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《牛精原干细胞分离纯化及长期培养研究》篇一一、引言随着干细胞研究领域的发展，特别是精原干细胞的深入探讨，牛精原干细胞因其在畜牧业、医药研发等领域具有广泛的应用潜力而受到重视。
精原干细胞具备自我更新能力和多向分化潜能，可被用于研究雄性生殖系统的发育机制，并有望在再生医学中发挥重要作用。
本文将就牛精原干细胞的分离纯化及长期培养进行详细的研究与探讨。
二、材料与方法1. 材料本实验所使用的牛精原干细胞取自健康成年公牛的睾丸组织。
实验过程中使用的试剂和耗材均需符合无菌、无热原等要求。
2. 方法（1）干细胞分离纯化：采用酶消化法对睾丸组织进行消化处理，获取单细胞悬液，通过密度梯度离心法及流式细胞仪等方法进行干细胞的分离纯化。
（2）长期培养：将纯化后的干细胞接种于特定培养基中，进行长期培养，观察其生长情况及分化能力。
三、实验结果1. 干细胞分离纯化通过酶消化法处理睾丸组织，获取的单细胞悬液中包含多种细胞类型。
经过密度梯度离心及流式细胞仪的分离纯化，成功获得较高纯度的牛精原干细胞。
2. 长期培养将纯化后的牛精原干细胞接种于特定培养基中，通过显微镜观察，干细胞在培养基中呈现良好的生长状态，具有较高的增殖能力。
经过一定时间的培养，干细胞仍保持其多向分化的潜能。
四、讨论本实验研究了牛精原干细胞的分离纯化及长期培养，实验结果表明，通过酶消化法、密度梯度离心及流式细胞仪等方法，可成功获取较高纯度的牛精原干细胞。
在特定培养基中，干细胞呈现良好的生长状态，具有较高的增殖能力及多向分化潜能。
这为进一步研究牛精原干细胞的生物学特性、功能及其在再生医学中的应用提供了有力支持。
在实验过程中，我们还需要注意以下几点：首先，实验所使用的试剂和耗材需符合无菌、无热原等要求，以确保实验结果的准确性；其次，流式细胞仪等仪器的操作需严格按照规范进行，以确保干细胞的分离纯化效果；最后，在长期培养过程中，需定期观察干细胞的生长状态及分化能力，以评估其生物学特性和应用潜力。
植物干细胞的研究及应用植物干细胞是指具有自我更新和分化能力的未分化细胞，是植物组织再生和发育的基础。
近年来，随着对植物干细胞的深入研究，其在农业、环保、药品等领域的应用越来越广泛。
一、植物干细胞的研究1. 植物干细胞的来源植物干细胞可以来源于顶端分生组织、体细胞再生等途径。
其中，顶端分生组织就是植物干细胞最常见的来源，如植物的根尖和茎尖。
这些组织中的细胞不仅具有高度分化和分裂活力，同时也能不断地分化成各种器官和组织。
因此，这些细胞可以作为研究和应用的重要材料。
2. 植物干细胞的特点植物干细胞具有以下三个方面的特点：（1）自我更新能力。
植物干细胞具有自我更新的能力，可以不断地分裂，产生新的干细胞和其他细胞。
（2）多向分化能力。
与动物干细胞只能分化成某一细胞类型不同，植物干细胞可以分化成多种细胞类型，从而诱导出各种有效的组织和器官。
（3）细胞壁的特殊结构。
植物干细胞的细胞壁富含纤维素和其他有机物，可以保护细胞和支撑细胞的形态及功能。
二、植物干细胞的应用1. 农业生产植物干细胞在农业生产中有着极为广泛的应用。
例如，通过对植物干细胞的研究，可以培育出更高产、更耐病、更适应恶劣环境的植物品种。
同时，利用植物干细胞技术，也可以进行植物组织培养和快速繁殖，从而大幅提升农业的生产效率。
2. 药品研发植物干细胞技术在药品研发中也有着重要的应用。
例如，在传统药材中提取植物干细胞、干细胞培养和转化等技术的应用，可以提高药材的含量和成分，使其具有更好的疗效和药效。
此外，还可以将植物干细胞进行基因编辑，研发出更有效的药品。
3. 环保领域植物干细胞在环保领域的应用也非常广泛，例如，在城市空气污染、重金属污染等方面，可以利用植物干细胞进行植物修复，逐渐恢复植物群落的生态平衡。
