超高效液相色谱串联质谱法测定茶叶中6种农药残留

高效液相色谱串联质谱法测定普洱茶中草甘膦残留的不确定度评定

作者：罗发美，伍旭东，刘新月

来源：《现代食品》 2019年第22期

罗发美，伍旭东，刘新月

（普洱市质量技术监督综合检测中心，云南?普洱?665000）

Luo Famei, Wu Xudong, Liu Xinyue

(Pu’er City Quality and Technical Supervision Comprehensive Testing Center,

Pu’er?665000, China)

摘?要：依据标准检验SN/T 3983-2014《出口食品中氨甲基酸类有机磷除草剂残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》测定普洱茶中的草甘膦残留量，对测定结果的不确定度进行分析，计算了合成标准不确定度和扩展不确定度。实验结果表明：当置信概率为95%、包含因子k=2时，扩展不确定度为0.2 mg·kg-1。此外，校准曲线和测试方法精密度对测量不确定度的影响较大，检测人员应对这些影响因素进行重点控制，以提高检测结果精确度。

关健词：普洱茶；草甘膦；不确定度

Abstract：Glyphosate residues in tea were determined by HPLC-MS/MS method and

the uncertainty of determination result was analyzed and quantified. The expanded

uncertainty of determination was calculated to be 0.2 mg·kg-1 from the

experimental data when the confidence level was 95 % and factor (k) was 2. It was

found that the uncertainty mainly derived from the uncertainty of the uniformity of

２０１７年第７期　韩镌竹：超高效液相色谱一串联质谱法同时测定饲料中６种大环内酯及林可胺类抗生素残留　

超高效液相色谱一串联质谱法同时测定饲料中　

６种大环内酯及林可胺类抗生素残留　

韩镌竹　，杨文腰。，玄兵。，马　雷　，李欣南　

（１．辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心，辽宁沈阳　１１００１６：　２．辽宁成大生物股份有限公司，辽宁沈阳　ｌ１０１７９：　３．辽宁省锦州市兽药饲料监察所，辽宁锦州　１２１００１；　４．辽宁省沈阳市兽药饲料监察所，辽宁沈阳　１１００３２）　

摘要：本研究建立ＵＰＬＣ—ＭＳＭＳ法同时测定饲料中泰乐菌素、吉他霉素、交沙霉素、螺旋霉素、林可霉素和克　

林霉素６种大环内酯及林可胺类抗生素残留量。样品处理采用乙腈提取，正己烷去除脂肪净化。分析采用　ｘＲ—ＯＤＳ色谱柱：流动相为０．１％（ｖ／ｖ）甲酸一水／０．１％（ｖ／ｖ）甲酸一乙腈溶液，梯度洗脱；正离子多反应监测模式；内　

标法进行定量。泰乐菌素、吉他霉素和林可霉素的检出限为２０．０　ｌｉ　ｇ／ｋｇ，定量限为１００．０　ｕ　ｇ／ｋｇ，线性范围均为　

５０．０～５００．０　ｕ　ｇ／Ｌ；交沙霉素、螺旋霉素和克林霉素的检出限均为１．０　ｕ　ｇ／ｋｇ，定量限为１０．０　ｇ／ｋｇ，线性范围为　５．０—２００．０　ｕ　ｇ／Ｌ。该方法专属性强、灵敏度高，分离度好，适用于饲料中６种大环内酯及林可胺类抗生素残留量的　

测定。　关键词：超高效液相色谱一串联质谱；大环内酯类抗生素；林可胺类抗生素；多反应监测模式　

中图分类号：￥８１６．１７　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７２—９６９２（２０１７）０７—０００１—０９　

Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒｅｓｉｄｅｓ　ｏｆ　Ｍａｃｒｏｌｉｄｅ　ａｎｄ　Ｌｉｎｃｏｓａｍｉｄｅ　ｉｎ　Ａｎｉｍａｌ　

Ｆｅｅｄ　ｂｙ　Ｕｌｔｒａ——ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－Ｔａｎｄｅｍ　Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　

