弧菌科

临床医学检验技术(师)：弧菌科1、单选对霍乱弧菌进行培养，选用的培养基是（）A.SS平板B.EMB平板C.中国蓝平板D.TCBSE.KVL血平板正确答案：D参考解析：霍乱弧菌营养要求不高，在普通琼脂上（江南博哥）生长良好。

初次分离常选用pH8.5的碱性胨水进行选择性增菌培养，常用TC BS、4号琼脂平板、庆大霉素琼脂平板等。

2、单选副溶血性弧菌的致病因子包括（）A.黏附因子B.胞壁C.类脂AD.脂多糖E.蛋白质正确答案：A3、单选对于可疑霍乱感染者，在粪便中霍乱弧菌含量较少时，为增加分离灵敏度，需要对标本进行增菌，取粪便进行碱胨水增菌时，在37℃培养一般至少培养（）A.2～3小时B .4～6小时C.6～8小时D.12小时E.16小时正确答案：C4、单选关于霍乱，错误的是（）A.属于烈性消化道传染病B.人类是霍乱弧菌的唯一易感者C.病愈后，少数病人可长期带菌D.病后的免疫力短暂E.接种霍乱死疫苗可增强人群的特异性免疫力正确答案：D参考解析：患过霍乱的人可获得长久的免疫力，再感染的较为少见。

5、单选关于霍乱的叙述，下列正确的是（）A.传播途径主要是通过呼吸道感染B.只需少量细菌（102~103）即可使人感染发病C.细菌侵入肠上皮细胞和肠腺而损伤肠壁D.霍乱弧菌的O1群和O139群的致病机制与过程是一样的E.致病是通过肠毒素作用于小肠上皮细胞受体引起剧烈腹泻和腹痛正确答案：D参考解析：霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的病原体，自然情况下，人类是霍乱弧菌的易感者。

正常情况下，胃液中的胃酸可消灭食物中的霍乱弧菌不至于致病，但在胃酸降低或摄入大量的霍乱弧菌，可以通过胃进入肠道。

进入肠道的霍乱弧菌通过鞭毛运动穿过肠黏膜表面的黏膜层，接近肠黏膜上皮细胞，通过菌毛定植。

霍乱弧菌的O1群和O139群的致病机制与过程是一样的。

6、单选一男性病人，43岁，剧烈腹泻水样便伴呕吐1天。

无腹痛，无里急后重。

查体，疲倦面容，皮肤、唇舌干燥，眼窝内陷。

弧菌科（Vibrionaceae）细菌类群中基因组最小的细菌—海洋侧支发光细菌我们生活在一个微生物的世界。

微生物无处不在，无所不能。

它好比夜空中闪亮的星星，浩瀚无垠。

仰望夜空，你总能发现与众不同的一颗。

海洋如同浩瀚的星空一样，在这片蓝色的星球中蕴藏了许许多多的丰富多彩，与众不同的微生物。

从中国南海表层海水中，国家海洋局第三海洋研究所邵宗泽研究团队分离培养到弧菌科（Vibrionaceae）细菌的一个新类群——海洋侧支发光细菌（Paraphotobacterium marinum）。

模式菌株为NSCS20N07DT (=KCTC 52126T =MCCC 1A01886T =CIP 111031T)。

通过细菌基因组草图分析（draft genome），这个细菌基因组仅有2.5 M，其基因组大小远远小于发光细菌属的种类以及弧菌科的其他属的种类。

借助于三代测序（PacBio RS sequencing）的方法，国家海洋局第三海洋研究所邵宗泽科研团队获得了海洋侧支发光细菌，菌株NSCS20N07DT的基因组完成图。

三代测序是单分子测序技术，测序过程不需要PCR扩增，就可以对每一条DNA分子进行测序。

因此三代测序获得的序列很长，其平均长度为10 K，最长可以测序到60 K。

通过一个cell测序的数据，他们组装获得了菌株NSCS20N07DT 基因组的完整圈图（complete genome）。

这株菌的基因组大小只有2.6 Mbp，GC 含量为31.2 mol%, 这株菌也具有两个染色体，分别为大染色体1.4 M，GC含量31.6 mol%；小染色体1.2 M，GC含量30.8 mol%（图1）。