此外，在植物遗传改造和抗生物质体系等方面，也有着极为广泛的应用前景。
总体来说，植物干细胞的研究和应用对于推动经济发展和保障人类健康都有着不可忽视的意义。
干细胞的研究进展与思考摘要：干细胞是最具代表性的具有分化潜能的细胞。
干细胞的研究是21世纪的热点之一。
通过研究干细胞分裂分化的调控机制，有助于我们对它进行人为的利用从而造福于人类。
目前由理论方面取得的突破正在逐渐向临床方面发展并已经取得一些成就，本文就是对干细胞﹙主要为胚胎干细胞﹚进行的一些基本介绍、研究进展、临床应用等方面的突破以及一些个人的思考。
关键词：干细胞分化热点调控机制利用理论临床进展思考一、干细胞及胚胎干细胞的介绍1、干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化为多种功能细胞。
根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。
根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞，多能干细胞和专能干细胞。
干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，尚具有再生各种组织、器官和人体的潜在功能。
医学界称为“万用细胞”。
2、胚胎干细胞具有发育的全能性体外分化在特定的体外培养条件下，胚胎干细胞也能分化形成各种细胞系，如造血细胞、肌肉细胞和神经胶质细胞等。
﹙参考文献：1生命科学导论宋思扬2 生命科学概论裘娟萍钱海丰﹚二、干细胞的研究新成果个人思考：根据对干细胞的理解不难看出通过对干细胞结构与功能的全面认识，掌握其调控的机制并人为地加以诱导与生成所需要的目标产物，对医学中的创伤修复，组织器官再生具有重要的意义。
面对当前很多束手无策的疾病﹙已知发病原理却尚未找到解决途径或未知发病原理﹚、为数稀少的器官和异体捐赠免疫排斥的反应，这一项突破性进展进展无疑将成为21世纪的史诗。
中心法则中DNA 与RNA都是至关重要的调控因素。
目前研究表明转录因子、酶、蛋白质、化合物、受体、基因等其他因素。
1．1 Nanog Nanog转录因子对胚胎干细胞自我更新能力和分化潜能的维持有着重要的意义。
Nanog转录因子的活化能够使得人ES细胞不断进行自我更新并同时抑制细胞表达促分化基因。
而在缺失Nanog正调控分子FoxD3的小鼠胚胎中，由于Nanog的低表达，小鼠的胚胎在植入后不久即由于缺失上胚层而死亡，若将内细胞团与ES细胞内0ct4和Nanog因子去除，则会导致其失去多能性以及分别向滋养外胚层及胚外内胚层分化Jose等研究结果证明，同源蛋白Nanog在细胞获得全能性的一系列复杂过程中发挥着非常关键的组织协调作用。
关于细胞培养的毕业论文标题：细胞培养技术在生物医学领域的应用与发展摘要：细胞培养技术作为一种重要的生物学实验方法，已经在生物医学领域得到广泛应用。
本文通过对细胞培养技术的原理、方法和应用进行详细介绍和分析，旨在揭示细胞培养在疾病研究、药物筛选、组织工程等方面的重要作用，并展望了细胞培养技术在未来的发展趋势。
研究结果表明，细胞培养技术在生物医学领域有着广阔的应用前景，对于推动生物医学研究的发展将发挥重要的推动作用。
1. 引言细胞培养技术是指将组织学观察中经常需要的细胞组织放入含有适宜营养物的培养基中，使用合适的条件使其细胞能够生长、繁殖和维持一定的生物学功能。
凭借其高效可控的特点，细胞培养技术已经成为生物医学领域的重要工具，广泛应用于疾病研究、药物筛选和组织工程等方面。
2. 细胞培养技术的原理和方法细胞培养技术的原理主要基于细胞在体内的生长和分化规律，通过提供适宜的培养条件，使细胞以体外的方式完成其生存和繁殖。
培养基的设计、营养物质的供给和生物环境的调节等都是影响细胞培养成功的关键因素。
