高效液相色谱快速测定茶叶中儿茶素的含量

HPLC测定植物样品中的儿茶素

一、仪器与试剂

LC-6A 高效液相色谱仪, 包括SPD-6A 紫外-可见分光光度检测器, SCL-6A系统控制器, SIL-6A自动进样器, CR-3A 色谱工作站; PE Lambda 35 UV-Vis 紫外可见光分光光度仪; 超声波清洗器。

儿茶素标准溶液: 称取儿茶素标准品10.0 mg, 用乙醇溶解, 并定容于25mL容量瓶中,

质量浓度为400. 0 mg·L-1 。

水为重蒸馏水, 无水乙醇为优级纯, 甲醇为色谱纯。

二、仪器的工作条件

Shim-pack CLC-ODS C18 色谱柱( 150 mm×6.0mm, 5um) , 流动相为甲醇-水(75+ 25)

混合溶液, 柱温为30℃, 流速为1.0mL·min-1 , 进样量为5.0uL, 检测波长为210nm。

三、标准工作曲线的制定

移取不同体积的儿茶素标准溶液置于2mL容量瓶中, 用乙醇定容, 制成0，20.0，40.0，80.0，200.0，320.0，400.0 mg·L-1系列标准溶液, 按色谱条件进行测定，绘制出标准曲线。

四、试验方法

称取一定量（1g）粉碎后的植物样品, 以每克植物样品加乙醇－水( 20+ 80) 溶液15

mL的比例混合, 70 ℃水浴加热并超声溶解30min, 用0.45um微孔膜过滤。按仪器工作条件对提取液进样分析。

五、计算

根据标准工作曲线，计算出植物样品中儿茶素的含量（mg·g- 1）。

·５０６·ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｍａＩｏｆＭｅｄｉｃｉｎａＩＧｕｉｄｅ

２００７Ｖｏｌｕｍｅ９Ｎｏ．６（ＳｅｒｉａｌＮｏ．５３）

ＨＰＬＣ法快速测定茶多酚中儿茶素类及咖啡因含量

李萌王华燕胡文祥＋刘接卿

（首都师范大学化学系，北京１０００３７）

【摘要】目的：建立茶多酚中４种儿茶素类成分（ＥＧｃ、ＥＧＣＧ、ＥＣ、ＥＣＧ）和咖啡因的ＩｔＰＬＣ等度洗脱一次进样检测方法。方

法：采用Ｃ１８色谱柱，流动相为水：甲醇：乙酸＝７３：２３：２的等度洗脱反相Ｉ－ＩＰＩ．Ｅ法在１６ｒａｉｎ内完成检测。结果：样晶

分析时，除ＥＧＣＧ的色谱峰分离度＞１外，其它各组分的分离度均＞１．５；各组分的加样回收率在９８．８８％一１０１．８５％之

间。结论：该检测方法准确、稳定、重复性好，可正确定量茶多酚中的５种组分。

【关键词】儿茶素；ＨＰＬＣ；咖啡因

ｆ中图分类号】Ｒ４４６．１１＋１【文献标识码】Ａ【文章编号】１００９—０９５９（２０ａｒ７）０６一０５０６—０２

ＨＰＬＣＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＣａｔｅｃｈｉｎｓａｎｄＣａｆｆｅｉｎｅｉｎＴｅａＰｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ

“Ｍｅｎｇ，ＷａｎｇＨｕａ—ｙａｎ，ＨｕＷｅｎ—ｘｉａｎｇ，ｅｔａ１．

（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣａｐｉｔａｌＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３７，Ｃｈｉｎａ）【ＡＢ涨Ｃｒ：ｌ

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｔｅｃｈｉｎｓ（ＥＧＣ，ＥＧＣＧ，Ｅｅ，ＥＣＧ≯ａｎｄｃａｆ－

ｆｅｉｎｅｉｎｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓａｎｄｔｏｑｕａｎｔｉｆｙｆｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｗｉｔｈｉｎｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｓｔｕｄｙＷａＳａｃｈｉｅｖｅｄｕｓｉｎｇＣ１８ｃｏｌｕｍｎ