具有两个染色体（two chromosomes）是弧菌科细菌类群重要的基因进化特征。

比如我们熟知的霍乱弧菌Vibrio cholerae El Tor N16961，具有一个大染色体3.0 M，一个小染色体1.1 M。

第十五章弧菌科及检验本章内容一、弧菌属（一）霍乱弧菌（二） O139 型霍乱弧菌（三）副溶血性弧菌（四）其他弧菌二、气单胞菌属与邻单胞菌属（一）气单胞菌属（二）邻单胞茵属革兰阴性直杆菌或弧菌有极端鞭毛氧化酶阳性动力阳性发酵葡萄糖弧菌属——分类根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：① O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌 : 能被 O1群血清凝集但不产生致病毒素；③非 O1 群霍乱弧菌；④其他弧菌：包括副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、创伤弧菌、麦氏弧菌和拟态弧菌。

大多数为非病原菌，对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。

霍乱弧菌——生物学特性形态与结构形态：弧形或逗点状，“鱼群状”。

人工培养后呈杆状。

染色： G-。

特殊结构：有菌毛，无芽胞，部分有荚膜。

一端有一根粗而长的鞭毛，悬滴观察可见穿梭样或流星状运动。

·培养特性营养要求：不高，可无盐生长。

气体环境：兼性厌氧。

菌落特征：耐碱不耐酸。

pH8.5 的碱性蛋白胨水：培养6～ 9h，增菌形成菌膜。

碱性琼脂平板：较大圆形扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

硫代硫酸盐 - 柠檬酸盐 - 胆盐 - 蔗糖琼脂平板（ TCBS）：较大黄色菌落。

亚碲酸钾琼脂平板：还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。

庆大霉素琼脂：形成的菌落中心呈灰褐色。

·抗原·变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。

霍乱弧菌——微生物检验及鉴定·标本采集：以粪便（米泔水样便）为主，尽可能在用药之前采取。

及时接种适宜培养基。

常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文- 腊二氏保存液和卡 - 布运送培养基等。

·形态学检查：①动力观察：米泔水样粪便悬滴观察可见流星或穿梭状运动的细菌。

②制动试验：加霍乱多价诊断血清后弧菌凝集，运动停止。

③涂片染色：革兰染色，观察革兰染色阴性呈鱼群状排列的弧菌。

弧菌科的共同特点弧菌科（Aquificaceae）是一类发酵形态的放线菌（Actinobacteria）家庭，包括热源性发酵菌。

它们位于体内，分布于各种热源，包括海底热液系统、地表及地下热泉、热湖、温泉、湿地、热油井、蒸汽泉及高压变声墙等。

弧菌科主要有形态多变的环式细胞和条状细胞，具有假丝状、发酵性、芽胞细胞及多芦毛状外分泌物等特点。

弧菌科环式细胞和条状细胞都具有显著的特征，比如细胞壁、外分泌物及内质网结构等，这些特征有助于区分弧菌科。

细胞壁结构主要是由蛋白质和多糖体组成，具有多糖体结构特征，包括显微镜下可见的各种Matrix pattern，如仿质膜（mimic membrance）、月球模式（moonlight）、细针模式（pinneedle）、菱形模式等。

而弧菌科外分泌物，则以多芦毛状小分泌物（shurks）为主，从微观角度来看，每株弧菌的多芦毛的类型和数量都不尽相同，以此单纯地判别不同弧菌株也显得非常困难。

此外，弧菌科细胞壁结构与功能特点显著不同。

一般来说，此种细胞壁结构比其他放线菌种类稍薄，具有良好的抗菌和抗腐作用，能有效抵御某些抗生素和外界环境的损害，并具有一定的热耐受性。

同时，此种结构会影响弧菌科的一些细胞内表型，如代谢作用，从而影响其生物功能。

有趣的是，弧菌科细胞及其细胞内分子之间具有十分独特的关系，主要表现在其基因组结构上，如DNA条带状ã€-分布及能源代谢等。

其中，DNA条带状ã€-分布是指微量型小峡谷状分子，它们也被称为单独DNA分列（SDRs），能源代谢是指直接从外部获取能量的任何物理或化学过程，接着发电到其细胞器中的多种生物反应。

此外，弧菌科具有包括嗜热、嗜奇性、耐药性等各种特性，这些特性决定了它们可以生存、繁衍的环境所在。

综上所述，弧菌科的共同特点是具有显著的环式细胞和条状细胞，细胞壁由多糖体组成，外分泌物以多芦毛状小分泌物为主，而且还具有假丝状形态，发酵性，芽胞细胞等特征，使它们可以存活于各种热源环境，并具有抗菌、抗腐和热耐受性等生物功能。