细胞培养主要分为悬浮培养和贴壁培养两种类型，分别适用于不同细胞类型的培养需求。
常用的细胞培养方法包括传代培养、细胞凋亡检测、细胞分裂周期分析等。
3. 细胞培养技术在疾病研究中的应用细胞培养技术在疾病研究中发挥了重要作用。
通过培养患者的癌细胞，研究人员可以深入了解癌细胞的生物学特性和遗传变异，为癌症的预防和治疗提供新的思路。
细胞培养技术还可以用于感染病毒研究，模拟病毒与宿主细胞的相互作用过程，探索病毒传播的机制，为疫苗研发提供理论依据。
4. 细胞培养技术在药物筛选中的应用细胞培养技术在药物筛选中扮演了重要角色。
通过建立疾病模型细胞株，研究人员可以评估药物在不同细胞中的效应和毒性，从而筛选出具有潜力的治疗药物。
细胞培养技术还可以用于药物的安全性评估，通过观察细胞的形态变化和生物学功能的改变，判断药物对细胞的毒性和致突变性。
学号：20101310108本科毕业论文二○一四年六月题 目：干细胞的研究应用发展与存在问题 院 系：生命科学技术学院 专 业：生物工程 班 级：2010级生工（二）班 学生姓名：王姣 导师姓名： 刑雪琨毕业设计（论文）诚信声明书本人声明：本人所提交的毕业论文《肿瘤生物治疗的研究进展》是本人在指导教师指导下独立研究、写作的成果，论文中所引用他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中加以说明；有关教师、同学和其他人员对本文的写作、修订提出过并为我在论文中加以采纳的意见、建议，均已在我的致谢辞中加以说明并深致谢意。
本论文和资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。
论文作者：（签字）时间：年月日指导教师已阅：（签字）时间：年月日目录摘要 (1)Abstract (2)1 干细胞介绍 (3)1.1干细胞的定义和分类 (3)1.2干细胞特征 (3)1.3干细胞的调控机制 (4)2干细胞应用 (5)2.1干细胞研究意义及价值 (5)2.2干细胞研究的应用 (6)2.2.1干细胞与临床结合 (6)2.2.2干细胞与基因工程结合 (7)2.2.3干细胞的基础研究 (7)2.2.4干细胞与药物学的结合 (7)2.3干细胞应用新思路新进展 (8)3干细胞研究面临的问题 (8)3.1干细胞研究需要攻克的技术难关 (8)3.2干细胞研究需要正视的伦理问题 (9)4我国应对干细胞研究局势的对策和建议 (10)5展望 (10)6参考文献 (12)致谢 (15)干细胞的研究应用发展与存在问题摘要21世纪作为生命科学科学技术发展的飞速时期，干细胞应用研究为生物经济时代的到来将扮演重要角色之一，成为生命科学和临床医学具有强大生命力的重要领域，大有发展之势。
由于干细胞具有自我更新和多向分化潜能的功能，使得人们用干细胞治疗多种疾病成为可能。
首先对干细胞研究的历史、最新进展，干细胞的应用加以介绍，然后分析研究前景存在的问题和我国发展现状，同时由此带来了一些法律和伦理道德上的争论本文将围绕这些问题加以阐述。
人类干细胞研究的新进展与治疗应用自从2006年以来，人类干细胞研究已经经历了快速发展的阶段，技术不断创新，且越来越多的研究结果为干细胞治疗应用打开了更广阔的前景。
以下文章旨在介绍人类干细胞研究的新进展和治疗应用。
干细胞种类和发现过程干细胞是指能够分化成多种功能细胞且具有自我更新能力的细胞。
干细胞种类包括胚胎干细胞、诱导性多能性干细胞、骨髓干细胞等。
其中，胚胎干细胞是最早被发现的一种干细胞，来自已受精的胚胎，具有最为广泛的分化潜能，可以分化成所有种类的细胞。
而人类体内的骨髓干细胞，也是广泛应用于治疗的一类干细胞。
干细胞研究的新进展随着科技的不断创新，人类干细胞研究也在不断推进。
近年来，各种新技术正在开发和优化，以最大程度地利用干细胞的潜能。