2011

年11

月Vol．29No．11November2011ChineseJournalofChromatography1070～1075

研究论文

DOI：10．3724/SP．J．1123．2011．01070

*

通讯联系人：

巩志国，

硕士．Tel：（0991）4640279，E-mail：xjciqgong@sina．com．

收稿日期：2011-05-23超高效液相色谱-

串联质谱法快速检测

番茄酱中吡虫啉等6

种农药残留

苏敏1，

李世雨1

，

李锋格1，

巩志国1*

，

王金花2

（1．

新疆出入境检验检疫局，

新疆乌鲁木齐830063；2．

北京出入境检验检疫局，

北京100026）

摘要：

建立了番茄酱中吡虫啉、

多菌灵、

甲基硫菌灵、霜霉威、灭多威和烯酰吗啉等农药残留的超高效液相色谱-

串联

质谱（UPLC-MS/MS）

检测方法。

样品用含0.1%（

体积分数）

乙酸的甲醇-

水（1∶1，v/v）

混合溶液提取，

采用Wa-

tersAcquityUPLCBEHC

18色谱柱，

以甲醇和10mmol/L

乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱分离，

经电喷雾正离

子（ESI+

）

电离及多反应监测（MRM）

模式来测定目标化合物，

采用基质标准溶液曲线法进行定量。

结果表明：6

种

农药在0.005～0.2mg/L

的范围内线性关系良好（r＞0.995）；

当标准添加水平为0.02、0.05

和0.2mg/kg

时，

回

收率为66.8%～102.9%；

相对标准偏差均小于15%；6

种农药的定量限（

以信噪比（S/N）＞10

计）

均为0.02

mg/kg。

该方法简便、

快速、

灵敏和准确，

非常适合番茄酱中这6

种农药残留的快速检测及定量分析。

关键词：

超高效液相色谱-

串联质谱；

农药残留；

番茄酱

中图分类号：O658

文献标识码：A

文章编号：1000-8713（2011）11-1070-06

Rapiddeterminationof6pesticideresiduesintomatopaste

byultraperformanceliquidchromatography-

—　药残留检测技术讲座一一　…　一　。　第五讲：茶叶中农药残留的液相色谱测定方法　汤富彬　楼正云　刘光明　罗逢健　陈宗懋　（中国农业科学院茶叶研究所，３１０００８）　高效液相色谱法（Ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏ—　ｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）与气相色谱法有许多相似之处。气相色谱法　具有选择性高、分离效率高、灵敏度高、分析速度快的特点，　但它仅适于分析蒸气压低、沸点低的样品，而不适用于高沸　点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物以及生物活性物　质。从上世纪７０年代现代液相色谱出现至今，在短短几十年　的时间里得到了迅速发展和广泛应用。高效液相色谱法已成　为应用最为广泛和有效的分离分析手段。现在，ＨＰＬＣ几乎　能够分析所有的有机、高分子及生物试样。在已知的有机化　合物中，若事先不进行化学改性，只有２０％的化合物用气相　色谱法可以得到较好的分离，而８０％的有机化合物需ＨＰＬＣ　分析。因此，ＨＰＬＣ具有非常广阔的应用前景。　一、高效液相色谱法的分类　高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱　法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子　对色谱法及分子排阻色谱法。　１．液固色谱法　使用固体吸附剂，分离原理是根据固定相对组分吸附力　大小不同而分离。分离过程是一个吸附一解吸附的平衡过程。　常用于分离同分异构体。　２．液液色谱法　使用将特定的液态物质涂于担体表面，或化学键合于担　体表面而形成的固定相，分离原理是根据被分离的组分在流　动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平　衡过程。现在多采用的是化学键合固定相，如Ｃ１８、Ｃ８、氨基　柱、氰基柱和苯基柱。液液色谱法按固定相和流动相的极性　不同可分为正相色谱法（ＮＰＣ）和反相色谱法（ＲＰＣ）。　（１）正相色谱法。采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与　腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类，　如正己烷、环己烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲　烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较　强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。　（２）反相色谱法。一般用非极性固定相（如Ｃ１８、Ｃ８）；　流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、四氢呋喃等与水互　溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较　弱的化合物。ＲＰＣ在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，　它占整个ＨＰＬＣ应用的８０％左右。　３．离子交换色谱法　・１０・　固定相是离子交换树脂，常用苯乙烯与二乙烯交联形成　的聚合物骨架，在表面末端芳环上接上羧基、磺酸基（称阳　离子交换树脂）或季氨基（阴离子交换树脂）。分离原理是　树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测　组分的离子进行可逆交换，根据各离子与离子交换基团具有　不同的电荷吸引力而分离。　４．离子对色谱法　又称偶离子色谱法，是液液色谱法的分支。它是根据被　测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子对化合物后，　在非极眭固定相中溶解度增大，从而使其分离效果改善。主　要用于分析离子强度大的酸碱物质。离子对色谱法常用ＯＤＳ　柱（即Ｃ１８），流动相为甲醇一水或乙腈一水，水中加入３￣１０　ｍｍｏｌ／１的离子对试剂，在一定的ｐＨ值范围内进行分离。被　测组分保留时间与离子对性质、浓度，流动相组成及其ｐＨ　值，离子强度有关。　５．排阻色谱法　固定相是有一定孔径的多孔性填料，流动相是可以溶解　样品的溶剂。小分子量的化合物可以进入孔中，滞留时间长；　大分子量的化合物不能进入孔中，直接随流动相流出。它利　用分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异而完　成分离。常用于分离高分子化合物，如组织提取物、多肽、蛋　白质、核酸等。　高效液相色谱系统的组成　高效液相色谱系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测　器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测　器是关键部位。　１．输液泵　输液泵是ＨＰＬＣ系统中最重要的部件之一。为了延长泵　的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项　进行操作：①防止任何固体微粒进入泵体。流动相最好在玻　璃容器内蒸馏，泵的入口都应连接泵滤棒（或片）。输液泵的　滤器应经常清洗或更换。②流动相不应含有任何腐性物质，　含有缓冲液的流动相不应保留在柱内，尤其是在停泵过夜或　更长时间的情况下。因此，必须在泵入纯水将泵充分清洗后，　再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂（对于反　相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇水）。③泵工作时要　留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损　柱塞、