弧菌科及检验弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。

弧菌科包括4个菌属，即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。

前三属细菌均可引起人类感染，发光杆菌属对人无致病性。

一、弧菌属弧菌属的细菌分布广泛，以水中最多。

世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型01群霍乱弧菌；③非01群霍乱弧菌；④其他弧菌（副溶血性弧菌）。

对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。

（一）霍乱弧菌霍乱弧菌是霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。

1.生物学特性（1）形态染色：本菌呈弧形或逗点状，无芽胞，有菌毛，有些菌株有荚膜。

一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。

取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。

液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。

（2）培养特性：需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。

耐碱不耐酸。

可在无盐环境生长。

碱性蛋白胨水中，经35℃培养6～9h，在液体表面大量繁殖形成菌膜，可达快速增菌的目的。

碱性琼脂平板上，经培养18～24h，形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）上，形成较大黄色菌落。

含亚碲酸钾琼脂平板上，因还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。

庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。

（3）生化反应：能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。

迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。

氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。

能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。

（4）抗原结构与分型：霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原和不耐热的非特异性H抗原。

H抗原为弧菌属所共有，特异性低。

O抗原特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。

第11、12章弧菌属与螺杆菌属一、名词解释1、弧菌属2、 Cholera entero toxin二、填空题1、霍乱弧菌可分为O-1群霍乱弧菌、___________和__________，前者包括________和________两个生物型。

2、霍乱弧菌耐_________不耐酸，其选择性增菌培养基是_____________。

3、霍乱肠毒素的A1肤链作用于腺苷酸环化酶，使________不断转化为_________，引起肠液大量________，导致严重腹泻。

4、霍乱肠毒素的毒性中心是___________，结合中心是_________，后者与肠上皮细胞的________结合使毒素分子变构。

5、霍乱弧菌有耐热的____________抗原和不耐热的___________抗原。

6、霍乱弧菌感染后主要抗体是____________________。

7、霍乱弧菌根据O抗原不同可分为_________个血清群，其中_________和_________引起霍乱。

8、副溶血性弧菌是一种嗜________性弧菌，能引起________，病后免疫力__________。

9、空肠弯曲菌广泛存在于禽类__________，人类接触后主要引起_______________。

10、幽门螺杆菌形态似______状，目前认为与人类的_______、________等疾病有关。

三、选择题A型题1、霍乱弧菌的主要致病物质不包括A、鞭毛B、菌毛C、毒素共调菌毛D、外毒素E、内毒素2、关于霍乱弧菌的生物学性状，叙述错误的是A、革兰阴性弧菌，有单鞭毛B、霍乱弧菌耐碱不耐酸C、在霍乱病人粪便悬滴标本中，可见“鱼群样穿梭”现象D、ELTor真生物型霍乱弧菌抵抗力强，是因为有芽胞形成E、有菌毛和荚膜3、关于霍乱肠毒素，叙述正确的是A、A亚单位与细胞受体结合B、B亚单位迸入细胞发挥毒性作用C、激活鸟苷酸环化酶，使cGMP升高D、其受体是糖蛋白E、不耐热外毒素4、霍乱病人排泄物的特点A、脓血便B、水样便C、米泔水样便D、果酱样便E、柏油样便5、关于霍乱，错误的是A、属于烈性传染病B、人类是霍乱弧菌的唯一易感者C、病愈后，少数病人可长期带菌D、病后的免疫力短暂E、接种霍乱死菌苗可增强人群的特异性免疫力6、弧菌主要分布于A、空气B、水C、土壤D、人体肠道E、动物体肠道7、关于ELTor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌所致疾病的叙述，下列错误的是A、两者感染后，机体免疫力有强弱之别B、两者所致疾病的临床表现轻重不一C、人类是唯一易感者D、传染源均为病人或带菌者E、传播途径均为污染水源或经食物摄人8、O139群霍乱弧菌与01群霍乱弧菌的不同之处是A、形态染色性B、产生肠毒素C、成人病例比例高D、在TCBS琼脂培养基呈黄色菌落E、所致临床表现9、副溶血性弧菌引起的食物中毒经什么传播A、污染用水B、病畜肉C、病鼠尿污染食物D、苍蝇污染食物E、海产品或盐脯制品10、一男性病人，43岁，头晕，腹胀，剧烈腹泻水样便伴呕吐1天。