基因编辑技术聚合酶链反应和基因编辑技术是新的干细胞研究的前沿研究领域。
基因编辑技术可以帮助科学家在干细胞中删减或添加基因，以促进细胞分化和生长。
这种技术的应用范围尚在探索中，但有望在治疗一些遗传性疾病方面取得突破。
人工合成种植技术近年来许多研究也在针对人类干细胞培养的技术上进行了改进。
一些研究者正试图开发出人工合成手段来创造适宜干细胞生长环境的方法，如支架和多孔微环境。
这种基于开发干细胞生长坏境的研究，提高了对体外培养干细胞的质量和数量控制能力，并为干细胞治疗应用提供了更广泛的可能性。
新型药物开发干细胞研究在药物开发方面的应用正在迅猛发展，许多研究有望利用干细胞来开发新的治疗药物，针对一些慢性病的治疗也有着广阔的应用前景。
例如，利用干细胞可以针对某些遗传性消化道疾病进行治疗。
治疗应用前景和挑战干细胞在医学中的应用前景广阔，目前已经应用于治疗多种无法治愈的疾病，如心血管疾病、神经退行性疾病和肿瘤。
近几年，一些非正式的疗法例如自体细胞移植已经在临床中得到了验证。
然而，未来还需要解决诸多挑战，例如干细胞使用的安全问题、培养及其生长产量的限制以及严格的法规和道德问题。
此外，干细胞在不同种族、性别、年龄之间的效果还需要更多的临床研究来确定。
《人诱导多能干细胞系的建立》篇一一、引言人诱导多能干细胞（Human Induced Pluripotent Stem Cells，简称hiPSC）的发现与建立，是现代生物学领域的一大突破。
这种干细胞具有高度自我更新能力和多向分化潜能，为疾病模型构建、药物研发以及再生医学等领域提供了新的研究工具和治疗方法。
本文将详细介绍人诱导多能干细胞系的建立过程、方法及其在科研和临床上的应用前景。
二、人诱导多能干细胞的建立1. 背景与原理人诱导多能干细胞技术的原理主要是通过特定基因的过表达和转录因子的激活，将成熟的人体细胞重编程为多能性干细胞。
这种方法在技术层面上克服了传统胚胎干细胞研究的伦理问题，同时也为疾病模型构建、药物研发等领域提供了新的研究工具。
2. 实验方法人诱导多能干细胞的建立主要涉及细胞培养、基因编辑和细胞分化等步骤。
首先，从人体获取成熟的体细胞，如皮肤成纤维细胞或外周血细胞等；然后通过基因编辑技术，将特定的转录因子导入细胞中；最后，通过体外培养和分化，诱导这些细胞成为多能性干细胞。
三、人诱导多能干细胞系的应用1. 疾病模型构建人诱导多能干细胞可模拟各种疾病的发病过程，为研究疾病的发生机制和寻找治疗方法提供了有力工具。
例如，通过建立帕金森病、糖尿病等疾病的模型，可以研究疾病的发病机制，并筛选出潜在的治疗药物。
2. 药物研发人诱导多能干细胞可用于药物研发过程中的毒性和药效评估。
通过分析药物对干细胞的影响，可以预测药物在人体内的疗效和潜在副作用，为新药研发提供有力支持。
3. 再生医学人诱导多能干细胞具有分化成多种组织细胞的能力，为再生医学提供了新的治疗手段。
例如，通过诱导干细胞分化成神经元、心肌细胞等，可以用于治疗帕金森病、心肌梗死等疾病。
此外，还可以通过基因编辑技术修复干细胞的基因缺陷，从而治疗遗传性疾病。
四、未来展望随着人诱导多能干细胞技术的不断发展，其在科研和临床上的应用前景将更加广阔。
未来，我们可以期待以下几个方面的发展：1. 技术的进一步完善：随着基因编辑和细胞培养技术的不断进步，人诱导多能干细胞的建立过程将更加高效和稳定。
神经干细胞研究进展[摘要]神经干细胞研究是目前医学研究的热点之一，在目前已经取得了一定的研究成果。
尽管大部分研究仍处在动物模型和实验阶段，相信在不久的将来会有越来越多的成果应用于临床。
本文对有关神经干细胞的特性，来源，培养与纯化，临床应用等方面作一简单介绍。
[关键词] 神经干细胞随着分子生物学的迅猛发展，人们对神经系统多种疾病的相关基因及细胞研究有了更新的认识，使神经系统疾病的治疗有了更多可能的选择。
