on interleukin-1β (IL-1β) induced activation of human embryonic lung fibroblasts (FB).Methods The human embryonic lung fibroblasts were cultured in vitro and treated with IL-βor JNK inhibitorSP600125.The expression of phosphorylated JNK (p-JNK) and α-smooth muscle actin (α-SMA) were examined by Western blot,and the plasminogen activator inhibitor of endothelial cell type (PAI-1),fibrinogeu (FN),nerve growth factor (NGF) and α-SMA mRNA were detected by RT-PCR.In addition,the concentrations of NGF and interleukin-6 (IL-6) levels in the culture supernatant were measured by enzyme-linked immunosorbentassay (ELISA).Results We found that under the treatment of IL-1 β,the JNK signal pathway in human lung fibroblast was activated.The expression of p-JNK increased significantly compared with the control group (P ＜0.05).mRNA expressions of PAI-1,FN,NGF,α-SMA,and the concentrations of NGF and IL-6 in the culture supernatant were all increased in the IL-1β treated groups (P ＜ 0.05).However,the SP600125 reversed the effect of IL-1β on the expression of p-JNK,oα-SMA,FN,NGF,and IL-6 mentioned above.Conclusion These findings provided evidence that JNK signal pathway may play an important role in the IL-1β induced human lung fibroblast activation and extracellular matrix synthesis.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2017(046)011【总页数】5页(P44-48)【关键词】白细胞介素-1β;JNK信号通路;人胚肺成纤维细胞;细胞外基质【作者】张慧;林蓓蓓;张维溪;林立;李昌崇【作者单位】325027 温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科【正文语种】中文【中图分类】R725.6气道炎症和气道重塑是支气管哮喘(简称哮喘)的主要病理学特征，其中气道重塑是气道壁结构改变而引起的不可逆或部分可逆的气流阻塞，是导致哮喘慢性化的主要原因。

IL-1β对体外培养MRC-5细胞增殖、表型转化的影响张和;金龙腾;林立;虞秀飞;王丽;李昌崇【摘要】目的探讨外源性白介素-1β(IL-1β)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)表型转化的影响.方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),以不同浓度IL-1 β(0、0.1、1、5、10ng/ml)刺激48h和同一浓度(10ng/ml) IL-1β刺激不同时间(0、24、48、72h);采用CCK-8法检测细胞增殖情况,半定量反转录聚合酶链式反应法(RT-PC R)、Western blot检测细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白水平.结果 IL-1β以浓度和时间依赖性方式调节MRC-5细胞α-SMA mRNA和蛋白表达.结论 IL-1β可能通过促进肺成纤维细胞增殖和肺成纤维细胞-肌成纤维细胞的细胞表型转化,促进气道炎症后的重塑进程.%Objective To observe the effect of cell proliferation and phenotypic differentiation on MRC -5 stimulated with IL - 1(5 in vitro. Methods MRC - 5 were cultured in vitro after stimulation either with different concentrations (0 ,0. 1,1,5 , lOng/ml) of IL - 1 β for 48h, or with the same concentration (l0ng/ml) for different time (0, 24, 48, 72h). Then cell proliferation, the expression of a -SMA - mRNA and protein were detected by CCK - 8 cell proliferation assay, semi - quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT -PCR) and Western blot. Results IL - lβ induced cell proliferation, the gene expression and protein production of a -SMA on MRC -5 in vitro. Conclusion Lung fibroblasts may play an important role in the process of airway remodeling after inflammao-tion, by the means of upgrading cell proliferation and phenotypic differentiation after simulation of IL - lβ.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2013(042)002【总页数】4页(P37-40)【关键词】细胞表型转化;α-平滑肌肌动蛋白;白介素-1β;肺成纤维细胞【作者】张和;金龙腾;林立;虞秀飞;王丽;李昌崇【作者单位】325027 温州医学院附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医学院附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医学院附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医学院附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医学院附属育英儿童医院呼吸科;325027 温州医学院附属育英儿童医院呼吸科【正文语种】中文支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾病，气道重塑是慢性哮喘的主要病理生理特征之一，重塑的病理改变最终导致气道高反应性(AHR)、持续性气流阻塞、不可逆的肺功能损害。