ｗｉｔｈｗａｔｅｒ／ｍｅｔｈａｎｏｌ／ａｃｅｔｉｃａｃｉｄ（７３／２３／２，∥ｖ／ｖ）ｗｉｔｈｉｎ１６ｍｉｎｕｔｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ｎｅｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓｉｎｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅａＨａｂｏｖｅ１．５髓

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日照绿茶儿茶素品质指数研究

作者：李庆伟

来源：《农学学报》2014年第06期

摘要：研究日照绿茶的儿茶素品质指数，是揭示日照绿茶品质特征的重要方面。通过对日照主要茶区分春、夏、秋3季取样，采用高效液相色谱(HPLC)分析法进行检测，全面分析日照绿茶儿茶素及单体含量。结果表明：日照绿茶儿茶素平均含量为136.04 mg/g，春茶为127.96 mg/g，夏茶为136.50 mg/g，秋茶为143.27 mg/g，秋茶＞夏茶＞春茶；日照绿茶儿茶素单体平均含量大小为EGCG＞EGC＞ECG＞EC＞C＞GC＞GCG，以EGCG最高，平均达80.84

mg/g，占儿茶素总量的59.09%，其次为EGC和ECG，分别占儿茶素总量的14.90%和13.83%；日照绿茶儿茶素品质指数春茶、夏茶、秋茶分别为652.14、388.57、522.13，全年平均520.95，以春茶最好、秋茶次之、夏茶最差；较好地反映了日照绿茶的品质状况。

关键词：日照绿茶；儿茶素；组分；HPLC；品质指数

中图分类号：S571.1文献标志码：A论文编号：2013-1042

0引言

茶叶中的儿茶素是茶多酚的主要成分，具有重要的保健功能，儿茶素的含量及其单体组成是影响绿茶品质的关键因素之一，对茶叶色、香、味品质的形成具有重要作用。关于儿茶素品质指数的研究，中茶所研究较早，其他茶区虽有所报道，但总的研究还不是很多，日照绿茶儿茶素及品质指数研究一直处于空白，在研究日照绿茶品质的项目中，笔者详细研究了日照绿茶儿茶素单体及其儿茶素品质指数，对揭示日照绿品质具有重要意义。

1材料与方法

1.1试验材料

在日照主要茶树种植区，按照面积分布，分别在东港区的北叶青、文山、驻龙山、御园春、御海湾、大暖帐、刘官庄、陈疃、南湖、高兴，岚山区的榴园、黄泥沟、薄家口子、后黄埠、碧波、北满、后山旺、共青、景阳青，莒县的浮来青，五莲县的叩关、凤玉，22个有代表性的茶园，于2012年分春、夏、秋3季取样，分别取样46份、52份、50份，共计148份。样品采集标准为1芽2叶，品种为日照主栽品种‘黄山群体种’，样品采集后，在实验室进行摊晾、杀青、烘干，每个样品取烘干2 kg贮存，以备化验使用。

Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａ１　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｖｏ１．２６　Ｎｏ．４　２０１３　文章编号：１００４—４３３７（２０１３）０４—０４６０—０２　中图分类号：Ｒ９２７．２　文献标识码：Ａ　高效液相色谱法测定天山花楸中表儿茶素含量△　张雅婷　顾晓娟　马亚菠　李　乐　（石河子大学药学院　石河子８３２００２）　・药学研究・　摘要：　目的：建立高效液相色谱法测定天山花楸中表儿茶素的含量。方法：采用Ｃ１８色谱柱，检测波长２８０ｎｍ，流动相为乙腈：　水（２０：８０），流速为ｌｍｌ・ｍｉｎ～。结果：测得天山花楸中表儿茶素的含量为１．９６％。结论：该方法准确，重现性好，能为天山花楸的进　一步研究提供理论依据。　关键词：高效液相色谱法；表儿茶素　ｄｏｉ：１０．３９６９／Ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－４３３７．２０１３．０４．０３４　天山花楸为蔷薇科（Ｒｏｓｅｃｅａｅ）花楸属（Ｓｏｒｂｕｓ）植物，主要　产新疆各地。该属植物具有重要的药用价值及经济价值，其　中一些植物由于有密集的花序也常作观赏用。《新疆中草药　手册》记载：“果实：味甘苦，性平，无毒。嫩枝和皮：味苦，性　寒，无毒。清肺止咳，补脾生津。治肺结核，哮喘咳嗽＿１ｊ，’。课　题组在前期研究中，在天山花楸枝叶部分分离出表儿茶素单　体。而在一些研究报道中，表儿茶素对一些疾病具有抑制作　用，包括糖尿病等。本实验通过ＨＰＬＣ法对天山花楸中的表　儿茶素含量进行测定，对天山花楸的抗糖尿病作用研究提供　一定的理论依据。　１材料与方法　１．１仪器与试药　美国ＨＰｌｌ００高效液相色谱仪；德国￥ａｒｔｏｒｉｕｓ　ＢＰ２１１Ｄ十　万分之一电子天平；表儿茶素对照品为中国药品生物制品检　定所提供；花楸枝叶采自玛纳斯林场，经药学院高级实验师陈　玉怀鉴定为天山花楸，采摘时间分别为２０１１０９０１，２０１１０８１５，　２０１００８０７，２０１００８０１；实验所用甲醇、乙腈为色谱级，其余均为　分析级。　１．２方法　１．２．１检测色谱条件　十八烷基硅烷键合硅胶填充柱；乙腈：　水（２０：８０）为流动相；检测波长为２８０ｎｍ，保留时间９分钟。　１．２．２表儿茶素标准品溶液的配制取在６０￣Ｃ干燥２小时　的表儿茶素标准品约１５ｍｇ，精密称定，溶解并定量稀释制成　每ｌｍｌ中约含表儿茶素０．４ｍｇ的溶液，精密量取５ｍｌ，置５０ｍｌ　量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为对照品溶液＿２］。　１．２．３花楸供试品溶液配制取花楸枝叶５ｇ，粉碎，精密称　取适量，置２５ｍｌ具塞锥形瓶中，６０　乙醇定容，３７℃超声２Ｏ　分钟，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液５ｍｌ，置５０ｍｌ量瓶　中，用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。　２结果　２．１线性关系考察　精密吸取表儿茶素对照品溶液Ｉ，５，ｉ０，１５，２０／￣１，按照，　“１．２．１”色谱条件进样，重复进样５次取均值，以进样量为横　坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得标准曲线。线性回归　方程为：ｙ＝一１．２７５＋２３５９．４２Ｘ，相关系数ｒ一０．９９９８，　一５，　线性范围为０．Ｏ４～Ｏ．８＞ｇ。　２．２稳定性及精密度试验　精密吸取同一浓度供试品溶液１０／，１，于０，６，１２，１８，２４ｈ　进行测定，结果表明样品稳定性良好，２４ｈ内峰面积基本不变，　ＲＳＤ为０．４　（　一５）。吸取表儿茶素同一浓度对照品溶液，　重复进样６次，峰面积ＲＳＤ为０．９　。　２．３回收率　表儿茶素的平均回收率为９８．７　，ＲＳＤ为１．２５　。　２．４样品测定　取４批天山花楸样品按照”１．２．２”项下方法制备供试品　溶液，取供试品溶液和对照品溶液各１０ｕｌ，按“１．１．２”色谱条　件记录色谱图。测量对照品和供试品待测成分的峰面积，按　外标峰面积法计算含量，计算后得含量为１．９６　，结果见表　１。重复进样，峰面积ＲＳＤ为０．３　，结果表明该方法重复性　良好。加样回收率为９９．５２　～９９．７９　。　表１天山花楸中表儿茶素含量测定（　一３）　收稿日期：２０１３—０４—０２　通讯作者：李乐　作者简介：张雅婷，女，石河子大学药学院２０１１级药学２班　△基金项目：石河子大学第十一期大学生研究训练计划（ＳＲＰ２０１３Ｏ２４５）；石河子大学优秀青年科技人才培育计划立项项目　（２０１２ＺＲＫＸＹＱ２１　・４６０・