神经干细胞作为近几年来比较热门的研究课题之一，已经引起了越来越多的医护人员的关注，已经取得了一定的研究成果。
本综述对近几年来有关神经干细胞的研究作一简单介绍。
1、神经干细胞的特性干细胞是一类具有自我复制能力、多潜能分化的非特异性细胞，这种分化、复制能力贯穿于生物组织器官生长的始终。
在一定条件下，它可以分化成不同形态、不同功能的细胞。
神经干细胞( neuralstem cells, NSCs)是重要的干细胞类型之一，是神经系统发育过程中保留下来的具有自我更新和多向分化潜能的原始细胞,可分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞等多种类型的神经细胞。
具有很多的特性，如自我更新、多潜能分化、迁移和播散、低免疫原性、良好的组织相容性、可长期存活等[1]。
2、神经干细胞的来源在20 世纪90 年代初, Reyonlds 等[2] 和Richards 等[3]从鼠和恒河猴以及人脑中分离出神经干细胞,从而证实了啮齿类海马齿状面的颗粒层细胞在成年后仍具有分裂能力这一推测。
最近,扎桑等[4] 报道在小鼠大脑室下带(subventricular zone,SVZ)有神经上皮的残余,是产生神经干细胞最活跃的部位,产生神经元迁移到嗅球体并分化成该处的中间神经元,其他的3个脑区分别为海马的齿状面,嗅回和纹状体。
其中海马的神经干细胞产生的新的神经元成齿状回的颗粒神经元。
1996 年Sohonen等[5]通过细胞培养证实这些部位的细胞能够自我复制并分化成神经元,星形胶质细胞和少突胶质细胞等。
细胞论文范文细胞是构成生命的基本单位，是所有生物体的基本组成部分。
细胞的研究对于理解生命的起源和发展，以及治疗疾病具有重要的意义。
本文将从细胞的结构、功能和研究方法等方面进行探讨，以期能够更深入地了解细胞的奥秘。
细胞是由细胞膜、细胞质和细胞核组成的。
细胞膜是细胞的外层边界，它能够控制物质的进出，维持细胞内外环境的稳定。
细胞质是细胞内的液体基质，其中包含着各种细胞器和细胞器的基质。
细胞核是细胞内的控制中心，其中包含了遗传物质DNA，能够指挥细胞的生长、分裂和功能表达。
细胞具有多种功能，包括营养摄取、代谢活动、生长和分裂等。
细胞通过细胞膜上的蛋白质通道摄取营养物质，然后在细胞质中进行代谢活动，产生能量和合成各种生物分子。
细胞的生长和分裂是细胞增殖的基础，它能够保持生物体的生长和发育，以及修复受损的组织。
研究细胞的方法主要包括光学显微镜、电子显微镜和分子生物学技术等。
光学显微镜能够观察活细胞的形态和结构，但对于细胞内部的细节了解有限。
电子显微镜能够观察细胞的超微结构，但需要对样品进行特殊的处理。
分子生物学技术能够研究细胞的遗传物质和蛋白质表达，揭示细胞的分子机制。
细胞的研究对于生命科学和医学具有重要的意义。
通过研究细胞的结构和功能，可以更深入地了解生命的奥秘，为人类健康和疾病治疗提供理论基础。
因此，我们应该加强对细胞的研究，探索细胞的奥秘，推动生命科学和医学的发展。
总之，细胞是生命的基本单位，具有复杂的结构和多样的功能。
通过对细胞的研究，可以更深入地了解生命的起源和发展，为人类健康和疾病治疗提供理论基础。
我们应该加强对细胞的研究，推动生命科学和医学的发展，为人类福祉做出更大的贡献。
干细胞的研究进展与思考摘要：干细胞是最具代表性的具有分化潜能的细胞。
干细胞的研究是21世纪的热点之一。
通过研究干细胞分裂分化的调控机制，有助于我们对它进行人为的利用从而造福于人类。
目前由理论方面取得的突破正在逐渐向临床方面发展并已经取得一些成就，本文就是对干细胞﹙主要为胚胎干细胞﹚进行的一些基本介绍、研究进展、临床应用等方面的突破以及一些个人的思考。
关键词：干细胞分化热点调控机制利用理论临床进展思考一、干细胞及胚胎干细胞的介绍1、干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化为多种功能细胞。
根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。
根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞，多能干细胞和专能干细胞。
干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，尚具有再生各种组织、器官和人体的潜在功能。
医学界称为“万用细胞”。
2、胚胎干细胞具有发育的全能性体外分化在特定的体外培养条件下，胚胎干细胞也能分化形成各种细胞系，如造血细胞、肌肉细胞和神经胶质细胞等。
﹙参考文献：1生命科学导论宋思扬2 生命科学概论裘娟萍钱海丰﹚二、干细胞的研究新成果个人思考：根据对干细胞的理解不难看出通过对干细胞结构与功能的全面认识，掌握其调控的机制并人为地加以诱导与生成所需要的目标产物，对医学中的创伤修复，组织器官再生具有重要的意义。
面对当前很多束手无策的疾病﹙已知发病原理却尚未找到解决途径或未知发病原理﹚、为数稀少的器官和异体捐赠免疫排斥的反应，这一项突破性进展进展无疑将成为21世纪的史诗。
中心法则中DNA 与RNA都是至关重要的调控因素。
目前研究表明转录因子、酶、蛋白质、化合物、受体、基因等其他因素。
1．1 Nanog Nanog转录因子对胚胎干细胞自我更新能力和分化潜能的维持有着重要的意义。
Nanog转录因子的活化能够使得人ES细胞不断进行自我更新并同时抑制细胞表达促分化基因。
而在缺失Nanog正调控分子FoxD3的小鼠胚胎中，由于Nanog的低表达，小鼠的胚胎在植入后不久即由于缺失上胚层而死亡，若将内细胞团与ES细胞内0ct4和Nanog因子去除，则会导致其失去多能性以及分别向滋养外胚层及胚外内胚层分化Jose等研究结果证明，同源蛋白Nanog在细胞获得全能性的一系列复杂过程中发挥着非常关键的组织协调作用。
干细胞研究论文细胞培养论文
肺癌干细胞的研究现状
【摘要】肺癌已成为世界上发病率和死亡率增长最快，严重危害人类健康和生命的恶性肿瘤。
最近，科学家们提出“肿瘤干细胞”理论，认为肿瘤组织由异质性的细胞群体组成，其中很小部分细胞具有干细胞特性，是恶性肿瘤发生、耐药、复发及转移的根源。
因此人们希望从肿瘤干细胞的角度找到根治肺癌的途径。
【关键词】肺癌;干细胞;肿瘤干细胞
目前，肺癌已成为世界上发病率和死亡率增长最快，严重危害人类健康和生命的恶性肿瘤，5年生存率低于15%。
科学家们通过总结大量肿瘤细胞和干细胞的生物学相似性后，提出“肿瘤干细胞” (TSC)理论。
该理论的提出为肺癌的治疗带来曙光。
1 干细胞
干细胞(SC)是指具有自我更新和分化潜能的细胞。
干细胞的自我更新和分化在其内在机制和周围环境中的信号调控下处于动态平衡状态,维持了干细胞的数量稳定。
一旦干细胞发生基因突变或信号传导途径发生错误,将导致这一平衡被打乱,引起高度协调的干细胞分裂增殖过程失调,导致肿瘤发生。
2 肿瘤干细胞
2001年，科学家们提出了TSC理论，认为肿瘤组织由异质性的细胞群体组成，其中很小部分细胞具有干细胞特性，决定肿瘤的发生、侵袭、转移、播散和对各种治疗是否敏感[1~3]。
TSC的最早报道见于白血病。
Ai-Hajj等发现乳腺癌干细胞,首次证明了在实体瘤中TSC的存在。
目前已成功分离并鉴定的实体
TSC包括脑肿瘤、结肠癌、前列腺癌、黑色素瘤及胰腺癌等,肺癌TSC的研究也取得很大进展。
3 肺癌干细胞
3.1 肺癌干细胞的发现 2005年Kim等从大鼠细支气管、肺泡管结合部分离出Sca-1+CD45-Pacam-CD34- 细胞,其有很强的自我更新和分化能力, 称之为支气管肺泡干细胞(BASCs)，并认为BASCs可能是肺腺癌的起源细胞。
2006年,黄盛东等发现,A549细胞悬浮培养可形成3种类型的克隆集落,其中Holoelone型克隆体具有干细胞特性。
2007年,Summer等从鼠的肺组织中分离出肺内源的间充质干细胞。
Ho等发现肺癌SP细胞较非SP细胞具有更强的致瘤性, 表达乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)等多种ABC家族膜转运蛋白。
Eramo等在人的肺癌组织中发现一群具有自我更新、多向分化能力的CD133+细胞，其具有肿瘤细胞的恶性特征，被命名为肺癌干细胞。
3.2 肺癌干细胞的分选方法:肺癌干细胞的分选主要采用三种方法:A.应用细胞表面特异性标记进行分选;B.根据SP表型进行TSC的分选;C.利用干、祖细胞中ALDH的含量较高进行分选。
细胞表面标志物是分选肺癌肿瘤干细胞的关键。
Kim等应用流式细胞仪分选出Sca+/CD45-/Pecam-/CD34+的支气管肺泡干细胞，肺腺癌肿瘤干细胞亦存在与BASCs相似的表面标志物。
另一表面标志物是CD133。
Eramo等发现CD133+细胞在肺癌标本中普遍存在，但含量较低。
科学家们还发现，CD133+肺癌细胞可无血清悬浮培养，含血清培养出现分化； CD133+细胞比CD133-细胞更易形成与原发瘤表型一致的肿瘤，更具耐药性。
上述研究显示CD133+细胞可能包含了肺癌干细胞，且和肺癌化疗耐药密切相关。
但Meng等[19]对肺癌细胞株中的
CD133+及CD133-细胞进行对比，发现二者均可形成移植瘤，故CD133+细胞是否代表肺癌干细胞，仍存在争议。
人们发现造血干细胞具有将荧光染料泵出细胞外的特性,即SP特性[23]。
目前利用这一特性进行纯化已成为一种常用的分离方法。
SP细胞表面表达ABCG2等ABC家族膜转运蛋白,因此,也可应用ABCG2作为标记分选TSC。
利用干、祖细胞中ALDH的含量较高进行分选肺癌干细胞。
在造血系统、神经系统的干、祖细胞、乳腺癌中ALDH含量很高。
在乳腺癌中发现ALDH1+肿瘤细胞具有干细胞特性，且与乳腺癌不良预后相关。
美国学者应用流式细胞仪从人类肺癌细胞系中分选出ALDH1阳性细胞，发现其具备诸多干细胞特征，并表达CD133，并与肺癌患者的预后呈负相关。
3.3 肺癌干细胞的鉴定方法:目前研究认为TSC鉴定必须通过一些经典的干细胞实验进行鉴定。
自我更新是干细胞的三大重要特性之一,如 CD133+肺癌细胞能够在含生长因子的无血清培养基中以细胞球的方式悬浮生长,这是鉴定其具有自我更新的能力,也是鉴定其是为TSC的重要方法。
致瘤能力是鉴定TSC 的最重要环节,目前多通过裸鼠致瘤实验进行检验。
分化潜能是TSC的重要特征之一，可通过单克隆实验进行检验,以此鉴定其干细胞特性。
4 肺癌干细胞的展望
进入21世纪以来，肺癌的治疗已经进入分子时代,对肺癌干细胞的研究越来越受到重视。
直接靶定肺癌干细胞，通过寻找特异性的表面分子标志识别肺癌干细胞，制备单克隆抗体，携带放射性物质或化疗药物，靶向放化疗，最终促使肺癌干细胞凋亡，使肿瘤失去生成新的肿瘤细胞的能力，争取达到根治的目的。
这些方法将为肺癌的治疗带来了新的曙光。
参考文献
[1] Reya T.Stem cells,cancer,and cancer stem cells.Nature 2001;414(6859):105~111
[2] Wicha MS,Liu S,Dontu G.Cancer stem cells:an old idea a paradigm shift Cancer Res 2006;66(4):1883~1890
[3] Al-Hajj M.Cancer stem cells and oncology therapeutics.Current Opinion in Oncology 2007;19(1):61~64。
